UJI DAYA HAMBAT EKSTRAK ETANOL BIJI MENGKUDU

(Morinda citrifolia L.) TERHADAP PERTUMBUHAN

Propionibacterium acnes PENYEBAB ACNE VULGARIS
1
Nurfitrah Wahyuni, 2Nelly Herfina Dahlan, 2Indria Hafizah

1
Program Pendidikan Dokter
2
Fakultas Kedokteran Universitas Halu Oleo

ABSTRACT

Background: Propionibacterium acnes is a gram-positive bacteria, pleomorphic bacilli and anaerobic to the
aerotolerant which plays a role in the occurrence of Acne vulgaris that causes chronic inflammation in the
pilosebasea unit. Many plants that have potential as an antibacterial and not yet well utilized namely noni seed
(Morinda citrifolia L.). Research Purpose: This study aimed to analyze the content of secondary metabolite
compounds and inhibitory power of ethanol extract of noni seeds on the growth of Propionibacterium acnes
causes acne vulgaris. Research Method: This research used post test only control design with free variable was
ethanol extract of seed and dependent variable was inhibition zone of bacterial growth. Extraction was
performed using reflux method. The content of secondary metabolites was done by qualitative phytochemical
test and the inhibitory test of ethanol extract of noni seed was done by the method of paper disc diffusion by
observing the formation of clear zone. Research Result: The content of secondary metabolite compounds in
noni seeds was known to be a class of alkaloids, flavonoids, terpenoids, tannins and saponins. The extract of
ethanol of noni seeds has the resistance to growth of Propionibacterium acnes was shown at 100%
concentration with 11.75 mm large, while at concentrations of 75%, 50%, 25%, 12.5%, and 6.25% there was
not clear zones founded around the paper disc. Conclution: The conclusions of this study were the extract of
noni seed (Morinda citrifolia L.) possessing low inhibitory on growth of Propionibacterium acnes but did not
have Minimum Inhibitory Concentration (MIC) and Minimum Bacteriasidal concentration (MBC) content of the
tested concentration.
Keywords: Noni seed, Secondary metabolite, Propionibacterium acnes, inhibitory test, KHM, KBM.

