Anda di halaman 1dari 14

STRUKTUR HALUS DAN MORFOGENIK

GERAKAN MOBIL DI GASTRULA


DARI TREEFROG, HYLA REGILLA
PATRICIA C. BAKER, Ph.D.
Dari Departemen Zoologi, Universitas California, Berkeley, California. Hadiah Dr.
Baker
alamat adalah Departemen Patologi, Universitas Sekolah Kedokteran Oregon, Portland,
Oregon

ABSTRAK
Alur blastoporal dari gastrula awal dari treefrog, Hyla regilla, diperiksa dengan
mikroskop elektron. Perpanjangan paling dalam dari alur ini dilapisi dengan
invaginating flask dan sel berbentuk baji dari entoderm dan mesoderm.
Permukaan distal sel-sel ini beruang mikrovili yang didasari dengan lapisan
elektron-buram yang terdiri dari butiran halus bahan dan fibril. Lapisan padat
dan massa vesikula proksimal untuk mengisi leher sel. Dalam sel-sel flask yang
berbatasan dengan archenter yang terbentuk pada vesikula digantikan oleh
besar vakuola dikelilingi oleh lapisan membran. Sel-sel yang melapisi alur
bergabung dengan erat di ujung distal mereka di wilayah lapisan padat. Secara
proksimal, badan sel dipisahkan oleh ruang antar sel yang luas. Tubuh sel, yang
bermigrasi ke bagian dalam gastrula, mengandung nukleus ditambah organel
lain dan inklusi umum untuk amfibi sel-sel gastro. Lapisan padat dari bahan
granular, vesikula, dan membran terletak di bawah permukaan sel tubuh dan
meluas menjadi proses seperti pseudopodium dan undulations permukaan yang
melintasi ruang antar sel. Sel mesodermal khusus yang diamati pada lapisan
dorsal dari alur lebih kecil dan lebih padat dari chordamesodermal dugaan
sekitarnya sel. Jari panjang sitoplasma, diisi dengan lapisan padat, vesikel dan
membran, memanjang dari permukaan distalnya di sepanjang tepi alur, berakhir
dengan saling mengunci erat sel mesodermal lainnya. Beberapa korelasi antara
struktur halus dan mekanika gastrulasi dibahas, dan teori invaginasi diusulkan,
berdasarkan kontraksi dan perluasan lapisan padat dan sambungan ketat pada
permukaan sel distal.
PENGANTAR

Gerakan memerintahkan sel embrio digastrulasi telah lama menjadi subjek spekulasi
dan investigasi. Dalam enam puluh tahun terakhir berbagaipendekatan eksperimental
telah dilakukan, beberapaditinjau di bawah ini, dalam upaya untuk memahami
pergerakan lambung yang korelatif jugaperan sel-sel individual. Studi-studi ini
menunjukkan itu satu kelompok sel memulai gastrulasi, yaitu labu atau sel botol dari
entodcrm, yang olehgerakan arah menyebabkan insinking awal,alur blastoporal, yang
diperdalam lebih jauhinvaginasi sel-sel ini. Sel-sel labu juga telah dianggap
mengerahkan kekuatan menarik pada voluting sel mesodermal melalui permukaan
mantel menutupi semua sel-sel eksterior gastrula. Saya t
Diharapkan bahwa dengan mengamati uhrastruktur sel-sel invaginating beberapa
wawasan baru mungkin naik ke masalah lama mekanika gerakan morfogenik.

