Grupo: 1551.
Equipo: 7.
INTEGRANTES FIRMA
Benítez García Gabriela Sugey.
Informe de la práctica:
CATABOLISMO DE LA HEMOGLOBINA.
OBJETIVO:
1. Analizar el metabolismo de la bilirrubina.
2. Cuantificar la bilirrubina total y la bilirrubina directa.
3. Relacionar la importancia de cada uno de los pigmentos en el estudio de la función hepática.
RESUMEN:
Se extrajo una muestra de sangre en un tubo con tapa roja (sin anticoagulante). Se llevó a la centrífuga durante
5 minutos a 3000xRPM y se trabajó con el plasma sanguíneo.
Se utilizaron tres tubos de ensaye, marcados con; B (blanco), D (directa) y T (total). Después de cinco minutos,
se leyeron las muestras de los tubos de bilirrubina total y directa.
Las absorbancias obtenidas se multiplicaron por un factor y se discutieron los valores obtenidos comprándolos
con los valores de referencia.
INTRODUCCIÓN:
El hígado es el segundo órgano más grande del cuerpo humano después de la piel, y es el mayor órgano interno.
La verdosa vesícula biliar y sus vías están exactamente debajo del lado derecho del hígado. Las tareas del hígado
son numerosas:
La hemoglobina es una proteína de la sangre de color rojo, que transporta el oxígeno y el CO2a los tejidos,
participa en la regulación de pH de la sangre. Posee un grupo hemo.
DEGRADACION DE LA HEMOGLOBINA.
Ocurre cuando el eritrocito alcanza su tiempo límite de vida (120 días), la membrana celular, se vuelve débil y se
rompe por lo cual toda la hemoglobina que es liberada es fagocitada por algunos de los macrófagos tisulares,
como el de la medula ósea, el bazo y el hígado.
Se separa la molécula globina y la molécula hemo, la molécula globina se transforma en aminoácidos que
posteriormente seránreutilizados para la producción de proteínas y el grupo hemo, es oxidado por la hemo-
oxigenasa, abriéndose el anillo tetra pirrólico y se genera una molécula lineal con cuatro anillos pirrólicos
denominado biliverdina, el hierro se oxida de (Fe2+ a Fe3+) que se une a la transferrina para poder ser
transportado a la médula ósea, donde formará parte de las reservas de hierro del organismo (ferritina).
La biliverdina con ayuda de la enzima biliverdina reductasa se reduce para formar bilirrubina. La bilirrubina viaja
unida a la albúmina sérica (proteína transportadora) desde el torrente sanguíneo hasta llegar al hígado, donde
se separa y es secretada por la bilis (por eso el color amarillo-verdoso de la bilis).
La bilis es denominada como el líquido amarillo verdoso de sabor amargo proveniente del hígado la cual puede
ser producida por el hígado de muchos vertebrados y puede contener sales biliares, hormonas, proteínas y
colesterol que forman el 3% del contenido y en cambio el agua es la que forma un 97% del contenido en la bilis.
La transformación de los anillos pirrólicos del grupo hemo en bilirrubina implica una serie de transformaciones
bioquímicas absolutamente esenciales para su excreción. Aproximadamente el 80% de la bilirrubina proviene de
la destrucción diaria de los glóbulos rojos, el otro 20% proviene de una eritropoyesis inefectiva de la médula
ósea. Una vez sintetizada, la bilirrubina debe ser excretada, proceso que involucra varios pasos.
MATERIAL:
- Tuvo para extracción sanguínea con tapón rojo. (Sin anticoagulante)
- Sistema de extracción sanguínea.
- Ligadura
- Algodón
- Pipetas graduadas de 1mL (0.1 en 0.1)
- Pipeta graduada de 5mL.
- Una gradilla.
- Una parrilla de calentamiento.
- Un vaso de precipitados de 250mL.
- Un soporte universal.
- Unas pinzas de doble presión.
- Un termómetro.
REACTIVOS:
- Alcohol
- Hipoclorito de sodio
- Kit de reactivos para bilirrubinas:
1. Reactivo A.
2. Reactivo B.
3. Diazoreactivo.
EQUIPO:
- Espectrofotómetro.
METODOLOGÍA.
Se realizó una toma de muestra sanguínea utilizando un tubo para extracción sanguínea tapón color rojo.
Una vez obtenida la muestra sanguínea el tubo se centrifugo a 3500 durante 5 minutos. Posteriormente se
trabajo únicamente con el suero.
En tres tubos de ensayo previamente marcados cada uno como: B (Blanco), D (Directa) y T(Total) se colocaron
los reactivos conforme se indica en la siguiente tabla.
Tubo B D T
Muestra (suero) 0.2mL 0.2mL 0.2mL
Agua destilada 2.5mL 2.5mL ---
Reactivo A --- --- 2.5mL
Reactivo B 0.2mL --- ---
Diazoreactivo --- 0.2mL 0.2mL
Una vez terminada la adición de cada una de las sustancias, correspondientemente a cada tubo. Se
prosiguió a mezclar de inmediato cada tubo por inversión y se mantuvieron en incubación 5 minutos (a
baño maría).
Pasando los 5 minutos se leyó las absorbancias del blanco, directa y total en el espectrofotómetro a
530nm, se ajustó a cero con agua destilada.
RESULTADOS.
Valores de referencia:
Equipo 7
CÁLCULOS DE LA CONCENTRACIÓN.
