Artikel Ilmiah STIFAR Riau

UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK KULIT BATANG

POHON BUNGA KUPU-KUPU (Bauhinia semibifida Roxb) DENGAN
METODE DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhidrazil)

Haiyul Fadhli1), Ainun Nurain Nurdin2)

1)
Program Studi Diploma III Farmasi Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi (STIFAR) Riau
ABSTRACT

Has done research about the trials of antioxidant activity extract of bark of trees
flowers butterflies (Bauhinia semibifida Roxb) with the DPPH method. This research aims
to know the antioxidant activity of the extracts of tree bark extract Butterfly flower
(Bauhinia semibifida Roxb) against free radicals. Testing based on absorban extract against
DPPH at a wavelength of 517 nm using a microplate reader. The results showed that n-
heksan extract of bark of trees flowers butterflies IC50 value 137 µ g/ml by the value of the
AAI 0.5 categorized weak < extract ethyl acetat IC50 value 30.151 µ g/ml by the value of
the AAI 1.32 categorized strong and the methanol extract of IC 50 value of 16 µ g/ml with a
value of 2.5 AAI categorized very strong. It shows that the methanol extract of bark of trees
flowers butterflies have a very strong antioxidant activity compared with other extracts, but
almost comparable with Vitamin C.

Keywords: antioxidants, Bauhinia semibifida Roxb, IC50, AAI

ABSTRAK

Telah dilakukan penelitian tentang uji aktivitas antioksidan ekstrak kulit batang
pohon bunga kupu-kupu (Bauhinia semibifida Roxb) dengan metode DPPH. Penelitian ini
bertujuan untuk mengetahui aktivitas antioksidan dari ekstrak ekstrak kulit batang pohon
bunga kupu-kupu (Bauhinia semibifida Roxb) terhadap radikal bebas. Pengujian
berdasarkan absorban DPPH terhadap ekstrak pada panjang gelombang 517 nm
menggunakan microplate reader. Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak n-heksan
kulit batang pohon bunga kupu-kupu memiliki nilai IC50 137 µg/ml dengan nilai AAI <0,5
dikategorikan lemah, ekstrak etilasetat memiliki nilai IC50 30,151 µg/ml dengan nilai AAI
1,32 dikategorikan kuat dan ekstrak metanol memiliki nilai IC50 sebesar 16 µg/ml dengan
nilai AAI sebesar 2,5 yang dikategorikan sangat kuat. Hal itu menunjukkan bahwa ekstrak
metanol kulit batang pohon bunga kupu-kupu (Bauhinia semibifida Roxb) mempunyai
aktivitas sebagai antioksidan yang sangat kuat dibandingkan dengan ekstrak lainnya,
namun hampir sebanding dengan Vitamin C.

