UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÒNOMA DE MÈXICO

FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES CUAUTITLÀN

DEPARTAMENTO DE CIENCIAS BIOLÒGICAS
SECCIÒN DE BIOQUÍMICA Y FAEMACOLOGÌA
FARMACOLOGÌA ESPECIAL

FES CUAUTITLAN REPORTE DE LA PRACTICA 1. “ANSIOLÍTICOS”

Elaborado por: Grupo: 2551 Hipótesis:

-Hernández Pérez Elida Semestre: 2018-II Metodología:
Monserrat Carrera: Licenciado en Farmacia Resultados:
-Navarro Gallegos Luis Profesor de teoría: Dra. Luisa Martínez Análisis:
Roberto Aguilar Conclusiones:
-Romero Monter Elizabeth Bibliografía:
TOTAL:

Fecha Equipo:3
08-02-18 Profesor de laboratorio: LF. Gómez-Tagle
Gonzales Anuar

INTRODUCCION.
La ansiedad es un síntoma que puede presentarse formando parte de distintos cuadros
psiquiátricos tales como episodios depresivos, maníacos, psicóticos, etc. Sin embargo,
también puede constituir un síndrome en sí misma manifestándose como componente
emocional, cognitivo y/o comportamental (palpitaciones, sudoración, tensión muscular, etc.)
de distintos trastornos psiquiátricos como las crisis de angustia (panic attack), el trastorno de
ansiedad generalizada y el trastorno por estrés postraumático entre otros. ) (Díez, 2002)
Desde su aparición y hasta la actualidad, las benzodiazepinas se han convertido en los
fármacos de mayor prescripción en el tratamiento psicofarmacológico de la ansiedad.
Existen también fármacos no benzodiazepínicos con perfil ansiolítico y/o sedativo como
antihistamínicos (ej. difenhidramina), buspirona y barbitúricos.
Estos últimos, desde que se dispone de benzodiazepinas, han dejado de utilizarse para el
manejo de la ansiedad dado su bajo índice terapéutico y hoy su uso ha quedado limitado para
anestesia intravenosa y como anticonvulsivantes. Los barbitúricos fueron las drogas de mayor
prescripción como ansiolíticos y sedativos durante la primera mitad del siglo XX. (Rang, 2012)
OBJETIVO GENERAL
Reconocer la dosis adecuada del Diazepam aplicada en ratones y su efecto ansiolítico
mediante el modelo fármacologico Plus-maze para entender los efectos que esto causa al
sistema nervioso central
HIPÓTESIS
Demostrar el efecto ansiolítico de benzodiacepinas en lotes de ratones albinos a distintas
dosis por medio de modelos experimentales como el laberinto elevado en cruz a partir de los
parámetros etológicos que presenten.
 METODOLOGIA

ANSIOLÍTICOS
-Bascula, guantes,
9 ratones albinos

cubrebocas
Adultos

Pesar, sexar y distribuir a los

ratones en tres lotes de tres ratones
cada uno.

A los lotes 1, 2 y 3 administrar: al ratón 1:

0.05mL/30g; al ratón 2: 0.1mL/30g y al
ratón 3: 0.15 mL/30 g de peso.

Con los volúmenes indicados en el

punto dos y conociendo la
concentración del diazepam calcular
las dosis administradas.

. Evaluar los lotes con el modelo de

plus- maze, después de 10 minutos
de la administración.

Construir histogramas dosis contra

efecto ansiolítico.

R0

A partir de estos realiza gráficas de barras,

para llevar a cabo el análisis de los resultados.

FIN
R0: No se generaron residuos
RESULTADOS
Tabla 33. Datos generales de los ratones

Lote mL/30mg Ratón Peso (g) Vol. Dosis

Administrado (mg/kg)
(mL)
SSF 0 Pd 32.9g 0 0.7
DZ 0.7 0.05 Co 28.5g 0.04 mL 0.7
mg/mL 0.1 CoCa 38.2g 0.12 mL 0.7
0.15 Pa 30.5g 0.15 mL 0.7

Tabla 34. Resultados obtenidos por equipo con el modelo plus-maze para evaluar el efecto
ansiolítico.