BAHAN DAN METODE

Tahapan pratinjau dari Pacific Treefrog, Hyla regilla (Baird dan Girard), dikumpulkan
dari kolam di Bukit-bukit Berkeley dan disimpan pada 4 ° C. Embrio-embrio itu
dikeluarkan dari kulkas dan dibiarkan berkembang untuk tahap gastrular awal
(Gambar 1 A dan 8 A) di kamar suhu.
~ [dia setengah dorsal dari gastrula, termasuk- ing blastopore dan bagian dari plug
kuning masa depan, diisolasi dalam larutan Niu-Twitty (30). Opera- tion dilakukan
dengan lingkaran rambut dan kaca halus jarum di permukaan halus petri berlapis
lilin hidangan. Perhatian besar diambil untuk memotong embrio dengan bersih dan
untuk menghindari peregangan atau merusak sel-sel. Spesimen kemudian
ditetapkan untuk l hingga 2 jam 4 ° C dalam larutan Dalton (7) disesuaikan dengan
pH 7,4 dengan potasium hidroksida. Sampel-sampel itu cepat hilang. terhidrasi
dalam aseton menggunakan metode Parson (31) dan fiat-tertanam di Epon (28).
Blok plastik itu dipangkas sehingga hanya daerah blastoporal itu dipotong.
Melebihi setengah bagian dorsal dari embrio, bukan wilayah blastoporal saja, tidak
hanya mengurangi kemungkinan kerusakan operatif pada blastoporal sel, tetapi
difasilitasi orientasi spesimen. Bagian kurang dari 100 m di ketebalan dipotong
dengan pisau kaca dan diwarnai dengan timbal sitrat (33) selama 20 hingga 30
menit, mikrograf elektron dibuat dengan RCA EMU-3G.
PENGAMATAN

Sel-sel blastoporal memiliki penampilan yang mencolok di mikrograf elektron.


Permukaan luarnya dan leher tertata rumit – padat dengan partikel sitoplasma atau diisi
dengan bran, vesikel dan vakuola. Fitur ini trast nyata dengan sel-sel lain dari gastrula
yang sebagian besar tidak terdiferensiasi dan di organel sitoplasma yang baru saja
dimulai peningkatan jumlah dan kompleksitas dan di mana inklusi yang paling
menonjol adalah kuning telur, lemak drop-
memungkinkan, dan partikel sitoplasma (l, 13, 22). Observations dibuat pada gastrula
awal, Tahap l0 dari
Shumway (37). Untuk referensi yang mudah, lebih awal Tahap 10 dibagi menjadi
Tahapan 10A dan 10B; di Tahap 10A alur blastoporal lebih pendek dari bahwa dalam
Tahap 10B (bandingkan Gambar. 1 A dan 8 A).
Invaginasi Dini - Tahap IOA Pada Tahap 10A (Gbr. 1 A) alur blastoporal di
bagian sagital memiliki tampilan huruf U dengan lengan panjang (Gambar. I B
dan 1 C), dasar dari U sesuai dengan perpanjangan terdalam dari alur
blastoporal. Sel-sel yang melapisi alur masuk periode awal ini dapat dianggap
sebagai salah satu dari beberapa bentuk (Gbr. 1 C): (i) bentuk labu dengan leher
panjang dan sempit tubuh proksimal distal dan kasar bola, (2) bentuk baji
dengan permukaan eksterior yang berbelit-belit, dan (3) bentuk kuboid dengan
permukaan yang biasanya halus, tetapi yang mungkin menanggung microvilli
pada mereka sel-sel dekat bagian terdalam dari alur. Sel blastoporal berbentuk
labu ditemukan di dasar dari U dengan leher mereka berorientasi dicular ke
rongga blastoporal (fc, Gambar. 1 C dan 2). Mereka sebagian besar adalah
orang yang menganggap entoderm, al- meskipun beberapa sel mesodermal
dapat menjadi flask- berbentuk saat mereka mencapai perpanjangan terdalam
dari alur (16). Sel-sel berbentuk baji dari en toderm dan mesoderm ditemukan
di kedua sisi sel-sel labu (kami, Gambar. 1 C). Berbentuk kubus sel adalah
karakteristik mes-mes oderm pada dorsal arm dari U dan dari entoderm pada
lengan ventral. 1. FLASK CELLS Bagian parasagital dari bulan sabit
blastoporal ungkapkan sel-sel labu dengan leher yang sangat panjang seperti
tangkai dasar U (fc, Gambar. 2). Leher yang diberikan mungkin mencapai
panjang melebihi 40 # saat sedang Lebar 0,3 hingga 2,0 inci. Sebagai salah satu
terus parasagital sectioning menuju median pesawat dari embrio, sel labu
dengan leher yang lebih pendek dan lebar (fc, Gambar. 5) mengganti sel
berleher panjang. Jumlah labu sel meningkat hingga, di bagian saggital dari alur
blastoporal, leher sebanyak sepuluh sel-sel flask berbatasan dengan dasar U
(Gambar 6). bilik dari sel-sel labu (Gbr. 2). Sedangkan lapisan vesikuler pada
sel baji (Gambar 4) lebih sedikit vesikula dan lebih sempit dari itu di dalam
tabung sel (Gambar. 5), vesikula serupa dalam ukuran dan penampilan. Ujung
distal sel baji sangat erat bergabung dengan jenis sambungan yang sama seperti
dalam tabung sel: interdigitasi membran sel lateral (Gbr. 4), bibir yang tumpang
tindih (wl, Gambar. 5), dan padat "semen" interseluler (Gbr. 5). Secara
proksimal ad- sel-sel yang berdekatan dapat dipisahkan oleh interseluler spasi
20 hingga 80 m # lebar (Gbr. 4). Pembentukan Archenteron - Tahap lOB Pada
periode yang agak terlambat dalam gastrulasi, blastoporal groove
mengasumsikan bulan sabit yang lebih panjang bentuk (bandingkan Gambar. 1
A dan 8 A); sagital dan bagian parasagital dari embrio mengungkapkan hal itu
pergerakan morfogenik dari sel-sel memiliki ened dan mempersempit alur
(Gambar 8 B dan C). The archenteron mulai dari sebagai kira-kira rongga bulat
pada perpanjangan paling anterior dari alur, yaitu di bagian bawah U yang
terlihat dalam detik- tional view (Gbr. 8 C). Rongga ini dibatasi - teriorly oleh
sel-sel flask entodermal dan mesodermal, dorsal oleh sel-sel mesoderm yang
menyulitkan, dan secara ventral oleh labu dan sel-sel wedge dari entoderm
(Gambar 8 C dan 9). Meskipun sel-sel yang bernanah tampaknya telah pindah
jarak yang relatif singkat dalam periode waktu antara Tahapan 10A dan 10B,
perubahan yang ditandai telah terjadi dalam struktur mereka dan pengaturan.

