Syaiful Bahri dan Rinawati…Senyawa Terpenoid Hasil Isolasi

SENYAWA TERPENOID HASIL ISOLASI DARI DAUN LADA

(Piper nigrum, Linn) DAN UJI BIOAKTIVITASNYA
TERHADAP HAMA Callosobruncus chinensis
Syaiful Bahri dan Rinawati

Jurusan Kimia FMIPA Universitas Lampung

Jl. S. Brojonegoro No.1 Bandar Lampung 35145

E-mail: muzaki@maiser.unila.ac.id

Diterima 8 Juli 2005, perbaikan 25 November 2005, disetujui untuk diterbitkan 2 Desember 2005

ABSTRACT
The isolation of terpenoid from pepper leaves (Piper nigrum, Linn) has successfully been performed. The
compound (3 mg) was isolated by the use of 100 % chloroform eluen with the RF of 0.46 as white crystal.
The compound shows activity against Callosobruncus chinensis. Based on the infrared and the mass
spectrometry spectra, the compound obtained is classified as sesquiterpen containing the main functional
groups of –OH and C=C, with the relative molecular mass of 220 m/e. The bioactivity test of this compound
against Callosobruncus chinensis on mung bean leaves showed that the compound causing not only to the
death of the plant diseases but also reducing the feeding activity with the contact time of 72 hours.

Keywords: pepper leaves, terpenoid, bioactivity, Callosobruncus chinensis

1. PENDAHULUAN insektisida botani yang memiliki sifat mudah

Dewasa ini ketergantungan petani akan
penggunaan insektisida sintetik untuk
menanggulangi hama cukup tinggi bila
dibandingkan dengan insektisida botani. Padahal
penggunaan insektisida tersebut umumnya dapat
berpengaruh buruk bagi lingkungan dan dapat
mengakibatkan hama menjadi resisten terhadap
insektisida tersebut, akhir-akhir inipun harga
pestisida sintetik relatif mahal dan terkadang sulit
untuk memperolehnya. Untuk itu perlu dicari
tumbuh-tumbuhan yang memiliki khasiat
insektisida khususnya yang mudah diperoleh dan
dapat diramu sebagai sediaan insektisida1 untuk
pengendalian hama gudang yang efektif dan tidak
berpengaruh buruk terhadap manusia dan
lingkungannya2.
Lada merupakan salah satu tanaman yang
mengandung senyawa terpenoid sekitar 1 – 4 %.
Penggunaan lada sebagai sumber potensial
insektisida botani pernah dilaporkan oleh Arnason
(1993) dan Isman (1995)1 sedangkan daun lada
dilaporkan pula dapat digunakan sebagai
insektisida terhadap ngengat dalam lemari
pakaian3. Daya insektisidal yang terdapat dalam
buah lada cukup efektif untuk melindungi produk
pertanian misalnya digunakan sebagai pencegah
daya makan (antifeedant) terhadap hama gudang1.
Pengendalian hama gudang (Callosobruncus
chinensis) dengan menggunakan daun lada
merupakan salah satu contoh penggunaan
terurai (biodegradable)4 di alam sehingga tidak
mencemari lingkungan dan relatif aman bagi
manusia karena residunya mudah hilang.
Insektisida tersebut juga bersifat pukul dan lari,
yaitu apabila diaplikasikan akan membunuh hama
pada waktu itu setelah hamanya terbunuh maka
residunya akan cepat menghilang di alam5.
Hingga saat ini informasi tentang pemanfaatan
daun lada sebagai sumber insektisida botani masih
sangat terbatas, sehingga perlu diadakan penelitian
tentang pemanfaatan daun lada tersebut.
Penelitian ini bertujuan mengisolasi dan meng-
identifikasi senyawa terpenoid pada daun lada dan
menguji sifat bioaktivitas terhadap hama gudang
Callosobruncus chinensis pada biji kacang hijau.
2. METODE PENELITIAN
2.1. Persiapan sampel
Sampel daun lada diambil dari Way Kanan. Daun
lada yang diperoleh kemudian dibersihkan dari
kotoran yang menempel dan kemudian
dikeringkan pada suhu kamar. Setelah kering
sampel daun lada digiling untuk mendapatkan
ukuran yang lebih kecil.
2.2. Proses isolasi dan pemurnian
Sampel kering seberat 5 kg dimasukkan dalam
wadah dan direndam dengan menggunakan pelarut