Kata Kunci : antioksidan, Bauhinia semibifida Roxb, IC50, AAI

1

PENDAHULUAN
Berkembangnya ilmu pengetahuan dan
teknologi, menyebabkan perubahan pola hidup
masyarakat yang serba dinamis, dimana hal itu
tidak dapat dipisahkan dengan dampak negatif
yang diakibatkannya. Diantaranya semakin
meningkatnya faktor resiko timbulnya berbagai
penyakit. Data WHO (World Health
Organization) tahun 2015 menunjukkan bahwa
beberapa penyakit degeneratif seperti
aterosklerosis, stroke, diabetes mellitus, kanker
dan lainnya termasuk ke dalam sepuluh
penyebab utama kematian manusia di seluruh
dunia. Salah satu pemicu utama penyakit
degeneratif tersebut radikal bebas (WHO,
2017).
Radikal bebas merupakan molekul yang
bersifat reaktif terhadap suatu elektron lain
dikarenakan memiliki elektron tidak
berpasangan pada orbital luarnya sehingga tidak
stabil (Winarsi, 2007). Substansi penting yang
dapat membantu melindungi tubuh dan
mengurangi dampak negatif dari serangan
radikal bebas adalah antioksidan. Jika tubuh
terkena paparan radikal bebas yang berlebih
maka antioksidan eksogen sangat diperlukan
karena tubuh tidak memiliki sistem pertahanan
oksidatif yang cukup (Rohdiana, 2001).
Bauhinia merupakan salah satu
tumbuhan yang dapat tumbuh di daerah tropis
dan subtropis, dan merupakan genus dari famili
Leguminosae yang terdiri dari 300 spesies, di
Indonesia sendiri tumbuhan Bauhinia hanya
terdapat 10 spesies (Heyne, 1987). Berdasarkan
data hasil uji fitokimia tumbuhan Bauhinia
menghasilkan senyawa metabolit sekunder
yakni fenolik yang merupakan senyawa
golongan flavonoid dan stilbenoid. Senyawa
flavonoid dan stilbenoid dilaporkan mempunyai
aktivitas sebagai antikanker, antimalaria,
antidiabetes, antibiotik, antiinflamasi, dan
antioksidan (Boonphong et al., 2007), (Yadava
& Tripathi, 2000). Berdasarkan penelitian yang
Artikel Ilmiah STIFAR Riau
dilakukan oleh (Tanjung and Tjahjandarie,
2014) terdapat dua jenis flavonoid, 6C-7O-
dimethylaromadendrin and phlorizin, yang
berhasil di isolasi dari kulit batang Bauhinia
semibifida L. Beberapa penelitian lainnya
menunjukkan bahwa ekstrak total metanol dari
akar tumbuhan Bauhinia semibifida memiliki
aktivitas antioksidan yang sangat tinggi, dimana
terkandung didalamnya dua senyawa metabolit
sekunder yang dominan, flavonoid dan fenolik,
dengan IC50 6,6247 (Fitmawati et al., 2017).
Ekstrak kulit batang Bauhinia
semibifida Roxb didapat dengan menggunakan
metode maserasi bertingkat, karena berdasarkan
penelitian yang dilakukakan Suzery et al.,
(2010) menunjukkan bahwa metode yang paling
efektif untuk mengekstraksi pigmen antosianin
rosela adalah dengan metode maserasi 25oC
karena memberikan rendemen ekstak dan total
antosianin paling tinggi. Selain menghasilkan
rendemen yang lebih banyak dibandingkan
dengan metode yang ekstrasi yang lain,
maserasi bertingkat juga tidak memerlukan
peralatan khusus, pengerjaan yang sederhana,
dan ekstrak yang didapatkan berbeda menurut
sifat kepolarannya dengan pelarut yang
digunakan. Ekstrak yang didapat akan diuji
dengan menggunakan instrumen microplate
reader (Epoch), karena sensitifitasnya cukup
tinggi, waktu yang diperlukan dalam pengujian
lebih cepat, dapat mendeteksi banyak sampel
secara bersamaan, dan jumlah (volume) sampel
