InmunologíA

GeneraL
Por: Francisco Riveros N.
Otoño 2010
Universidad Mayor
16/03/10

Evaluaciones:
 3PP's
o 1° 25%
o 2° 25%
o 3° 30%
 Seminarios (entran como materia en pp's) 10%
 Promedio controles de lectura 10%

 Powerpoints
o hasta el jueves en la mañana el profe revisará las presentaciones, después de eso no
o inmuninvierno@gmail.com

 Buscar cosas en google académico o en dominios con .edu

 Las pruebas de inmunología general son los lunes en la tarde, durante la hora de seminario

Inmunología:

 Ciencia que estudia todos los mecanismos fisiológicos de defensa, específicas e inespecíficas, a
fin de mantener la integridad y homeostasis (balance, equilibrio) del organismo animal,
identificando y diferenciando lo propio de lo extraño (antígeno) y destruyendo éste último
 Anteriormente ligado a la microbiología
 Identificación:
o reconocimiento del cuerpo, lo propio
o se diferencia lo extraño

 El 95% de los linfocitos creados son eliminados naturalmente por el cuerpo

 Solo el 5% son inmunológicamente maduras y activas

 El sistema inmune tiene que ser tolerante con lo propio, no existe tolerancia con lo extraño
 Enfermedades autoinmunes ---> se pierde la tolerancia a lo propio

Leucocitosis: alza en n° de leucocitos

Leucopenia: baja en n° de leucocitos

 Fagocito de primer ataque

o rápido, peón, muchos, débiles, Polimorfo nuclear NEUTROFILO
 Fagocitos de segundo ataque
o más lento, caballería, MONOCITO

 Células más inmaduras son normalmente más grandes, con núcleos más claros
Respuestas Inmunes:

Inmunidad innata ---> natural o inespecífica

Inmunidad adaptativa ---> específica

 La primera fase de cualquier respuesta inmune consiste en el reconocimiento [del agente

agresor] del patógeno o del material extraño, a fin de iniciar reacción para eliminarlo

Células del Sistema Inmune: (se generan en la médula ósea – tejido hematopoyético)

Células Mieloides: Células Linfoides:

Granulociticas Linfocitos T
-neutrofilos (fagocitos) -helper
-basófilos (inflamatorio -citotóxicas
no fagocito) -supresoras
-eosinófilos (inflamatorio Linfocitos B
citotoxico) -células plasmáticas
Monociticas Células dentríticas?
-macrofagos (tejidos)
-langerhans (piel)
-kuppfer (hígado)
-Células dentríticas?

Eosinofilia:
 Aumento de eosinofilos en la sangre
 Frecuente en alergias y parasitismos

Kuppfer:
 Importante porque el hígado trae en la sangre desechos que deben ser eliminados
22/03/10

Componentes del Sistema Inmune

Innato (inespecifico o Adaptativo

natural) (especifico)

Humoral Celular Humoral Celular

-serie de moleculas -macrofagos -anticuerpos o -linfocitos T
fagocitosis
-complemento: -neutrofilos inmunoglobulinas -más otras células
mecanismo de defensa efectoras que
-interferón colaboran con
-factor necrotico gran asociación
tumoral
-lisozima (lagrimas

*Acción contra lo propio ---> Lupus ---> ataca al Colágeno, la cual es una proteína estructural, en
muchas (casi todas) las células. Los anticuerpos atacan al colágeno y también a trozos de éste.

Acción del Sistema Inmune

Benéficos:
 Protección contra agentes invasores
 Eliminación de células propias alteradas
Deletéreo:
 Inflamación
 Acción contra lo propio (autoinmunidad) ‡ tolerancia inmunológica ---> tolera propio
 Sobrerreacción (hipersensibilidad) – Alergia tipo 1

Sobrerreaciones:
 Rash cutáneo: enrojecimiento en pintita en la piel
 Shock anafiláctico: inflamación sistémica por hipersensibilidad

Puntos cardinales de la inflamación:

 Dolor
 Rubor
 Tumor (aumento de volumen)
 Calor
 Pérdida de función

Vacunas polivalentes:
 Tienen diferentes antígenos
 Con éstas vacunas se corre el riesgo de que el organismo no actúe con la misma eficiencia ante
el antígeno

*Estrés ---> libera sustancias, entre ellas corticodes, los cuales afectan la respuesta inmune.
Cuando el estrés es muy fuerte, pueden proliferar células cancerígenas.
*El corticodes tiende a generar retención de líquidos
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Inmunidad Innata v/s Adaptativa

Innata: Adaptativa:
-independiente Ag (antígeno) -dependiente Ag (sin
-inmediata antígeno, no hay respuesta
-Ag inespecífico inmune adaptativa)
-sin memoria inmunológica -periodo latencia (varía según
edad, estado de salud, etc.)
-Ag específico
-memoria inmunológica

Neutrófilo
Macrófago
Multiplicación y especialización
(linfocitos B en celulas
plasmáticas producen
inmunoglobulinas)

Innato
Barreras físicas
-piel, vellos intestinales,
cilios pulmonares, etc.
Factores solubles
-citoquinas (mensajeras),
interferón, complemento
(preformadas), etc.
Células
-fagocitos*, células NK,
eosinofilos (citotóxicas),
células K
*Función de -macrófagos
fagocitosis -neutrófilos
*Los camélidos tienen
eritrocitos nucleados!!
Lugar
Piel
Tracto Gastro-intestinal (GI)
Pulmón
Ojos – Nasofaringe
Sangre – Órganos linfoides
Componentes del Sistema Inmune
Adaptativo
No
Inmunoglobulinas
Linfocitos T y B
Killer (citotóxica) tiene
una condición: el
antígeno debe estar
rodeado de
inmunoglobulinas
Mecanismos Efectores – Innata
Componente
Células escamosas, glándulas
sebáceas y sudoríparas
Células columnares
Mucus, cilios
Mucus, saliva, lagrimas
Fagocitosis, células K, NK / LAR
(células activadas por
linfoquinas ---> citoquinas
provenientes de linfocitos)
Cualquier célula que
tenga receptores para
la región FC (fracción
cristalizable) de las
inmunoglobulinas
puede actuar como
célula K
Función
Descamación, ácidos grasos
Peristalsis, pH, sales biliares,
ácidos grasos
Clearance ciliar, surfactante
Flushing, lisozima (enzima
preformada, destruye
peptidoglicanos bacterianos)
Fagocitosis / destrucción
intracelular, citolisis directa y
dependiente de Ac
(anticuerpos)
 Suero y líquidos tisulares Lactoferrina, transferrina
(transportadores de fierro)
Interferón, FNT-a (factor
necrótico tumoral α)
Fibronectina / complemento
Deprivación de fierro
(Muchas bacterias usan fierro
para multiplicarse, así que si
se les quita el fierro, tienen
menos posibilidades de
proliferar)
Proteínas antivirales y
activación fagocítica
Opsonización, fagocitosis
aumentada, inflamación

Opsonización: proceso por el cual un agente bacteriano que puede generar una agresión del
sistema, es rodeado por “opsoninas” (Ac, etc.), y producto de ello la célula fagocítica incrementa
su apetito, la cual se incrementa en forma inespecífica en una inflamación. ---> Como ketchup a
las papas fritas.

 En la superficie de los linfocitos B, hay inmunoglobulinas de membrana (son chasconas)

 Van hacia afuera las regiones FAB (hipervariable), la cual interactúa directamente con el
antígeno
 El linfocito T para reconocer el antígeno necesita una Célula Presentadora de Antígeno (CPA),
el cual podría ser un linfocito B, pero no es su función principal ser CPA (la cual es dar lugar a
las células plasmáticas para la producción de inmunoglobulinas)
 El macrófago podría ser CPA, pero las Células Dendríticas Interdigitales son las CPA por
excelencia
 Hemobartonella felis ---> parásito intracelular
 Litiasis (cálculos) biliares ---> obstruye paso de salida de la bilis, causando hiperbilirrubinemia,
a su vez causando ictericia, sin necesariamente ser un problema hepático.
29/03/10

 Se debe volver a la homeostasis (con apoptosis) después del crecimiento y derrota de los
antígenos para evitar una inflamación crónica que daña progresivamente el tejido de manera
irreparable.

Tipos de Respuesta Inmune Adaptativa

*CPA: célula dendrítica interdigitante

 Suero es la parte que contiene proteínas solubles en el plasma sanguíneo
 TCR ---> receptor de los linfocitos T ---> interactúa con un macrófago (CPA), formando un
complejo, para generar moléculas de coestimulación, para poder activar a un linfocito T
helper.
 El helper libera sustancias ---> linfoquinas (citoquinas provenientes de linfocitos T) hacia un
receptor de linfoquina del macrófago, y así se estimula la actividad y capacidad fagocítica del
macrófago, estimula la capacidad de la liberación de sustancias.

Inmunidad
Inmunidad
mediada
Humoral por células

Linfocito T Célula autóloga

Bloquea infecciones y
elimina a los microbios
extracelulares
Helper infectada por virus
+ +
Macrófago Linfocito T citolítica

Activación de Lisis de células

macrófagos para matar autólogas para
a los microbios interrumpir el ciclo de
fagocitados reproducción del virus
al destruir su
reservorio de infección

 Después de la lisis, los viruses se liberan, para que actúen las inmunoglobulinas, ya que no
pueden actuar intracelularmente.