PENDAHULUAN ini (Lynn dkk., 2016; Harazika dan

Acne vulgaris meupakan
peradangan kronis pada unit pilosebasea
yang sering terjadi pada masa remaja.
Kasus ini 85% dialami oleh remaja usia
12-25 tahun yang sering menjadi tanda
pertama pubertas dan dapat terjadi satu
tahun sebelum menarke atau haid pertama.
(Movita, 2013).
Acne memiliki gambaran klinis
beragam terdiri dari komedo, papula,
pustul, nodul dan jaringan parut Acne
vulgaris 85% dialami oleh remaja usia 12-
25 tahun. Acne timbul terutama pada
wajah dan leher, diikuti punggung dan
dada. Komplikasi utama acne adalah
jaringan parut dan gangguan psikologi.
Depresi dan Kepercayaan diri menurun
dilaporakn pada pasien dengan gangguan
Archana, 2016).
Propionibacterium acnes
merupakan bakteri Gram positif berbentuk
basil pleomorfik anaerob hingga
aerotoleran. Bakteri ini merupakan flora
normal kelenjar pilosebasea yang berperan
dalam patogenesis acne. Bakteri ini
memecah trigliserida, salah satu komponen
sebum menjadi asam lemak bebas
sehingga terjadi kolonisasi P. acnes yang
memicu inflamasi pada acne. Selain itu,
antibodi terhadap antigen dinding sel
bakteri ini meningkatkan respons inflamasi
melalui aktivasi komplemen (Brooks dkk.,
2013; Movita, 2013).
Populasi bakteri Propionibacterium
acnes dapat diturunkan dengan memberikan
suatu zat antibakteri seperti Clindamycin.
Antibakteri ini adalah salah satu antibiotik
yang paling sering digunakan dalam
pengobatan acne vulgaris. Penggunaan
antibakteri ini secara luas, memunculkan
strain P.acnes yang resisten akibatnya
penggunaan clindamycin sebagai anti-acne
jangka panjang mulai diragukan, oleh karena
itu diperlukan terapi alternatif dengan
memanfaatkan zat aktif dari tumbuhan yang
mempunyai potensi tinggi sebagai antibakteri
(Aida dkk., 2016).
Indonesia merupakan negara tropis
dengan potensi tanaman yang secara turun
temurun digunakan sebagai obat tradisional
sebagai upaya dari menjaga kesehatan,
menambah kebugaran dan merawat
kecantikan. Namun masih banyak tanaman
yang tidak dimanfaatkan dengan baik dan
dibiarkan begitu saja.
Berdasarkan penelitian yang dilakukan
Haryani dan Tjijah (2004) biji mengkudu
mengandung komponen metabolit sekunder
berupa alkaloid, saponin, tannin dan
glikosida jantung yang berpotensi sebagai
antibakteri. Komponen tersebut memiliki
aktivitas sebagai antibakteri dengan cara
inaktifasi protein, merusak dinding dan
membran sel bakteri, menghambat sintesis
dinding sel bakteri, menginaktivaksi enzim
esensial dan mengganggu metabolisme
bakteri (Kurniawan dan Wayan, 2015;
Ngoci, 2013).
Berdasarkan penelitian diatas, maka
penelitian ini dimaksudkan untk mengetahui
kandungan metabolit sekunder dan
kemampuan daya hambat ekstrak biji
mengkudu terhadap pertumbuhan
Propionibacterium acnes penyebab acne
vulgaris.
METODE PENELITIAN
Penelitian ini merupakan penelitian
eksperimental laboratorium dengan quasi
eksperimental yakni pengujian ekstrak
etanol biji mengkudu (Morinda citrifolia
L.) dalam menghambat aktivitas
pertumbuhan Propionibacterium acnes
penyebab acne vulgaris. Penelitian ini
menggunakan desain post test only
control dengan variabel bebas atau
independen yaitu ekstrak etanol buah
mengkudu (Morinda citrifolia L.) dan
variabel terikat atau dependen yaitu daya
hambat pertumbuhan Propionibacterium
acnes yang diukur melalui zona hambat.
Pengambilan dan Persiapan Sampel
Sampel pada penelitian ini adalah biji
mengkudu yang dieperoleh dari Kecamatan
Baruga Kelurahan Lepo-lepo Kota Kendari,
Sulawesi Tenggara. Kriteria sampel yang
digunakan adalah biji yang berasal dari buah
yang matang dengkan karasteristik berwarna
putih dan lunak. Jumlah sampel yang
digunakan dalam penelitian ini adalah 9 kg
buah mengkudu menghasilkan 1800 g biji
mengkudu yang telah dibersihkan dari sisa
daging yang melengket, lalu diangin-
anginkan hingga mengering. Proses
pengeringan dilakukan selama 5 hari. Sampel
yang telah kering kemudian dicacah kasar
menggunakan pencacah elektrik. Sampel
yang telah kering di ekstraksi menggunakan
metode refluk dengan etanol 96% sebagai
pelarut. Kemudian filtrat dikumpulkan dan
dipekatkan dengan rotary vacuum
evaporatorhingga diperoleh ekstrak etanol