yang digunakan lebih sedikit (Ham & Maham,
2016)
Berdasarkan latar belakang diatas dan
dengan melihat beberapa penelitian tentang
tumbuhan Bauhinia semibifida, maka peneliti
tertarik ingin mengetahui kemampuan aktivitas
antioksidan ekstrak kulit batang pohon bunga
kupu-kupu (Bauhinia semibifida Roxb). Uji
aktivitas dilakukan dengan menggunakan
metode DPPH dan menggunakan alat
microplate reader terhadap ekstrak n-heksan,
2
etil asetat dan metanol. Sebagai pembandingnya
digunakan vitamin C yang secara umum
digunakan sebagai antioksidan.
METODOLOGI PENELITIAN
Bahan dan Alat
Bahan-bahan yang digunakan untuk
penelitian ini adalah simplisia kulit batang
pohon bunga kupu-kupu, n-heksan, etil asetat,
metanol, etanol 70%, kloroform (CHCl3),
kloroform amoniak 0,05N, asam sulfat
(H2SO4) ,pereaksi Mayer, asam klorida (HCl) p,
pereaksi ferri klorida (FeCl3), asam asetat
anhidrat, aquadest, DPPH, vitamin C.
Alat-alat yang digunakan untuk penelitian
yaitu tabung reaksi, pipet tetes, rak tabung, plat
tetes, botol gelap, rotary evaporator, timbangan
analitik, vial, alat-alat gelas, batang pengaduk,
spatel, kertas saring, corong, desikator, pipet
micro (Dragon Med), microplate reader
(Epoch®).
Pengambilan dan Persiapan Sampel
Kulit batang pohon bunga kupu-kupu
(Bauhinia semibifida Roxb) diperoleh dari
KHDTK Bukit Suligi Kabupaten Rokan Hulu.
Kulit batang yang diambil yang tidak terlalu
tua, berwarna coklat batang pada umumnya.
Kulit batang dibersihkan dan dikeringkan,
setelah kering kulit batang dirajang.
Ekstraksi Kulit Batang
Sampel yang telah dihaluskan
selanjutnya diproses secara maserasi bertingkat.
Menurut Hanani (2015) Sampel 2 Kg
dimasukan kedalam botol gelap direndam
dengan pelarut n-heksan selama 3-4 hari 3 kali
pengulangan, lalu ampas hasil maserasi tadi
dimaserasi kembali dengan etil asetat dilakukan
selama 3-4 hari dan dilakukan sebanyak 3 kali
pengulangan sambil sesekali dikocok lalu
ampas hasil maserasi tadi dimaserasi kembali
dengan metanol dengan tiga kali pengulangan.
Proses berlangsung di tempat yang terlindung
dari sinar matahari langsung. Lalu dilakukan
penyaringan sehingga menghasilkan maserat,
selanjutnya masing-masing maserat dipekatkan
dengan menggunakan alat rotary evaporator
sehingga menghasilkan estrak kental n-heksan,
etil asetat dan metanol
Skrining Fitokimia
Pemeriksaan Alkaloid
Sebanyak 0,5 gram ekstrak dimasukkan
dalam tabung reaksi kemudian ditambahkan 2
mL kloroform secukupnya dan 10 mL amonia
lalu ditambahkan 10 tetes H2SO4. Campuran
dikocok dan dibiarkan hingga membentuk 2
lapisan. Lapisan H2SO4 dipindahkan dalam
tabung reaksi dengan volume 2,5 mL. Larutan
diuji dengan pereaksi Meyer. Larutan positif
pada pereaksi Meyer karena adanya endapan
putih.
Pemeriksaan Flavonoid
Sebanyak 0,5 gram ekstrak dimasukkan
dalam tabung reaksi, ditambahkan 5 mL etanol
dan dipanaskan selama 5 menit dalam tabung
reaksi. Selanjutnya ditambahkan 10 tetes HCl
pekat. Kemudian ditambahkan 0,2 gram serbuk
Mg. Adanya flavonoid ditunjukkan oleh
timbulnya warna merah coklat.
Pemeriksaan Fenolik
Sebanyak 0,5 gram ekstrak dimasukkan
dalam tabung reaksi, ditambahkan 5 mL etanol
dan dipanaskan selama 5 menit dalam tabung
reaksi. Selanjutnya ditambahkan 10 tetes FeCl3.