158  2005 FMIPA Universitas Lampung

J. Sains Tek., Desember 2005, Vol. 11, No. 3
aseton selama 2 x 24 jam. Hasil perendaman
kemudian disaring untuk mendapatkan filtrat.
Filtrat tersebut lalu dipekatkan dengan penguap
putar vakum hingga diperoleh ekstrak kental.
Ekstrak kental tersebut kemudian dipartisi dengan
menggunakan pelarut n-heksana : H20 (1 : 1).
Fasa n-heksana diambil dan dipekatkan dengan
penguap putar vakum. Kemudian dilakukan uji
KLT dengan eluen n-heksana dan kloroform, plat
KLT tersebut dilihat pada lampu UV kemudian
disemprot dengan pereaksi Liebermann-Burchad
untuk mengetahui letak senyawa terpenoid.
Setelah itu dilakukan uji bioaktif dengan
menggunakan hama gudang Callosobruncus
chinensis dan bahan uji biji kacang hijau
2.3. Pemisahan dengan Kromatografi Kolom
Ekstrak kental hasil partisi dimasukkan ke dalam
kolom dan dielusi dengan pelarut mulai dari n-
heksana, kloroform, metanol dan perbandingan
dari pelarut-pelarut tersebut. Dari hasil
pemisahan fraksi-fraksi tersebut kemudian
dilakukan uji KLT dan uji bioaktif untuk
mendapatkan fraksi yang aktif dan mengandung
senyawa terpenoid. Untuk memurnikan fraksi
yang diperoleh dari hasil kromatografi kolom ,
fraksi tersebut kemudian di rekolom untuk yang
kedua kalinya. Hasil elusi ditampung setiap 1 ml
per botol sampel agar didapatkan pemisahan yang
lebih baik.
2.4. Uji Bioaktif
Uji bioaktif dilakukan dengan tujuan mengetahui
pengaruh daun lada sebagai insektisida5. Uji
bioaktif dilakukan pada semua fraksi hasil setiap
tahapan pemurnian. Pengujian bioaktivitas
dilakukan dengan metode percobaan makan.
Pengamatan mortalitas hama uji dilakukan setiap 6
jam sekali sampai didapatkan fraksi aktif yaitu
fraksi yang ditambahkan pada biji kacang hijau
mengakibatkan hama uji mati seluruhnya pada 5
kali pengulangan. Data yang ditampilkan dalam
waktu (jam) merupakan data hama yang masih
dapat bertahan hidup6 .
2.5. Identifikasi Senyawa Terpenoid
Sampel yang telah diisolasi kemudian
diidentifikasi dengan metode spektroskopi, yaitu
spektroskopi UV-Vis, IR dan GC-MS.
3. HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil perendaman daun lada disaring sehingga
didapatkan filtrat yang kemudian dipekatkan
dengan penguap putar yang bertujuan memekatkan
filtrat dengan suhu (30 – 400C dan putaran 60
 2005 FMIPA Universitas Lampung
rpm) rendah menggunakan bantuan vakum
sehingga senyawa-senyawa dalam filtrat relatif
aman dari kerusakan akibat pemanasan yang
berlebihan. Dari hasil pemekatan didapatkan
ekstrak kental sebanyak 50 gram. Ekstrak kasar
aseton yang diperoleh dipartisi dengan
menggunakan n-heksana : air (1 : 1). Partisi ini
bertujuan untuk memperkecil pola penyebaran
range komponen senyawa hasil maserasi
berdasarkan kelarutannya. Setelah didiamkan
beberapa saat kemudian akan didapatkan 2 lapisan
yang selanjutnya dipisahkan dan dihasilkan fasa n-
heksana dan fasa air. Pada kedua fasa tersebut
diuji dengan pereaksi Liebermann-Burchard. Pada
fasa air tidak terbentuk endapan yang mencirikan
terdapatnya senyawa terpenoid, sedangkan pada
fasa n-heksana ternyata didapatkan endapan
berwarna ungu sehingga fasa inilah yang
dilanjutkan ketahap berikutnya.
Fasa n-heksana yang didapat kemudian dipekatkan
dengan penguap putar vakum sehingga didapatkan
crude n-heksana sebanyak 10 gram. Selanjutnya
dilakukan uji KLT menggunakan plat KLT dengan
SiO2 sebagai fasa diam. Dari hasil KLT fasa n-
heksana didapatkan 10 bercak noda dengan harga
Rf masing-masing Rf1 = 0,03, Rf2 = 0,09, Rf3 =
0,16, Rf4 = 0,41, Rf5 = 0,46, Rf6 = 0,5, Rf7 = 0,61,
Rf8 = 0,77, Rf9 = 0,8, dan Rf10 = 0,95 dengan
kloroform 100 % sebagai fasa gerak, hasil KLT
diberikan pada Gambar 1.
Rf10
Rf9
Rf8
Rf7
Rf6
Rf5
Rf4
Rf3
Rf2
Rf1
(a) (b)
Gambar 1. Hasil KLT Crude n-heksana Hasil
Partisi (a) Eluen n-heksana 100 % (b) Eluen
CHCl3 100 %
Hal itu menunjukkan bahwa dalam ekstrak n-
heksana terkandung sedikitnya 10 komponen
senyawa dan dengan pereaksi Liebermann-
Burchard dapat dilihat adanya senyawa terpenoid
pada bercak noda dengan Rf2, Rf5, Rf6, Rf8 dan
Rf10 ditandai dengan terbentuknya warna ungu,
merah jambu dan ungu kemerahan.
159
 Syaiful Bahri dan Rinawati…Senyawa Terpenoid Hasil Isolasi