kental.
Uji Fitokimia
Uji fitokimia ini dilakukan identifikasi
terhadap senyawa alkaloid, flavonoid,
terpenoid, tannin, dan saponin (Harborne,
1998)
Senyawa golongan alkaloid
Sebanyak 1 mL dimasukkan dalam
tiap tabung lalu ditambahkan HCl 10%
dan 2 tetes pereaksi dragendrof kemudian
dikocok kuat, adanya endapan jingga
menunjukkan positif alkaloid.
Senyawa golongan flavonoid
Sebanyak 1 mL ektrak
ditambahkan serbuk magnesium dan 1 mL
HCl pekat, selanjutnya ditambahkan
alkohol, dikocok dengan kuat dan
dibiarkan hingga memisah. Terbentuknya
warna merah, kuning, atau jingga dalam
larutan alkohol menunjukkan adanya
senyawa golongan flavonoid.
Senyawa golongan tanin
Sebanyak 1 mL ekstrak
ditambahkan pereaksi FeCl3 1%.
Terbentuknya warna biru tua atau hijau
kehitaman menunjukkan adanya golongan
tanin.
Senyawa golongan steroid/ terpenoid
Sebanyak 1 mL ekstrak
dimasukkan kedalam tabung lalu
ditambahkan pereaksi Lieberman
Burchard. Terbentuknya warna merah atau
cincin hijau menunjukkan adanya senyawa
golongan steroid dan terpenoid.
Senyawa golonga saponin
Sebanyak 1 mL ekstrak
dimasukkan kedalam tabung lalu
diencerkan dengan air, kemudian dikocok
kuat selama 10 menit. Terbentuknya busa
yang stabil dalam tabung reaksi
menunjukkan adanya golongan saponin.
Uji Aktivitas Antibakteri
Uji daya hambat dilakukan dengan
metode difusi agar menggunakan metode
difusi kertas cakram. Uji daya hambat ekstrak
etanol biji mengkudu (Morinda citrifolia L.)
akan dilakukan pengulangan sebanyak tiga
kali. Uji daya hambat dengan metode difusi
kertas cakram yaitu dilakukan dengan
menggunakan kertas cakram yang telah
direndam kedalam konentrasi ekstrak dan
diletakkan pada permukaan media yang telah
berisi bakteri. Sebanyak ± 25ml medium
MHA di tuang pada cawan petri steril.
Metium yang telah padat selanjutnya
diinokulasi bakteri dan diratakan pada
seluruh permukaan media. Kertas cakram
yang telah berisi masing masing konsentrasi
ekstrak, kontrol ositif dan negatif dileakkan
pada permukaan media. Cawan petri yang
berisi media, bakteri dan ekstrak di inkubasi
selama 24 jam untuk nemilai KHM dan 48
jam untuk menilai KBM pada suhu 370C.
Daya hambat ekstrak ditentukan dengan cara
mengukur rata-rata diameter zona hambat
yang terbentuk di sekeliling sumuran yang
diambil dari 4 sisi yang berbeda.
HASIL
Kandungan Fitokimia
Berdasarkan tabel 1. Hasil uji
fitokimia kandungan metabolit sekunder biji
mengkudu menggunakan pereaksi spesifik
didapakan terbentuknya endapan jingga
menggunakan HCl dan pereaksi Dragendrof
pada uji alkaloid, terbentuknya warna jingga
menggunakan Mg, HCl dan alkohol pada uji
flavonoid, hijau kehitaman menggunakan
FeCl3 pada uji tannin, merah menggunakan
pereaksi Lieberman Burchard pada uji
terpenoid dan terbentuknya busa statis
menggunakan air pada uji saponin.
Aktivitas Antibakteri
Berdasarkan tabel 2. Hasil
pengamatan dilakukan setelah pengamatan
1x24 jam dan 1x48 jam. Pengukuran
terhadap diameter zona hambat yang
terbentuk menggunakan mistar. Uji
pendahuluan ekstrak etanol biji mengkudu
terhadap pertumbuhan Propionibacterium
acnes pada konsentrasi 100% memiliki daya
hambat sebesar 11,75 mm. Pada pengamatan
1x24 jam terhadap zona bening pada
konsentrasi 75%, 50%, 25%, 12,5% dan
6,25% dari tiga kali pengulangan tidak
menimbulkan zona hambat. Kontrol positif
yaitu clindamycin didapatkan rata-rata zona 75%, 50%, 25%, 12,5% dan 6,25%
hambat dari tigakali pengulangan sebesar ditemukan pertumbuhan. Pada kontrol positif
23,33 mm dan kontrol negtif yakni aquades ditemukan pertumbuhan dan pada kontrol
dari tigakali pengulangan tidak menimbulkan negatif ditemukan pertumbuhan koloni
zona hamabat. bakteri.
Berdasarkan tabel 3. Hasil
pengamatan 1x48 jam terhadap pertumbuhan
koloni bakteri pada konstentrasi ekstrak
Tabel 1. Hasil pengujian kandungan metaboit sekunder ekstrak biji mengkudu (Morinda
citrifolia L.)
Senyawa Metabolit Pereaksi Hasil Interpretasi
Sekunder
Alkaloid HCl + Pereaksi Dragendrof Tterbentuk endapan jingga +
Flavonoid HCl + Mg Jingga +
Terpenoid (FeCl3) Hijau kehitaman +
Tannin Pereaksi Lieberman Buchard Merah +
Saponin Air Busa statis +
(Sumber : Data primer, 2017)

