Jurnal Farmasi Analisis 7 (2017) 170-175 

Tersedia online 7 Januari 2017 2095-1779 / © 2017 Xi'an Jiaotong University. Produksi dan hosting yang oleh Elsevier Ini 
adalah sebuah artikel akses terbuka di bawah CC BY--ND NC lisensi (http://creativecommons.org/licenses/BY-NC-ND/4.0/). 
Daftar isi tersedia di ScienceDirect 

Journal ofFarmasi Analisis 

homepagejurnal: www.elsevier.com/locate/jpa 

Penelitian Original Article Pengaruh pengolahan alkaloid dalam umbi Aconitum oleh 
HPLC-TOF / MS 
Min Liua, 1, Yan Caob, 1, Diya LVB, 1, Wen Zhangc, Zhenyu Zhub, Hai Zhangc, 
⁎,Yifeng Chaib, ⁎ 
Departemen Farmasi, Rumah Sakit Shanghai Changhai, Universitas Kedokteran Militer Kedua, Shanghai 200433, Cina b 
Sekolah Farmasi, Kedua Universitas Kedokteran Militer, Shanghai 200433, Cina c Departemen Farmasi, Timur Bedah Rumah 
Sakit Hepatobiliary, Kedua Universitas Kedokteran Militer, Shanghai 200.438, Cina 
PASAL INFO 
Kata kunci: Aconitum umbi Alkaloid Pengolahan HPLC-TOF / MS 
ABSTRAK 
Menurut  Farmakope  Cina  2015,  hanya  diproses  umbi  Aconitum  dapat  klinis  diterapkan,  dan  efek  pengolahan  tidak  jelas. 
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengeksplorasi  efek  pengolahan  pada  khasiat  jantung  alkaloid  dalam  umbi  Aconitum.  Pertama, 
bahan-bahan  kimia  dalam  yang  belum  diproses  dan  diolah  umbi-umbian  Aconitum  diidentifikasi  dan  dibandingkan  dengan 
menggunakan  kromatografi  cair  kinerja  tinggi  waktu-of-penerbangan  spectro-  massa  Metry  (HPLC-TOF  /  MS)  dan  multivariat 
metode  pengenalan  pola.  Kemudian  alkaloid  perwakilan  di  Aconitum  umbi-umbian,  aconitine,  benzoylaconine,  dan  aconine, 
yang  termasuk  ke  diester-diterpenoid  alkaloid,  alkaloid  monoester-diterpenoid,  dan  alkaloid  amina-diterpenoid, masing-masing, 
dipilih  untuk  validasi  lebih  lanjut  mekanisme  dilemahkan.  Eksperimen  farmakologi  berikutnya  dengan  aconitine, 
benzoylaconine,  dan aconine di SD tikus digunakan untuk memvalidasi efek pengolahan pada fungsi jantung. Setelah pengolahan 
umbi  Aconitum,  ditemukan  bahwa  isi  alkaloid  diester-diterpenoid  berkurang,  dan  orang-orang  dari  alkaloid 
monoester-diterpenoid  dan  alkaloid  amina-diterpenoid  meningkat,  menunjukkan  bahwa  diester-  alkaloid  diterpenoid  diubah 
menjadi  alkaloid  monoester-diterpenoid  dan  amina  alkaloid  -diterpenoid.  Melalui  lanjut  decocting  yang  aconitine  dalam  air 
mendidih,  itu  menegaskan  bahwa  tiga  alkaloid  dapat  semakin  berubah.  Eksperimen  farmakologi  dengan  aconitine, 
benzoylaconine,  dan  aconine  di  SD  tikus  menunjukkan  bahwa  aconitine dengan dosis 0,01 mg / kg dan aconine dengan dosis 10 
mg  /  kg  meningkatkan  fungsi  jantung,  sementara  benzoylaconine  dengan  dosis 2 mg / kg melemahkan fungsi jantung. Pengaruh 
pengolahan  dikaitkan  dengan  transformasi  alkaloid  diester-diterpenoid  yang  paling  beracun  ke  kurang  beracun  alkaloid 
diterpenoid monoester- dan alkaloid amina-diterpenoid. 
1.Pendahuluan 
umbiAconitum,  atau  Wutou  dalam  bahasa  Cina,  adalah  akar  dari  genus  Aconitum  dari  keluarga  Ranunculaceae  yang  telah 
lama  digunakan  dalam  praktek  pengobatan  tradisional  Cina  (TCM)  untuk  analgesik,  anti  tindakan  inflamasi dan kardiotonik [1, 
2].  Aconitum,  yang  menghalau  dingin  dan  mengurangi  rasa  sakit,  digunakan  untuk  mengobati  arthritis  rematik  dalam  ramuan 
tunggal  atau  dengan  herbal  lain.  Bahan  kimia  utama  di  Aconitum  adalah  alkaloid  aconitum,  termasuk  alkaloid 
diester-diterpenoid,  monoe-  ster-diterpenoid  alkaloid,  dan  amina-diterpenoid  alkaloid  [3-7].  Perwakilan  alkaloid 
diester-diterpenoid  termasuk  aconitine,  conitine  mesa-  dan  hypaconitine; perwakilan monoester-diterpenoid loids alka- termasuk 
benzoylaconine,  benzoylmesaconine  dan  benzoylhypaco-  sembilan;  dan  perwakilan  alkaloid  amina-diterpenoid  termasuk 
aconine, 
mesaconine  dan  hypaconine  [8-10].  Aconitum  alkaloid  yang  seharusnya  menjadi  bahan  beracun  utama  dalam  aconitum,  dan 
dapat menyebabkan cardio parah, neuro dan cyto-toksisitas [11,12]. Dilaporkan bahwa LD 
50 
nilaiinjeksi  intravena  aconitine,  mesaconitine  dan  hypaconitine  pada  tikus  adalah  0,12,  0,10  dan  0,47  mg  /  kg, 
masing-masing  [13],  bahwa  dari  benzoylaconine,  benzoylmesaconine  dan  benzoylhypaconine  adalah  23,  21  dan  23mg  /  kg, 
masing-masing, dan bahwa dari aconine adalah 120mg / kg, menunjukkan toksisitas tiga jenis alkaloid aconitum dalam urutan. 
