DETERMINACION DE PROTEINAS TOTALES

COMPETENCIA:

1. Conocer la importancia de las proteínas plasmáticas.

2. Conocer la importancia nutricional de las proteínas y aminoácidos.
3. Manejar la técnica de cuantificación de proteínas totales y fraccionadas en suero humano
e interpretar los resultados correctamente.
4. Diagnosticar problemas nutricionales, enfermedad renal o hepática.
5. Determinar niveles de proteína en la sangre.

MARCO TEORICO:

Las proteínas son compuestos orgánicos macromoleculares, ampliamente distribuidos en el

organismo, esenciales para la vida. Actúan como elementos estructurales y de transporte y
aparecen bajo la forma de enzimas, hormonas, anticuerpos, factores de coagulación, etc. En el
plasma las proteínas contribuyen a mantener el volumen del fluido circulante, transporta
sustancias relativamente insolubles y actúan en la inactivación de compuestos tóxicos y en la
defensa contra agentes invasores. La determinación de proteínas totales es útil para el monitoreo
de cambios ocasionados por diversos estados de enfermedad. En condiciones patológicas como
perdidas renales, desnutrición, infecciones prolongadas, etc., suelen presentarse
hipoproteinemias, mientras que en otras como mieloma múltiple, endocarditis bacteriana y
hemoconcetración de diversos orígenes, se observan hiperproteinemas.

Los enlaces peptídicos de las proteínas reaccionan con el ion cúprico en medio alcalino, para dar
un complejo color violeta con máximo de absorción a 540 nm, cuya intensidad es proporcional a la
concentración de proteínas totales en la muestra.

MATERIAL REQUERIDO:

 Espectrofotómetro o fotocolorímetro.- Estos son equipos utilizados en el Laboratorio para

el análisis de muestras fisiológicas, basándose en el principio que cada compuesto químico
absorbe o emite energía lumínica de diferente longitud de onda. Esta longitud puede estar
en el espectro de luz visible, o en otra parte del espectro electromagnético.
 Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados.- Las pipetas son un
instrumento volumétrico de laboratorio que permite medir la alícuota de líquido con
bastante precisión. Las pipetas suelen fabricarse de vidrio. Disponen de un tubo
transparente que termina en una de sus puntas de forma cónica, y de una graduación (una
serie de marcas grabadas) para indicar distintos volúmenes. Algunos modelos de pipetas
son graduados o de simple aforo. Esto significa que se enrasan una vez en los cero
mililitros, y luego se deja vaciar hasta el volumen que se necesite. Otros modelos de
pipetas, las denominadas de doble enrase o de doble aforo, se enrasan en la marca o
aforo superior y se dejan escurrir el líquido con precaución hasta enrasar en el aforo
inferior.

 Tubos o cubetas espectrofotométricas.

  Baño de agua a 37°C.

 Reloj o timer.

CONDICIONES DE REACCION:

Longitud de onda: 540nm en espectrofotómetro o en foto colorímetro con filtro verde (520-560
nm)

Temperatura de reacción: 37 °C.

Tiempo de reacción: 15 minutos.

Volumen de muestra: 20 ul.

Volumen de reactivo A: 2.0ml.

Volumen final de reacción: 2.02ml.

PROCEDIMIENTO:
CALCULO DE RESULTADOS:

Factor= concentración del standard (g/dl)

Absorbancia del estándar:

Proteínas totales (g/dl)=factor x absorbancia desconocida

PT = F x A As=0.201

F= 4.7 g/dl = 23.38

A1 = 0.295 x 23.38 =6.89 g/dl

INTERPRETACIÓN:

 El nivel de proteínas totales es normal, no se encuentra ninguna alteración. 6.89 es un

resultado óptimo equilibrado.
 Se puede considerar que su alimentación es adecuada.

VALORES NORMALES DE REFERENCIA:

 Proteínas totales: 6.1 a 7.9 g/dl.

PROTEINAS TOTALES ELEVADAS Y BAJAS

Los valores altos de albumina (hiperalbunemia) son raros y suelen deberse a deshidratación.
Puede producirse por sudoración excesiva y ejercicio intenso prolongado. Entre sus síntomas
destacan náuseas y vómitos.