1. FLASK CELLS

Sel-sel labu terlihat pada Tahap 10B mungkin yang sama yang memulai
invaginasi, sekarang ditambah oleh beberapa sel mesodermal yang involuting
dikonversi menjadi sel-sel tabung (16, 35, 36). Dengan Tahap 10B, Leher sel-sel
telah memendek dan menjadi lebih tersusun rumit (bandingkan Gambar. 9 dan
10 dengan Gambar. 2 dan 5). Secara proksimal, sel-sel labu sekarang dipisahkan
oleh ruang antar sel yang luas
(Gambar 8 C, 10, dan 13), di mana seperti jari ekstensi sitoplasma dapat
mencapai dari satu sel ke sel lainnya (p, Gambar. l0 dan 13). Ini memperluas
sion mungkin sesuai dengan pseudopodia dibentuk oleh sel-sel blastoporal yang
terisolasi (18, 19). Al- meskipun terpisah jauh di tepi proksimal mereka,
sebagian besar sel-sel labu erat bergabung di mereka ujung distal (Gbr. 9).
Beberapa sel di bagian paling ujung blastopore, bagaimanapun, tampaknya telah
mengendur koneksi interseluler mereka (lihat panah, Gambar. 10). Sel yang
invaginating dikenal untuk melepaskan mereka koneksi dan bermigrasi ke
blastocoel selama formasi archenteron (16), konfigurasi interseluler nections sel
labu ke kanan pada Gambar. 10 Mei akan melonggarkan sebelum migrasi seperti
itu. Mikrobial di permukaan sel sekarang tampak lebih tipis dan lebih panjang
dari pada Tahap 10A, dan mereka dipenuhi dengan substansi yang padat lapisan.
Sekali lagi, dalam matriks granular dari lapisan fibril samar dapat dideteksi
berjalan paralel ke permukaan (f, Gbr. 1 I). Whorls of membranes dan tumpukan
vesikula kadang-kadang ditemukan bersetubuh di lapisan padat (Gbr. 12). Di
bawah lapisan padat adalah vakuola besar. ditutup oleh membran tunggal (vc,
Gambar. 9 dan 10). Beberapa vakuola tertanam dalam jaringan membran dan
tubulus dan tampak terisi dengan bahan transparan-elektron homogen. Massa
membran yang mengelilingi vakuola dan terus ke leher sel tidak diatur dalam
pola yang terlihat. Di beberapa area, membran tampak agregasi vesikel (v, Gbr.
11); daerah lain mengandung sangat melipat membran (ml, Gambar. 10)
diselingi dengan vesikula atau ruang oblong kecil. Lebih jauh di sepanjang leher
lapisan membran memberi jalan untuk lipid tetesan, trombosit kuning,
mitokondria, pigmen granula, partikel sitoplasma, dan endoplasmik reticulum
(Gambar 9 dan 10). Tubuh sel yang mengandung mengandung nukleus serta
organel yang dimentelikan di atas dan inklusi. Korteksnya yang padat
mengandung bran dan vesikula kecil (my, v, Fig. 13). Ini lapisan tampaknya
versi lebih tipis dari lapisan padat di leher sel. Finger-like psuedopodia yang
mana menjembatani kesenjangan antarseluler juga diisi dengan substansi padat
(p, Gbr. 13) i