Tratamiento Rata Eba Ebc %Eba Tba Tbc TPc %Tba Post. No.
(seg) (seg) Est. Bolos
Diazepam Co 1 15 6.25 4 seg 250 73 1.57 5 0
(0.7 seg
mg/mL)
CoCa 1 14 6.66 54 261 231 17.14 12 4
seg seg
Pa 1 22 4.34 7 seg 437 398 1.57 10 0
seg
Resultados por sección
Tabla 35. Resultados obtenidos por sección del Lote No1. Control (Volumen 0.05/30mg) con
el modelo de plus-maze para evaluar el efecto ansiolítico.
Dosis: 0 mg/Kg

No. Equipo % Eba % Tba Post. Est. No. De bolos

1 0 0
3 0 0
5 0 0 8
7 40 0
Promedio

Tabla 38. Resultados obtenidos por sección del Lote No2. Diazepam [0.07 mg/ml] (Volumen
0.05/30mg) con el modelo de plus-maze para evaluar el efecto ansiolítico.
Dosis: 0.07 mg/Kg
 No. Equipo % Eba % Tba Post. Est. No. De bolos
1 40.47 28 4 0
5 41.37 54.53 4 0
Promedio 41.26

Tabla 39. Resultados obtenidos por sección del Lote No2. Diazepam [0.07 mg/ml] (Volumen
0.1/30mg) con el modelo de plus-maze para evaluar el efecto ansiolítico.
Dosis: 0.07 mg/Kg

No. Equipo % Eba % Tba Post. Est. No. De bolos

1 43.33 5.73 2 1
5 16.66 1.96 2 0
Promedio 3.84

Tabla 40. Resultados obtenidos por sección del Lote No2. Diazepam [0.07 mg/ml] (Volumen
0.15/30mg) con el modelo de plus-maze para evaluar el efecto ansiolítico.
Dosis: 0.07 mg/Kg

No. Equipo % Eba % Tba Post. Est. No. De bolos

1 45.45 45.2 3 0
5 54.16 75.73 0 0
Promedio 60.46

Tabla 40. Resultados obtenidos por sección del Lote No3. Diazepam [0.7 mg/ml] (Volumen
0.05/30mg) con el modelo de plus-maze para evaluar el efecto ansiolítico.
Dosis: 0.7 mg/Kg

No. Equipo % Eba % Tba Post. Est. No. De bolos

3 6.25 1.57 5 0
7 0 0 0 0
Promedio 1.57

Tabla 41. Resultados obtenidos por sección del Lote No3. Diazepam [0.7 mg/ml] (Volumen
0.1/30mg) con el modelo de plus-maze para evaluar el efecto ansiolítico.
Dosis: 0.7 mg/Kg

No. Equipo % Eba % Tba Post. Est. No. De bolos

3 6.66 17.14 12 4
 7 60 1.85 2 0
Promedio 9.45

Tabla 41. Resultados obtenidos por sección del Lote No3. Diazepam [0.7 mg/ml] (Volumen
0.15/30mg) con el modelo de plus-maze para evaluar el efecto ansiolítico.
Dosis: 0.7 mg/Kg

No. Equipo % Eba % Tba Post. Est. No. De bolos

3 4.34 1.57 10 0
7 50 3.07 12 0
Promedio 2.32

Gráfica 1. % Tba vs Dosis mg/kg

ANALISIS DE RESULTADOS
A partir de los datos obtenidos en el modelo “Laberinto elevado en cruz” o Plus maze cuyo
fundamento está en la preferencia de los roedores por los espacios cerrados del laberinto
(ramas cerradas del laberinto) en relación a las abiertas sabiendo esto como respuestas
defensivas de los roedores mostradas a continuación.

