ESTUDIO MICROSCOPICO DEL

DESARROLLO BIOLOGICO DE
Peronospora sparsa EN ROSA BAJO
CONDICIONES CONTROLADAS

Universidad Militar “Nueva Granada”

Facultad de Ciencias
Biología Aplicada

Sonia Gómez Mbiol. Cand.MSc

sogomez@umng.edu.co

Juan José Filgueira Biol. M.Sc. Dr.Sc.

 HISTORIA
- Importancia histórica de los mildeos en el mundo.
- Peronosporales, parásitos obligados vegetales.
Limitaciones de su estudio.
- Desarrollo de la enfermedad en Colombia, falta de
información para las condiciones de nuestro país.
- Reportes sobre el efecto climático sobre el desarrollo del
patógeno.

Síntomas de Mildeo Velloso en la variedad de rosa

susceptible “Mango” en campo abierto
 OBJETIVOS DEL TRABAJO
OBJETIVO GENERAL:
ESTUDIAR EL COMPORTAMIENTO
INFECCIOSO DEL MILDEO VELLOSO DE LA
ROSA IN VITRO BAJO CONDICIONES
CONTROLADAS.

OBJETIVOS ESPECIFICOS:
1. ESTANDARIZAR LA METODOLOGIA PARA LA
PRODUCCION Y MANTENIMIENTO DE
MICROPLANTAS DE ROSA IN VITRO

2. LOGRAR LAS CONDICIONES OPTIMAS PARA LA

PRODUCCION DE LA ENFERMEDAD IN VITRO

3. HACER UN SEGUIMIENTO MICROSCOPICO DE LA

INFECCION DEL MILDEO A NIVEL DE HOJA Y
TALLO
 METODOLOGIA
INTRODUCCION Y DESINFECCION DE BROTES DE ROSA DE
VARIEDAD SUSCEPTIBLE

SIEMBRA EN MEDIO IN VITRO (MS 4.4g/l, Phytagel 2.5 g/l,

azúcar 30 g/l, BAP 10mg/l, ANA 60mg/ml y AG3 224mg/l, pH 5.6 )

CULTIVO EN CONDICIONES DE LABORATORIO: 18 hrs. luz,

6000 LUX, 26°C POR 6 SEMANAS

PASE AL MISMO MEDIO DE CULTIVO IN VITRO

INFECCION CON LA SUSPENSION “LIMPIA”DE

ESPORANGIOS DE MILDEO VELLOSO*

INCUBACION (CONDICIONES DE SALON)

CORTES A MANO ALZADA Y OBSERVACION MICROSCOPICA

SECUENCIAL
 METODOS
1. PRODUCCION
DE
MICROPLANTAS
IN VITRO

2. SUSPENSION
“LIMPIA” DE
ESPORANGIOS DE
MILDEO VELLOSO JJFILGUEIRA. S. GOMEZ. UMNG

3. INFECCION

JJFILGUEIRA. S. GOMEZ. UMNG JJFILGUEIRA. S. GOMEZ. UMNG

100X
 RESULTADOS

C P

JJFILGUEIRA. S. GOMEZ. UMNG

Fig.1. Esporangios de mildeo velloso, con

pared resistente a la desecación (p) y un
contenido (c) citosólico. Estos
esporangios pueden sobrevivir hasta 8
horas en condiciones de alta humedad.
(1100X)

PRUEBA DE GERMINACION DE ESPORANGIOS

 tg

JJFILGUEIRA. S. GOMEZ. UMNG

Fig.2. Esporangios de mildeo velloso en

germinación, se observa esterigma (e),
papila (p), así como la formación del tubo
germinal (tg). 1 Hora Después de la
Inoculación (1HDI). (1100X).

PRUEBA DE GERMINACION DE ESPORANGIOS

 tg

a
JJFILGUEIRA. S. GOMEZ. UMNG

Fig.3. Esporangio de mildeo velloso, se

observa el vaciado del cuerpo del
esporangio, y la formación del apresorio
(a), y el tubo germinal (tg). (2HDI). (500X).

PRUEBA DE GERMINACION DE ESPORANGIOS

 cc

tg

JJFILGUEIRA. S. GOMEZ. UMNG

Fig.4. Esporangio de Mildeo velloso

obtenido por germinación in vitro.
Contenido celular (cc), tubo germinal
(tg). (6HDI). (500X).

PRUEBA DE GERMINACION DE ESPORANGIOS

 e

n e

JJFILGUEIRA. S. GOMEZ. UMNG

Fig.5. Esporangios de velloso sobre la

superficie de hojas de rosa de la
variedad Charlotte. Esporangio (e),
nervadura de la hoja (n). (0HDI). 500X.

SEGUIMIENTO DE LA INFECCION EN HOJA

 ev

tg

JJFILGUEIRA. S. GOMEZ. UMNG

Fig.6. Inicio de la penetración del apresorio

en la hoja. Se observa, esporangio vacío
(ev), tubo germinal (tg), y apresorio (a).
(2HDI). (1100X).

SEGUIMIENTO DE LA INFECCION EN HOJA

 e

JJFILGUEIRA. S. GOMEZ. UMNG

Fig.7. Penetración del mildeo velloso en la

hoja. Se observa el esporangio con escaso
contenido citoplasmático (e), el apresorio (a) y
la hifa de crecimiento intercelular (h). (4HDI).
500X.