Adanya fenolik ditunjukkan oleh timbulnya
warna ungu sampai biru kehitaman.
Pemeriksaan Saponin
Sebanyak 0,5 gram ekstrak ditambahkan
dengan 10 mL akuades kemudian dikocok kuat
selama kurang lebih 1 menit. Selanjutnya
3
didiamkan diamati buih atau busa yang
terbentuk. Keberadaan senyawa saponin dalam
sampel ditandai dengan terbentuknya buih yang
stabil.
Pemeriksaan Terpenoid
Ekstrak sebanyak 0,5 gram di larutkan
dengan kloroform, lalu ditambahkan dengan
asam asetat anhidrat sebanyak 0,5 ml,
selanjutnya ditambahkan asam sulfat pekat 2 ml
melalui dinding tabung. Adanya senyawa
terpenoid ditandai dengan terbentuknya larutan
berwarna jingga hingga merah tua.
Pembuatan Larutan DPPH
DPPH sebanyak 1 mg dilarutkan dalam
10 mL larutan metanol lalu dikocok hingga
homogen lalu disimpan didalam botol gelap
sehingga didapatkan larutan dengan konsentrasi
100 µg/mL. Kemudian dibuat konsentrasi 40
µg/mL dengan cara dipipet 4 mL larutan induk
DPPH (100 µg/mL) dalam labu ukur 10 mL dan
ditambahkan metanol sampai tanda batas.
Pembuatan Konsentrasi Sampel Uji
Masing-masing ekstrak ditimbang 10
mg dimasukan kedalam 10 ml metanol sehingga
didapatkan larutan induk dengan konsentrasi
1000 µg/mL. pengujian dilakukan dengan 6 seri
konsentrasi 1000; 500; 250; 125; 62,5; 31,25
µg/mL, namun jika tidak ditemukan nilai IC50
maka dilanjutkan pada konsentrasi 250; 125;
62,5; 31,25; 15,6; 7,8 µg/mL, dan jika masih
belum ditemukan nilai IC50 akan dilanjutkan
kembali dengan konsentrasi 50; 25; 12,5; 6,25;
3,125; 1,56 µg/mL. Asam askorbat ditimbang
10 mg dilarutkan dalam 10 ml labu ukur
ditambahkan metanol sampai tanda batas,
sehingga didapatkan konsentrasi 1000 µg/mL,
Pengujian dilakukan 6 seri konsentrasi 100
µg/mL; 50 µg/mL; 25 µg/mL; 12,5 µg/mL; 6,25
µg/mL; dan 3,125 µg/mL dalam larutan
metanol. Masing-masing dilakukan 3 kali
pengulangan.
Pelaksanaan Uji Aktivitas Antioksidan
Uji aktivitas antioksidan dilakukan
menggunakan 96 well plate dengan metode
DPPH (1,1- diphenyl-2- picrylhydrazyl) pada
panjang gelombang 517 nm. Larutan uji
(masing-masing ekstrak) dari kulit batang
pohon bunga kupu-kupu konsentrasi 1000
µg/mL, masing-masing dipipet 100 µl
dimasukkan kedalam sumur baris A pada plate.
Sumur baris B sampai dengan sumur baris F
ditambahkan 50 µl metanol. Sumur baris A
dipipet sebanyak 50 µl dimasukkan kedalam
sumur baris B dilakukan sampai sumur baris F,
sedangkan sumur baris F dipipet 50 µl dan
kemudian dibuang. Pengenceran ini dilakukan
untuk membuat larutan dengan konsentrasi
sumur baris A (1000 µg/mL), sumur B (500
µg/mL), sumur C (250µg/mL), sumur D (125
µg/mL), sumur E (62,5 µg/mL), dan sumur F
(31,25 µg/mL. Larutan DPPH konsentrasi 40
µg/mL dipipet 80 µl dan dimasukkan sumur
baris A sampai sumur baris G. sumur baris G
tidak diisi dengan larutan uji ekstrak, tetapi diisi
dengan 50 µl metanol dan 80 µl larutan DPPH
konsentrasi 40 µg/mL, sementara sumur baris H
hanya diisi dengan metanol sebagai blanko.
Dilakukan perlakuan yang sama untuk larutan
uji asam askorbat pada konsentrasi 100; 50; 25;
12,5; 6,25; 3,125 µg/mL. Selanjutnya
diinkubasi selama 30 menit dan ditutup agar
reaksi sempurna kemudian diukur
absorbansinya pada panjang gelombang 517 nm
dengan microplate reader.
Analisa Data