Los valores altos de globulinas se producen en situaciones y enfermedades que pueden ser graves:

 Enfermedades y cánceres sanguíneos: melanoma múltiple, linfoma de Hodgkin, leucemia,

macroglobulinemia, anemia hemolítica.
 Enfermedades autoinmunes: artritis reumatoide, lupus, sarcoidosis, hepatitis autoinmune.
 Enfermedades infecciosas: tuberculosis, VIH.
 Enfermedades renales.
 Enfermedades hepáticas.

Los valores bajos de globulinas son raros y en algunos casos se relacionan con inmunodeficiencias.
Se pueden deber a causas como:

 Malnutrición y deficiencia proteica.

 Enfermedades renales.
 Enfermedades hepáticas.
 Enfermedades autoinmunes.
 Problemas digestivos: malabsorción intestinal, enfermedad de Cronhn, enfermedad
celiaca.
 Diabetes no controlada.
 Hipertiroidismo.
 Fallo cardiaco o del sistema circulatorio.
 Intoxicación hídrica.
 DETERMINACION DE ALBUMINAS

COMPETENCIA:

1. Analizar la importancia que tiene la albumina.

2. Conocer los valores normales de albumina.
3. Interpretar los valores obtenidos.

MARCO TEORICO:

Las proteínas son compuestos orgánicos macromoleculares, ampliamente distribuidos en el

organismo, esenciales para la vida. La albúmina es la proteína más abundante en la sangre. Es
fabricada por el hígado pero también la proporcionan ciertos alimentos, especialmente la leche y
los huevos. La albúmina desempeña una gran variedad de funciones que hacen que sea esencial
para el organismo. De hecho, es necesaria, entre otras cosas, para la buena distribución de los
líquidos entre las diferentes estructuras: los vasos sanguíneos, los tejidos y el espacio entre ellos
llamado espacio intersticial. También transporta algunas hormonas, los ácidos grasos y la
bilirrubina. En la sangre, la tasa de albúmina o albuminemia disminuye en caso de malnutrición o
de síndrome nefrótico, enfermedad renal que es responsable de la filtración de proteínas por la
orina.

La concentración normal en la sangre humana oscila entre 3,5 y 5,0 gramos por decilitro, supone
un 54,31 % de la proteína plasmática. El resto de proteínas presentes en el plasma se llaman en
conjunto globulinas. La albúmina es fundamental para el mantenimiento de la presión oncótica,
necesaria para la distribución correcta de los líquidos corporales entre el compartimento
intravascular y el extravascular, localizado entre los tejidos. La albúmina tiene carga eléctrica
negativa. La membrana basal del glomérulo renal, también está cargada negativamente, lo que
impide la filtración glomerular de la albúmina a la orina. En el síndrome nefrótico, esta propiedad
es menor, y se pierde gran cantidad de albúmina por la orina.

MATERIAL REQUERIDO:

 Espectrofotómetro o fotocolorímetro.- Estos son equipos utilizados en el Laboratorio para

el análisis de muestras fisiológicas, basándose en el principio que cada compuesto químico
absorbe o emite energía lumínica de diferente longitud de onda. Esta longitud puede estar
en el espectro de luz visible, o en otra parte del espectro electromagnético.
 Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados.- Las pipetas son un
instrumento volumétrico de laboratorio que permite medir la alícuota de líquido con
bastante precisión. Las pipetas suelen fabricarse de vidrio. Disponen de un tubo
transparente que termina en una de sus puntas de forma cónica, y de una graduación (una
serie de marcas grabadas) para indicar distintos volúmenes. Algunos modelos de pipetas
son graduados o de simple aforo. Esto significa que se enrasan una vez en los cero
mililitros, y luego se deja vaciar hasta el volumen que se necesite. Otros modelos de
pipetas, las denominadas de doble enrase o de doble aforo, se enrasan en la marca o
aforo superior y se dejan escurrir el líquido con precaución hasta enrasar en el aforo
inferior.

 Tubos o cubetas espectrofotométricas de caras paralelas.

 Reloj o timer.
PROCEDIMIENTO:

CALCULO DE RESULTADOS:

Albumina (g/dl)=Factor(25.4 g/dl) x absorbancia desconocida.

F= 3.1 = 12.81

0.242

Ast.:0.242

A1: 0.422 x 12.81= 5.40gr/dl

INTERPRETACIÓN:

 Se considera de los valores de esta persona exceden al rango de normalidad. Por lo tanto
se puede considerar que tiene una deshidratación severa o básicamente ha tenido la
perdida de líquidos corporales.