Células linfoides:

1. Linfocitos B
2. Linfocitos T Helper (Th) o colaboradoras
3. Linfocitos T Citolíticas (Tc)
4. Linfocitos Grandes Granulares (LGG)

*95% de Natural Killers (NK) son LGG

*Cáncer ---> reacciones citotóxicas celulares predominan en su combate.
30/03/10

Linfocitos:

Células B:
 Cada linfocito B está programado genéticamente para codificar un receptor de superficie
específico de un antígeno determinado.
 Si reconoce al antígeno, se multiplica y diferencia a célula plasmática para la producción de
inmunoglobulinas (anticuerpos)

Células T: según función

 Th: interacción con célula B (multiplicación, diferenciación, producción anticuerpos)
 Th: interacción con fagocitos mononucleares (destruyen patógenos intracelulares)
 Tc: destrucción célula huésped infectadas por virus u otro patógeno intracelular
 LGG: reconocen células huésped que carecen o han perdido expresión de ciertas moléculas
(antígenos) CMH (células tumorales infectadas por viruses)

Maduración de los Linfocitos:

*Linfocitos B ---> Inmunidad adaptativa humoral

*Linfocitos T ---> Inmunidad adaptativa celular
---> Existe maduración también (no solo en el Timo) sino que en la piel y en el
epitelio intestinal
---> Aves ----> se encuentran en la Bursa de Fabricio en la cloaca

 La maduración de los linfocitos ocurre en gran parte en el tejido linfático asociado a la piel
 La maduración implica que el linfocito esté listo para poder defender

Clases de Linfocitos:

Linfocito B ---> neutralización, fagocitosis, activación del complemento ---> (respuesta adaptativa)

Linfocito T Helper ---> activación de macrófagos

---> inflamación (neutrófilo) (respuesta adaptativa)
---> activación de linfocitos T y B (diferenciación)

Linfocito T Citolítica ---> matar células infectadas intracelularmente ---> (respuesta adaptativa)

Natural Killer ---> matar células infectadas intracelularmente ---> (respuesta innata)

Linfocitos T:

 Para su activación deben reconocer al antígeno (con el uso del CPA: célula presentadora de
antígeno – CMH)
 CMH: moleculas especializadas codificadas en un conjunto de genes denominado complejo de
mayor (o principal) histocompatibilidad
 Linfocito T posee receptor específico TCR que reconoce: péptido Ag-CMH ---> activación
linfocito T por moleculas de coestimulación
 Linfocito activado libera citoquinas (proteínas solubles): transmisión de señales a otras células
o interactúa directamente con otras células

*Reticulocitos: eritrocitos nucleados por inmadurez

*Encontrar compatibilidad sanguínea es más fácil que encontrar compatibilidad de órganos, ya que
la sangre tiene sus antígenos de membrana mucho menos especializadas que los órganos

Célula autóloga ---> CMH I

CPA ---> CMH I y CMH II
---> pueden de tener un péptido antigénico para llevarlo a la membrana CMH II

 La célula autóloga, si está infectada, puede expresar un CMH I con una anormalidad, gracias a
péptidos virales adheridos a sus antígenos de membrana normales, los cuales toman contacto
con las NK, y al no poder expresar su inhibidora de apoptosis (como normalmente lo haría, en
un caso normal), la NK detecta un problema y la lisa

Células Citotóxicas:

 Linfocito T Citotóxico (Tc)

 Linfocito granular grande (LGG)
 Células natural killer (NK)
 Polimorfonucleares eosinófilos

Todas éstas células destruyen a las células afectadas o alteradas a través de la liberación de
sustancias de los gránulos intracelulares en la cercanía de ella (los citotóxicos liberan también
sustancias tóxicas contenidas en el citosol).

*Cél K ---> Adcc (citotoxicidad dependiente del Ac.)

---> ~~ Antibody dependent on citotoxic cells

Células mediadoras de Inflamación:

Basófilos (circulantes) / Mastocitos o células cebadas (tisulares):

 Contienen gran cantidad de gránulos
 Pueden sintetizar y secretar mediadores que controlan las respuestas inmunes
 Mastocitos están cercanos a vasos sanguíneos y ejercen función sobre endoteliocitos

Plaquetas: trombogénesis o Ag-Ac induce activación con liberación de mediadores de la

inflamación

*Células cebadas ---> ej. Adventicia conectiva de arteriolas

Fx: quimiotaxis leucocitaria y de mediadores solubles hacia el punto de infección

 Mediadores liberan histamina a los mastocitos en sus receptores H1, el cual causa relajación
(vasodilatación), aumentando la permeabilidad a su vez causando edema (exceso de líquido
intersticial).
Mediadores solubles: (sérico ---> suero sanguíneo, plasma sin elementos figurados que coagulan)

 Inmunoglobulinas
 Citoquinas
 Proteínas de fase aguda
 Complemento

*Las citoquinas son liberadas hacia el hígado para sintetizar las proteínas de fase aguda, la cual es
inflamatoria (ej. PCR).
* Las inmunoglobulinas, las proteínas de fase aguda y el complemento son las moléculas que
promueven la fagocitosis, es decir, se comportan como opsoninas.
05/04/10

 Antígeno:
o cuerpos extraños al organismo
o toda respuesta inmune comienza con un reconocimiento del antígeno
o incapaz por sí mismo de unirse a un BCR o un TCR, pero si puede unirse a un linfocito T
activado

 Inmunógeno:
o cuerpo capaz de activar una respuesta inmune, de despertar
o capaz de unirse a un BCR o TCR (receptores de linfocitos B y T)

 Hapteno:
o molécula muy pequeña
o incapaz de desencadenar una respuesta inmune
o antígeno, pero no inmunógeno

 Epítopo o Determinante Antigénico:

o son algunos sectores de un antígeno que inducen reacción inmune
o H1N1 ---> gripe porcina // H1N5 ---> gripe aviar
o en un mismo microbio, pueden haber más de un tipo de epítopo

 Anticuerpo:
o glicoproteína
o la producen células plasmáticas
o éstas células las producen cuando hay presencia de inmunógenos

 Tolerógenos:
o antígeno reconocido para que ya no se reaccione ante su presencia

Factores que influencian la inmunogenicidad del inmunógeno

 Carácter de extraño (inmunógeno)

o Xeno (de especies distintas) ---> xenoantígeno
 injerto de piel de cerdo a un humano
o Alo (de la misma especie, de un individuo distinto) ---> aloantígeno
 injerto de piel de un humano a otro
o Auto (del mismo individuo) ---> autoantígeno
 injerto de piel del mismo individuo
 Tamaño
o macromoléculas
 Composición Química
o Estructura primaria ---> determinante de secuencia
o Estructura secundaria Proteínas
o Estructura terciaria Determinantes conformacionales
o Estructura cuaternaria
 Forma Física
o Particuladas > soluble
o Denaturada > nativa
 Degradabilidad
o Ag procesado por CPA
o Hidratos de carbono no son degradables

Factores que influencian la inmunogenicidad

Contribución del Sistema Biológico

 Genética
o especies
o individual
 Edad
o lentitud al tener muy poca edad o vejez

Factores que influencian la inmunogenicidad

Método de Administración

 Dosis y Ruta
o > subcutánea > intragástrica
 Adjuvante
o sustancias que aumentan la respuesta inmune a Ag

Naturaleza Química de los Inmunógenos

 Proteínas (las mejores)

 Polisacáridos
 Ácidos nucleicos
 Lípidos (los peores)
o algunos glicolípidos y fosfolípidos pueden ser inmunogénicos (células T)

Tipos de de Antígenos
T – Independientes

 Si el Ag es capaz de activar directamente sin linfocito T helper es un T – independiente

 Polisacáridos
 Propiedades
o estructura polimérica (se repite el epítopo en los monómeros)
o activación policlonal células B:
 positivo ---> tipo 1 (TI – 1) ---> capaz de activar muchos linfocitos B
 negativo ---> tipo 2 (TI – 2) ---> monoclonal u oligoclonal
o resistente a la degradación
o ejemplos:
 polisacárido pneumococo, lipopolisacárido
 flagelos
 Tipos de de Antígenos
T – Dependientes

 Protéicos
 Estructura
o epítopos son diferentes
 Degradables
 Ejemplos:
o proteínas microbianas
o proteínas extrañas o propias alteradas

Conjugados Hapteno – Carrier

 Definición: se tiene que unir a una macromolécula que le da la estructura y complejidad

(carrier)
 Estrucura
o determinantes nativos
o determinantes hapténicos
 Depende del carrier, si es polisacárido o proteína si es T – independiente o T – dependiente
 El carrier puede tener determinantes nativos (propios de la proteína o polisacárido), y además
se puede tener determinantes de los haptenos conjugados con el carrier
 Los haptenos se unen al carrier para poder generar una respuesta inmunológica

Determinantes Antigénicos
Reconocidos por Células B y Ac

 Composición
o proteínas, polisacáridos, ácidos nucléicos
o determinantes de secuencia (lineares)
o determinantes conformacionales
 BCR las reconoce todas
 TCR solo reconoce los determinantes de secuencia
06/04/10

Determinante Antigénico
Reconocidos por células B y Ac.

 Número
o límitado (epítopos inmunodominantes)
o superficies externas de los Ags.

Determinante Antigénico
Reconocidos por células T

 Composición
o proteínas (algunos son lípidos)
o determinantes de secuencia
o procesado (no es directo)
o presentación MHC ---> presentación de lípidos por MHC – like CD1
*solo los CPA expresan MHC II
 Tamaño
o 8 – 15 residuos
 Número
o ilimitado a aquellos que se puedan unir a MHC

*Un hepatocito tiene el gen del MHC II pero no lo expresa

Superantígenos

 Definición
o Antígeno capaz de producir una reacción enorme en el sistema inmune, en
comparación con otros antígenos
o normalmente un antígeno activa una respuesta inmune de 1:10 4 linfocitos
o un super antígeno activa 1:4 linfocitos

Determinantes Reconocidos por el Sistema Inmune Innato

 Sistema inmune adaptativo

o determinante discreto
o reacciona con patógeno específico
 Sistema Inmune Innato
o amplio patrón molecular
o reacciona con una variedad de patógenos
o patrón molecular asociado a patógeno (PMAP o PAMP (en inglés))
o patrón de reconocimiento de receptores (PRR)
 Afinidad:
o fuerza de enlace que se establece entre el antígeno y el anticuerpo
 Avidez:
o fuerza de unión debido a enlaces multivalentes
 Anticuerpos se unen a antígenos por uniones no-covalentes; a mayor distancia entre ellos,
menor afinidad
 A mayor kd (constante de disociación) menor afinidad

Inmunoglobulinas

 La mayoría son γ-globulinas, pero pueden ser α o β con

Función General de Inmunoglobulinas

 Unión a Ag
o puede ser protectiva
o Valencia: sitio de unión de un Ac. con un epítopo (si es un punto de unión, la valencia es
1; si son dos puntos de unión, la valencia es 2; etc.)
 Funciones efectoras
o fijación del complemento
o unión a varias células
o inmunidad al feto
o inmunidad de mucosa
o hipersensibilidad inmediata
o regulación de la respuesta inmune

Estructura Básica de Ig.

 Ig – heterogéneos
 Mieloma proteínas – homogéneas

 Cadenas pesadas y ligeras

 L = 23 – 25 kD
 H = 5 – 77 kD
 Puentes disulfuro
o intercadena (intercatenarios)
o intracadena (intracatenarios)
o H 450 – 550 aa's; 3 – 15% carbohidratos
o L 220 aa's; no contiene carbohidratos
 Región variable y constante
o VL y CL
o VH y CH
 Región de Bisagra
 Estructura de la Región Variable

 Hipervariable (HVR) o región determinante de complementaridad (CDR)

 Región de entramado

Fragmentos de las Ig.