Pengolahan,  bernama  Paozhi  dalam  bahasa  Cina,  merupakan  salah  satu  dari  Cina  metode  pengolahan  obat tradisional untuk 
menghilangkan  zat-zat  yang  tidak  diinginkan  atau  beracun  dari  obat-obatan  herbal  Cina  [14,15], selain rebusan atau pengaturan 
dengan  ramuan  Cina  lainnya  [16].  Hanya  diproses  Aconitum  diperbolehkan  untuk  klinis  digunakan  dalam  praktek  TCM. 
MenurutCina 
Peer reviewdi bawah tanggung jawab Xi'an Jiaotong University. ⁎ penulis Sesuai. 
Alamat E-mail: zhxdks2005@126.com (H. Zhang), yfchai@smmu.edu.cn (Y. Chai). 1 Tiga penulis pertama sama-sama 
memberikan kontribusi untuk pekerjaan ini. 
http://dx.doi.org/10.1016/j.jpha.2017.01.001 Diterima 27 September 2016; Diterima dalam bentuk direvisi 29 Desember 2016; 
Diterima 6 Januari 2017 

MARK 
 
M. Liu et al. Jurnal Farmasi Analisis 7 (2017) 170-175 
Pharmacopoeia 2015, Aconitum dapat diproses dengan cara dikukus dan 
2,4. Persiapan yang belum diolah dan diproses sampel 
Aconitum mendidih untuk mengurangi kandungan beracun diester-diterpenoid alkaloid [17- 20]. Dilaporkan bahwa pengolahan 
atau rebusan dapat menipiskan 
Kedua diproses dan diolah Aconitum hancur 
keracunan serbuk Aconitum [21-25]. Namun, ada beberapa studi melaporkan 
pada tingkat penumbukan 50 mesh, dan bubuk 2g 
Aconitum adalah perbedaan komponen kimia dan farmakologis mereka 
diambil, direndam dalam 25 mL etil eter dengan 2 mL 
larutan amonia untuk tindakan antara Aconitum belum diproses dan diproses. Selain itu, 
12h. Supernatan (1mL) dipindahkan ke dalam 1.5ml 
dari tidak jelas apakah perubahan dari bahan setelah pengolahan bantuan 
tabung polypropylene dan dikeringkan di bawah aliran 
gas nitrogen. Residual yang meningkatkan efikasi jantung. 
dilarutkan dalam 200 uL asetonitril dan vortexed selama 1 
menit, ada kontroversi atas aktivitas farmakologi dari 
diikuti oleh centrifuge selama 5 menit pada 12.000 
rpm, dan supernatan diester-diterpenoid alkaloid, alkaloid monoester-diterpenoid dan 
(200μL) diambil untuk analisis HPLC-TOF / MS. Lain 
20μL alkaloid amina-diterpenoid [26,27]. Alkaloid diester-diterpenoid 
solusi asetonitril, dicampur dengan 180 uL larutan 
asetonitril con- dilaporkan menjadi racun dan mewujudkan aritmia [28]. Telah 
taining standar internal (2-kloro- 
L selalu 
mengakui bahwa kandungan alkaloid diester-diterpenoid di Aconitum berkurang dan berubah menjadi alkaloid baru setelah 
pengolahan, sehingga memainkan peran sinergis dan dilemahkan akhirnya. Saat ini beberapa penelitian menunjukkan efektif 
komponen dalam Aconitum adalah fraksi yang larut dalam air yang bisa bekerja pada sistem kardiovaskular [29]. masih belum 
jelas apakah beracun alkaloid diester-diterpenoid tidak hanya bahan beracun tetapi juga zat yang efektif. 
tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  untuk  menggunakan  metode  HPLC-TOF  /  MS  dan  pengenalan  pola  multivariat  untuk 
menyelidiki  diversifikasi  bahan  kimia  dalam  Aconitum  diproses  dalam  upaya  untuk  mengevaluasi  efek  pengolahan  pada  zat 
kimia  dalam  Aconitum,  mengeksplorasi  mekanisme  transformasi  antara  tiga  jenis  alkaloid  selama  pemrosesan  prosedur, 
menjelaskan perbedaan dalam efek farmakologis antara diproses dan diproses Aconitum, dan mengeksplorasi khasiat jantung dari 
tiga jenis alkaloid dengan menggunakan eksperimen hemodinamik pada tikus. 
2. Bahan dan metode 
2.1. Bahan kimia dan bahan 
The  aconitine,  benzoylaconine,  aconine  dan benzoylmesaconine dibeli dari Institut Nasional untuk Pengendalian Farmasi dan 
Produk  Biologi  (Beijing,  Cina)  dan  benzoylmesaconine  digunakan  sebagai  standar  internal  untuk  analisis  HPLC-MS.  Senyawa 
2-kloro- 
L 
171 
-phenylalanine, 1 mg / mL), disiapkan dan disuntikkan ke dalam sistem HPLC / MS 
untuk analisis. 
2.5. Transformasi antara aconitine, benzoylaconine dan aconine 
Aconitine,  benzoylaconine,  aconine  dan  benzoylmesaconine  dilarutkan  dalam  DMSO  untuk  mempersiapkan  larutan  stok. 