VALORES NORMALES DE REFERENCIA:

 Se obtuvieron los siguientes rangos:

Albumina: 3.5 a 4.8 g/dl.

ALBUMINAS ELEVADAS Y BAJAS

Elevadas.- una de las principales razones detrás de altos niveles de albuminas en la sangre es la
deshidratación severa y esta puede ocurrir debido a la ingesta inadecuada de agua, o perdida de
líquidos debido a vómitos severos o diarrea.
Así, los niveles de albumina sérica pudiesen elevarse en individuos afectados por enfermedades
que causan deshidratación.

Aunque la deshidratación en realidad no hace que los niveles de proteína aumenten, la perdida de
agua hace que la sangre espese, lo que a su vez produce que los componentes de la sangre se
concentren.

Bajas.- la hipoalbuminemia es un déficit de albúmina en la sangre, que se ve con mayor frecuencia

en pacientes mayores.

Existen muchas causas de niveles bajos de albumina sérica, estas causas pueden incluir:

 Estado nutricional deficiente: no ha estado ingiriendo la cantidad suficiente de proteínas o

puede estar perdiendo proteínas, por lo general durante un periodo de enfermedad.
 Aumento de la excreción de albumina de su cuerpo a causa de :
 Disfunción renal es posible que sus riñones no trabajen bien debido a distintas
condiciones y puede estar perdiendo albumina en la orina, causando
hipoalbuminemia.
 Ciertas condiciones cardiacas: como la insuficiencia cardiaca congestiva o
pericarditis pueden causar niveles bajos de albumina en la sangre.
 Problema con el estómago.
 Los efectos secundarios de los medicamentos pueden provocar hipoalbuminemia.
 DETERMINACION DE GLICERINA

COMPETENCIA:

1. Conoce las condiciones para la toma de muestra.

2. Actualizar los valores normales de glucosa en sangre y su implicancia en la diabetes
mellitus.
3. Aprende los cuidados nutricionales del diabético

MARCO TEORICO:

La patología más común relacionada con el metabolismo de los hidratos de carbono es la diabetes
mellitus. El diagnostico precoz y el control de los pacientes diabéticos, tienen por objeto evitar la
cetoacidosis y las complicaciones de los síntomas resultantes de la hiperglicerina mediante el
tratamiento adecuado. Dado que existen múltiples factores causales de híper o hipoglicemia, debe
considerarse en cada caso la condición fisiológica y/o la patología presente en el paciente en
cuestión.

MATERIAL REQUERIDO:

 Espectrofotómetro o fotocolorímetro.- Estos son equipos utilizados en el Laboratorio para

el análisis de muestras fisiológicas, basándose en el principio que cada compuesto químico
absorbe o emite energía lumínica de diferente longitud de onda. Esta longitud puede estar
en el espectro de luz visible, o en otra parte del espectro electromagnético.
 Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados.- Las pipetas son un
instrumento volumétrico de laboratorio que permite medir la alícuota de líquido con
bastante precisión. Las pipetas suelen fabricarse de vidrio. Disponen de un tubo
transparente que termina en una de sus puntas de forma cónica, y de una graduación (una
serie de marcas grabadas) para indicar distintos volúmenes. Algunos modelos de pipetas
son graduados o de simple aforo. Esto significa que se enrasan una vez en los cero
mililitros, y luego se deja vaciar hasta el volumen que se necesite. Otros modelos de
pipetas, las denominadas de doble enrase o de doble aforo, se enrasan en la marca o
aforo superior y se dejan escurrir el líquido con precaución hasta enrasar en el aforo
inferior.

 Tubos o cubetas espectrofotométricas de caras paralelas.

 Reloj o timer.
PROCEDIMIENTO:

CALCULO DE RESULTADOS:

G= Factor de absorbancia.

F= (1gr/dl) / 0.291

F= 3.44 gr/dl

St= 0.291

D1: 0.235 x 3.44 gr/dl = 0.81 gr/dl

INTERPRETACION

 Su porcentaje es el adecuado ya que se encuentra dentro del rango normal. Se puede ver
que tiene un consumo adecuado de glucosa.

VALORES NORMALES DE REFERENCIA

 Suero o plasma: 0.74 – 1.06 g/l.