Data hasil penelitian akan diolah dan
disajikan dalam bentuk tabel. Data dari
uji aktivitas antioksidan dengan
4
 menghitung nilai IC50 dan AAI
(Aktivitas Antioksidan Indeks).Uji
aktivitas antioksidan pada ekstrak kulit
batang pohon bunga kupu-kupu atau
biasa dikenal dengan pohon tapak kuda
().
]HASIL DAN PEMBAHASAN
Penyiapan Sampel
Uji aktivitas antioksidan pada ekstrak
kulit batang pohon bunga kupu-kupu atau biasa
dikenal dengan pohon tapak kuda (Bauhinia
semibifida Roxb) pada daerah terdapatnya
sampel. Pengambilan sampel dilakukan di
Kawasan Hutan dan Tumbuhan Khusus
(KHDTK) Bukit Suligi, Rokan Hulu, Riau.
Bagian tumbuhan yang digunakan adalah kulit
batang pohon, pemilihan ini dikarenakan belum
ada pengujian aktivitas antioksidan terkait
dengan kulit batang pohon bunga kupu-kupu
(Bauhinia semibifida Roxb). Sampel yang telah
didapat selanjutnya disortasi basah, dicuci,
dikeringkan pada suhu ruangan, dirajang,
disortasi kering. Pada sortasi basah sampel
dipisahkan dengan pengotor yang tidak
diperlukan dalam proses pengujian seperti
tanah, lumut, benalu, dan lain-lain. Setelah itu
sampel dicuci dengan menggunakan air
mengalir, lalu sampel dikeringkan pada ruangan
yang terhindar dari cahaya matahari langsung
atau suhu ruangan.
Tujuan pengeringan ini dilakukan untuk
menjaga agar sampel awet, tidak rusak, dan
dapat digunakan atau disimpan dalam jangka
waktu yang relatif lama dengan cara
mengurangi kandungan air pada sampel
sehingga dapat menghentikan reaksi enzimatik
yang memungkinkan terjadinya penguraian
senyawa aktif pada sampel (Hanani, 2015).
Sampel kering yang didapat kemudian
dilakukan sortasi kering sama halnya dengan
sortasi basah untuk memisahkan benda-benda
asing yang tidak dibutuhkan dalam pengujian.
Sampel kering yang didapat sebanyak 4,1 Kg,
lalu sampel dihaluskan. Proses penghalusan
dilakukan bertujuan untuk mempermudah
proses penetrasi pelarut kedalam sel dan
mengoptimalkan proses penarikan senyawa-
senyawa yang terkandung didalam sampel
dengan cara memperluas permukaan sampel
pada saat ekstraksi (Harborne, 1987).
Ekstraksi
Untuk mendapatkan ekstrak dilakukan
penyarian menggunakan metode maserasi
bertingkat. Metode maserasi merupakan teknik
umum yang digunakan untuk mengekstraksi
senyawa dalam tumbuhan yang didapat dari
proses penyarian simplisia tanpa pemanasan.
Metode ini merupakan metode ekstraksi yang
sederhana dengan menggunakan pelarut organik
dengan beberapa kali pengocokan pada
temperatur ruangan, terhindar dari cahaya
matahari langsung selama 3-5 hari. Maserasi
bertingkat menggunakan pelarut n-heksan, etil
asetat, dan metanol. Proses awal penyarian
dengan cara perendaman dilakukan
menggunakan pelarut n-heksan lalu pelarut etil
asetat dan terakhir pelarut metanol dengan 3
kali pengulangan.
Dari hasil ekstrak cair kemudian
dipekatkan untuk menghasilkan ekstrak kental.
Tujuan pemekatan adalah untuk memisahkan
pelarut yang terdapat pada ekstrak cair. Proses
ini menggunakan suhu 500 0C untuk menjaga
senyawa yang tidak tahan terhadap pemanas
(Anonim, 1986). Hasil ekstrak kental n-heksan
5
1,234 g (0,0617%), ekstrak kental etil asetat
10,051 g (0,50%), ekstrak kental metanol
114,778 g (5,738%), dan yang selanjutnya akan
diuji skrining fitokimia.