Solusi  stok aconitine, benzoylaconine dan aconine diencerkan dengan tion concentra- dari 10 ug / mL. Aconitine, benzoylaconine 
dan  aconine  (masing-masing  1  mL)  ditambahkan  ke  tabung  1.5ml  polypropylene  masing-masing,  dan  setiap  solusi  diambil 
selama  tiga  ulangan.  Tabung  dipanaskan  dalam  air  mendidih,  dan  100μL  larutan  dipanaskan dikumpulkan pada titik-titik waktu 
yang  ditentukan  0,  5,  10,  15,  30,  45  dan  60  menit.  400 uL asetonitril, yang es di muka, mengandung IS pada konsentrasi 50 ng / 
mL,  ditambahkan  ke  dalam  solusi  segera  dan  vortexed  selama  1  menit,  diikuti  dengan  centrifuge  selama  3  menit  pada  12.000 
rpm, dan aliquot dari 5 uL supernatan disuntikkan ke dalam sistem HPLC / MS untuk analisis. 
2.6. Evaluasi hemodinamik aconitine, benzoylaconine dan aconine 
Delapan  belas  tikus SD laki-laki dengan berat 250-280 g sama-sama rando- kap pola menjadi tiga kelompok: A (aconitine), B 
(benzoylaconine),  dan  C  (aconine).  SD  tikus  dibius  dengan  injeksi  intra-peritoneal  (ip)  dari  1,4  g  /  urethane  kg. Fungsi jantung 
dievaluasi pada Power Lab 8/35 (AD instrumen, Australia), dan tikus yang 
-phenylalanine,  yang  dibeli  dari  Aladdin  Reagen  Co,  Ltd,  digunakan  sebagai  standar  internal  untuk 
HPLC-  TOF  /  MS  analisis.  Kemurnian  mereka  semua  lebih  dari 98%. Asetonitril dan asam formiat dari HPLC kelas yang dibeli 
dari  Burdick  &  Jackson  (USA).  Air  ultra  murni  dibuat  dengan  Milli-Q  System  (Millipore,  Bedford,  MA,  USA).  Semua  reagen 
lain  dari  kelas  analitis.  Ramuan,  Aconitum  carmichaelii  Debx.,  Dibeli  dari  Shanghai  Leiyunshang  Pharmaceutical  Co,  Ltd 
(Shanghai, Cina) dan dikonfirmasi oleh Profesor Lianna Sun dari Departemen 
terhubung  Power  Lab melalui tiga kateter polietilen. Salah satunya dimasukkan ke dalam arteri karotis kanan dan kemudian maju 
ke  dalam  rongga  ventrikel  kiri  untuk  merekam  kiri  sistolik  ventrikel  (LVSP)  dan  tekanan  akhir  diastolik  (LVEDP)  dan  denyut 
jantung  (HR),  sementara  yang  lain  dimasukkan  ke  dalam  arteri  femoralis  kanan  untuk  merekam  tekanan  darah  sistolik  (SBP), 
tekanan  diastolik  darah  (DBP)  dan  tekanan  darah  (MBP),  dan  yang  ketiga  ditempatkan  di  vena  femoralis  tepat  untuk  narkoba 
suntikan. HR, LVSP, LVEDP, SBP, DBP, MBP dan tingkat maksimal ventrikel kiri pengembangan tekanan sistolik (+ dp / dt 
m
ax Farmakognosi, Universitas Kedokteran Militer Kedua (Shanghai, Cina). 
2.2. Hewan 
hewan  protokol  percobaan  ini  dilakukan  sesuai  Pedoman  untuk  Perawatan  dan  Penggunaan  Laboratorium  Hewan, dan telah 
disetujui  oleh  Komite  Hewan  Etik  Kedua  Medis  Militer  University.  Pria  Sprague  Dawley-(SD)  tikus,  yang  disediakan  oleh 
Sino-British  Sippr  /  BK  Lab  Hewan  Ltd  (Shanghai,  Cina),  yang  bertempat  di  22-25  °  C  dengan  akses  gratis  ke  keran  air  dan 
standar tikus chow, dan kemudian berpuasa semalam dengan akses gratis ke air sebelum setiap percobaan. 
2.3. Pengolahan Aconitum carmichaelii Debx 
Menurut  Farmakope  Cina  (2015  Edition),  akar  utama  Aconitum  carmichaelii  Debx  direndam  dalam  air  selama  7  hari, 
kemudian dikukus selama 6 jam dan dikeringkan selama 12 jam pada 40 ° C dalam 
oven.)yang  dianalisa  oleh  software  Labchart.  Setelah  merekam  30 
menit  dari  tekanan  ventrikel  yang  stabil,  konsentrasi  yang  berbeda  dari  aconitine,  Conine  benzoyla- dan solusi aconine disuntik 
secara  intravena  (iv)  ke  dalam  tikus.  Semua  parameter  dijelaskan  sebelumnya  dicatat  selama  30  menit.  Uji-t  berpasangan 
digunakan untuk perbandingan (p <0,05), dan semua hasilnya dinyatakan sebagai aritmatika berarti ± standar deviasi (SD). 
2.7. Akuisisi data 
analisis  HPLC-TOF  /  MS  dilakukan  pada  Agilent  1100  HPLC  seri  digabungkan  ke  Agilent  6220  Akurat-Mass  TOF  massa 
spektrometer (Agilent, USA). Pemisahan kromatografi dilakukan pada Agilent Zorbax SB-C 
18 
kolom  (3,0  mm  x  100  mm,  3,5  m,  Agilent,  USA).  Fase  gerak  terdiri  dari  0,1%  asam  format  (A)  dan 
ACN  (B).  Mengikuti  program  gradien  digunakan:  5%  -50%  B  di  0-20  menit,  diikuti  oleh  5  menit  re-equilibrium.  Temperatur 
kolom  dipertahankan  pada  25 ° C. Volume injeksi adalah 5μL, yang diperkenalkan ke dalam spektrometer massa dengan laju alir 
0,8 mL / menit dan rasio membelah pasca-kolom 1: 1 dengan tiga cara patungan. 