GLUCEMIA ELEVADA Y BAJA

La hiperglicemia es el exceso de azúcar (glucosa) en la sangre. El sistema endocrino regula la

cantidad de azúcar que se almacena y utiliza para energía, necesaria para el funcionamiento de las
células.
El azúcar que se consume en una dieta se utiliza o almacena, pero ciertas condiciones y trastornos
pueden causar que haya dificultad para procesar y almacenar la glucosa, lo que puede resultar en
hiperglicemia o hipoglicemia.

Una hormona importante para el almacenamiento y procesamiento normal del azúcar es la

insulina. La insulina es una hormona que produce el páncreas y es responsable de mantener los
niveles "normales" de azúcar en sangre. Si hay un problema en el páncreas, es posible que los
niveles de azúcar en sangre sean altos.

Los niveles normales de glucosa (azúcar) en sangre son de 60 a 110 mg/dL. Los valores normales
pueden variar según el laboratorio. Niveles por encima de estos pueden indicar hiperglicemia.

Las causas de la hiperglicemia pueden incluir:

Diabetes. Cerca del 90% de las personas pueden desarrollar diabetes al llegar a la vida adulta
(diabetes tipo 2). Hay más riesgo de desarrollar diabetes con la edad, si se tiene sobrepeso (ser
obeso), si hay historia familiar de diabetes (padres, hijos) y ser descendiente de afroamericanos,
hispanoamericanos o indios americanos. Las personas con diabetes tienen una baja producción de
la hormona insulina, que disminuye los niveles de azúcar en sangre. Si tiene diabetes, tendrá
problemas con niveles elevados de azúcar en sangre.

Si desarrolla diabetes tipo 2 y es adulto, el médico podrá prescribir medicamentos en píldoras que
permiten que el cuerpo produzca la insulina necesaria para mantener niveles "normales" de
glucosa en sangre. Es probable que el páncreas esté produciendo suficiente insulina, pero que el
organismo sea resistente a la insulina e incapaz de procesar esa hormona de manera efectiva,
resultando así en hiperglicemia.

Si tiene diabetes y está hipoglicémico, su médico también le tratará para aumentar los niveles de
azúcar en sangre. Deberá seguir una dieta especial para mantener un buen control de su azúcar en
sangre.

Se recomienda realizar ejercicio, ya que ayuda a disminuir los niveles de azúcar y a promover la
circulación de la sangre por todo el cuerpo.

La hipoglucemia, también conocida como bajo nivel de glucosa o de azúcar en la sangre, ocurre
cuando el nivel de glucosa en la sangre cae por debajo de lo normal. Para muchas personas con
diabetes, eso se refiere a un nivel de 70 miligramos por decilitro (mg/dL) o menos. Sus números
pueden ser diferentes, así que hágase un chequeo con médico para encontrar qué nivel es muy
bajo para usted.

Los síntomas de la hipoglucemia tienden a aparecer con rapidez y pueden variar de una persona a
otra. Puede tener uno o más síntomas enumerados en el siguiente cuadro y pueden ser de leves a
moderados. Algunas personas no sienten ningún síntoma.
La hipoglucemia severa es cuando tu nivel de glucosa en la sangre baja tanto que no puede
aplicarse el tratamiento por sí mismo y necesita ayuda de otra persona. Esta hipoglucemia es
peligrosa y necesita ser tratada de inmediato. Esta condición es más común en personas con
diabetes tipo 1.

Algunos síntomas de hipoglucemia durante el sueño son

 Llorar o tener pesadillas

 Sudar hasta que su pijama o sábanas se pongan húmedas
 Sentirse cansado, irritable, o confundido después de levantarse
 TRABAJO DE BIOQUIMICA LABORATORIO

1. Que es la glucolisis y qué importancia tiene.

2. Cuáles son los productos intermedios de la glucolisis que posteriormente servirán para
otras vías.
3. Como entra la glucosa en el organismo Diferencie Glut y SGLUT

4. Cuáles son los destinos del Piruvato

5. Como se degrada la galactosa, fructuosa y manosa.

6. Indique las rutas metabólicas de la glucosa.

7. Que es el síndrome metabólico, factores de riesgo, síntomas y tratamiento.

8. Explique “resistencia a la insulina” y “tolerancia a la insulina”