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Informe N° 12 Extracción de colesterol del cerebro

1.0.- INTRODUCCIÓN

Los triacilgliceroles son la forma más importante de almacenamiento de


energía en los animales. Este tipo de almacenamiento presenta sus ventajas, al
oxidarse el C de los AG producen más ATP que cualquier otra forma de C,
además, los lípidos están menos hidratados que los polisacáridos, por lo que
ocupan menos espacio. Los AG se incorporan a las membranas celulares. El
principal órgano de interconversión y metabolismo de lípidos es el hígado.
Además de ser una fuente de energía los ácidos grasos cumplen otras funciones
como por ejemplo el colesterol que es un esterol que se encuentra en los tejidos
corporales y en el plasma sanguíneo de los vertebrados. Se presenta en altas
concentraciones en el hígado, médula espinal, páncreas y cerebro. Pese a tener
consecuencias perjudiciales en altas concentraciones, es esencial en los
animales superiores para la formación de membranas celulares, necesario para
la síntesis de hormonas, síntesis de vitaminas y ácidos biliares.

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2.0.- PARTE TEORICA

2.1.- METABOLISMO DE LÍPIDOS

Los ácidos grasos (AG) son los componentes principales de los lípidos complejos
(triacilgliceroles, fosfolípidos). Los triacilgliceroles son la forma más importante
de almacenamiento de energía en los animales. Este tipo de almacenamiento
presenta sus ventajas, al oxidarse el C de los AG producen más ATP que
cualquier otra forma de C, además, los lípidos están menos hidratados que los
polisacáridos, por lo que ocupan menos espacio. Los AG se incorporan a las
membranas celulares. El principal órgano de interconversión y metabolismo de
lípidos es el hígado.

2.2.- EL COLESTEROL

Es un esterol que se encuentra en los tejidos corporales y en el plasma


sanguíneo de los vertebrados. Se presenta en altas concentraciones en el
hígado, médula espinal, páncreas y cerebro. Pese a tener consecuencias
perjudiciales en altas concentraciones, es esencial en los animales superiores
para la formación de membranas celulares, necesario para la síntesis de
hormonas, síntesis de vitaminas y ácidos biliares

El colesterol, 3β-hidroxi-5,6-colesteno, tiene una estructura de ciclopentano-


perhidrofenantreno que se caracteriza por presentar un grupo hidroxilo en el
carbono 3 del anillo esterano, un doble enlace entre los carbonos 5 y 6 y una
cadena lateral de 8 átomos de carbono anclada en el carbono 17. Así, el
colesterol es una molécula tan hidrófoba que la solubilidad de colesterol libre
en agua es de 10-8 M y, al igual que los otros lípidos, es bastante soluble en
disolventes no polares como el cloroformo (CHCl3).

El colesterol por acción de agentes deshidratantes como el ácido sulfúrico y


anhídrido acético se transforma en colesterileno, compuesto de dobles enlaces
conjugados que dan complejos intensamente coloreados.

Reacción de Hager-Salkowski.- Si a una disolución de colesterol en


cloroformo se le añade un volumen idéntico de ácido sulfúrico concentrado, en
la interfase aparece un anillo coloreado y agitando se observa la disolución
clorofórmica que se tiñe de rojo intenso y el ácido sulfúrico de verde. Esta

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reacción no es específica del colesterol y otros esteroles producen el mismo


efecto.

Reacción de Liebermann-Buchard.- A una solución de colesterol en


cloroformo se le agrega unas gotas de anhídrido acético y varias gotas de ácido
sulfúrico concentrado. Al agitar la mezcla se torna de color violeta, pasa a azul
y finalmente al verde. La reacción es común a otros esteroles

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3.0.- DETALLES EXPERIMENTALES

3.1.- MATERIALES Y REACTIOS

MATERIALES:

 Gradilla
 Tubos de ensayo
 Gotero
 Estufa
 Mortero
 Lamina de vidrio
 Espátula de madera
 Embudo de vidrio
 Papel filtro
 Pipetas de 10 mL
 Vasos de Precipitado.
 Bagueta

REACTIVOS:

 Cloroformo
 Sulfato de calcio en polvo
 Ácido sulfurico concentrado
 Anhidrido acetico
 Mezcla de formalina conn ácido sulfurico