Esto fué evaluado a partir de una serie de parámetros etológicos, o conductas de evaluación
de riesgo, para mejorar la sensibilidad del test, su fiabilidad y su validez ecológica.
 El primero de ellos es Head-dipping protegido (contacto con la pared de los brazos
cerrados o de la plataforma central) que consiste en que el animal saca la cabeza
por debajo del nivel de los brazos del laberinto. Una frecuencia alta de esta conducta
sugiere cierto miedo de los animales.
 Existe también el Head-dipping no protegido (sin contacto con la pared, es decir,
brazos abiertos)., en el que la conducta se realiza en los brazos abiertos y muestra
cierta tranquilidad de los animales.
 Otra medida etológico es el SAP protegido (del inglés, stretched attend posture) en la
que el animal se estira en toda su longitud y explora olfateando sin moverse del sitio.
Esta conducta es sinónimo de miedo.
 También tiene su variante de SAP no protegido, que se realiza en los brazos abiertos
y en este caso indica desconfianza por parte del animal.
 El Rearing es otro de los nuevos parámetros, que consiste en que el animal se levanta
apoyado en sus dos patas traseras para explorar las paredes y se interpreta como la
exploración del espacio por parte del animal, por lo que un número elevado de Rearing
indica un bajo nivel de estrés/ansiedad por parte del animal.
 La Inmovilización, es un parámetro que indica el nivel general de actividad por parte
del animal. Mayor tiempo de Inmovilización, mayor miedo o ansiedad expresada por el
animal. Por último, vuelta al brazo cerrado, el animal mantiene sus dos patas traseras
en el brazo cerrado mientras explora el centro del laberinto o un brazo abierto, que
indica miedo por parte del animal. Cárdenas y Navarro (2002).
En la gráfica No 1. “%Tba vs Dosis mg/kg” se evaluó el efecto del contexto en el desarrollo
de la tolerancia al diazepam mediante diferentes concentraciones y volúmenes (los cuales
están registrados en las tablas de resultados) los resultados de este experimento,
demostraron el desarrollo de tolerancia al efecto ansiolítico del diazepam. Sin embargo, solo
se detectó tolerancia farmacológica y no tolerancia asociativa. Esto es, no se demostró el
efecto del contexto en el desarrollo de la tolerancia al efecto ansiolítico del diazepam con la
dosis empleada (0.7 mg/Kg)
Los fármacos ansiolíticos aumentan específicamente el número de entradas en los brazos
abiertos y el tiempo que se pasa allí. El puntaje de entradas totales y la distancia total se
consideran un índice útil de actividad general. El puntaje de entradas totales también es un
índice de ansiedad, y los porcentajes de entradas y el tiempo empleado en cada brazo
constituyen el índice de ansiedad primaria (Rodgers y Dalvi, 1997, Mechiel Korte y De Boer,
2003). Se considera que los brazos abiertos y cerrados evocan el mismo impulso de
exploración, por lo que se considera que evitar los brazos abiertos es el resultado de la
inducción de mayores niveles de miedo (Rodgers y Dalvi, 1997). Se cree que la aversión de
los ratones a explorar los brazos abiertos del laberinto es causada por el miedo a los espacios
abiertos y elevados.
Podemos observar en la Gráfica No 1. “%Tba vs Dosis mf/kg” existe un mayor porcentaje
de entradas a brazos abiertos cuando la concentración del Diazepam es menor, esto quiere
decir que el fármaco alcanzó un nivel de anestesia que a nivel neuronal quiere decir que esta
se hiperpolariza (se vuelve más negativa) y se aleja de la carga que necesita para poder
comenzar su actividad eléctrica como manera de llevar la información hacia la siguiente
sinapsis. Otra manera de decirlo es que la hiperpolarización aleja a la neurona de su umbral