 
M. Liu et al. Jurnal Farmasi Analisis 7 (2017) 170-175 
Sumber  electrospray  ionisasi  (ESI)  antarmuka yang digunakan dan diatur dalam modus scan positif. Pengaturan berperan MS 
adalah  sebagai  berikut:  kapiler  tegangan  3,5  kV, nozzle tegangan 500 V, tekanan gas nebulizer 45 psig, pengeringan laju alir gas 
11  L  /  min,  suhu  gas  350  °  C,  suhu  gas  selubung  400  °  C,  dan  gas  selubung  aliran  11  L  /  min.  Data dikumpulkan dalam mode 
centroid dan rentang massa ditetapkan pada m / z 100- 1000 dengan menggunakan rentang dinamis diperpanjang. 
Analisis  HPLC-MS  dilakukan  pada  HPLC  seri  Agilent  1100  digabungkan  ke  massa  spektrometer  Agilent  (Agilent,  USA). 
Sebuah Agilent Zorbax SB-C 
18 
kolom (3,0 mm x 100 mm, 3,5 m, Agilent, USA) digunakan untuk memisahkan analit. Fase gerak terdiri dari A 
(0,1%  asam  format)  dan  B  (asetonitril)  dengan  menggunakan  program  gradien  sebagai  berikut:  0-8  min,  20%  -60%  B;  8-12 
menit,  60%  -60%  B;  posting  waktu  5  menit.  Temperatur  kolom  adalah  25 ° C. Volume injeksi adalah 5 uL, yang diperkenalkan 
ke  dalam  spektrometer  massa  pada  laju  alir  1  mL  /  menit  dan  rasio  membelah  pasca-kolom  1:  2  dengan  tiga  cara  patungan. 
Parameter  MS  dioptimalkan  melalui  FIA  untuk  mendapatkan  respon  tertinggi  dengan  menggunakan  modus  SIM,  dan  analisis 
kuantifikasi  dilakukan  dalam  mode  ion  positif.  The  [MH]  +  adalah  m  /  z  646,3,  604,4,  500,2  dan  590,4  untuk  aconitine, 
benzoylaconine,  aconine  dan  IS,  masing-masing.  Software  Agilent  MassHunter  Workstation  Data  Acquisition  digunakan untuk 
peralatan kontrol dan akuisisi data, dan perangkat lunak Agilent Analisis kualitatif B.04.00 digunakan untuk analisis data. 
2.8. Analisis data 
yangdiperoleh  HPLC-TOF  /  MS  Data  asli dalam format tertentu instrumen (.d) pertama kali dikonversi ke format data umum 
(.mzData)  dengan  menggunakan  Agilent  MassHunter  Kualitatif  Analisis  B.04.00.  The  XCMS Program ini kemudian digunakan 
untuk penyelarasan nonlinier dari data 
172 
Gambar. 1. Total kromatogram ion dari (A) yang belum diolah (B) diproses Aconitum. 
dalam  domain  waktu  dan  integrasi  otomatis  dan  ekstraksi  intensitas  puncak  oleh  2.14.0  software  R.  XCMS  parameter  yang 
pengaturan  default  kecuali  untuk  yang  berikut:  FWHM  =  8,  snthersh  =  5  dan  bw  =  10.  Output  data  yang  diimpor  ke  dalam 
perangkat  lunak  MATLAB  R2010,  dimana  data  yang  dinormalisasi  menggunakan  penjumlahan  dari  respons  terhadap  semua 
analit  dalam  satu  sampel.  Data  pra-diproses  diperkenalkan  ke  SIMCA-P  +  11  (demo,  Umetrics,  Swedia)  untuk  kuadrat terkecil 
parsial  analisis  diskriminan  (PLS-DA)  setelah  rata  centering  dan  pare  untuk  scaling.  Kualitas model dievaluasi dengan R2 yang 
relevan dan Q2 seperti yang dibahas di tempat lain. 
3. Hasil dan diskusi 
3.1. Bahan dalam diproses dan diproses Aconitumtersebut. 
Gambar  1  menunjukkan  total  ion  kromatogram  (TIC)  dari  Aconitum  diproses  dan  diproses.  Seperti  ditunjukkan  dalam 
Gambar.  1, Peaks 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 dan 12 meningkat, sementara Peaks 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20 dan 21 menurun 
setelah pengolahan, menunjukkan bahwa bahan-bahan bawah- pergi perubahan selama pemrosesan. 
Sebuah  model  parsial  setidaknya  analisis  kuadrat-diskriminasi  (PLS-DA)  didirikan  untuk  mengevaluasi  bahan-bahan  yang 
berbeda  di  Aconitum  belum  diproses  dan  diproses.  Skor  scatter  plot  pada Gambar. 2A menunjukkan tren bahwa belum diproses 
Aconitum  jauh dari Aconitum diproses, dan seperti yang ditunjukkan dalam pemuatan scatter plot (Gambar. 2B), 21 bahan-bahan 
yang ditemukan berada jauh dari yang lain. 
Daftar  pentingnya  variabel  menunjukkan  bahwa  21  alkaloid  jelas  berbeda  antara  kedua  kelompok  dalam  hal  berat  molekul. 
Informasi rinci ditampilkan pada Tabel 1, termasuk waktu retensi (t 
R), 
rumus dan variabel penting dalam proyeksi 
 
M. Liu et al. Jurnal Farmasi Analisis 7 (2017) 170-175 
Gambar. 2. (A) PLS-DA skor plot dan (B) memuat plot HPLC-TOF / MS spektra dari diproses (merah) dan diproses Aconitum 
(hitam). 
(VIP)  nilai  alkaloid.  Di  antara  21  alkaloid,  enam  adalah  alkaloid  diterpenoid  diester-  termasuk  beiwutine,  mesaconitine, 
10-OH-aconitine,  hypaconitine,  aconitine  dan  deoxyaconitine,  dan  delapan  adalah  alkaloid  monoester-diterpenoid  termasuk 
14-benzoil-10-OH-mesaco-  sembilan,  benzoylmesaconine,  benzoylaconine,  benzoylhypaconine,  zoyldeoxyaconine  ben, 
pyromesaconitine,  pyrohypaconine  dan  pyroaconi-  tine,  sementara  tujuh  lainnya  adalah  amina-diterpenoid  alkaloid  termasuk 
mesaconine, hypaconine, isotalatizidine, aconine, fuziline, talatizamine dan 14-acetyltalatizamine (Tabel 1). 