Uji Skrining Fitokimia

Skrining fitokimia dilakukan untuk
mengetahui kandungan senyawa fitokimia pada
ekstrak kental kulit batang pohon bunga kupu-
kupu (Bauhinia semibifida Roxb) secara
kualitatif. Senyawa fitokimia yang diidentifikasi
meliputi senyawa fenolik, senyawa alkaloid,
senyawa flavonoid, senyawa steroid, senyawa
terpenoid dan senyawa saponin. Hasil pengujian
dari skrining fitokimia sampel segar dan ekstrak

6
 Artikel Ilmiah STIFAR Riau

kulit batang pohon bunga kupu-kupu dapat

dilihat pada tabel 1.

Tabel 1. Hasil Skrining Fitokimia Ekstrak Kulit Batang Bauhinia semibifida Roxb

Hasil Pengamatan
Kandungan Kimia Sampel E. E. Etil
E. Metanol
Segar n- Heksan Asetat
Alkaloid Endapan Endapan Endapan putih
Bening (-)
putih (+) putih (+) (+)
Flavonoid Jingga
Jingga (+) bening (-) Jingga (+)
kemerahan (+)
Fenolik Hijau gelap Hijau gelap
bening (-) Kehitaman (+)
(+) (+)
Saponin Tidak
Buih (+) Buih (+) Buih (+)
berbuih (-)
Steroid Jingga
Abu-abu (-) Coklat (-) Jingga (-)
kecoklatan (-)
Terpenoid Jingga
Jingga
kemerahan Jingga (+) Jinggga (+)
(-)
(+)