~. SEL WEDGE Pada Tahap 10B, sel berbentuk baji terbatas lapisan entodermal ventral
dari archenteron dan terletak sedikit jauh ke ketegangan alur (kami, Gambar. 8 C dan 9).
Itu permukaan sel yang berbatasan dengan alur miring menuju dasar alur, dan microvi]
li lebih panjang dan lebih banyak daripada di irisan sel-sel Panggung 10A (bandingkan
Gambar 2 dan 9). Itu lapisan padat, tidak begitu gelap seperti di labu yang berdekatan
sel, meluas ke microvilli (Gbr. 9). Itu sitoplasma proksimal ke lapisan padat diisi
dengan tubulus dan vesikel. 3. MELAYANI MESODERMAL SEL Sel mesodermal,
mudah dibedakan karena dari butiran pigmen mereka, garis sisi dorsal dari membentuk
archenteron dan memanjang sepanjang dorsal dinding blastopora ke bagian luar
(Gambar 8 C dan 9). Sedangkan sebagian besar sel yang involuting tampak berbentuk
kuboid dalam bentuk, sel-sel mesodermal yang melapisi pembentuk archenteron busur
kira-kira persegi panjang dengan mereka sumbu panjang sejajar dengan lengan U.
Seperti labu dan sel baji di daerah ini, mesodermal sel dipisahkan oleh ruang
interselular 0,5 ke Lebar 3 # (Gambar 8 C); involuting mesodermal sel-sel distal ke titik
bg pada Gambar. 8 C, bagaimanapun, sangat padat. Di daerah archenteron yang
membentuk, sejenis sel muncul di antara mcsodermal yang involuting sel yang memiliki
kemiripan dengan invagi- sel-sel labu yang mendinginkan. Sel-sel khusus ini lebih kecil
dan lebih padat dari mesoderm sekitarnya, dan panjang jari-jari sitoplasma memanjang
dari distal sur- menghadap sepanjang tepi alur blastoporal (Gbr. 14). Ujung jari yang
diperpanjang saling bertautan dengan ekstensi sitoplasma elongate lainnya sel
mesodcrmal (cj, Gambar. 14 dan 15). Secara proksimal, tubuh sel melekat pada sel
mesodermal yang berdekatan oleh pseudopodia (p, Gambar. 14) yang menjembatani
ruang antar sel (i, Gambar. 14). Microvilli pada permukaan dipenuhi dengan ekstensi
dari lapisan padat; di bawah lapisan padat dapat dilihat massa membran dan vesikel.
Partikel sitoplasma
Berdiameter 15 hingga 40 m, mungkin ribonucleo- protein dan glikogen, dapat terlihat
berlimpah di semua bagian sel (g, Gambar. 14 dan 15). Pigmen butiran lebih
terkonsentrasi daripada yang lain sel mesodermal (bandingkan sel yang berdekatan pada
Gbr. 14). DISKUSI Sejarah Sel-sel labu blastopore telah ada belajar dengan mikroskop
cahaya oleh banyak inves- tigators (14-16, 34, 35, 38), dan banyak teori telah maju
untuk menjelaskan gerakan mereka (lihat ulasan dalam 2, 8, 16, 17, 36, 38). Vogt sedini
1929 (39) menyarankan bahwa invaginasi jatuh tempo bagian untuk kontraksi aktif dari
ujung distal sel-sel blastoporal. Waddington (40) dikembangkan ide ini lebih lanjut
dengan berspekulasi bahwa penyebabnya agen untuk invaginasi entoderm mungkin
serat protein di tepi luar blastoporal sel yang aktif berkontraksi dan mengurangi distal
bagian dari sel blastoporal, dengan demikian memulai invaginasi. Dalam upaya untuk
mendapatkan dence untuk teori ini, Picken dan Waddington (40) menunjukkan bahwa