Isi  dari  tujuh  alkaloid  amina-diterpenoid  yang  in-  berkerut  setelah  pengolahan,  sedangkan  isi  dari  alkaloid  enam 
diester-diterpenoid  yang  menurun  tajam.  Di  antara  delapan  alkaloid  diterpenoid  monoester-,  14-Benzoil-10-OH-mesaconine, 
benzoylmesaco-  sembilan,  benzoylaconine,  benzoylhypaconine,  pyromesaconitine  yang  di-  berkerut  dalam  kelompok  diproses, 
sementara  benzoyldeoxyaconine,  paconine  pyrohy-,  pyroaconitine  mengalami  penurunan  setelah  pengolahan.  Hasil  penelitian 
menunjukkan  bahwa  alkaloid  diester-diterpenoid  mungkin  diubah  menjadi  alkaloid  monoester-diterpenoid,  dan  alkaloid 
monoester-diterpenoid mungkin diubah menjadi alkaloid amine-diterpenoid setelah pengolahan. 
3.2. Isi aconitine, benzoylaconine dan aconine di Aconitum belum diproses dan diproses 
Karena tren yang berbeda antara tiga bentuk alkaloid, konsentrasi dari tiga alkaloid yang khas (aconitine, benzoyla- 
Tabel 1 Perbandingan bahan kimia antara yang belum diproses dan diproses umbi Aconitum . 
No t 
R 
(min) nama Senyawa Formula [M + H] + TrendVIP 
Terdeteksi diharapkan Kesalahan 
1c 0,8746 Mesaconine C 
24 
486,2695 486,2703 -1,6 1,373 ↑ 2c 0,8748 
Hypaconine C 
24 
173 H 
39 
NO 
9 
470,2744 470,2754 -2,1 0,6974 ↑ 3c 0,8792 
Isotalatizidine C 
23 
H 
39 
NO 
8 
408,2747 408,2750 -0,7 1,394 ↑ 4c 0,8880 
Aconine C 
25 
H 
37 
NO 
5 
500,2846 500,2860 -2,8 0,731 ↑ 5c 7,039 
Fuziline C 
24 
H 
41 
NO 
9 
454,2811 454,2805 1,3 1.880 ↑ 6c 7,164 
Talatizamine C 
24 
H 
39 
NO 
422.2908 
7422.2901 1,7 2,116 ↑ 7c 9,047 
14-acetyltalatizamine C 
26 
H 
39 
NO 
5 
464,3008 464,3012 -0,9 0,9646 ↑ 8b 9,153 
14-Benzoil-10-OH- mesaconinemesaconine C 
31 
H 
41 
NO 
6 
606,2906 606,2914 -1,3 1,238 9b 10.17 
Benzoylmesaconine C 
31 
H 
43 
NO 
11 
590,2976 590,2965 1,9 2,844 ↑ 10b 10,65 
Benzoylaconine C 
32 
H 
43 
NO 
10 
604,3132 604,3122 1,7 2,072 ↑ 11b 11.00 
Benzoylhypaconine C 
31 
H 
45 
NO 
10 
574,3021 574,3016 0,9 2,303 ↑ 12b 11.16 
Pyromesaconitine C 
31 
H 
43 
NO 
572.2855 
9572.2860 -0,9 1,298 ↑ 13a 11.33 Beiwutine 
C 
33 
H 
41 
NO 
9 
648,3029 648,3015 2,2 1,541 ↓ 14b 11,55 
Benzoyldeoxyaconine C 
32 
H 
45 
NO 
12 
588,3179 588,3173 1,0 1,323 ↓ 15b 12,08 
Pyrohypaconine C 
31 
H 
45 
NO 
9 
556,2913 556,2910 0,5 1,199 ↓ 16a 12.10 
Mesaconitine C 
33 
H 
41 
NO 
8 
632,3085 632,3065 3,2 2,099 ↓ 17a 12.23 
10-OH-Aconitine C 
34 
H 
45 
NO 
11 
662,3182 662,3171 1,7 1,571 ↓ 18a 13,08 
Hypaconitine C 
33 
H 
47 
NO 
12 
616,3143 616,3122 3,4 3,235 ↓ 19a 13,08 
Aconitine C 
34 
H 
45 
NO 
10 
646,3231 646,3222 1,4 1,607 ↓ 20b 13,23 
Pyroaconitine C 
32 
H 
47 
NO 
11 
586,3018 586,3011 1,2 0,9038 ↓ 21a 14,20 
deoxyaconitine C 
34 
H 
43 
NO 
9 
630,3293 630,3273 3,2 2,206 ↓ 
a: Diester-diterpenoid alkaloid; b: alkaloid monoester-diterpenoid; c: Amine-diterpenoid alkaloid. 
H 
47 
NO 
10 
Conine dan aconine) ditentukan dengan HPLC / MS. Waktu retensi aconitine, benzoylaconine, aconine dan IS adalah 10,01, 7,84, 
2,10  dan  7,20  menit,  masing-masing.  Kurva  kalibrasi  aconitine,  benzoylaconine  dan  aconine  menunjukkan  linearitas  yang 
memuaskan  selama  rentang  tion  concentra-  dari  1.35-54ng  /  mL  untuk  aconitine,  1,21-43,6  ng  /  mL untuk benzoylaconine, dan 
,815-32,6  ng  /  mL  untuk  aconine,  sementara  persamaan  sion  regres-  adalah  y  =  0.409x  +  0,083  untuk  aconitine,  y  =  0.986x  + 
0,758 untuk benzoylaconine, dan y = 0.156x + 0,157 untuk aconine. Semua koefisien korelasi (r) adalah> 0,99. 