Pengujian skrining fitokimia dilakukan
untuk mengetahui adanya metabolit sekunder
yang terkandung pada kulit batang. Data
menunjukkan bahwa tumbuhan Bauhinia
Uji Aktivitas Antioksidan Dengan Metode
DPPH (1,1-Difenil-2-Picrylhidrazil)
Metoda yang digunakan dalam pengujian
aktivitas antioksidan adalah metoda serapan
Adanya aktivitas antioksidan dari sampel
mengakibatkan perubahan warna pada larutan
DPPH dalam metanol yang semula berwarna
violet pekat menjadi kuning pucat (Permana,
2003). Perubahan warna ini terjadi karena DPPH
mengalami reduksi sehingga menyebabkan
elektron menjadi berpasangan. Perubahan ini akan
memberikan perubahan absorbansi pada panjang
gelombang maksimum DPPH sehingga diketahui
adanya aktivitas peredaman radikal bebas yang
dinyatakan dengan nilai IC50 (Inhibitory
radikal DPPH karena merupakan metoda yang
sederhana, mudah, dan menggunakan sampel
dalam jumlah yang sedikit dengan waktu yang
konsentrasi yang dapat meredam 50% aktivitas
DPPH (Molyneux, 2004). Ketiadaan standarisasi
hasil pengujian metode ini menyulitkan untuk
membandingkan kemampuan dan kekuatan
antioksidan dari ekstrak maupun senyawa murni.
Activity Antioxidant Index (AAI) merupakan
salah satu metode untuk menstandarisasi hasil
pengujian antioksidan berdasarkan metode DPPH.
Penelitian ini dilakukan untuk menentukan
kemampuan aktivitas antioksidan ekstrak kulit
batang tumbuhan Bauhinia semibifida Roxb
berdasarkan AAI (Vasić et al., 2012)
Molyneux (2004) menyatakan bahwa suatu
zat mempunyai sifat antioksidan bila nilai IC50
kurang dari 200 µg/mL. Bila nilai IC 50 yang

7
 Concentration). diperoleh berkisar antara 200-1000 µg/mL, maka
Pada pengujian ini menggunakan metanol zat tersebut kurang aktif namun masih berpotensi
sebagai pelarut, karena DPPH stabil dalam sebagai zat antioksidan. Adanya aktivitas
metanol dan dapat menarik senyawa yang dapat antioksidan dari sampel menmgakibatkan
beraktivitas sebagai antioksidan. Sehingga zat perubahan warna pada larutan DPPH dalam
yang larut dalam metanol saja yang dapat terlibat metanol yang semula berwarna violet pekat
dalam proses penangkapan radikal bebas (Marxen menjadi kuning pucat. Perubahan warna ini akan
et al., 2007). Pengukuran aktivitas antioksidan memberikan perubahan absorbansi pada panjang
sampel dilakukan pada panjang gelombang 517 gelombang maksimum DPPH sehingg diketahui
nm karena penangkapan radikal DPPH diikuti adanya aktivitas peredaman radikal bebas yang
oleh penurunan serapan pada panjang gelombang dinyatakan dengan nilai IC50 (Inhibition
515–517 nm. Pada pengujian ini menggunakan Concentration). Hasil pengujian aktivitas
microplate reader karena instrumen ini dapat antioksidan ekstrak kulit batang pohon bunga
mendeteksi banyak sampel dalam waktu yang kupu-kupu (Bauhinia semibifida Roxb) dapat
bersamaan, waktu yang diperlukan lebih cepat, dilihat pada tabel 2.
dan jumlah sampel yang digunakan lebih sedikit.
Parameter analisa data untuk menginterpretasikan Adanya aktivitas antioksidan dari sampel
hasil dari uji aktivitas antioksidan dengan metode mengakibatkan perubahan warna pada larutan
DPPH adalah dengan nilai inhibition DPPH dalam metanol yang semula berwarna
concentration (IC50). violet pekat menjadi kuning pucat (Permana,
Tabel 2.Adanya aktivitas aktivitas
Hasil pengujian antioksidan dari sampel
antioksidan 2003).
ekstrak Perubahan
kulit warnabunga
batang pohon ini terjadi karena DPPH
kupu-kupu
mengakibatkan perubahan warna
(Bauhinia semibifida Roxb) pada larutan mengalami reduksi sehingga menyebabkan
DPPH dalam metanol yang semula berwarna elektron menjadi berpasangan. Perubahan ini akan
violet pekat menjadi kuning pucat (Permana, memberikan perubahan absorbansi pada panjang
2003). Perubahan warna ini terjadi karena DPPH gelombang maksimum DPPH sehingga diketahui
mengalami reduksi sehingga menyebabkan adanya aktivitas peredaman radikal bebas yang
elektron menjadi berpasangan. Perubahan ini akan dinyatakan dengan nilai IC50 (Inhibitory
memberikan perubahan absorbansi pada panjang Concentration).Adanya aktivitas antioksidan dari
gelombang maksimum DPPH sehingga diketahui sampel mengakibatkan perubahan warna pada
adanya aktivitas peredaman radikal bebas yang larutan DPPH dalam metanol yang semula
dinyatakan dengan nilai IC50 (Inhibitory Concent berwarna violet pekat menjadi kuning pucat
Adanya aktivitas antioksidan dari sampel (Permana, 2003). Perubahan warna ini terjadi
mengakibatkan perubahan warna pada larutan karena DPPH mengalami reduksi sehingga
DPPH dalam metanol yang semula berwarna menyebabkan elektron menjadi berpasangan.
violet pekat menjadi kuning pucat (Permana, Perubahan ini akan memberikan perubahan
2003). Perubahan warna ini terjadi karena DPPH absorbansi pada panjang gelombang maksimum
mengalami reduksi sehingga menyebabkan DPPH sehingga diketahui adanya aktivitas
elektron menjadi berpasangan. Perubahan ini akan peredaman radikal bebas yang dinyatakan dengan
memberikan perubahan absorbansi pada panjang nilai IC50 (Inhibitory Concentration).
gelombang maksimum DPPH sehingga diketahui
adanya aktivitas peredaman radikal bebas yang
dinyatakan dengan nilai IC50 (Inhibitory Adanya
aktivitas antioksidan dari sampel mengakibatkan