3.1. Pemisahan dengan Kromatografi Kolom
Pemisahan komponen senyawa pada crude n-
heksana dilakukan menggunakan kromatografi
kolom dengan fasa diam silika gel 60 dan fasa
gerak menggunakan cara elusi landaian dimulai
dengan pelarut n-heksana, kloroform, dan
perbandingan dari pelarut tersebut terakhir
menggunakan pelarut metanol. Dari hasil
penampungan kolom kromatografi didapatkan 5
fraksi yaitu fraksi n-heksana (1), fraksi n-heksana :
CHCl3 (2), fraksi CHCl3 (3), fraksi CHCl3 : MeOH
(4) dan fraksi MeOH (5). Hasil kromatografi
kolom fasa n-heksana diberikan pada Tabel 1.
Hasil fraksi-fraksi tersebut dipekatkan dengan
penguap putar vakum, kemudian diambil sejumlah
cuplikan dan dilarutkan dengan aseton untuk uji
bioaktif terhadap hama Callosobruncus chinensis
untuk mengetahui fraksi yang bersifat aktif.
Dari hasil uji bioaktivitas yang disajikan pada
Tabel 2. dapat dilihat bahwa fraksi n-heksana :
CHCl3 dan fraksi CHCl3 bersifat aktif. Pada fraksi
n-heksana : CHCl3 mempunyai sifat aktif terhadap
hama uji tetapi tidak mengandung senyawa
terpenoid sedangkan fraksi CHCl3 merupakan
fraksi yang aktif terhadap hama gudang
Callosobruncus chinensis dan mengandung
senyawa terpenoid ditandai dengan adanya bercak
noda yang berwarna ungu kemerahan. Fraksi
CHCl3 memiliki keaktifan terhadap hama
Callosobruncus chinensis dengan waktu kontak
selama 24 jam untuk dapat mematikan semua
hama uji pada lima kali pengulangan.
yang berada pada Rf tersebut menjadi target isolasi
berikutnya.
Rf4
Rf3
Rf2
Rf1
Plat KLT SiO2
Eluen CHCl3 100 %
Gambar 2. Hasil KLT Senyawa Fraksi CHC3
Untuk memisahkan senyawa yang menjadi target
isolasi dari komponen yang lain dilakukan kembali
kromatografi kolom dengan menggunakan silika
gel 60 sebagai fasa diam dan fasa gerak n-heksana,
kloroform, perbandingan pelarut-pelarut yang
digunakan dan MeOH. Hasil rekolom dari fraksi
CHCl3 dapat dilihat pada Tabel 3.
Dari hasil rekolom fraksi CHCl3 didapatkan 4
fraksi. Pada fraksi-fraksi tersebut kemudian diuji
bioaktivitas dan uji terpenoid. Didapatkan
senyawa target berada difraksi 3.3 dengan eluen
CHCl3 : MeOH dan setelah diuji bioaktivitas
ternyata fraksi tersebut aktif terhadap hama gudang
Callosobruncus chinensis, hasil uji bioaktif
diberikan pada Tabel 4.