Berdasarkan  metode di atas, isi aconitine, benzoylaco- sembilan dan aconine ditentukan sebagai 0,83 ± 0,03, 0,16 ± 0,008 dan 
0,11  ±  0.006mg  /  g  di  Aconitum  belum  diproses,  dan  0,10  ±  0,005,  0,67  ±  0,02  dan  0,14  ± 0,003 mg / g di Aconitum diproses, 
secara berurut. 
3.3. Hidrolisis aconitine, benzoylaconine dan aconine 
Seperti  ditunjukkan  dalam  Gambar.  3,  isi  aconitine  menurun  dengan  cepat  dalam  waktu  kurang dari 10 menit selama proses 
pemanasan  60-menit,  sementara  isi  benzoylaconine  dan  aconine,  terutama  aconine  meningkat.  Setelah  pemanasan  selama  45 
menit,  isi  benzoylaconine  turun  perlahan-lahan,  sementara  isi  aconine  meningkat  secara  bersamaan.  Hasil  ini  menunjukkan 
bahwa  aconitine  mungkin  dikonversi  ke  benzoylaconine  dan  aconine,  dan  benzoylaconine  bisa  lebih  dikonversi  ke  aconine. 
Seperti ditunjukkan dalam Gambar. 4, gugus karboksil dari aconitine diambil dari dan 
 
M. Liu et al. Jurnal Farmasi Analisis 7 (2017) 170-175 
Gambar. 3. Konsentrasi perubahan (A) aconitine, benzoylaconine dan aconine ketika aconitine itu decocted dalam air mendidih, 
dan (B) benzoylaconine dan aconine ketika benzoylaconine itu decocted dalam air mendidih. 
dikonversi ke benzoylaconine, sementara kelompok fenil dari benzoylaconine diambil dari dan ditransformasikan ke aconine 
selama proses pemanasan. 
3.4. Fungsi jantung dari aconitine, benzoylaconine dan aconine 
Hasil  percobaan  hemodinamik  menunjukkan  bahwa  aconitine,  benzoylaconine  dan  aconine  memiliki  efek  jantung  yang 
berbeda, yang ditunjukkan pada Tabel 2. SBP, DBP, MBP, HR, LVSP dan + dp / dt 
max 
meningkat  secara signifikan setelah intravena 0,01 mg / kg aconitine, 
menunjukkan  bahwa  aconitine  bisa  meningkatkan  fungsi  jantung  dari  SD  tikus.  Meskipun  benzoylaconine  tidak  bisa 
meningkatkan  fungsi  jantung,  parameter  tekanan  ventrikel  menunjukkan  fungsi  jantung  melemah  pada  dosis  2  mg  /  kg,  yang 
diwakili oleh penurunan LVSP dan + dp / dt 
max, 
dan  peningkatan  LVEDP.  Aconine  juga  bisa  meningkatkan  fungsi  jantung,  dan  dosis  efektif  10  mg  /  kg  adalah 
1000 kali lipat lebih tinggi dari aconitine. 
3.5. Klarifikasi dari mekanisme pengolahan Aconitum umbi 
Aconitum  umbi  telah  dianggap  sangat  beracun,  dan  hanya  diproses  umbi  Aconitum  dapat  klinis  diterapkan di klinik. Dalam 
penelitian  ini,  komposisi  kimia  yang  belum  diproses  dan  diolah  umbi-umbian  Aconitum  dianalisis  dan  dibandingkan  dengan 
menggunakan  HPLC-TOF  /  MS.  Ditemukan  bahwa  ada  perbedaan  yang  signifikan  dalam  mengidentifikasi  21  alkaloid  antara 
umbi  Aconitum  belum  diproses  dan  diproses.  Setelah  pengolahan,  isi  dari  semua  alkaloid  diester-diterpenoid  menurun,  dan 
semua  alkaloid  amine-diterpenoid  meningkat.  Tapi  lima  alkaloid  monoester-diterpenoid meningkat dan tiga alkaloid diterpenoid 
monoester-  menurun.  Hasil  ini  menunjukkan  bahwa  alkaloid  diester-diterpenoid  dapat  diubah  menjadi  diterpenoid  dan 
amina-diterpenoid  alkaloid  monoester-  setelah  pengolahan.  Aconitine,  benzoylaconine  dan  aconine  tiga  alkaloid  perwakilan  di 
umbi  Aconitum,  milik  diester-diterpenoid  alkaloid,  alkaloid  monoester-diterpenoid  dan  alkaloid  amina-diterpenoid, 
masing-masing.  Untuk  memverifikasi  konversi  alkaloid,  mereka  lebih  decocted  dalam  air  mendidih.  Hasil  menegaskan  bahwa 
tiga jenis alkaloid yang progresif diubah selama proses pemanasan dalam air mendidih, menunjukkan konversi diester- 
174 
Gambar. 4. Konversi antara aconitine, benzoylaconine dan aconine. 
alkaloid diterpenoid ke alkaloid monoester-diterpenoid dan alkaloid diterpenoid amine-. 
Ada  kontroversi mengenai apakah alkaloid dalam umbi Aconitum secara farmakologi bahan beracun atau efektif. Dalam studi 
ini,  kami  melakukan  eksperimen  farmakologi  dengan  aconitine,  benzoylaconine  dan  aconine  untuk  mengevaluasi  ities  activ- 
farmakologi  mereka  pada  fungsi  jantung  di  SD  tikus.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  aconitine  bisa  meningkatkan fungsi 
jantung  pada  dosis  0,01 mg / kg, benzoylaconine tidak hanya mengurangi fungsi jantung tapi disebabkan aritmia yang serius, dan 
aconine bisa memainkan efek jantung pada dosis 10 mg / kg intravena, namun efektif dosis adalah 1000 kali lipat lebih tinggi dari 
aconitine. LD 
50 
dari  aconitine,  benzoylaconine  dan  aconine  adalah  0,12,  23  dan  120  mg  /  kg  seperti  yang 
dilaporkan  sebelumnya.  Oleh  karena  itu  kami  percaya  bahwa  alkaloid  diester-diterpenoid  adalah  bahan  utama  yang  efektif  dan 
beracun  dalam  umbi  Aconitum,  dan  bahwa  transfor-  masi  dari  yang  paling  beracun  alkaloid  diester-diterpenoid  ke  kurang 
beracun  alkaloid  monoester-diterpenoid  dan  alkaloid  amina-diterpenoid  mungkin  mekanisme  dilemahkan  pengolahan  dari 
Aconitum  umbi-umbian,  yang  tidak  mempengaruhi  efek  jantung  umbi  Aconitum  karena  dosis  efektif  rendah  alkaloid 
diester-diterpenoid.  Berdasarkan  temuan  di  atas,  kami  sangat  menyarankan  bahwa  kandungan  alkaloid  diterpenoid  diester-  di 
umbi Aconitum harus dikontrol dengan ketat dalam praktek klinis. 