9.08𝑚𝑔
𝐵𝑖𝑙𝑖𝑟𝑟𝑢𝑏𝑖𝑛𝑎 𝑇𝑜𝑡𝑎𝑙 = (0.037) ( ) = 0.3363 𝑚𝑔/𝑑𝐿
𝑑𝐿
9.08𝑚𝑔
𝐵𝑖𝑙𝑖𝑟𝑟𝑢𝑏𝑖𝑛𝑎 𝐶𝑜𝑛𝑗𝑢𝑔𝑎𝑑𝑎 = (0.022) ( ) = 0.199 𝑚𝑔/𝑑𝐿
𝑑𝐿
𝐵𝑇 = 𝐵𝐶 + 𝐵𝑁𝐶
𝐵𝑁𝐶 = 𝐵𝑇 − 𝐵𝐶
𝑚𝑔 0.199𝑚𝑔
𝐵𝑖𝑙𝑖𝑟𝑟𝑢𝑏𝑖𝑛𝑎 𝑁𝑜 𝐶𝑜𝑛𝑗𝑢𝑔𝑎𝑑𝑎 = (0.3363 )− ( ) = 0.1373 𝑚𝑔/𝑑𝐿
𝑑𝐿 𝑑𝐿
ANÁLISIS DE RESULTADOS.
Un análisis de bilirrubina en la sangre permite obtener un recuento preciso de los tres niveles de bilirrubina en la
sangre: bilirrubina conjugada, no conjugada y total.
Los resultados obtenidos sobre la concentración de Bilirrubina Total es de 0.3363mg/dL, los valores normales de
bilirrubina directa se sitúan entre 0.3 a 1 mg/dL, resultado el cual se encuentra dentro del rango normal de
referencia, al igual que para bilirrubina conjugada, se obtuvo un valor de 0.199mg/dL y los valores normales de
bilirrubina conjugada van de 0.1 a 0.25mg/dL, lo cual también se encuentra dentro del rango en base a los
valores de referencia.
Se debe tener en cuenta que valores por encima de 2.5 mg/dL., puede dar origen a ictericia, que consiste en la
coloración amarillenta tanto de la piel como de la esclerótica del ojo.El aumento de la bilirrubina sérica puede
ocurrir por sobreproducción, disminución de captación hepática, disminución en la conjugación y disminución en
la excreción de la bilis (intra o extrahepática).
En estos valores puede haber ciertas diferencias por la técnica o por criterios de normalidad propios de
laboratorios concretos, a veces en el rango de valores y otras veces por las unidades a las que se hace
referencia, el factor de dilución, así como tomar en cuenta si la muestra es de suero, plasma o líquido amniótico.
CONCLUSIONES.
Analizamos el metabolismo de la bilirrubina para evaluar problemas o alteraciones del hígado y vesícula biliar.
La paciente no muestra anomalías en la degradación de hemoglobina. Los valores de bilirrubina total y directa se
encontraron dentro de los valores de referencia. Se puede denotar, que se está llevando una buena degradación
de hemoglobina.
Los buenos resultados indican un buen manejo y control de tiempo sobre la muestra, al momento de medir la
absorbancia.
CUESTIONARIO.
1) ¿Qué diferencia hay entre la bilirrubina conjugada y no conjugada?
-Cuando la bilirrubina se une a la glucosa se la denomina bilirrubina directa o bilirrubina conjugada, mientras
que a la bilirrubina sin glucosa se la conoce como bilirrubina indirecta o bilirrubina no conjugada. La bilirrubina
de la sangre en conjunto se conoce como bilirrubina total.
La bilirrubina es poco soluble en agua, por lo que circula unida a albúmina en el plasma Bilirrubina no conjugada
(Indirecta). La bilirrubina es un compuesto potencialmente tóxico. En el hígado la bilirrubina es conjugada con
ácido glucurónico. Este paso origina la llamada Bilirrubina conjugada (Directa), que es soluble, no tóxica y que se
excreta fácilmente a través de la bilis.
2) Elabore una tabla en la que incluya la clasificación de las ictericias, las causas y cómo se encuentran las
bilirrubinas en la sangre y en la orina.
-Ocurre cuando hay una obstrucción completa de la vía biliar o una falla de la excreción hepática muy marcada
de la bilirrubina, ésta no llega al intestino y no produce la pigmentación color café de las deposiciones normales,
se da la presencia de deposiciones blanquecinas.
-El término "kernicterus" se refiere a la tinción amarilla causada por la bilirrubina. Esto se observa en partes del
cerebro en una autopsia.
Esta afección normalmente se desarrolla en la primera semana de vida, pero puede observarse hasta la tercera
semana. Algunos recién nacidos con enfermedad hemolítica del Rh están en alto riesgo de presentar ictericia
grave que puede conducir a esta afección. En raras ocasiones, la EB se puede desarrollar en bebés
aparentemente saludables.
El término “fototerapia” significa “tratamiento mediante el uso de luz”. Un médico o una enfermera desvestirán
al bebé, le protegerán los ojos y lo expondrán a una luz especial.
La piel y la sangre de su bebé absorben las ondas luminosas. La luz convierte la bilirrubina a su forma soluble en
agua y de este modo el cuerpo puede eliminarla con mayor facilidad.
Existe también un producto llamado “BiliBlanket”. Es otra manera de tratar la ictericia del bebé mediante la luz.
La manta (blanket) es una almohadilla plana con una cubierta, que se coloca alrededor del bebé. Está conectada
a una máquina especial por medio de una larga manguera gris. Esta máquina hace que la almohadilla emita luz.
BIBLIOGRAFÍA.