Hasil KLT pada fraksi CHCl3 menunjukkan bahwa
dalam fraksi tersebut masih terdapat 4 komponen
senyawa dengan harga Rf masing-masing senyawa
adalah Rf1 = 0,41, Rf2 = 0,46, Rf3 = 0,5 dan Rf4
= 0,61. Pada Rf = 0,46 dan Rf = 0,5 diidentifikasi
sebagai senyawa terpenoid karena berwarna ungu
kemerahan dan merah jambu setelah disemprot
dengan Liebermann-Burchard, maka komponen
Hasil KLT fraksi 3.3 diberikan pada Gambar 3.
Dari gambar tersebut dapat dilihat hasil KLT
rekolom fraksi 3.3 bercak noda yang dihasilkan
sudah satu spot tetapi masih agak memanjang
sehingga perlu dilakukan lagi kromatografi kolom
terhadap fraksi tersebut untuk mendapatkan
senyawa target yang lebih murni.

Tabel 1. Hasil Kromatografi Kolom Crude n-heksana

Hasil Uji
Fraksi Eluen Warna Fraksi Uji Terpenoid
Bioaktif
1. n-heksan Kuning pekat - +
2. n-heksan : CHCl3 Hijau pekat - +
3. CHCl3 100 % Kuning kemerahan + +
4. CHCl3 : MeOH Hijau kehitaman + +
5. MeOH 100% Hitam - -

Keterangan : + = Hasil uji aktif / terdapat terpenoid

- = hasil uji tidak aktif / tidak mengandung terpenoid

160  2005 FMIPA Universitas Lampung

J. Sains Tek., Desember 2005, Vol. 11, No. 3

Tabel. 2. Data Hasil Uji Bioaktif Kromatografi Kolom Fase n-heksana

Waktu (Jam) / Hama yang Masih Berat

Berat Awal Hidup
Perlakuan Akhir Keterangan
(gram)
6 12 18 24 (gram)
Blangko
Kacang
a. 0,6888 10 10 10 9 0,6703
hijau
b. 0,6775 10 10 10 10 0,6625 berlubang
c. 0,7465 10 10 10 10 0,7286 dan
berbubuk
d. 0,7113 10 10 10 9 0,6998
e. 0,7277 10 10 10 10 0,7175
Pelarut Aseton
kacang
a. 0,7096 10 10 10 9 0,6898
hijau
b. 0,7398 10 10 10 10 0,7252 berlubang
c. 0,6132 10 9 10 10 0,6039 dan
berbubuk
d. 0,6358 10 10 9 8 0,6225
e. 0,6824 10 10 10 10 0,6249
Fraksi
heksana : CHCl3
a. 0,6468 10 10 7 4 0,6315 kacang
hijau
b. 0,6872 10 9 5 2 0,6398
berlubang
c. 0,6886 10 9 7 6 0,6706 dan
d. 0,6813 10 9 6 3 0,6783 berbubuk

e. 0,6357 10 10 6 4 0,6224
Fraksi CHCl3
kacang
a. 0.6388 8 5 3 0 0.6388
hijau
b. 0.7143 6 4 2 0 0.7143 tetap
utuh
c. 0.7292 9 7 5 0 0.7292
d. 0.7386 8 3 0 0 0.7386
e. 0.7840 8 6 4 0 0.7840
Fraksi CHCl3 :
MeOH
a. 0,6844 9 6 1 0 0.6781
b. 0,6625 8 4 2 1 0.6497 kacang
hijau
c. 0,6989 10 8 4 2 0.6901 sedikit
d. 0,7227 8 5 2 0 0.7112 berbubuk

e. 0,7348 8 6 3 1 0.7178
Fraksi MeOH
kacang
a. 0,6921 10 6 5 2 0,6753
hijau
b. 0,6928 10 7 3 1 0,6805 berlubang
c. 0,6133 10 9 6 4 0,5924 dan
d. 0,6685 9 7 4 0 0,6479 berbubuk
e. 0,6319 9 8 4 1 0,6186

 2005 FMIPA Universitas Lampung 161

 Syaiful Bahri dan Rinawati…Senyawa Terpenoid Hasil Isolasi

Tabel 3. Hasil Rekolom Fraksi Kloroform (CHCl3)