4. Kesimpulan 
Setelah  identifikasi  dan  perbandingan  bahan  kimia  dalam  yang  belum  diproses  dan  diolah  umbi-umbian  Aconitum  dengan 
menggunakan  HPLC-TOF  /  MS  dan  pola  multivariat  metode  pengakuan,  ditemukan  bahwa  alkaloid  diester-diterpenoid  dapat 
diubah  menjadi  alkaloid  diterpenoid  monoester-  dan  amina-diterpenoid  alkaloid selama prosedur pengolahan. Melalui decocting 
tiga  alkaloid  perwakilan,  aconitine,  benzoylaconine  dan  aconine,  dalam  air  mendidih,  itu  lebih  lanjut  membuktikan  bahwa 
mereka  dapat  semakin  berubah.  Selanjutnya  percobaan  farmakologi  dengan  aconitine,  benzoylaco-  sembilan  dan aconine di SD 
tikus  menunjukkan bahwa efek dari pengolahan umbi Aconitum disebabkan transformasi alkaloid diester-diterpenoid yang paling 
beracun ke kurang beracun monoester-diterpenoid 
 
M. Liu et al. Jurnal Farmasi Analisis 7 (2017) 170-175 
Tabel 2 fungsi jantung dari aconitine, benzoylaconine dan aconine sebelum dan setelah pemberian injective pada tikus (n = 6). 
Parameter Aconitine (0,01 mg / kg) Benzoylaconine (2 mg / kg) Aconine (10 mg / kg) 
Sebelum iv Setelah iv Sebelum iv Setelah iv Sebelum iv Setelah iv 
SBP (mmHg) 96,7 ± 11,5 112,7 ± 10,5 ** 104,1 ± 11,8 100,6 ± 11,9 105,1 ± 7,3 122,3 ± 11,1 ** DBP (mmHg) 64,8 ± 10,4 82,7 
± 10,4 ** 75,6 ± 8,2 69,8 ± 14,8 74,1 ± 6,9 89,9 ± 7,1 ** MBP (mmHg) 80,1 ± 11,1 94,9 ± 10,0 ** 88,3 ± 9.1 82.6 ± 13,7 86,3 ± 
6,3 103,7 ± 7,7 ** HR (bpm) 388 ± 47 412 ± 57 * 387 ± 34 348 ± 47 380 ± 43 430 ± 54 * LVSP (mmHg) 108,6 ± 6,6 121,5 ± 
6,2 ** 119,8 ± 10,9 112,9 ± 14,2 114,5 ± 3,4 129,0 ± 8,9 ** LVEDP (mmHg) 8,9 ± 3,0 7,6 ± 3,0 * 9,6 ± 3,1 11,4 ± 2,8 * 8,8 ± 
0,6 6,7 ± 1,8 * + dp / dt 
max 
(mmHg / s) 3473,1 ± 367,4 4078,1 ± 402,0 ** 4156,7 ± 466,9 3575,6 ± 1085,8 3857,7 ± 338,1 4568,4 ± 291,4 ** 
* p <0,05, ** p <0,01. 
175 alkaloid dan amina-diterpenoid alkaloid, yang akan 
memberikan dukungan untuk aplikasi pengolahan dan klinik umbi Aconitum. 
[13] NG Bisset, racun panah di Cina. Bagian II. aconitum-botani, kimia, dan 
farmakologi, J. Ethnopharmacol. 4 (1981) 247-336. [14] L. Li, B. Sun, T. Zhang, et al., Studi Metabonomic toksisitas 
Hei-Shun-Pian, 
akar lateral yang diproses dari Aconitum 
carmichaelii Debx. (Ranunculaceae), J. Konflikbunga. 
Ethnopharmacol 116 (2008) 561-568. [15] P. Tong, C. Wu, X. Wang, et al., Pengembangan dan penilaian dari complete- 
Para penulis menyatakan bahwa tidak ada konflik kepentingan. 
Strategi detoxication untuk Fuzi (root lateral Aconitum carmichaeli) dan penerapannya dalam terapi rheumatoid arthritis, J. 
Ethnopharmacol. 146 (2013) 562-571. Ucapan Terima Kasih 
[16] K. Peter, J. Schinnerl, S. Felsinger, et al, Sebuah konsep baru untuk detoksifikasi. 
Kompleksasi antara aconitine dan liquiritin dalam formula herbal Cina ( 'Sini Tang'), J. Ethnopharmacol. 149 (2013) 562-569. 
Karya ini secara finansial didukung oleh Alam Nasional 
[17] TY Chan, Aconitum konten alkaloid dan 
toksisitas tinggi aconite tingtur, Science Foundation of China (81.573.396) dan Militer Inovasi Pendanaan (16CXZ012). 