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3.2.- PROCEDIMIENTO

3.2.1.-Curso de determinación

Se molió cuidadosamente en un mortero de 3 g de cerebro con cantidad doble de


yeso. Se homogenizo la mezcla, luego se colocó sobre una lámina de vidrio y se
puso a secar en la estufa. Una vez seca la muestra, se le raspo sobre la lámina
y con la ayuda de un pequeño cuchillo se le pasó una pequeña muestra de polvo
seco a un tubo de ensayo seco, se le añadió un mismo volumen de cloroformo, se
agito durante unos minutos. Luego se filtro el extracto clorofórmico obtenido en
un tobo de ensayo seco a través de un papel filtro también seco.

Figura N01:Proceso en el que se agrega la muestra molida sobre la lámina de


vidrio.

3.2.2.- Reacción de Guppert-Salkowski

En un tubo se tomó 1 mL del extracto clorofórmico del cerebro y


cuidadosamente, se le vertió ácido sulfúrico concentrado luego se le agito un
poco. Apareciendo un anillo de color líquido de color rojo, que luego se difunde
en todo el líquido. De forma análoga se procedió para el aceite, solo que en este
caso se le adiciono directamente.

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Figura N02:En la figura se observa la formación del anillo rojo, característico


de la reacción de Guppert-Salkowski.

3.2.3.- Reacción de Lieberman-Buchard

En un tubo de ensayo seco se le agrego un poco del extracto clorofórmico y se le


añadió 10 gotas de anhídrido acético y dos gotas de ácido sulfúrico. Apareció un
color rojo paulatinamente pasa a verde. De forma análoga se procede para el
aceite y como en el caso anterior se realiza directamente.

Figura N0 3: En la figura se observa la transición de color de rojo a verde,


característico de la reacción de Lieberman-Buchard.

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Resultados:

 En la reacción de Guppert-Salkowski (tanto para el cerebro como para el


aceite vegetal) aparece el anillo de color rojo y mientras pasa el tiempo la
solución también se torna roja (fig.2).

Fig.4

 En la reacción de Lieberman –Buchard(tanto para el cerebro como para el


aceite vegetal) aparece al comienzo una coloración roja; la cual comienza a
tomar matices de color verde conforme transcurre el tiempo (fig.3).

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4.0.- DISCUSIÓN DE RESULTADOS

 En la reacción de Guppert – Salkowski los resultados fueron los esperados


ya que se obtiene una solución roja, lo cual indica la formación de
colesterileno.

 En la reacción de Liebermann – Buchard los resultados también fueron los


esperados; ya que, en un inicio se forma la coloración roja la cual conforme
pasa el tiempo se vuelve verde. Esto indica la formación de bicolestadieno

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5.0.- CONCLUSIONES

 La reacción de Guppert – Salkowski se fundamenta en la deshidratación de


alcoholes por acción del ácido sulfúrico concentrado formando un alqueno,
en el caso del colesterol la deshidratación de su grupo alcohólico da como
resultado la formación de un colesterileno compuesto que posee una
coloración roja.

 La reacción de Liebermann – Buchard tiene lugar en un medio ácido fuerte


(ácido sulfúrico). La etapa inicial del proceso consiste en la protonación del
grupo hidroxilo del colesterol, seguido de su deshidratación para formar un
ión carbonio 3,5-colestadieno. La oxidación secuencial de este ión carbonio
alílico por el sulfúrico produce un compuesto cromóforo.

 Al realizar la reacción de Guppert – Salkowski el tubo debe estar limpio y


totalmente seco; ya que, si hubiera agua, se formaría una emulsión y esto
impide el correcto transcurso de la reacción.

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6.0.- BIBLIOGRAFÍA

 http://lipidosob.blogspot.com/2010/06/obtencion-de-colesterol-
practica.html http://es.scribd.com/doc/2407201/GuiaBioquimica
 http://www.enfermeriaynutricion.com/gfx/el_metabolismo_de_los_hidrato
s_de_carbono.pdf
 http://amaltea.fmvz.unam.mx/textos/alimenta/MET_CHO_LIP_PRO2.pd
f
 http://www.unizar.es/acz/02AcademicosNumerarios/Dis

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