Hasil Uji
Fraksi Eluen Warna Fraksi Uji Terpenoid
Bioaktif
3.1 n-heksana 100 %, n- Kuning muda - -
heksana : CHCl3
3.2 CHCl3 100 % Kuning - -

3.3 CHCl3 : MeOH Kuning kemerahan ++ +

3.4 MeOH 100 % Kuning + +

Keterangan : ++ = Hama mati semua

+ = Hama masih ada yang hidup
- = Hama masih bayak yang hidup

Tabel 4. Data Hasil Uji Bioaktif Fraksi 3 (CHCl3)

Berat Waktu (jam) / Hama yang Masih Berat

Perlakuan Awal Hidup Akhir Keterangan
(gram) 12 24 36 48 60 (gram)
Blanko
a. 0,7356 10 10 10 10 9 0,7068 Kacang
b. 0,7562 10 10 10 9 8 0,7245 hijau
c. 0,7208 10 10 10 10 10 0,6981 berlubang
d. 0,7759 10 10 10 10 10 0,7540 dan
e. 0,7270 10 10 10 10 10 0,6876 berbubuk
Pelarut Aseton
a. 0,7080 10 10 10 10 10 0,6852
b. 0,7085 10 10 10 9 9 0,6907 Kacang
c. 0,6678 10 10 10 10 10 0,6393 hijau
d. 0,6706 10 10 10 9 8 0,6564 berlubang
e. 0,6930 10 10 10 9 9 0,6818 dan
berbubuk
Fraksi 3.1
a. 0,6647 10 10 8 6 3 0,6529 Kacang
b. 0,7939 10 9 6 4 2 0,7761 hijau
c. 0,6558 9 8 6 4 1 0,6354 sedikit
d. 0,7334 9 7 5 3 3 0,7149 berbubuk
e. 0,7150 10 9 7 5 4 0,6893
Fraksi 3.2
a. 0,6670 10 7 5 4 2 0,6602 Kacang
b. 0,7249 8 6 3 1 0 0,7089 hijau
c. 0,7799 10 7 5 2 0 0,7675 sedikit
d. 0,7352 10 8 6 4 3 0,7228 berbubuk
e. 0,7074 9 8 6 3 1 0,6937
Fraksi 3.3
a. 0,7548 9 8 6 3 0 0,7548 Kacang
b. 0,6935 9 7 4 2 0 0,6935 hijau
c. 0,6611 8 7 6 4 0 0,6611 tetap
d. 0,7403 7 5 3 0 0 0,7403 utuh
e. 0,6665 9 6 5 2 0 0,6665
Fraksi 3.4
a. 0,6724 10 9 6 4 3 0,6680 Kacang
b. 0,6921 10 6 4 2 1 0,6854 hijau
c. 0,7526 9 7 3 2 2 0,7472 berlubang
d. 0,6673 9 5 3 1 1 0,6603 dan
e. 0,7839 10 7 6 3 0 0,7788 berbubuk

162  2005 FMIPA Universitas Lampung

J. Sains Tek., Desember 2005, Vol. 11, No. 3

eluen dengan kepolaran yang berbeda-beda, harga

Rf 0,17 dengan eluen n-heksana : CHCl3 (1 : 1) (a),
Rf 0,46 dengan eluen CHCl3 100 % (b), eluen n-
heksana : CHCl3 : MeOH ( 5 : 4 : 1) Rf 0,60 (c)
dan Rf 0,9 dengan eluen CHCl3 : MeOH (1 : 1)
(d). Kristal yang dihasilkan sebanyak 3 mg
Plat KLT SiO2 berbentuk seperti jarum dan berwarna putih. Hasil
Eluen CHCl3 100 % plat KLT senyawa target yang dihasilkan dengan
beberapa eluen diberikan pada gambar berikut:

Gambar 3. Hasil KLT Rekolom Fraksi 3.3

Pada tahap pemurnian ini, hasil tampungan

dilakukan setiap 1 ml per botol sampel dengan
menggunakan eluen n-heksana : CHCl3, CHCl3,
CHCl3 : MeOH dan MeOH. Dari hasil kolom
didapatkan hasil penampungan sebanyak 210 botol
sampel dan tiap botol diuji KLT dan disemprot
dengan pereaksi Liebermann-Burchard.
Berdasarkan hasil KLT yang dilihat dari harga Rf
bercak noda yang terbentuk didapatkan 6 fraksi.
Setelah didiamkam selama beberapa hari pada
masing-masing fraksi terbentuk kristal berbentuk
jarum. Kristal yang terbentuk tiap fraksi memiliki
bentuk yang hampir sama dan memiliki nilai Rf
yang memiliki perbedaan sangat tipis. Hasil kristal
terbanyak terdapat pada fraksi 3.3.4. Hasil kolom
kromatografi pemurnian ini diberikan pada Tabel
5.
Pada masing-masing fraksi yang didapat dari hasil
kromatografi kolom fraksi 3.3 kemudian dilakukan
uji bioaktivitas terhadap hama gudang
Callosobruncus chinensis. Berdasarkan hasil uji
bioaktivitas yang diberikan pada Tabel 6. fraksi
3.3.4. bersifat aktif terhadap hama uji, sehingga
kristal yang ada pada fraksi ini yang kemudian
diidentifikasi dengan alat spektroskopi.
Pemeriksaan dengan KLT memperlihatkan bahwa
senyawa target yang diperoleh selalu memberikan
bercak tunggal walaupun telah digunakan berbagai
(a) (b) (c) (d)
Gambar 4. Hasil KLT Senyawa Hasil Isolasi
(Terpenoid)
3.2. Uji Bioaktif
Hasil pengujian uji bioaktivitas Callosobruncus
chinensis pada biji kacang hijau menunjukkan
bahwa pada ekstrak daun lada mengandung
senyawa terpenoid yang dapat menyebabkan
kematian pada hama uji dan juga dapat
mengurangi aktivitas makan. Hal ini dapat dilihat
dari banyaknya hama yang mati dan biji kacang
hijau pada fraksi yang aktif masih dalam keadaan
utuh. Sedangkan biji kacang hijau pada blangko,
pelarut dan fraksi yang lain menjadi berlubang dan
berbubuk sehingga menyebabkan penurunan berat
kacang hijau. Berkurangnya berat kacang hijau
disebabkan karena selama perkembangannya larva
Callosobruncus chinensis memakan kotiledon
maupun embrio dari kacang hijau. Serangan yang
dilakukan oleh hama ini menyebabkan kacang
hijau berlubang bahkan sampai hampa (tinggal
kulitnya saja) dan bobotnya menjadi ringan9.

Tabel 5. Hasil Kromatografi Rekolom Fraksi 3.3 (Fraksi CHCl3 : MeOH)

Hasil Uji Uji Kristal yang

Fraksi No. Tabung Eluen
Bioaktif Terpenoid terbentuk
3.3.1 1 – 20 n-hek : CHCl3 - + sedikit
3.3.2 31 – 69 CHCl3 - + sedikit
3.3.3 76 – 84 CHCl3 + + cukup banyak
3.3.4 88 – 151 CHCl3 : MeOH + + banyak
3.3.5 159 – 173 MeOH - + sedikit
3.3.6 177 – 210 MeOH - + cukup banyak