 Fab (fracción que se une al antígeno)

o unión al antígeno
o valencia = 1
o especificidad determinada por VH y VL
 Fc (fracción cristalizable)
o funciónes efectoras
o *cadenas pesadas son identicas entre sí

Clases de Ig.

 IgG – Gamma cadenas pesadas

 IgM – Mu cadenas pesadas
 IgA – Alpha cadenas pesadas
 IgD – Delta cadenas pesadas
 IgE – Epsilon cadenas pesadas

Tipos de Ig.
(cadenas ligeras)

 Kappa
 Lambda:
o Lambda 1
o Lambda 2
o Lambda 3
o Lambda 4

Nomenclatura Ig.

 IgM (kappa)
 IgA1 (lambda 1)
 IgG
 Heterogéneos

IgG

 Propiedades:
o alta concentración sérica
o mayor concentración en espacio extravascular
o transferencia placentaria
o la más versátil
 IgM

 Estructura:
o pentómero (19s) normalmente
o dominio extra (CH4)
o cadena J

 Propiedades:
o 3era Ig sérica
o primera Ig sintetizada por el feto y las células B vírgenes
o fija complemento
o opsonizante

*Sólo los antígenos que no son polisacáridos pueden activar a las células B para producir más de
una clase distinta cada vez que vuelva el antígeno, y quede el linfocito de memoria para clonación.
Esto se llama conmutación de clase

o Ig aglutinante
o se une a receptores Fc
o Ig de superficie de células B

IgA

 Sérico – monómero
 Secreciones (sIgA)
o dímero (11s)
o cadena J
o componente secretorio
 2da Ig sérica
 Mayor Ig de secreción (inmunidad de mucosas o local)

IgD

 Monómero
 Porción hidrofóbica (extremo ácido)
 No fija complemento

IgE

 Monómero
 Dominio extra (CH4)
 La menor proporción en el suero
 Une a basófilos y células cebadas (no requiere unirse a Ag)
 Reacción Alergica
 Infecciones parasitarias (particularmente helmintos)
o unión a receptor Fe de eosinófilos
 no fija complemento
 Isotipos, Alotipos e Idiotipos

Isotipos o variabilidad isotípica

 Hay variaciones estructurales en la secuencia de aa. en la región constante de las cadenas H y L
 Cadenas ligeras = kappa, lambda
 Cadenas pesadas = mu, alpha, gamma....

Isotipos:
 Son los determinantes antigénicos que caracterizan las clases y subclases de las cadenas
pesadas y los tipos y subtipos de las cadenas ligeras
 Importancia:
o cuantificación de los isotipos
o caracterización de tumores de células B
o inmunodeficiencias

Alotipos:
 Son determinantes antigénicos específicos para formas alélicas de los genes de Ig
 Variabilidad genética entre individuos de la misma especie
 Alotipos representan pequeñas diferencias de secuencia el aa L y H
 Frecuencia: en algunas personas solamente
 Genética (alelos)
o co-dominancia, genes autosomales
 Exclusión alélica: la decisión de un linfocito de seguir un alelo especifico por el resto de su
existencia y ningún otro
 Importancia:
o monitoreo trasplantes de médula
o medicina forense
o test de paternidad

Estructura Básica de una Inmunoglobulina

Dominio variable de cadenas

pesada y ligera (V)

Vh Intercatenarios
Ch1

Ch2 Ch3
Vl
Cl
Extremo amino Cl Extremo ácido
Vl
Ch2 Ch3
Ch1
Unión a
Vh Intracatenarios
receptores

Dominio constante de
cadenas pesada y ligera (C)
12/04/10

*Imprimir powerpoint para el profe!

Inmunología a escala zoológica

 Todos los organismos tienen algún sistema de defensa inmunológica

 Unicelulares: marcadores de membrana y formación de geles de defensa
 Invertebrados: innato
o celular
 celomocitos o hemomocitos
 nódulos y encapsulación
 citotoxicidad inespecífica (carece de memoria)
o humoral
 opsoninas, aglutininas
 pentraxinas ---> proteína C reactiva
 Vertebrados:
o barreras fisico-quimicas
 piel
 reflejo de la tos, estornudo, mucus
 Evolución órganos linfoides
o timo: a partir de los condrictios
o ganglios linfáticos: reptiles ---> también parten los linfocitos T helper
o aves y mamíferos: células de membrana
 Ciclóstomos: complemento
 Proteínas de fase aguda ---> opsoninas
 Interferón: limita reproducción viral
 Anfibios ---> solo tienen IgY (por peso molecular)
 Lisozimas se han encontrado en insectos, moluscos, y equinodermos
13/04/10

Idiotipos:
 Definición
o determinantes antigénicos, únicos presentes en una molécula individual o en moleculas
de especificidad idéntica (mismas regiones hipervariables)
o variabilidad del dominio variable, tanto la cadena pesada como la ligera
o determinan especificidad del paratopo (Vh Vl)
o idiotipos privados y públicos de reacción cruzada
o idiotipo – Anticuerpo anti-idiotipo
 Importancia
o marcadores de región variable
o regulación de la respuesta inmune
o vacunas
o tratamiento de tumores de células B

Vacunas

 El objetivo de toda vacuna es inducir inmunidad especifica que evite la invasión de

microorganismos, eliminar a los que han entrado y neutralizar las toxinas microbianas, la
inmunidad debe ser duradera
 Que sean inocuas, que sean baratas, fácil almacenaje, no puede producir autoinmunidad, ni
hipersensibilidad
 Dosis apropiada
 Características químicas Inmunidad protectiva
 Vía de administración

Tipos de vacunas
Vacunas elaboradas por Biotecnología

1. Aislar gen específico e insertarlo en el ADN de ciertos microbios o células de mamíferos, se

convierten en “fábricas” que producen el antígeno deseado

*a microorganismos muertos
*a microorganismos atenuados Lo clásico
(Mejor, pero con el peligro de presentar la patología)

2. Insertar gen o genes del antígeno deseado en el ADN de un virus vaccinia (ej. virus pox del
canario) y se inyecta, se produce respuesta tanto al virus como al antígeno que codifica los
genes introducidos (vacunas recombinantes)

3. Vacunas de ADN: se localizan los genes de un antígeno de un antígeno, se clonan, insertan en

un plásmido y se inyectan, la célula del huésped expresará el antígeno deseado

 Plásmido: molécula extracromosomal de ADN doble helicoidal, se replican en forma

independiente
 Transfección: transferencia del ADN del virus al de una célula propia (muscular, etc.)
4. Síntesis química de antígenos al conocer el gen que codifica un determinado inmunógeno se
conoce la secuencia exacta de aminoácidos que lo componen (vacunas de subunidad) lo que
constituye un antígeno purificado

5. Vacunas anti-idiotipo, el paratopo es un reflejo tridimensional del epítopo de un antígeno

(espejo)

Se usa el anti-idiotipo como vacuna porque da la respuesta inmune para producir los anti-anti-
idiotipos, que también funcionan para los primeros antígenos, sin necesidad de tener el original

Génetica en la Inmunología

Historia
 La misma región C se puede asociar con muchas regiones V
o IgG posee diferentes especificidades
 La misma región V se puede asociar a muchas regiones C
o mismo idiotipo en IgG e IgM
 Regiones C y V se codifican por genes separados
 H y L son codificados por 3 familias de genes
 Para H: para kappa y para lambda

Genes Familiares Cadena Ligera

 Organización línea genética germinal

*genes cadena ligera lambda: n=30

*genes cadena ligera kappa: n=300

 Reordenamiento y expresión genética

Genes Familiares Cadena Pesada

 Organización línea genética germinal

*genes cadena pesada; Vn=1000 , Dn=15

 Exones que codifican para dominios de cadena H están separadas por intrones
 Reordenamiento y expresión genética
19/04/10

Inmunidad en Neonatos y Vacunaciones Polivalentes

 Neonato: periodo e mayor riesgo, tiempo varía según especie

 Inmunidad fetal
o formación timo y órganos linfoides secundarios
o aparición de los linfocitos B e Ig's
o Gato: linfocitos maduros a los 42 dias
 La vía por la que llegan las Ig maternas al feto depende de que tipo sea la placenta (en relación
al grado de invasión de la placenta en el tejido materno), esto es porque si es, por ejemplo, una
placenta hemocorial (primates, roedores) las Ig's de la madre pasarán directamente de su
sangre a la sangre del feto.
 Infecciones intauterinas: toxoplasmosis, lengua azul, rinotraqueitis infecciosa bovina, rubeola
 Inmunidad neonatal
o inmunidad pasiva (propia)
o sistema inmune completo, pero inmaduro
o ayuda muchisimo el calostro (primera leche que secreta la madre, conteniendo muchos
Ig's)
 El cachorro solo recibirá las Ig's contra las enfermedádes que la madre haya sido inmunizada
 Vacunas
o inmunización activa sintetizada
o hay vacunas inactivadas o vivas atenuadas (más fuertes)
 Vacunas polivalentes
o triple (gato), sextuple (perro) y octuple (sextuple plus)
o 6ta a 8va semana ---> inicio del calendario de vacunación
o últimos avances ---> vacunas recombinantes
20/04/10

Mecanismos de Reordenamiento del ADN

 Secuencia de señales de recombinación (RSS o SSR en español)

o nonámero
o heptámero
o 1 o 2 señales de vuelta

Heptámero Nonámero Nonámero Heptámero

CACAGTG – 23hp – ACAAAAACC TGTTTTTGG – 23hp – GTGTCAC

GTGTCAC – 23hp – TGTTTTTGG ACAAAAACC – 23hp – CACAGTG

2 turnos 1 turno
RSS 2 1 RSS

 RAG-1 y RAG-2
 Kappa:
o 1 exón C
o corriente abajo de exón V ---> RSS tipo 1
o corriente arriba de exón J ---> RSS tipo 2

 Porque una célula B individual produce una sola clase de Ig de una misma cadena L y de una
misma H
 Porque una célula B produce una Ig de una especificidad
 Puede cambiar el isotipo pero no el idiotipo (conmutación de clase
 *Cuando el antígeno es un hidrato de carbono, no hay conmutación de clase
 Porque hay exclusión alélica
 Orden de Expresión de Genes de Ig

Célula B
progenitora
1ro

Gen Cadena
+ Pesada
V-D-J recombinación –
2do
No Reordenamiento
Productivo
Apoptosis
Transcribe
Si

Cadena
Pesada

Materno Paterno
o

Célula
Pre-B

Gen Cadena
Ligera
1ro kappa
+ V-J recombinación 2do kappa
3ro lambda
4to Reordenamiento
No Productivo
Apoptosis Transcribe –
Si