SEGUIMIENTO DE LA INFECCION EN HOJA

 a

tg

vp

vs

h JJFILGUEIRA. S. GOMEZ. UMNG

Fig.8 Esporangios de mildeo velloso

infectando hojas de Charlotte in vitro. Se
observa el tubo germinal (tg), apresorio (a),
vesícula primaria (vp), vesícula secundaria
(vs), y hifa (h). (4HDI). (1100X).

SEGUIMIENTO DE LA INFECCION EN HOJA

 pc
a
ce

ce
c

ce

JJFILGUEIRA. S. GOMEZ. UMNG

Fig.9 Corte de hoja infectada con mildeo

velloso. Se observa apresorio (a) rompiendo
la cutícula (c) y la pared celular (pc) de las
células epidermales (ce). (6HDI). (1100X).

SEGUIMIENTO DE LA INFECCION EN HOJA

FUENTE: PERIODICO HOY, SEPTIEMBRE 2002
 ce Fig.10. Formación del
se
haustorio (h) en las
células subepidérmicas
(se), a partir de la vesícula
secundaria (vs) de las
vs células epidérmicas (ce)
h
de la hoja. Corte
ce transversal de hoja.
se
(12HDI). (1100X).
h

ce

JJFILGUEIRA. S. GOMEZ. UMNG

SEGUIMIENTO DE LA INFECCION EN HOJA

 Fig.11. Invasión del
patógeno hacia el
interior de la hoja. Se
pe
observa la epidermis (ce), se

las células
subepidermicas (se), así
como el parénquima de ce pe
empalizada (pe),
igualmente se observa
haustorios (flechas). se
(20HDI). (1100X).

ce

JJFILGUEIRA. S. GOMEZ. UMNG

SEGUIMIENTO DE LA INFECCION EN HOJA

 Ce

es

JJFILGUEIRA. S. GOMEZ. UMNG

Fig.12. Esporangióforos de mildeo velloso

saliendo de estomas del envés de la hoja.
Célula estomática (Ce), orificio del estoma
(o), esporangióforos (es) (96HDI) . (1100X)

SEGUIMIENTO DE LA INFECCION EN HOJA

 Em

e
R

JJFILGUEIRA. S. GOMEZ. UMNG

Fig.13. Desarrollo de los esporangios en los

esporangióforos que emergen de los
estomas. Esporangios maduros (Em),
Ramificación dicotómica (R), esporangio
inmaduro (e). (96HDI). 1100X

SEGUIMIENTO DE LA INFECCION EN HOJA

 E
E

e
JJFILGUEIRA. S. GOMEZ. UMNG

JJFILGUEIRA. S. GOMEZ. UMNG

Fig.14. Desarrollo de esporangios

en hojas de Charlotte. Se observa
el esporangióforo (E), ramificación
(R), y los esporangios (e). (96HDI).
500X.

SEGUIMIENTO DE LA INFECCION EN HOJA

 pl
Fig.15. Células del
parénquima lagunar
(pl) del tallo, donde pl
se observa hifas
intracelulares (hi)
que atraviesan las h
paredes de las
células (p), y un
haustorio (h). hi
(120HDI). (1100X).

JJFILGUEIRA. S. GOMEZ. UMNG

SEGUIMIENTO DE LA INFECCION EN TALLO

 pl
pl

pl h

hi

JJFILGUEIRA. S. GOMEZ. UMNG

Fig.16. Células del parénquima lagunar (pl) de

tallos infectados con mildeo velloso. Se
observan hifas intracelulares (hi) y haustorios
(h). (48HDI). 1100X.

SEGUIMIENTO DE LA INFECCION EN TALLO

 e

h
e

JJFILGUEIRA. S. GOMEZ. UMNG

Fig.17. Esclerénquima (E) atacado por

mildeo velloso, se observan haustorios (h),
todo el tejido adyacente a esta laguna de
esclerénquima está infectado por el
patógeno. (60HDI). (500X).

SEGUIMIENTO DE LA INFECCION EN TALLO

 v

he

JJFILGUEIRA. S. GOMEZ. UMNG

Fig.18. Corte transversal de vasos del

xilema atacados por mildeo velloso, se
observan: los haces vasculares (v), las
hifas extracelulares (he) y los haustorios
(h) en el interior de los vasos de xilema.
(96HDI). (1100X).

SEGUIMIENTO DE LA INFECCION EN TALLO

 Fig.19. Vasos
conductores (v)
v
infectados con mildeo
* velloso, donde se
observan hifas del
patógeno que viajan a
través de los vasos y
v los atraviesan. Hifa
pc
intracelular (flechas),
pared celular (pc),
v hifa penetrando la
pared (*). (120HDI).
JJFILGUEIRA. S. GOMEZ. UMNG
1100X.

SEGUIMIENTO DE LA INFECCION EN TALLO

 JJFILGUEIRA. S. GOMEZ. UMNG

Fig.20. Evidencia de ataque sistémico de M.

velloso en hojas de la variedad Charlotte.
Cortes de tallo y hoja muestran un
desarrollo vascular del patógeno en estos
ataques.

SEGUIMIENTO DE LA INFECCION EN HOJA

 CONCLUSIONES

1- El patógeno infecta a cualquier célula

disponible en el área de la lesión.
2- Las hifas del patógeno pueden moverse
entre los espacios intercelulares o los espacios
intracelulares.
3- El movimiento del patógeno dentro de la
planta muestra un comportamiento sistémico
viajando por los haces vasculares.
 AGRADECIMIENTOS
• Universidad Militar “Nueva Granada”
• MG CONSULTORES (G.R Chía)
• BASF Colombia
• BASF Ecuatoriana
GRACIAS!!!