de disparo. Así se inhibe la descarga eléctrica de la neurona postsináptica; y es caracterizado
por la tranquilidad del individuo sin relajación muscular ni inducción al sueño; así bien el
Diazepam es un depresor del sistema nervioso central y esté efecto es mediado a través del
neurotransmisor ácido gamma-aminobutírico (GABA) el cual es inhibitorio más importante del
sistema nervioso central (SNC) ocupando selectivamente ciertas áreas de proteínas en el
cerebro llamadas receptores GABA-A. Las benzodiazepinas aumentan las respuestas al
neurotransmisor inhibitorio GABA al abrir los canales de cloruro activados por GABA y permitir
que los iones cloruro entren en la neurona. Esta acción permite que la neurona se cargue
negativamente y sea resistente a la excitación, lo que conduce a la actividad de diversos tipos
de ansiolíticos, sedantes o antiasimientos que se observan con estos fármacos. La subunidad
a2 de GABA-A parece ser responsable de los efectos antiansiedad de las
benzodiazepinas; otras subunidades modulan las propiedades amnésicas y sedantes de las
benzodiazepinas. Las benzodiazepinas que se dirigen a subunidades específicas de los
receptores de GABA tienen acciones farmacológicas más selectivas. (Marueen, 2012).
Una segunda administración a dosis diez veces mayores afecta de manera significativa la
respuesta, como podemos observar en la Gráfica No 1. “%Tba vs Dosis mf/kg”. En primera
las benzodiazepinas son antagonistas completos del receptor GABA A. Esto quiere decir que
tienen afinidad por él y que tienen actividad intrínseca sobre ese receptor. A la vez, son
moduladores alostéricos positivos, estimulando la unión del neurotransmisor GABA sobre el
receptor, aumentando la frecuencia de aperturas del canal iónico, lo que produce el
incremento de la entrada de cloro a la célula. Entonces a dosis mayores la entrada de iones
Cl- será mayor dando así un incremento en neuronas hiperpolarizadas que en la
experimentación observamos como un cambio de un efecto ansiolítico a un efecto hipnótico o
anestésico que son caracterizadas por promover la relajación muscular y la inducción al sueño
explicando por qué el ratón tiende a comportamientos como posiciones anatómicas de sueño,
cierre de ojos y escasos movimientos
El ratón es un mamífero de sangre caliente, de hábitos nocturnos y su comportamiento está
influenciado por feromonas; se adapta a una gran variedad de condiciones ambientales,
desde zonas muy frías hasta regiones tropicales. En general, las especies prefieren
ambientes más secos que húmedos. Posee un agudo sentido de la audición, por lo que se
alteran rápidamente con los ruidos, es por ello que hay que tener cuidado con los equipos que
se utilizan y acondicionar el equipo de trabajo para poder simular un ambiente parecido a su
habitad así como se mencionó anteriormente, esto mejorará la sensibilidad del test, su
fiabilidad y su validez ecológica.
CONCLUSIONES.
Se demostró el efecto ansiolítico del Diazepam en ratones albinos distribuidos en lotes y
administrados a diferentes dosis con el modelo experimental del laberinto elevado en cruz a
partir del cual observamos los cambios en el efecto ansiolítico provocados por la
concentración del fármaco por medio de parámetros etológicos, o conductas de evaluación de
riesgo en ratones.

Bibliografía
A, J., & Bevan. (1982). Fundamentos de farmacologia. Mexico. DF: Harla Harper & Row Latinoameriana.

H.P, R., J.M, R., R.J, F., & G, H. (2016). Farmacología . Barcelona, España: ELSEVIER.

Fuentes X. (1998). Bioquímica Clínica y Patología Molecular. (2ª ed). España: Editorial
Reverté.

González, M. (2012). Laboratorio Clínico y Nutrición. México: El Manual Moderno.

Castells, S. (2007). Farmacología en enfermería. (2da ed). Madrid, España: Elvesier España
S.A.