Cadena
Ligera

Célula B
Madura
 Orígen de la Diversidad Ac

Historia
 Definición: diversidad (repertorio) es el total de todas las especificidades de Ac que el
organismo es capaz de expresar
 Teorías
o teoría de la línea germinal
o teoría de la mutación somática

Conceptos actuales
 Múltiples genes V
 Uniones VJ y VDJ
 Recombinación variable (o imprecisas)
 Inserción de regiones N: enzima terminal transferasa
o mutación somática
o conversión génica
o combinación por asociación
o multiespecificidad

Receptor Célula T
 Heterodímero de una cadena alfa y otra beta
 Estructura y expresión genética de cadena alfa análoga a cadena ligera de la Ig
 Estructura y expresión genética de la cadena beta, análoga a cadena pesada de la Ig
 *Tiene cadenas variables y constantes porque son análogas
 No presenta mutación somática en la células T

Órganos Linfoides

 Primarios: Timo y Médula ósea (Bolsa de Fabricio)

o maduración (linfopoyesis): adquieren receptores específicos para cada tipo de Ag
o selección de linfocitos: autotolerancia
 Secundarios o Periféricos: Ganglios linfáticos, Bazo, Tejidos linfáticos asociados a mucosa
(MALT).
o interacción entre células (linfocitos, CPA, células accesorias) y reconocimiento del Ag
o diseminar la respuesta inmune al resto del organismo
 *Vías respiratorias tienen MALT porque constantemente antígenos entran, y deben ser
reconocidos
 *La mucosa intestinal tiene millones de bacterias (flora bacteriana), y si hay permeabilidad del
intestino, puede ocurrir translocación de bacterias y finalmente, sepsis.
 Órganos Primarios

Timo
 2 lóbulos (en humano) – lobulillos (trabéculas conectivas)
 Lobulillo tímico: timocitos
o corteza (gran densidad célular – inmaduras)
Gradiente de diferenciación
o médula (menor densidad celular – maduras)
 Estroma tímico: varios tipos celulares no linfoides
o epiteliales
o células dendríticas interdigitantes (límite córtico-medular)
o macrofagos (localización similar a células dentríticas)

 Células del estroma expresan en su superficie MHC I y/o II y participan en la maduración y

selección de linfocitos T maduros

*Células procedentes de la médula ósea entran a timo – división activa en corteza – 95% mueren
por apoptosis – 5% va a la médula (maduración) – salen del timo como células T vírgenes maduros
(inmunocompetentes) por venas postcapilares

 Interacción células T con células estromales induce selección de timocitos:

o selección positiva: generan TCR que reconozcan MHC propio
o selección negativa: de ellos, se eliminan los autorreactivos

Médula Ósea
 Los linfocitos B se desarrollan en islotes de células hematopoyéticas
 La médula ósea además de linfocitos B, presenta células T maduras y abundantes células
plasmáticas (órgano linfoide secundario)
 En aves, los linfocitos B se desarrollan en la Bolsa de Fabricio, que contiene folículos (corteza y
médula)

Órganos Secundarios

1. Capsulados
a. Ganglios: capturan Ag de la piel y de superficies internas
b. Bazo: captura Ag desde la sangre
2. No capsulados: asociados a mucosas (MALT)
o (> 50% del tejido linfoide total) protección frente a Ag que penetran por epitelios
mucosos (1er encuentro – iniciación) como tracto gastrointestinal, tracto respiratorio y
genitourinario, siendo su principal mecanismo efector la secreción de IgA (más
abundante)
3. Acúmulos difusos (no capsulados): dispersos por todo el cuerpo

Ganglio Linfático
 Corteza: rica en células B
1. Folículos primarios: B maduros reposo (sin reacción)
2. Folículos secundarios: estimulación antigénica con centro germinal y manto (células que
reaccionaron)
 Paracorteza: rica en células T y células dendríticas interdigitantes
 Médula: células B, T, plasmáticas, abundantes macrófagos
 Seno subcapsular: donde van Ag timo-independientes

 En su recorrido permite interacción Ag con macrófagos y otros CPA (procesan Ag y presentan

conjunto con MHC II) – activación linfocitos Th – en centro germinal hay activación,
proliferación y diferenciación de linfocitos B (células plasmáticas y de memoria: manto)
 Linfa sale por eferente (rico en Ac y linfocitos: tanto los que proliferaron más lo que ingresaron
desde la sangre por las vénulas postcapilares del endotelio alto (HEV)

Bazo
 Captación y reservorio, cápsula conectiva – trabéculas + más red reticular
 Cada compartimiento: pulpa blanca y pulpa roja
o Pulpa blanca: tejido linfoide, zona más densa alrededor de las arteriolas: capa linfoide
periarteriolar (CLP), constituye la zona T (células CPA – MHC II – Th); por fuera del CLP
zona más difusa rica en células B y macrófagos (folículos primarios, células B vírgenes y
secundarios centro germinal)
o Pulpa roja: red de sinusoides venosos y cordones celulares que contienen macrófagos
residentes especializados: hematocateresis (destruir, y recuperar material de linfocitos
viejos, y son fagocitados)
27/04/10

Tejido linfoide asociado a mucosas (MALT)

Intestino:
 Placas de Peyer; agrupadas pero no capsuladas

Compartimientos Celulares

Lámina Propia:
 Células T CD4+
 Macrófagos, células dendríticas
 Pocas células T CD8+
 Muchas células productoras IgA
 Mastocitos, eosinófilos

Membrana Epitelial:
 Células T CD8+
 Células T CD4+
 Células T CD4–, CD8– Pocas
 Células no-TCD3–, CD7+

*Inflamación Basófilos Mecanismo de Desgranulación ¿Cómo?

vasodilatación (Liberación de Histamina)

Células M: Facilita la captación de antígenos y los permite avanzar, in hacerles nada, hacia el lugar
donde están las células del MALT
 Organización del Sistema Inmune

 Órganos, tejidos y células ampliamente difundidos por el organismo

 Órganos ---> vasos sanguíneos y linfáticos – transporte celular (linfocitos)
 Primario: proliferación y maduración de linfocitos
 Secundario: captura e interacción con el antígeno

Hematopoyesis:

 Célula madre ~~ stem cell ---> células sanguíneas

 saco vitelino (en embrión) – hígado /bazo --- médula ósea (en adultos)
 médula ósea: las células madre son 1 en 10.000 son autorregenerativas
 *maduración mieloide y linfoide: microambiente dado por la matriz celular del estroma +
factores de crecimiento
 Cada tipo celular tiene regulación diferente (ej. vida media de eritrocitos: 120 dias; PN: pocos
días; algunos linfocitos T: más de 30 días)

*Regulación fase estacionaria: citoquinas propias del estroma

*Hematopoyesis inducible: (en caso de infección o hemorragia) citoquinas producidas por
macrófagos y linfocitos Th activados – células específicas – migran al foco de infección
Muerte Celular Programada o Apoptosis:

Características:
 Programada genéticamente como respuesta adaptativa
 Reducción de tamaño celular y citoesqueleto (pliegues en membrana celular)
 Condensación cromatínica y fragmentación nuclear (nucleasas)
 Descomposición celular en fragmentos llamados “cuerpos apoptóticos” rodeados por
membrana, contienen gránulos intactos
 Macrófagos y PMN fagocitan y degradan los cuerpos apoptóticos sin inducir respuesta
inflamatoria ---> deben tener receptores para antígenos de superficie
 myc, p53 (inductores ; bcl y otros (inhibidores)

Marcadores de Superficie de Leucocitos

 Se producen en órganos linfoides primario (1000 millones al día), de ahi van a órganos
linfoides secundarios y a espacios tisulares
 Adultos (humano) existe 1 billón de linfocitos (2% peso corporal)
 Representan el 20% – 30% de leucocitos totales
 Existen 3 poblaciones de linfocitos funcionalmente distintos, difícil de diferenciar
morfológicamente, caracterizada por un juego de marcadores de superficie (T, B, NK)
 Los linfocitos T y B (específicos)
 NK (innato)

Linfocitos T y B Vírgenes

 Son pequeños (6μ) poco citoplasma con cromosomas condensados (heterocromatina)

 Pocas mitocondrias y poco RER y Golgi
 En ausencia de antígeno tienen vida media corta (días a pocas semanas) y fácilmente sufren
apoptosis
 En contacto con el antígeno, se origina linfoblasto (15μ) – citoplasma con Golgi bien
desarrollado; estas proliferan y se diferencian en 2 subpoblaciones
1. Células efectoras: vida corta
2. Células de memoria: vida larga (algunas toda la vida del individuo)

Linfocitos B

 Generado en médula ósea (mamíferos), Bursa de Fabricio (aves)

 Reconocen al antígeno por medio de Ig de membrana (aprox. 150.000 moléculas de IgM, clases
M y D con la misma especificidad antigénica), que forman la parte del receptor de membrana
(BCR)
 Poseen otros marcadores de superficie MHC II, receptores del complemento: CD35 (CR1), CD21
(CR2), receptor para IgG exógena CD32 (FcgR II)
 Si hay contacto con antígeno, selección y proliferación clona en dos subpoblaciones: células
plasmáticas productoras de Ac y otra célula de memoria (pero con reconocimiento de Ag)
Células Plasmáticas

 Carecen de Ig de membrana y poseen más citoplasma que las B

 Gran síntesis de Ac. (RER) con idéntica especificidad antigénica que B original
 No circula por sangre ni por vasos linfáticos (en órganos linfoides secundarios y en zonas de
respuesta inmunológica)
 Son células en fase terminal, carecen de capacidad mitótica – apoptosis (viven pocos días)
 Linfocitos B (cebadas; proviene de tener mucho apetito) de memoria pueden vivir en reposo
(20 – 30 años), reexpuestas al antígeno, respuesta inmunitaria rápida, intensa y mayor afinidad

Linfocitos T

 Diferenciación temprana en Timo – regresión y diferenciación posterior en piel y mucosa

intestinal
 Posee receptor de membrana TCR, solo interactúa con antígeno asociado no covalente al
complejo CD3
 Reconocimiento del antígeno por TCR, solo interactúa con Ag presentado en superficie de
células asociado a moléculas de MHC (esto es una diferencia con el BCR)
 Existen 2 tipos de TCR: TCR (delta-gamma: 5-10%) y el TCR2 (alfa-beta unido S-S: 90-95%
células T)
 TCR1: no son circulantes, localizadas en epitelios (intestinos): reconocimiento de ciertos
patógenos que ingresan vía mucosa
 TCR2 se subdivide a su vez en 2 tipos:
1. TCR2CD4+: funcionan como células cooperadoras (Th), reconocen el Ag expuesto por el
MHC II propio de células presentadoras de antígenos (CPA): se activan y proliferan
clonalmente, liberan citoquinas para activar otras células (T, B, macrófagos, etc.)
2. TCR2CD8+: funcionan como células citotóxicas (Tc), reconocen el Ag expuesto en moléculas
MHC I, de células propias del huésped, infectadas con un virus o neoplásicas, que en
conjunto con la acción de citoquinas específicas, se activan, proliferan clonalmene,
diferenciándose a linfocitos T citotóxicos, citolíticos.