Tabel 2. Hasil pengukuran diameter zona hambat terhadap pertumbuhan bakteri

Propionibacterium acnes penyebab Acne Vulgaris pada 24 jam masa inkubasi.
No. Perlakuan Diameter Zona Bening (mm) Rata-rata
I II III (mm)
1 6,25% 0 0 0 0
2 12,5% 0 0 0 0
3 25% 0 0 0 0
4 50% 0 0 0 0
5 75% 0 0 0 0
6 Kontrol + 24 23 23 23,33
7 Kontrol - 0 0 0 0
(Sumber : Data primer, 2017)

Tabel 3. Hasil pengamatan adanya koloni bakteri Propionibacterium acnes yang tumbuh
pada zona bening yang terbentuk pada 48 jam masa inkubasi.
No. Perlakuan Pertumbuhan bakteri Interpretasi
I II III
1 6,25% Ada Ada Ada Terdapat pertumbuhan
2 12,5% Ada Ada Ada Terdapat pertumbuhan
3 25% Ada Ada Ada Terdapat pertumbuhan
4 50% Ada Ada Ada Terdapat pertumbuhan
5 75% Ada Ada Ada Terdapat pertumbuhan
6 Kontrol + Ada Ada Ada Terdapat pertumbuhan
7 Kontrol - Ada Ada Ada Terdapat pertumbuhan
(Sumber : Data Primer, 2017)