 2005 FMIPA Universitas Lampung 163

 Syaiful Bahri dan Rinawati…Senyawa Terpenoid Hasil Isolasi

Tabel 6. Data Hasil Uji Bioaktif Rekolom Fraksi 3.3

Berat Waktu (Jam) Berat

Perlakuan Awal 12 24 36 48 60 72 Akhir Keterangan
(gram) (gram)
Blangko
a. 0,7371 10 10 10 10 10 10 0,7125 Kacang
b. 0,7710 10 10 10 10 10 10 0,7528 hijau
c. 0,7067 10 10 10 10 10 10 0,6891 berlubang
d. 0,7324 10 10 10 10 9 9 0,7089 dan
e. 0,7952 10 10 10 10 10 9 0,7765 berbubuk
Pelarut Aseton
a. 0,7158 10 10 10 10 9 8 0,6500
b. 0,7007 10 10 10 10 10 10 0,6252 Kacang
c. 0,7698 10 10 10 10 10 9 0,6288 hijau
d. 0,7429 10 10 10 10 10 10 0,6784 berlubang
e. 0,7952 10 10 10 10 10 10 0,6892 dan
berbubuk
Fraksi 3.3.1
a. 0,6849 10 9 7 7 5 5 0,6682 Kacang
b. 0,6904 10 8 6 5 4 4 0,6828 hijau
c. 0,7060 10 10 8 6 5 2 0,6859 berlubang
d. 0,6824 9 7 6 5 5 3 0,6705 dan
e. 0,6794 8 6 4 3 1 0 0,6591 berbubuk
Fraksi 3.3.2
a. 0,6735 10 10 7 5 3 3 0,6689 Kacang
b. 0,6654 10 9 9 6 3 3 0,6573 hijau
c. 0,7111 10 10 8 7 4 4 0,6902 berlubang
d. 0,6869 10 9 7 6 1 1 0,6803 dan
e. 0,7229 10 9 9 6 2 2 0,7114 berbubuk
Fraksi 3.3.3
a. 0.6572 10 8 7 6 5 5 0,6385 Kacang
b. 0.6814 10 9 8 5 3 2 0,6719 hijau
c. 0.7213 10 10 9 7 4 2 0,7152 berlubang
d. 0.7543 9 7 6 5 3 3 0,7290 dan
e. 0.7259 9 8 6 6 2 1 0,7004 berbubuk
Fraksi 3.3.4
a. 0,6897 8 5 3 2 1 0 0,6897
b. 0,6609 8 6 5 5 2 0 0,6609 Kacang
c. 0,7441 9 8 6 4 1 0 0,7441 hijau
d. 0,7336 7 6 4 1 1 0 0,7336 tetap
e. 0,7345 10 8 5 2 0 0 0,7345 utuh
Fraksi 3.3.5
a. 0,6852 9 7 5 3 2 0 0,6785
b. 0,6909 9 7 6 4 1 0 0,6821 Kacang
c. 0,7336 8 7 4 2 1 1 0,7250 hijau
d. 0,7278 10 8 6 5 3 2 0,7209 sedikit
e. 0,7414 8 6 5 3 1 0 0,7334 berbubuk
Fraksi 3.3.6
a. 0,6753 9 9 7 4 3 2 0,6611 Kacang
b. 0,6988 8 7 4 3 1 0 0,6799 hijau
c. 0,7215 10 9 7 6 3 1 0,7153 berlubang
d. 0,7566 10 9 7 5 2 2 0,7425 dan
e. 0,6484 9 9 6 5 4 2 0,6348 berbubuk