Células Natural Killer

 Carecen de especificidad y memoria, maduración extratímica

 Sus marcadores distintivos son CD16 y/o CD56. Carecen de CD3
 En su mayoría, morfológicamente corresponden a LGG
 Poseen gránulos azurófilos densos con membranas, mitocondrias y ribosomas libres, poro RER,
gran aparato de Golgi
 Existen 2 tipos de funciones: citotóxica y regulación de la respuesta inmune (a través de
citoquinas). Inducen apoptosis a células infectadas o células tumorales (menor expresión en
superficie MHC I)
 NK es activada por IFN-γ (interferón gamma) e Il-2 (interleukina-2) generándose una célula LAK
(lymphokine activated killer cell)
 *El interferón y la interleukina son citoquinas (proteínas/mensajeras)
04/05/10

Células mieloides:

1. Fagocitos: PMN y Monocito – Macrófago

2. Células Dendríticas
3. Eosinófilos
4. Basófilos
5. Mastocitos o células cebadas

PMN Neutrófilos:

 95% de los granulocitos – cientos de millones al día

 Núcleo multilobulado (2-5 lóbulos), gránulos en citoplasma: azurófilos (inmaduros) contienen
hidrolasas ácidas proteasas, mieloperoxidasas y lisozima / secundarios (específicos) que
contienen lactoferrina, cofactores NADPH oxidasa
 Después de salir de la médula espinosa, circulan de 7-10 horas, luego pasan a tejidos, donde
mueren a los 2-3 días
 Los circulantes son los primeros fagocitos atraídos por quimiotaxis al foco de infección
 Ingieren los microorganismos, quedando en fagosomas luego se unen a lisosomas
conformando el fagolisosoma: encargado de destruir al agente
 Pueden ser activadas por IC en liberación de sustancias desde sus gránulos e inducen acción
citotóxica (hipersensibilidad tipo II)

*Neutrófilos en banda: precursores de PMN neutrofilo; médula las manda cuando no alcanza a
producir toda la demanda
*Piogénico: productor de pus ---> Detritos celulares + PMN neutrófilos muertos = Pus

Fagocitos Mononucleares: Monocitos:

Características:
 Vida más larga (semanas a meses), con abundante RER y gran cantidad de mitocondrias y
enzimas
 Destruyen viruses, bacterias, protozoos intracelulares
 Pertenecen al sistema inmune innato (fagocitosis y producción de citoquinas) pero participan
activamente en el sistema adaptativo

 10-18μ diámetro, núcleo en forma de herradura

 Citoplasma con gránulos azurófilos: que contienen peroxidasas e hidrolasas ácidas para la
destrucción del patógeno, Golgi bien desarrollado
 Adherencia e ingestión a través de receptores especializados (ciertos carbohidratos de la pared
bacteriana, o a IgG y el complemento que recubren al patógeno)
 Aprox. 8 horas de haber abandonado la médula, migran a los tejidos – macrófagos
 Célula circulante
Macrófago:

1. En tejidos:
 Kuppfer: sinusoides hepáticos
 Células mesangiales en glomérulos renales
 Macrófagos alveolares en pulmón
 Macrófagos de serosas (peritoneo)
 Células de microglía en cerebro
 Osteoclastos en huesos
 Sinoviocitos A en articulaciones
 Histiocitos en tejido conectivo
2. Libres:
 Estratégicamente ubicados en órganos linfoides secundarios: macrófagos de sinusoides
esplénicos (bazo) y senos medulares (ganglios linfáticos)

Mecanismos de Destrucción – O2 Dependiente:

Glucosa + NADP+ Pentosa

G6P deshidrogenasa + NADPH

NADPH + O2 NADP+

Citocromo b558 + O2
Activación

2O2 + 2H+
H2O2 + O2
Superóxido dismutasa

2O2 + H2O2 OH + OH + O2

 Los PMN neutrófilos producen H2O2 para destruir Ag

 Radicales libres de oxigenos de la H2O2 son tóxicos para las células
 H2O2 + Cl-
OCl- + H2O
Mieloperoxidasa

OCl- + H2O O2 + Cl- + H2O

Inactivación
2O2 + 2H
H2O2 + O2
Superóxido dismutasa

2H2O2
H2O + O2
Catalasa

 Mieloperoxidasa cataliza reacción entre peróxido y cloro para formar un aluro, muy tóxico
celularmente
 Se inactiva por el peligro de si la célula muere y el peróxido se libera al medio y mata el tejido
propio

Mecanismos de Destrucción – NO:

 Óxido nítrico (NO) la producen las células endoteliales como sustancia vasodilatadora

NO sintetasa ---> O2 + L-Arginina → NO + Citrulina

cofactor: tetrahidrobiopterina

 Esto la estimula el FNT-α e interferón gamma

 El linfocito Th produce el interferón gamma y el FNT-α lo produce el mismo macrófago

Rol del Fagocito en Respuesta Inmune Especifica:

1. Como CPA: péptidos Ag se asocian con CMH II, y en la superficie son reconocidos por linfocitos
Th, e induce su activación
2. Macrófagos activados por linfocitos Th: aumenta capacidad fagocítica y destructiva: celula
efectora, en especial sobre cuerpos opsonizados (IgG's – complemento)

*Participa en reconocimiento, presentación y fase efectora

*Si bien el macrófago es una célula del sistema innato, puede ser considerada una célula efectora
del sistema inmune adaptativo
Células Dendríticas:

1. Células Dendriticas Interdigitantes:

 Línea mieloide, presentes en intersticio de la mayor parte de los órganos: corazón, pulmón,
riñón, tracto GI
 Prototipo: células de Langerhans de piel, rica en CMH II; en contacto con Ag migra por vasos
linfáticos eferentes a paracorteza de ganglios regionales, se convierten en CD interdigitantes,
alli presentan el Ag a linfocito Th
 Éstas células son las más potentes inductoras de respesta inmune relacionada con CMH II
2. Células Dendriticas Foliculares:
 No derivan de la médula ósea (no se relaciona con la interdigitante)
 Gran cantidad de receptores para complemento
 Presentes en folículos secundarios de áreas ricas en células B de los ganglios y bazo, y en
folículos linfoides de mucosa
 No tienen moléculas CMH II en su superficie, pero presentan gran cantidad de receptores para
FcgR
 Parece que tienen rol en el desarrollo de células B

Eosinófilos:

 Granulocito, PMN, en sangre y tejidos (1-3% de los leucocitos)

 Poseen núcleo bilobulado, abundantes gránulos de contenido básico (se tiñen bien con
colorantes ácidos) rodeados de membrana con cristaloide en su interior
 Migran desde la sangre a los tejidos por acción quimiotáctica
 Acción fagocítica mínima, mayor rol corresponde a defensa inespecífica frente a grandes
parásitos (ej. Helmintos: se unen a las larvas recubiertas por IgE o IgG y luego se desgranulan,
vierten la toxina (proteína básica) y enzimas que controlan la respuesta inflamatoria, hidrolizan
factores anafilacticos liberados por mastocitos
 Puede actuar como célula K dadas las condiciones (presencia de Ig) ya que tiene función
citotóxica y receptores de la región Fc para Ig's
 También en sus gránulos contienen histaminasa regulando la inflamación
 Alto n° en casos de parasitismos y alergias; complejo granuloma eosinofílico (felinos)

Basófilos y Mastocitos:

 Nucleo bi o multilobulado (basófilo) y redondeado (mastocito)

 Poseen abundantes y densos gránulos azul-violeta
 Carecen de función fagocítica (< 1% de leucocitos)
 Basófilos son circulantes y mastocitos están en los tejidos
 Ambos poseen abundantes receptores FcrRI (fracción cristalizable IgE)
 Papel preponderante en la hipersensibilidad tipo I o inmediata (Ag – IgE en la superficie de la
célula, liberan sustancias vasoactivas como la histamina, responsable de los síntomas en
alergias
 Función natural: protección frente a parásitos multicelulares
10/05/10

Sangre y Transfusiones en Caninos

Sangre:

 Tejido Líquido
 Plasma y elementos figurados
 Función: transporte, regulación de la temperatura, regulación de sales y electrolitos
 Elementos figurados: trombocitos, eritrocitos, leucocitos

Compatibilidad Sanguínea:

 Aloanticuerpos

Grupos Sanguíneos:

 DEA: dog erythrocite antigen

 Se han tipificado 8 de 15 antígenos de membrana en la sangre

DEA1 (A):

 Más antigénico
 Si no posee ningúno de la 3 antígenos es A-
 A- se considera un donador universal

Bazo: pulpa roja ---> hemocaterésis

Volumen sanguíneo: volemia

Anemia: Disminución de hemoglobina, eritrocitos, y la baja cantidad de O2 en sangre para
transporte de tejidos

VCA: recuento eritrocitario en una muestra sanguínea

Cross Match: No debe tener muestras de aglutinación en una compatibilidad

11/05/10

Complemento:

 Descubierto por Bordet en 1895

 Representan actividad lítica en suero fresco
 Su actividad lítica se destruye cuando se calienta a 56° por 30’’
 Proteínas ---> Enzimas ---> Zimógenos

Funciones:

 Benéficos:
o Opsonización (fagocitosis)
o Atracción y activación fagocítica
o Lisis de bacteria y de células infectadas
o Regulación de la respuesta inmune humoral innata
o Remoción de complejos inmunes (Ag-Ac)
o Remoción de células apoptósicas
 Deletéreas:
o Inflamación [cuando es crónica], anafilaxia (reacción alérgica sistémica)

Proteínas del sistema del Complemento (nomenclatura)

 C1(qrs), C2, C3, C4, C4, C5, C6, C7, C8, C9

 Factores B, D, H, I, properdina (P)
 Lectina que liga manosa (MBL), MBL asociado a serina proteases (MASP-1, MASP-2)
 Inhibidor de C1 (C1-Inh, serpina), proteína fijadorea de C4 (C4-BP) factor acelerador de
la degradación (DAF o CD55)
 Receptores del C (CR1-CD35; CR2-CD21), proteína S

Productos Activados de Proteínas del Complemento

 Componentes activados siguen a menudo una sustancia número-alfabética (C1qrs)