PEMBAHASAN cakram. Keberadaan zona bening

Hasil uji daya hambat ekstrak
etanol biji mengkudu (Morinda citrifolia
L.) terhadap bakteri Propionibacterium
acnes menunjukkan adanya respon
hambatan yaitu ditandai dengan
terbentuknya zona bening disekitar kertas
menunjukkan bahwa dalam ekstrak trsebut
terdapat senyawa bioaktif yan mampu
menghambat pertumbuhan bakteri. Dari
hasil analisis fitokimia yang dilakukan
dapat disimpulkan bahwa biji mengkudu
(Morinda citrifolia L.) memiliki senyawa
alkaloid, flavonoid, terpenoid, tannin dan
saponin.
Alkaloid merupakan golongan zat
tumbuhan sekunder yang terbesar.
Alkaloid memiliki kemampuan sebagai
antibakteri. Mekanisme yang diduga
adalah dengan cara mengganggu
komponen penyusun peptidoglikan pada
sel bakteri, sehingga lapisan dinding sel
tidak terbentuk secara utuh dan
menyebabkan kematian sel tersebut
(Darsana dkk., 2012).
Flavonoid merupakan senyawa
metabolit sekunder yang paling sering
ditemukan pada tumbuhan. Berdasarkan
penelitian yang dilakukan Cowan (1999)
Senyawa flavonoid memiliki aktivitas
sebagai antimikroba yaitu mengambat
sintesis asam nukleat, menghambat fungsi
membran sel, dan menghambat
metabolisme energi (Cushnie dan Andrew,
2005).
Senyawa terpenoid dapat
menghambat pertumbuhan bakteri dengan
cara mengganggu proses pembentukan
membran sel atau dinding sel
bakteri.Senyawa ini akan bereaksi dengan
porin (protein transmembran) pada
membran luar dinding sel bakteri,
membentuk ikatan polimer yang kuat
mengakibatkan rusaknya porin sehingga
sel bakteri tidak terbentuk secara sempurna
(Cowan, 1999).
Senyawa tanin merupakan senyawa
turunan polihidroksi fenol yang secara
umum mekanisme antimikrobanya dari
senyawa fenol. Tanin mempunyai target
pada polipeptida dinding sel. Senyawa ini
memiliki kemampuan menghambat
sintesis dinding sel bakteri dan sintesis
protein sel bakteri gram positif maupun
gram negatif. (Cowan (1999); Akiyama
dkk., (2001))
Mekanisme saponin sebagai
antibakteri adalah dengan cara merusak
membran sel bakteri akibat peningkatan
permeabilitas membran. Hal ini terjadi
akibat saponin berinteraksi dengan dinding
sel bakteri dan akhirnya berbagai
komponen penting dalam sel bakteri keluar
sehingga metabolisme sel terganggu dan
akan terjadi kematian sel (Arabski dkk.,
2012).
Hasil uji daya hambat ekstrak
etanol biji mengkudu (Morinda citrifolia
L.) menunjukkan pada konsentrasi 100%
menunjukkan aktivitas dalam menghambat
perumbuhan bakteri Propionibacterium
acnes yaitu terbentuknya zona bening
disekitar kertas cakram dengan ukuran
11,75 mm. Varisai konsentrasi yang
diunakan dalam penelitian ini yaitu 75%,
50%, 25%, 12,5% dan 6,25% tidak
menunjukkan adanya penghambatan
terhadap pertumbuhan bakteri dimana
ditemukannya pertumbuhan bakteri di
sekitar kertas cakram. Hal ini dapat
dipengaruhi oleh beberapa faktor yani dari
segi mutu ekstrak dan faktor bakteri yang
digunakan. Mutu ekstrak dipengaruhi oleh
faktor biologi berupa lokasi tumbuh dan
bagian yang digunakan, dan faktor kimia
yaitu jenis senyawa aktif dalam bahan,
komposisi kualitatif senyawa aktif,
komposisi kuantitatif senyawa aktif, dan
kadar total rata-rata senyawa aktif
(Departemen Kesehatan Repubilik
Indonesia, 2010).
Propionibacterium acnes sendiri
merupakan gram positif yang mengandung
lapisan peptidoglikan yang tebal berfungsi
sebagai proteksi terhadap tekanan osmotik
dan pengaruh lingkungan luar. Hal ini
memungkinkan senyawa metabolit
sekunder biji mengkudu berupa alkaloid,