Forensik Sci. Int. 222 (2012) 1-3. [18] TY Chan, faktor Iuran dalam ramuan-diinduksi keracunan aconite fatal, Forensik 
Sci. Int. 223 (2012) 40-43. . [19] Y. Kasahara, T. Itou, T. Numazawa, et al, Aconitine analog di Aconitum liar Referensi 
tanaman: isi toksisitas pada tikus dan penurunan dengan merebus, Shokuhin Eiseigaku Zasshi 54 (2013) 364-369. [20] RQ Wen, 
DH Li, X. Zhao, et al., Rasionalitas metode pengolahan aconiti [1] M. Murayama, T. Mori, H. Bando, et al., Studi pada 
konstituen dari Aconitum 
lateralis radix (Fuzi) berdasarkan analisis kimia, Yao 
Xue Xue Bao 48 (2013) spesies. IX. Sifat-sifat farmakologi dari pyro-jenis alkaloid aconitine, 
286-290. komponen bubuk aconite diproses 
'kako-bushi-Matsu': analgesik, antiin- 
[21] H. Lin, GH Deng, YM Gong, Studi teknologi 
pengolahan modern flammatory aconiti dan kegiatan toksik akut, J. Ethnopharmacol. 35 (1991) 159-164. 
kusnezoffii radix, Zhong Yao Cai 37 (2014) 
1163-1166. [2] YV Nesterova, TN Povetieva, NI Suslov, et al., Aktivitas Anti-inflamasi 
[22] M. Pei, X. Duan, X. Pei, Kompatibilitas kimia dari 
pasangan obat asam-basa alkaloid diterpen dari Aconitum baikalense , Bull. Exp. Biol. Med 156 (2014) 
Fuzi dan Gancao di Sini rebusan, Zhongguo Zhong 
Yao Za Zhi 34 (2009) 665-668. 
2047-2050. [3] J. Li, X. Wu, Y. Chen, et al., Sifat 
anti diare ekstrak yang berbeda dari Cina 
[23] H. Shen, LY Zhu, N. Yao, et al., Pengaruh 
kompatibilitas Radix Aconiti jamu rumus Bao-Xie-Ning, J. integr. Med 11 (2013) 125-134. 
Laterlis dan glycyrrhizae radix pada 
pharmacokinatic dari aconitine, mesaconitine dan [4] Y. Jaiswal, Z. Liang, A. Ho, et al., Distribusi alkaloid beracun di jaringan 
dari 
hypacmitine dalam plasma tikus, Zhong Yao Cai 34 
(2011) 937 -942. tiga jamu spesies Aconitum menggunakan laser yang mikro-diseksi, UHPLC- 
[24] F. Liu, XH Yu, F. Li, et al., Penentuan tiga jenis 
diester QTOF MS dan teknik LC-MS / MS, Fitokimia 107 ( 2014) 155-174. 
alkaloid diterpenoid (alkaloid diester-diterpenoid) 
di Aconitum carmichaeli [5] Y. Shi, H. Li, H. Wang, et al., penentuan simultan dari lima antrakuinon 
danproduk olahannya oleh HPLC, Zhongguo Zhong 
Yao Za Zhi 31 ( 2006) persiapan tradisional Cina dengan RP-HPLC menggunakan ditingkatkan ekstraksi 
1160-1162. prosedur, J. integr. Med. 12 (2014) 
455-462. 
[25] Y. Jaiswal, Z. Liang, P. Yong, et al., Sebuah studi 
perbandingan pada tradisional [6] E. Nyirimigabo, Y. Xu, Y. Li, et al., Sebuah review di fitokimia, farmakologi dan 
India Shodhana dan metode pengolahan Cina untuk 
akar aconite oleh studi toksikologi dari Aconitum, J. Pharm. Pharm. 67 (2015) 1-19. 
karakterisasi dan penentuan komponen utama, 
Chem. Sen. J. 7 [7] G. Zhou, L. Tang, X. Zhou, et al., Sebuah review di fitokimia dan farmakologi 
(2013) 169. kegiatan akar lateral yang diproses dari 
Aconitum carmichaelii Debeaux, J. 
[26] X . Chen, Y. Cao, H. Zhang, et al., Comparative 
normal/failing rat myocardium cell Ethnopharmacol. 160 (2015) 173–193. 
membrane chromatographic analysis system for 
screening specific components that [8] L. Xiong, C. Peng, XF Xie, et al., Alkaloids isolated from the lateral root of 
counteract doxorubicin-induced heart failure from 
Acontium carmichaeli, Anal. Aconitum carmichaelii, Molecules 17 (2012) 9939–9946. 
Chem. 86 (2014) 4748–4757. [9] H. Yue, Z. Pi, F. 
Song, et al., Studies on the aconitine-type alkaloids in the roots of 
[27] TY Ma, TF Yu, SM Li, et al., Advance in studies on 
Aconitum traditional Chinese Aconitum carmichaeli Debx. by HPLC/ESIMS/MS(n), Talanta 77 (2009) 
medicines in toxicokinetics and metabonomics, 
Zhongguo Zhong Yao Za Zhi 39 1800–1807. 
(2014) 1972–1975. [10] Y. Xiao, Z. Ma, Y. Wang, 
et al., Cardioprotection of Shenfu preparata on cardiac 
[28] J. Singhuber, M. Zhu, S. Prinz, et al., Aconitum in 
traditional Chinese medicine: a myocytes through cytochrome P450 2J3, J. Integr. Med. 11 (2013) 327–336. 
valuable drug or an unpredictable risk?, J. 
Ethnopharmacol. 126 (2009) 18–30. [11] TY Chan, Aconite poisoning, Clin. Toxicol. (Philos.) 47 (2009) 279–285. 
[29] Y. Zhou, W. Liu, Review and re-evaluation of the 
study on the effect of [12] G. Lu, Z. Dong, Q. Wang, et al., Toxicity assessment of nine types of decoction 
Aconitum carmichaelii Debx. on cardiovascular 
system (Part I), Pharmacol. Clin. pieces from the daughter root of Aconitum carmichaeli (Fuzi) based on the 
Chin. Mater. Med. 29 (2013) 198–205. chemical 
analysis of their diester diterpenoid alkaloids, Planta Med. 76 (2010) 825–830.