 Cuando se rompe enzimáticamente, la porción más grande se une al complejo de
activación, y el péptido más pequeño se libera al microambiente
 La letra “b” usualmente se agrega al péptido más grande que se une a la membrana y
“a” se designa al péptido más pequeño (ej. C3b/C3a, C4b/C4a, C5b/C5a) EXCEPTO C2
(el más grande, ligado a membrana es C2a: el más pequeño es C2b)
Activación del Complemento

Vía Clásica Vía de Lectinas Vía Alternativa

Dependiente
Independiente
de Anticuerpo
de Anticuerpo

Activación de C3 y Generación
de C5 convertasa

Activación de C5

Complejo de Ataque a
la membrana

Generación de C3 convertasa en Vía Clásica:

 IgG y IgM activan tradicionalmente el complemento

 Parátopos de inmunoglobulinas con C1qrs para su activación
 Para que se active el complemento se requiere de un agente extraño
 C1s activa (corta, escinde y separa la molecula) a la siguiente molécula (C4)
 Luego, C1s activa también a C2
 Quedan en el microambiente el C4a y C2b; mientras que C4b y el C2a y se unen a la
membrana
 C4b2a (conocido como cabeza) es C3 convertasa de la vía clásica
 Una vez que se activa C3, se forma el C4b2a3b o C5 convertasa, lo cual conduce a la
formación del CAM
Componentes de la Vía de Lectinas (unión a manosa):

 MBL (manose binding lectine) interactúa con azúcares de membrana de bacteria,

activándose
 Llega la MASP-1 y MASP-2 uniéndose la MBL
 Este complejo se parece mucho estructuralmente al C1qrs
 Éste activa al C4 (C4b a la membrana, C4a al microambiente)y luego al C2 (C2a a la
membrana, C2b al microambiente)
 C4b2a es C3 convertasa; conduce a la formación de C5 convertasa

Componentes de la Vía Alternativa:

 C3, B, P, D, H2O…

Activación Espontánea de C3:

 C3 se une con H2O ---> por hidrólisis obtenemos C3i como molécula partidora
 C3i se une con factor B y en ese mismo momento factor D corta a B
 Se forma el complejo C3iBb ---> C3 convertasa inicial (partidora)
 C3iBb tiene una vida muy corta ---> se une a C3 y se sigue la cadena

Circuito de Amplificación:

 Si es generación espontánea
 De una mínima cantidad se puede generar constantemente en pequeñas cantidades
 Anafilotoxinas: C3a, C4b, C2b patentes estimuladores de monocitos, músculos,
desencadenan reacción anafiláctico

*IC: inmunocomplejo (Ac-Ag)

*CAM o MAC: complejo de ataque a membrana

*DAF: factor acelerador de la degradación

Control de Activación Espontánea de C3 vía DAF:

 DAF impide la unión del factor B a C3b

 CR1 es receptor de C3b, se fija en la membrana (linfocitos B; células dendríticas
foliculares)
 DAF disocia al factor Bb unido al C3b
Control de Activación de C3 vía CR1:

 Factor H hace sinergia con DAF para poder disociar a la C3 convertasa

Estabilización de C3b y Activación de C5:

 C3b encuentra un activador (protector) de membrana

 C3b se une a B y luego D corta a B y se forma C3 convertasa
 Una molécula estable para proteger, estabilizar: P
 C3BBbC3b ---> C5 convertasa estable en la vía alternativa

C5 convertasa:

 C5 convertasa para la vía clásica y la vía de lectinas ---> C4b2a3b

 C5 convertasa para la vía alternativa ---> C3bBbC3b

Vía Lítica:

 Generación de C5 convertasa conduce a la formación del complejo de ataque a

membrana (CAM)
 C5,
 C6, C7, C8, C9

Activación C5, Ensamblaje CAM, Inserción del CAM a membrana:

 C5 convertasa vía clásica y/o lectina

 C5b de acopla a C6 y se unen a C7
 El complejo C5b67 se transforma a una molécula hidrofóbica para poder pegarse a la
membrana del agente extraño
 C8 se une (inserción de complejo de ataque a membrana en una membrana celular
para ayudar en acople a la membrana
 C9 son monómeros que se van polimerizando, produciendo poros, causando cambios
osmóticos desfavorables en la célula invasora

*Se puede proteger de los CAM al endocitar a las perforinas

17/05/10

Diferencias Inmunológicas entre Cerdos y Aves

Cerdos Aves

 Ganglios  Médula ósea

 Bazo  Bazo
 T. Linfoide  T. Linfoide
o placas de peyer  BALT
o tonsilas  GALT (placas de peyer y tonsilas
cecales)

Linfocito Null:

 Sin marcadores de superficie

 Sin función
 LGG
 Cerdo

Heterófilos:

 Reemplazo neutrófilos en aves

 Restringe crecimiento bacteriano

Igs:

 Aves:
o IgY (IgG)
o IgM
o IgA
 Cerdos:
o IgG
o IgM
o IgD
o IgA
o IgE

*IgY tiene un dominio extra en relación a IgG, reconoce otras moléculas

18/05/10

Vía Lítica – Cam

 Inserción del complejo de ataque a membrana celular

 Desequilibrio osmótico a crear un poro por el cual sale líquido celular

Rompimiento C1qrs:

 C1 inhibidor escinde a C1qrs en C1r y C1s

 Deficiencia inhibidor C1 ---> angioedema hederitaria

C2b:

 Proquinina que da origen a la bradiquinina

 Potente mediador inflamatorio que produce vasodilatación y aumento de
permeabilidad

C5a:

 Quimiotácticamente muy fuerte

 Activación neutrófilos, monocitos, macrófagos ---> liberan FNT-α
 Adhesión neutrófilos
 Anafilotoxinas
 Mastocitos
o desgranulan sustancias vasoactivas:
 histamina, heparina, serotonina, bradiquinina; lo que produce:
 aumento de permeabilidad vascular y estimulan musculatura
lisa, un ejemplo de ello:
o asma ---> contracción de bronquios por ésta causa

 C3b ---> formación convertasas ---> opsonina

 C4a: hermana menor
 C3a: hermana del medio Hacen lo mismo, pero en distintos grados
 C5a: hermana mayor
 C5a67: quimiotaxis, adhesión a otras membranas ---> proteína S (vitronectina) como
reguladora
 Anticuerpos Monoclonales:

 Misma clase, altamente específica, pero no absoluta

 Detección de una molécula dentro de una mucho más grande, por parte de un
anticuerpo
 1 antígeno – 1 anticuerpo

Hibridomas – año 1975

Mieloma Linfocito B

Inmortalidad – Producción de Ac –
capacidad para niveles bajos
niveles altos
Hibridoma

Producción de anticuerpos / Inmortal–

niveles altos

 Mieloma: plasmocitoma (célula tumoral de célula plasmática)

 Cultivo de células secretoras de Ac. monoclonales con especificidad predefinida,
pudiendo mantenerse indefinidamente, y en grandes cantidades

HAT (Hipoxantina, Aminopterina, Timidina) ---> precursores de ácidos nucleicos

 Estimula crecimiento de linfocitos B, pero no del tumor

25/05/10

Cooperación Celular:

Interacción LT y LB

IL-2 ---> inductor de la proliferación de la LB y LT

IL-4 ---> inductor de activación de la proliferación de LB

 La interacción hace que las células B inicien el ciclo celular, desarrollo de los centros
germinales y de las respuestas de anticuerpos frente a antígenos

Respuesta de los LB al Ag.

 El desarrollo de la respuesta inmune humoral va a depender de:

o el tipo de Ag: antígeno T-dependiente o antígeno T-independiente
o el tipo de célula presentadora de antígeno
o la exposición previa o no al mismo antígeno

Mecanismo de Activación

Unión del Ag. con BCR con otras moléculas accesorias y correceptores llevarán a
una estimulación de tirosina quinasas que bajo procedimientos de fosforilación activan la
fosfolipasa C que generarán compuestos intermediarios para activar a la proteína quinasa
C para que junto a la participación de otras quinasas se traducirán en la activación de los
factores de transcripción nucleares.

Interacción Ag. T-dependiente

La activación del LB requiere de dos señales de activación proporcionados por el

LTh: reconocimiento ligado y moléculas coestimuladoras (CD154 y CD28)

Activación del LB por parte del LTh

 CD40 (reposo) + CD154 (activadas) = señal necesaria para inicio celular de LB y generar
receptores de IL-2, IL-4 e IL-5
 CD28 + CD80/CD86 ausentes en células en reposo, solo activadas = llevan a la
expresión máxima de CD154 y secreción máxima de IL-2

Señales de Activación de LB

1. Reconocimiento entre las dos células a través del Ag. ligado al CMH II (reconocimiento
ligado)
2. Moléculas coestimuladoras
Interacción Ag. T-independiente

Fases de la Respuesta al Ag.

 Respuesta primaria: es la que se desarrolla tras la exposición por primera vez al

antígeno
 Respuesta secundaria: es la que se desarrolla tras exposiciones sucesivas al mismo
antígeno

*La respuesta secundaria dependerá de la naturaleza del Ag del huésped

Conmutación de Isotipos

Está realizado el reordenamiento génico de ADN bajo la presencia de CD40 y

citoquinas liberadas por la LTh, siendo la más importante la IL-2

Centros Germinales

 Es el lugar donde ocurren los eventos más importantes de los LB y corresponden a los
centros linfoides secundarios
 Ocurren los fenómenos de proliferación celular y la selección positiva y negativa de los
LB
 Ocurre durante los primeros seis días de iniciado el contacto Ag-LT

Complejo Mayor de Histocompatibilidad (MHC)

Introducción

 Grupo de genes presentes en todos los mamíferos que codifican glicoproteínas

(células MHC), fundamentales en el reconocimiento intercelular y discriminación de lo
propio y lo ajeno
 Rol fundamental en el desarrollo de la respuesta inmune
 Genes MHC: se encuentran alineados en una región grande y contínua del genoma
 Existen ciertas diferencias en la organización de los genes en las diferentes especies,
sin embargo, en la mayoría se pueden apreciar 3 grandes zonas zonas que determinan
3 tipos de moléculas:
o genes de clase I (MHC I): glicoproteínas de membrana, células nucleadas,
linfocitos Tc
o genes de clase II (MHC II): glicoproteínas de membrana, CPAs, linfocitos Th
o genes de clase III (MHC III): proteínas plasmáticas relacionadas con el sistema
inmune (complemento, TNF y otras proteínas no relacionadas con la respuesta
inmune)