flavonoid, terpenoid, tanin, dan saponin
belum mampu menembus lapisan sehingga
tidak dapat menghambat pertumbuhan
bakteri secara maksimal (Damayanti,
2014).
Kontrol positif yang digunakan
adalah Clindamycin dengan aktivitas
penghambatan kuat (sensitif). Clindamycin
adalah senyawa semi sintetis dari derivat
antibiotik lincomycin. Dapat menghambat
pertumbuhan bakteri Gram positif dan
Gram negatif dengan mekanisme kerjanya
menghambat sintesa dinding protein
bakteri melalui subunit 50S ribosom
namun tidak menyebabkan kematian
bakteri sepenuhnya (Fox,2016).
SIMPULAN
Simpulan penelitian ini adalah ekstrak
etanol biji mengkudu (Morinda citrifolia
L.) memiliki kemampuan daya hambat
lemah terhadap pertumbuhan
Propionibacterium acnes namun tidak
memiliki Kadar Hambat Minimum (KHM)
dan Kadar Bunuh Minimum (KBM) dari
konsentrasi yang diujikan.
SARAN
Diharapkan pada penelitian
selanjutnya, sebaiknya dilakukan dengan
metode berbeda, seperti metode sumuran
(cup-plate technique).
Perlu dilakukan pengujian kandungan
senyawa metabolit sekunder secara
kualitatif sehingga dapat diperole hasil
yang lebih akurat.
Pada penelitian selanjudnya,
sebaiknya menggunakan jenis bakteri yang
berbeda.
DAFTAR PUSTAKA
Aida, A.N., Suswati,E., dan Misnawi.
2016. Uji In Vitro Efek Ekstrak
Etanol Biji Kakao (Theobroma
cacao)sebagai Antibakteri terhadap
Propionibacterium acnes. e-Jurnal
Pustaka Kesehatan 4(1): 127-131.
Akiyama H., Fujii K., Yamasaki O., Oono
T., dan Iwatsuki T.2001.
Antibacterial action of several
tannins against staphylococcus
aureus. J Antimicrob Chemother
48: 487 – 491.
Brooks, G.F., Carroll, K.C., Butel, J.S.,
Morse, J.A., dan Mietzner, T.A.
2013. Jawetz, Melnick, & Adelberg’s
Medical Microbiology. Ed. 26.
McGraw-Hill. New York.
Cowan, M.M. 1999. Plant Products as
Antimicrobial Agents. Clinical
microbiology Reviews. 12: 564 –
582.
Cushnie, T.P.T., dan A.J. Lamb. 2005.
AntimicrobialActivity of
Flavonoids. International Journal
of Antimicrobial Agents. 26: 343 –
356.
Damayanti, M. 2014. Uji Aktivitas
Larutan Bawang Putih (Allium
Sativum) Terhadap Pertumbuhan
Bakteri Propionibacterium acnes
Secara In Vitro. Skripsi. Program
Studi Pendidikan Dokter
Universitas Islam Negeri Syarif
Hidayatullah. Jakarta.
Departemen Kesehatan RI. 2000.
Parameter Standar Umum Ektrak
Tanaman Obat. Jakarta.
Fox, L., Csongradi, C., Aucamp, M., Du
Plessis, J., dan Gerber M. 2016.
Treatment Modalities for Acne.
Molecules, 21(8), 1063.
Harazika, N., dan Archana, M. 2016. The
Psychosocial Impact of Acne
Vulgaris. Indian Journal of
Dermatology 61(5):515-520.
Harborne, J.B. 1998. Phytochemical
Methods A Guide to Modern
Technique of Plant Analysis. Ed.
III. Chapman and Hall. New York.
Hayani, E dan Tjijah F. Identifikasi
Komponen Kimia dalam Biji
Mengkudu (Morindacitrifolia).
2004. Temu Teknis Nasional
Tenaga Fungsional Pertanian.
Pusat Penelitian dan
Pengembangan Peternakan, 153-
156.
Kurniawan, B., Dan Aryana, W.F. 2015.
Binahong (Cassia Alata L) as
 Inhibitor of Escherichiacoli Movita, T. 2013. Acne Vulgaris.Cermin
Growth . Jurnal Majority, 4(4): Dunia Kedokteran, 40(4), 269-272.
100-104. Ngoci, N.S., Macharia, E., and Eliud N.,
Lynn, D.D., Umari, T., Dunnick, C. A., 2013. Screening for anti-bacterian
dan Dellavalle P.D. 2016. The activity and phytochemicals of
epidemiology of acne vulgaris in Leonotisnepetifolia leaves
late adolescence. Adolescent methanol extract. Journal of
Health, Medicine and Therapeutics Biotechnological Sciences, 1(1):15-
2016(7) : 13–25. 21.