8
perubahan warna pada larutan DPPH dalam
metanol yang semula berwarna violet pekat
menjadi kuning pucat (Permana, 2003). Perubahan
warna ini terjadi karena DPPH mengalami reduksi
sehingga menyebabkan elektron menjadi
berpasangan. Perubahan ini akan memberikan
perubahan absorbansi pada panjang gelombang
maksimum DPPH sehingga diketahui adanya
aktivitas peredaman radikal bebas yang
dinyatakan dengan nilai IC50 (Inhibitory
Concentration).

Kekuatan
Ekstrak IC50 AAI
Antioksidan

n-Heksan 137 µg/mL < 0,5 Lemah

Etil Asetat 30,151 µg/mL 1,32 Kuat

Metanol 16 µg/mL 2,5 Sangat kuat

Vitamin C 4 µg/mL 10 Sangat kuat

9
 Pada tabel diatas menunjukkan bahwa dengan nilai AAI yang sangat kuat sebesar 10.
ekstrak metanol yang memilki aktivitas ???????Pengujianil
antioksidan yang paling kuat dibandingkan
dengan ekstrak lainnya, dan hampir sama DAFTAR PUSTAKA
dengan vitamin C, Prior et al (2005) Boonphong, S., Puangsombat, P., Baramee, A.,
menjelaskan bahwa metanol adalah senyawa Mahidol, C., Ruchirawat, S., & Kittakoop,
polar yang mudah memposisikan atom hidrogen P. 2007. Bioactive compounds from
dari suatu senyawa atau gugus hidroksil untuk Bauhinia purpurea possessing
membentuk ikatan hidrogen karena adanya antimalarial, antimycobacterial,
ikatan ini akan memudahkan perpindahan antifungal, anti-inflammatory, and
proton (atom hidrogen antioksidan) ke radikal cytotoxic activities. Journal of Natural
bebas. Products, 70(5), 795–801.
Fitmawati, F., Sofiyanti, N., Roza, R. M.,
KESIMPULAN Isnaini, I., Irawan, Y. R., Winata, D. R., &
Hasil penelitian aktivitas antioksidan yang Dewi, A. P. K. 2017. Antioxidant Activity
dilakukan terhadap ekstrak kulit batang pohon of Dominant Plants Species in Obat Pahit
bunga kupu-kupu (Bauhinia semibifida Roxb) from Lingga Malay Ethnic in Riau
mengunakan microplate reader pada panjang Archipelago. Biosaintifika: Journal of
gelombang 517 nm. Ekstrak n-heksan kulit Biology & Biology Education, 9(2), 325–
batang pohon bunga kupu-kupu (Bauhinia 331.
semibifida Roxb) memiliki aktivitas antioksidan
yang lemah dibandingkan dengan ekstrak etil Ham, B. M., & Maham, A. 2016. Analytical
asetat kulit batang pohon bunga kupu-kupu Chemistry : A Chemist And Laboratory
(Bauhinia semibifida Roxb) yang memiliki Technician’s Toolkit. Canada: John Wiley.
aktivitas antioksidan yang kuat, namun ekstrak Hanani, E. 2015. Analisis Fitokimia. (T. D.
metanol kulit batang pohon bunga kupu-kupu Hadinata & A. Hanif, Ed.). Jakarta: EGC.
(Bauhinia semibifida Roxb) memiliki aktivitas
antioksidan yang sangat kuat yang kekuatan nya Harborne, J. B. 1987. Metode fitokimia:
hampir sama dengan Vitamin C sebagai kontrol Petunjuk cara modern menganalisis
positif yang memiliki aktivitas antioksidan yang tumbuhan. Bandung: ITB.
sangat kuat. 82%) dengan nilai IC50 0,028 Heyne, K. 1987. Tumbuhan Berguna Indonesia.
kategori sangat kuat dan nilai AAI > 2 kategori (Badan Penelitian dan Pengembangan
sangtuan persen inhibisiks (72%), 31,25 ppm Kehutanan, Ed.) (3 ed.). Jakarta:
(52%), 15,6 ppm (34%), 7,8 ppm (24%) dengan Departemen Kesehatan RI.
nilaiI), 125 ppm (85%), 62,5 ppm (87%), 31,25
Marxen, K., Vanselow, K. H., Lippemeier, S.,
(78%) dengan nilai IC50 0,024 kategori sangat
Hintze, R., Ruser, A., & Hansen, U. 2007.
kuat dan nilai AAI > 2 kategori sangat kuat.
Determination of DPPH Radical
Hasil penentuan persen inhibisi ekstrak
Oxidation Caused by Methanolic
manvitamin C didapatkan hasil yaitu 100 ppm
Ekstracts of Some Microalgal Species by
(96%), 50 ppm (88%), 25 ppm (78%), 12,5 ppm
Linear Regression Analysis of
(67%), 6.25 ppm (57%), 3,125 ppm (46%)
Spectrophotometric Measurements.
dengan nilai IC50 sangat kuat sebesar 4 ppm
Sensor, 7(10), 2080–2095.
Molyneux, P. 2004. The Use of the Stable Free
Radical Diphenylpicryl-hydrazyl (DPPH)
for Estimating Antioxidant Activity.
Songklanakarin Journal of Science and
Technology, 26(2), 211–219.
Prior, R., Wu, X., & Kschaich, K. 2005.
Standardized methods for the
determination of antioxidant capacity and
phenolics in foods and dietary
supplements. Journal of Agricultural and
Food Chemistry, 53(10), 4290–4302.
Rohdiana, D. 2001. Aktivitas Daya Tangkap
Radikal Polifenol Dalam Daun Teh.
majalah jurnal Indonesia, 12 (1), 53-58.
Suzery, M., Lestari, S., & Cahyono, B. 2010.
Penentuan Total Antosianin Dari Kelopak
Bunga Rosela (Hibiscus sabdariffa L)
Dengan Metode Maserasi dan
Sokshletasi. Jurnal Sains dan
Metematika, 18(1), 1–6.
Tanjung, M., & Tjahjandarie, T. S. 2014.
Flavonoids from the stem bark of
Bauhinia semibifida L. Der Pharmacia
Lettre, 6(6), 434–438.
Vasić, S. M., Stefanović, O. D., Ličina, B. Z.,
Radojević, I. D., & Čomić, L. R. 2012.
Biological activities of extracts from
cultivated granadilla Passiflora alata.
EXCLI Journal, 11, 208–218.
WHO. 2017. The Top 10 Causes Of The Death
Worldwide 2000 and 2015. Diambil dari
http://www.who.int/mediacentre/factsheet
s/fs310/en
Winarsi, H. 2007. Antioksidan Alami dan
Radikal Bebas. Kansius : Yogyakarta.
Yadava, R. N., & Tripathi, P. 2000. A novel
flavone glycoside from the stem of
Bauhinia purpurea. Fitoterapia, 71(1),
88–90.