*Dominio: secuencia aminoacídica específica

MHC I

 3 dominios de cadena α, pleomórficos más 1 dominio β2 microglobulina, invariable

 Interacción entre α1 y α2 se produce un surco, el cual se une el péptido a ser
presentado
 Se presenta ante un LTc (CD8+)
 Cadena α tiene un tallo citoplasmático

MHC II

 2 cadenas (1 α y otra β)
 Ambas tienen tallo hidrofílico transmembrana
 2 dominios α y 2 dominios β
 Interacción entre α1 y β1 (dominios más distales de la membrana) dormán surco o
hendidura para la presentación
 Presentación es a LTh (CD4+)
 Presentación de péptidos antigénicos de mayor tamaño
 Ambas cadenas son codificadas por genes de MHC II, a diferencia de la MHC I que solo
su cadena α es codificada y la β2 la codifica otro gen
 Ambas cadenas en MHC II son variables, pleomórficas
 Puede presentar alta gama de antígenos

MHC III

 Complemento
 FNT

Procesamiento y Presentación de Antígeno

 Para el reconocimiento de una proteína extraña, debe ser degradada en péptidos

pequeños que luego forman complejos con moléculas de clase I y/o II --->
procesamiento
 Procesamiento y presentación del antígeno junto a una molécula clase I o II está
determinado por la ruta de penetración del antígeno en la célula
o antígeno endógeno ---> MHC I
o antígeno exógeno ---> MHC II

Restricción MHC

 Linfocitos T reconocen a los antígenos unidos a las células y asociados a moléculas

MHC
 Moléculas MHC de clase I y II actúan como sistemas orientadores de los linfocitos T
 Moléculas MHC restringen la especificidad del linfocito T, el que no reconoce a la
molécula MHC o al fragmento peptídico, sino solo al complejo MHC-péptido específico
Antígeno Endógeno

 Producido dentro de una célula autóloga

 Siempre están unidas a MHC I
 En el caso de un virus, se introduce en la célula, y altera su ADN, y a su vez los antígeno
de membrana
 Luego eso las anormalidades de las proteínas de membrana se detectan y la célula se
intenta destruir, sin embargo, si no logra autodestruirse, una célula NK podrá venir a
terminar el trabajo

Antígeno Exógeno

 Se internaliza desde el exterior

 Se produce la síntesis MHC II
 En algún momento (en el citoplasma) se unen
 Luego viaja hacia la membrana y se ancla
31/05/10

Mecanismos de Evasión de la Respuesta Inmune de la Influenza Aviar y la Gripe Porcina

Virus:

 sin vida independiente

 necesitan ADN de células ajenas
 cápside protéica protege genoma viral
 neuraminidasa y hemaglutinina

Influenza:

 A y B (8 segmentos) o C (7 segmentos)
 alta patogenicidad
 A es de mayor riesgo pandémico

Mecanismos de Evasión:

 NS1 proteínas
o inactiva genes para citoquinas, quimioquinas
o inhibición pkr
o previene transcripción del gen del IFN-β
 Inhibición nks ---> baja de citotoxicidad ---> aumento de unión de dos receptores
inhibidores a las células infectadas
 Variación antigénica, “drift”, acumulación de mutaciones
 Virus recombinantes, “shift”, mezcla de ARN en caso de contacto con otro animal, se
forma un nuevo virus:
o virus cerdos + virus aves + virus humanos = nueva cepa
1/06/10

 La parte final el Golgi, la proteína invariante sufre escindación por parte de enzimas
proteasas, quedando un “clip” taponando el surco de la molécula MHC (antígeno
exógeno)

Comparación MHC clase I y II

Característica MHC I (HLA) MHC II (HLA)

Genes A, B, C DR, DP, DQ
β2m Si No
Cadenas Alfa Alfa – Beta
Expresión Constitutiva APC; Inducida
Células T CD8+ Tc CD4+ Th
N° Péptidos 8 – 9 aa 12 – 20 aa
Procedencia Ag. Citosol Fagocitosis

MHC y enfermedad

 Algunas enfermedades se asocian a determinados alelos del MHC:

o procesan autoinmunes
o suceptibilidad a virus
o alteraciones neurológicas
o alergias
 Polimorfismo del MHC: amplía la varieda de antígenos que se pueden reconocer y la
protección frente a numerosos agentes infecciosos
o enfermedades afectan al polimorfismo del MHC

*Endogamia de guepardos; nuevos viruses atacan a leones

Hipersensibilidad

 Respuesta inmune adaptativa exagerada o inadecuada que puede resultar en un daño

al organismo (alergia, anafilaxis, atopía)
 Respuesta inmunitaria normalmente beneficiosa que llega a provocar reacciones
inflamatorias y lesiones tisulares con disfunción orgánica
 Provocada por diferentes antígenos (alergenos)
 Agentes con capacidad de provocar hipersensibilidad son diferentes en cada individuo
 No se manifiesta en la primera exposición al antígeno, sino que suele aparecer tras un
contacto posterior
 la hipersensibilidad se refiere a los procesos patológicos que se deban a interacciones
inmunitarias específicas, entre antígenos (endógenos y exógenos) y los anticuerpos
humorales o linfocitos sensibilizados
 Se describen 4 reacciones de HS (Coombs y Gell): tipos I, II, III, IV, de acuerdo al
mecanismo inmunológico involucrado
 En la práctica estas HS tienden a superponerse unas con otras
 HS tipos I, II y III: mediadas por anticuerpos (HS humoral)
 HS tipo IV: mediadas por linfocitos T y macrófagos (HS celular)

Hipersensibilidad tipo I

 Reacción alérgica que aparece inmediatamente después de una segunda exposición a

un alergeno
 Las reacciones características se producen como consecuencia de la estimulación
específica de los mastocitos sensibilizados con IgE
 Se caracteriza por la producción de anticuerpos IgE contra proteínas ajenas presentes
en el medio
 El término alergia fue definido por “Von Pirquet” como: una capacidad alterada del
organismopara reaccionar ante sustancias ajenas.”
 Ahora se define como: “enfermedad debido a una respuesta del sistema inmune a un
antígeno comúnmente inocuo.”
 El término atopía está ligado a este fenómeno
 Se define como una reacción inmunitaria de desarrollo rápido, que desencadena
algunos minutos después de la combinación de un antígenos con un anticuerpo ligado
a mastocitos y basófilos en el huésped, previamente sensibilizado

Mastocitos

 Procedentes de la méddula ósea

 Distribuida en los tejidos
 Se encuentran cerca de los vasos sanguíneos y en localizaciones subepiteliales, donde
tienen a producirse las reacciones locales tipo I
 Citoplasma con gránulos rodeados de membrana, contienen mediadores químicos
biológicamente activos
 Posee receptores de Fc de IgE

Basófilos

 No se encuentran habitualmente en tejidos

 Circulantes en sangre en baja cantidad
 Posee receptores Fc IgE
 Citoplasma granulado
 Son atraídos por focos inflamados
IgE

 Glucoproteína que contiene dos cadenas ligeras y dos pesadas

 Se encuentra presente en el suero y en los líquidos tisulares de todos los mamíferos
 Es dintetizada por los linfocitos B, previa a una estimulación de linfocitos T
 Posee receptores Fc, que pueden ser de alta o baja afinidad
 Los mastocitos y basófilos tienen receptores de alfa afinidad para IgE

Mediadores Primarios

 Liberados por la desgranulación del mastocito

 Aminas biógenas: histamina y adenosina
 Mediadores quimiotácticos
o enzimas: proteasas, hidrolasas ácidas
o proteoglicanos: heparina (anticoagulante fisiológico)

Mediadores Secundarios

 lipídicos
o leucotrienos
o prostaglandina D2 mediadores inflamatorios
o factor activador de plaquetas (FAP)
 Citoquinas

Regulación por Citoquinas

 Síntesis de IgE
 Crecimiento de Mastocitos
 Crecimiento y activación de eosinófilos
7/06/10

 A mayor sensibilidad, mayor liberación de histamina por parte de los mastocitos

 Mala perfusión de los tejidos por HS, es decir, shock anafiláctico
 Histamina también estimula la secreción de glándulas respiratorias y
broncoconstricción (en general, constricción del músculo liso)
 Al haber una baja de presión sanguínea rápida, gracias a la rápida extravasación por
histamina, se afecta mucho al tejido nervioso, pudiendo causar ceguera temporal o
desmayos

Fasas de la HS

 Respuesta inicial
o se manifiestan entre los 5 a 30 minutos después del contacto con el alérgeno
o actúa de inmediato el mastocito con sus gránulos de secreción
 Respuesta tardía
o reclutación de leucocitos por gránulos del mastocito
o el más importante el eosinófilo, por su gran cantidad de mediadores

Anafilaxis

 Reaccción sistémica o local mediada por IgE, que se produce en una persona
previamnte sensibilizada que recibe al antígeno nuevamente
 Sistémica: por administración de hormonas, enzimas y fármacos
 Aparece picor, ronchas, eritema cutáneo (enrojecimiento de la piel), contracción de
bronquiolos, insuficiencia respiratoria. Luego puede entrar en shock, incluso morir al
cabo de una hora
 Local: producida por alérgenos exógenos, como el polen, caspa de animales, polvo,
pescado, etc.
 Alergia atópica (predisposición genética) ---> alergia a muchos componentes por
contacto
 Urticaria
 Angioedema
 Rinitis alérgica o Fiebre del Heno
 Asma

Tratamiento

 Evitar el contacto con el alérgeno

 Inmunoterapia con el alérgeno o producir una hiposesibilización (desensibilización),
inyectando un extracto de alérgeno por vía subcutánea en dosis creciente
 Antihistaminicos ---> prevención o casos leves
8/06/10

Hipersensibilidad tipo II

 Citotoxicidad dependiente de anticuerpos, de clase IgG e IgM que se unen en forma

específica a determinadas células o tejidos
 Los anticuerpos dirigidos contra antígenos situados en superficies celulares o sobre
tejidos interaccionan con el complemento o con una serie de células efectoras y
provocan daño en la célula diana (célula blanco)
 Consecuencias de la activación del complemento
o fragmentos C3 y C5 atraen macrófagos y PMN y estimulan mastocitos y
basófilos
o activación vía clásica del complemento, depósito de C3b, C3bi sobre la
membrana celular de la célula diana
o tras activación vía clásica y vía lítica del complemento se forma complejo de
ataque a la membrana C5b9
o células efectoras se unen al complejo Ag-Ac mediante sus receptores de Fc o al
complemento
o Adcc ---> antibody dependant cell citotoxicity