164  2005 FMIPA Universitas Lampung

J. Sains Tek., Desember 2005, Vol. 11, No. 3
Gambar 5. Spektrum IR Senyawa Hasil Isolasi
Gambar 6. Spektrum massa Senyawa Hasil Isolasi
3.3. Identifikasi dengan Spektroskopi Infra
Merah
Pemeriksaan spektrum infra merah dari senyawa
terpenoid yang diperoleh, memberikan pita-pita
serapan pada bilangan gelombang 3317,3 cm -1 (s)
merupakan serapan dari uluran – OH. Serapan
pada 2931,6 cm -1 (k) yang didukung dengan
serapan pada 1458,1 cm -1 (s) merupakan uluran
metil, pada bilangan gelombang 2862,2 cm -1
merupakan uluran =C-H dan serapan di daerah
sidik jari pada 1373,2 cm -1 menunjukkan uluran -
CH2. Pada 1643,2 cm -1 (l) yang didukung oleh
serapan di daerah sidik jari pada 887,2 cm -1 (l)
merupakan uluran C=C yang terdapat dalam
struktur lingkar. Serapan di daerah sidik jari pada
1126,4 cm -1 (s) merupakan serapan dari C-O
(Sastrohamidjojo, 1990). Data hasil pengukuran
spektroskopi IR diberikan pada Gambar 5.
3.4. Identifikasi dengan Spektroskopi Massa
Dari hasil pengukuran spektroskopi massa
didapatkan senyawa dengan berat molekul 220 m/e
dengan puncak dasar (100 %) adalah 43. Senyawa
dengan berat molekul 220 diduga memiliki rumus
molekul C15H24O. Jumlah ekivalen ikatan rangkap
 2005 FMIPA Universitas Lampung
dalam rumus molekul tersebut dapat dihitung
berdasarkan rumus DBE dan dihasilkan sebanyak
4 buah ekivalen ikatan rangkap, yaitu 3 buah
lingkar (siklik) dan 1 buah ikatan rangkap C=C7.
Adanya gugus – OH pada struktur dugaan
dibuktikan dengan adanya puncak 202 m/e pada
data MS dimana ion molekul melepaskan molekul
netral H2O dan didukung dengan adanya serapan
pada bilangan gelombang 3317,3 cm-1 pada data
IR. Gugus metil dilihat dari munculnya puncak
205 m/e dimana ion radikal metil dilepaskan dari
ion molekul dan juga puncak 187 m/e setelah
pelepasan H2O dan gugus metil dari ion molekul,
dari data IR gugus metil ditunjukkan dengan
adanya serapan pada 2931,6 cm-1 dan 1458,1 cm-1.
Adanya ikatan rangkap pada siklik ditunjukkan
dengan adanya serapan pada 1643,2 cm-1 dan
887,2 cm-1. Ikatan =C-H pada ikatan rangkap
ditunjukkan dengan adanya peak pada 2862,2 cm-1.
Hasil pengukuran Spektroskopi Massa diberikan
pada Gambar 6.
4. KESIMPULAN DAN SARAN
Dari hasil penelitian dapat diambil kesimpulan
sebagai berikut: telah berhasil diisolasi senyawa
165
 Syaiful Bahri dan Rinawati…Senyawa Terpenoid Hasil Isolasi
terpenoid dari daun lada (Piper nigrum, Linn) yang
bersifat bioaktif terhadap hama Callosobruncus
chinensis berupa kristal berwarna putih sebanyak 3
mg dengan harga Rf 0,46 menggunakan eluen
CHCl3 100 %. Dari hasil analisis spektroskopi IR
dan Spektroskopi Massa diperkirakan senyawa
hasil isolasi merupakan senyawa terpenoid jenis
seskuirterpenoid dengan gugus-gugus fungsi utama
OH dan C=C serta berat molekul relatif 220 m/e.
Adapun saran yang dapat diberikan dari hasil
penelitian ini adalah sebagai berikut : agar
didapatkan senyawa hasil isolasi yang memiliki
kemurnian lebih tinggi dilakukan pengukuran
dengan menggunakan HPLC, perlu dilakukan
pengukuran lebih lanjut dengan NMR agar dapat
menentukan struktur molekul senyawa terpenoid
yang didapat dari daun lada (Piper nigrum, Linn)
secara pasti. Perlu dilakukan uji bioaktivitas
terhadap hama Callosobruncus chinensis dengan
menggunakan beberapa taraf konsentrasi sehingga
dapat dihitung LC50 (Lethal Concentration).
DAFTAR PUSTAKA
1. Suprapto dan Nurjanah, N. 2001. Daya
Insektisida Buah Lada Terhadap Beberapa
Hama Gudang. J. Sains Tek.7(3): 141-146.
2. Idris, A.B dan E. Garfius. 1993. Pesticides
Affect Immature Stangst of Diadegme
Insulare (Hymenoptra: Plutellidea) and it’s
166
Host, The Diamondbackmoth (Lepidoptera:
Plutellidea). J. Econ. Ento. 48 (6): 435-411.
3. Bahri, S. dan Rinawati. 2005. Isolasi
Senyawa Alkaloid pada buah lada dengan uji
aktifitas terhadap hama beras (Sithopilus
oryzae L). J. Ilmiah MIPA. VIII(1): 42-47
4. Arnason, B.J.R., I. M Gagnon, N. Lesage,
L.egrave. 2005. Efficacy of Botanical
Insecticides from Piper Species (Piperaceae)
Extracts For Control of European Chafer
(Coleoptera: Scarabaeidae). J. Econ. Ento.
98 (3): 845-855(11)
5. Isman, M. 2002. Pesticide Outlook, J. Royal
Soc. Chem. 10.1039/b206507j: 30-37.
6. SAS Institut. 1990. SAS/STAT User’s Guide,
Version 6, Fourth Edition, Volume 2. North
Carolina. SAS Institut Inc.
7. Hamid, A., Y. Nuryani. 1992. Kumpulan
Abstrak Seminar dan Lokakarya Nasional
Etnobotani, Bogor. Dalam S. Riyadi, A.
Kuncoro, dan A.D.P. Utami. Tumbuhan
Beracun. Malang : Balitnas.
8. Rismunandar. 2001. Lada, Budidaya dan Tata
Niaganya. Penebar Swadaya. Jakarta.
Halaman 6-34.
9. Kartasapoetra. 1991. Hama Hasil Tanaman
dalam Gudang. Rineka Cipta. Jakarta.
 2005 FMIPA Universitas Lampung