Hipersensibilidad tipo III

 La interacción de antígenos con su correspondiente anticuerpo circulante conduce a la

formación de complejos Ag-Ac
 Los inmunocomplejos circulantes se depositan en los tejidos
 Se desencadenan diversos procesos inflamatorios
o interacción con el sistema del complemento (formación de C3a y C5a)
o estimulación a los macrófagos (liberación de citoquinas)
o interacción directa de los inmunocomplejos con basófilos y plaquetas
(mediante receptores Fc) e inducción a la liberación de aminas vasoactivas
 Los inmunocomplejos circulantes se depositan entre las membranas endoteliales y
membrana basal
 Los neutrófilos son llamados por el complemento a la pared del vaso sanguíneo, pero
como no puede fagocitarlo, solo libera su batería de enzimas, dañando los tejidos

Etapa 1

 Se forma una gran cantidad de complejos Ag-Ac en sangre y no pueden ser

completamente eliminados por los macrófagos

*Un ejemplo es de las enfermedades del glomérulo renal, el cual es un manojo de

capilares, y los inmunocomplejos se depositan allí por el proceso de filtración que allí
ocurre.
Etapa 2

 Los complejos Ag-Ac se depositan en el lecho capilar entre las células endoteliales y la
membrana basal

Etapa 3

 Los complejos Ag-Ac activan el complemento por la vía clásica produciendo

vasodilatación

Etapa 4

 Las proteínas del complemento y los complejos antígeno-anticuerpo atraen leucocitos

al sitio de lesión

C4a, C3a, C5a C3b

Binds to complement
Peptide receptors on phagocytes
mediators of
inflamation,
phagocyte
recruitment Opsonization of pathogens

Removal of inmune
complexes

Etapa 5

 Los leucocitos descargan sus mediadores de lisis y promuevan masivamente en

inflamación local
 Esto puede producir daño de tejido y hemorragia

Hipersensibilidad tipo IV

 3 tipos
o por contacto
o de tipo tuberculínico
o granulomatosa
 Las dos primeras se presentan dentro de las primeras 72 horas del desafío antigénico
 La reacción granulomatosa se desarrolla en un período de 21 a 28 días
 Puede haber más de un tipo de reacción de un antígeno y éstos pueden superponerse
 Los linfocitos T causan un daño directo a reacciones DTH o atacando células blanco
 Sus reacciones se deben a células Th1 efectores Ag-Ac
 Linfocitos T, CD8+ y CD4+ activan macrófagos (IFN-gamma) e inducen inflamación
(TNF)
 Los CD8+ citolíticos matan directamente a las células blanco (MHC I)
 El daño tisular es producido por macrófagos activados (hidrolasas, radicales de
oxígeno, óxido nítrico, citoquinas proinflamatorias)
 Las células endoteliales vasculares de las lesiones pueden expresar MHC II y moléculas
de adhesión elevadas
 Las reacciones crónicas producen fibrosis por incremento de citoquinas y factores de
crecimiento

*Se estimulan los fibroblastos, que reemplazan tejido funcional por colágeno del tejido
conectivo (fibrosis)

Hipersensibilidad por Contacto

 Las células de Langerhans internalizan y procesan el hapteno y se lo presentan a

células T-antígeno dependientes
 Las citoquinas producidas por células inmunocompetentes (queratinocitos, células de
Langerhans, células T) reclutan células T no-antígeno específicas y macrófagos

Hipersensibilidad a Tuberculina

 El desafío intradérmico con tuberculina, activa células T antígeno-específicas, que

secretan TNF-α y linfotoxínas (TNF-β); los que actúan sobre las células endoteliales
induciendo secuencialmente, moléculas de adhesión: E-selectiva, ICAM1, VCAM1, los
que reclutan leucocitos al sitio de reacción
 Intervienen inicialmente neutrófilos a las 4 horas, monocitos a las 12 horas y células T

Reacciones Granulomatosas

 Hay un balance entre inmunidad protectora y daño a tejido tisular mediado por células
T dirigidas hacia antígeno insoluble
 Un ejemplo es la lepra tuberculoide
 La persistencia del antígeno conduce a la diferenciación de macrófagos a células
epiteloides y a fusión para formar células gigantes (células de Langans)
 La reacción granulomatosa lesiona tejidos

*Aparato bucal de garrapatas que queda en la piel es un antígeno que causa una reacción
granulomatosa

Técnicas Inmunológicas

 La vacuna del clostridium (tetano) está hecha de un suero hiperinmune de equino

 Este suero hiperinmune tiene anticuerpos policlonales
Interacción Ag-Ac

 Interacción reversible a través de enlaces no-covalentes

 “In vitro”
 Interacción primaria: no visualizable (se puede marcar el Ag o Ac mediante unión
covalente, moléculas como fluorocromo, isótopos radioactivos o enzimas:
inmunofluorescencia, RIA, ELISA)
 Interacción secundaria: aparición de fenómeno visible como aglutinación o
precipitación (para que esto ocurra es indispensable determinadas concentraciones y
características de los Ag-Ac

Inmunodifusión Simple

 Permite identificar (cualitativamente) clases de anticuerpos o antígenos solubles

presentes en el suero (muestras biológicas)
 Matriz semisólida de Agar (algas de Agar agar), en donde se encuentra disuelto el
anticuerpo específico se adiciona en una celdilla central de Ag y en las celdillas que
rodean diferentes muestras biológicas a estudiar
 Método simple y económico

Inmunodifución Radial

 Permite cuantificar anticuerpos (clases) o antígenos solubles presentes en el suero

(muestras biológicas)
 Matriz semisólida de Agar, en donde se encuentra disuelto el anticuerpo específico
 La muestra biológica se agrega en celdillas y a medida que el Ag difunde en forma
radial se alcanza la relación Ag-Ac que permite la precipitación visible
 Curva de calibración (muestra patrones de concentración conocida)
 R del precipitado es proporcional a la concentración de Ag
 Test simple y económico

Inmunoelectroforésis

 Técnica cualitativa que permite la identificación de diferentes componentes protéicos

presentes en distintas muestras biológicas (suero, orina, etc.) a través de arcos de
precipitación
 Gel agarosa o de poliacrilamida, acetato de celulosa
 Etapas: 1° separación electroforética; 2° precipitación de proteínas con Acs específicos
15/06/10

Inmunofluorescencia

 Permite detectar Ag tisulares, celulares nucleares, caracterizar poblaciones celulares

(citometría de flujo), etc.
 Puede ser directa o indirecta
 Requiere equipamiento sofisticado (microscópio epifluorescencia, equipo lector
computacional (citómetro: células en suspensión))
 Similitud técnica con la inmunoperoxidasa (microscopio óptico)
 Técnica directa: 1Ag-1Ac mareado con fluorcromo
 Técnica indirecta: 2Ac (primero es AntiAg, no está marcado; segundo es AntiAc,
marcado) 1Ag ---> les permite amplificar la reacción, aumenta la sensibilidad

Inmunoperoxidasa

 Más barata
 Más simple, colorante de enzimas

Inmunoanálisis: ELISA

 Utiliza anticuerpos marcados por una enzima (ej. peroxidasa) para visualizar reacción
Ag-Ac
 Se usa tanto para la determinación de Ags como de Acs
 La reacción se puede cuantificar mediante la lectura de D.O. a través de un
espectrofotómetro
 Método muy sensible y económico
 Permite realizar gran cantidad de determinaciones en corto tiempo
 Los antígenos se pueden determinar mediante pruebas de tipo “sándwich” o
competitivas

Western Blot

 Permite identificar Ag-Ac – muy sensible

Etapas:

 Separación electroforética de proteínas en geles de poliacrilamida

 Transferencia (blotting) de dichas proteínas a un soporte sólido (membrana de
nitrocelulosa)
 Detección de una o más bandas identificadas por Acs específicas
 Migración depende fundamentalmente de PM (peso molecular) de sus péptidos
 Prueba comúnmente usada como confirmación, corroboración para pacientes VIH
ELISA+
Autoinmunidad

 Proceso patológico que se genera porque el sistema inmune reacción frente a los Ags
propios (autoantígenos).
 Se alteran los mecanismos responsables de la autotolerancia
 Mecanismos efectores:
o anticuerpos contra Ag propios
o células efectoras y sus productos

Clasificación General

 Local: afectan a un órgano o tejido específico (endocrino, muscular, etc)

 Sistémico: afectan a varios órganos o tejidos (Ac. contra diferentes componentes
tisulares, nativos o alterados: ADN, colágeno, células sanguíneas, etc.)

Predisposición Genética

 Modelos animales y observaciones en humanos sugieren que existe predisposición

genética para la manifestación de enfermedades autoinmunes
 Asociación entre ciertos antígenos HLA y enfermedades autoinmunes: HLA: B8, B27,
DR2, DR3, DR4, DR5, etc.

Etiología

 La etiología exacta patologías. AI no se conoce

Teorías

 Exposición Ag ocultos: AutoAg de desarrollo tardío (no expuestos durante

diferenciación de células T) o confinaados a tejidos protegidos (testículo, cerebro, etc.)
pueden estimular respuesta inmune y autoinmunidad al ser liberadas por acción
injuria traumática o quirúrgica (ej. por cambios moleculares: epítopos nuevos en
proteínas de membrana normales ---> hepatitis crónica canina, factor reumatoide (Ac
antiFc Ig: LES, artritis reumatoídea, etc)
 Escape clones autorreactivos: selección negativa de linfocitos a nivel del Timo puede
no reconocer todos los Ag propios o algunos no haber sido apropiadamente
procesados y/o presentados
 Reacción cruzada Ags: (mimetismo molecular) Ags de ciertos patógenos poseen
determinantes que presentan reacción cruzada con autoAgs y la respuesta inmune
contra dichos determinantes puede conducir a células efectoras o Ac contra Ag
tisulares (propias)

Mecanismo Daño Tisular

 Autoanticuerpos
 Linfocitos T autorreactivos
 Inmunocomplejos
Tipo de Reacción: Reacciones de HS

HS II

 Anemia hemolítica autoinmunitaria (citotoxicidad)

 Púrpura trombocitopénica (destrucción trombocitos)
 Células tiroides: Tiroiditis (inflamación, gran infiltración celular)
 Receptor de acetilcolina: Miastenia gravis
 Receptor de insulina: Diabetes

HS III

 Ac. + AutoAg
 SLE: glomerulonefritis membranoproliferativa
 Artitis reumatoídea: Ac. contra estructuras articulares: membrana sinovial, cartílago,
etc.

HS IV

 Provocada por Tc
o esclerosis múltiple (humana)
o diabetes mellitus insulinodependiente
 Destrucción del páncreas

Hipotiroidismo (Hashimoto)

 Gran infiltración leucocitaria – linfoide

 Tejido ya no funcional