leher labu kuning bebas sel menunjukkan birefringence yang lemah menunjukkan
Kehadiran serat berjalan sepanjang proses dan tegak lurus ke permukaan luar telur.
Lewis (25, 26) mengembangkan teori serupa bekerja sebagian besar dengan model. Dia
mengaitkan invagi- bangsa di Amblystoma punctatum ke suatu tion dari "lapisan gel" di
ujung luar ento- sel-sel dermal. Holtfreter (15-21) telah memberikan kontribusi terbesar
analisis eksperimental rinci struktur dan pergerakan sel blastoporal. Dia mendiskon
gagasan bahwa kontraksi permukaan sel memainkan bagian dalam invaginasi;
sebaliknya, dia berpikir bahwa invaginasi tergantung pada migrasi ke dalam dari
blastoporal sel-sel dan pada sifat-sifat "lapisan permukaan" ering eksterior embrio.
Hasil dari karyanya yang berkaitan dengan diskusi ini mungkin jumlah- marized sebagai
berikut. Gaya penggerak yang memulai gastrulasi adalah lo-
dikurung di dalam sel-sel labu entoderm. Pada waktu gastrulasi, bagian-bagian dalam
sel-sel ini mulai bermigrasi ke dalam, sebagian karena sebagian perbedaan dalam
lingkungan antara proksimal dan permukaan distal sel (misalnya alkalinitas dari
blastocoelic fluid) dan berpesta ke tendon yang melekat sel-sel ini untuk memanjang
dan bermigrasi bersama poros proximo-distalnya. Sebagai sel blastoporal bermigrasi ke
dalam, dengan mekanisme kontraksi dan perluasan permukaan sel, bagian distal tetap
melekat erat pada lapisan permukaan dan ditarik ke dalam bentuk labu. "Ketika seluler
formasi telah mencapai titik tertentu, tarik kekuatan bagian leher elastis memaksa
permukaan dilapisi untuk menghasilkan dan surut ke dalam interior dalam bentuk
archenteron "(17) tarikan tangensial yang ditimbulkan oleh blasto yang invaginating sel
poral di seluruh mantel lalu menariknya sel marjinal. Holffreter (15) menyatakan bahwa
lapisan permukaan adalah a lapisan, di bawah tegangan elastis, yang mengelilingi
eksterior embrio dan mengikat perifer sel bersama-sama menjadi unit supercellular,
mengintegrasikan gerakan mereka. Dalam makalah awal (15) katanya mantel itu
kontraktil, tetapi dalam makalah selanjutnya (38) dia menyatakan sebaliknya. Holtfreter
berspekulasi itu mantel baik yang melekat erat dengan sel sel brane atau merupakan
kelanjutan aktual sitokin plasma. Sebagai lapisan permukaan adalah fitur penting dalam
Holt- teori freter tentang gastrulasi, berbagai peneliti telah mencoba untuk
memverifikasi keberadaannya. Dollander (9, I 1) mengamati lapisan ekstraseluler di
sekitarnya telur yang dibuahi Triton yang diwarnai dengan Nil sulfat biru, tetapi dia
tidak dapat menunjukkannya mantel di tahap selanjutnya (10). LCvtrup (27)
menyatakan bahwa mantel ekstraseluler ada di Rana temporaria em- bryos yang
mengambil bagian dalam osmoregulasi oleh secara mekanis menentang pembengkakan
osmotik. Bell (5, 6) melaporkan bahwa lapisan permukaan terdiri dari muco-
polisakarida dapat dihapus dari Rana pipiens
gastrula dan neurula dengan cara memfokuskan trasound. Mikrograf elektron belum
mendukung mem-porting gambar hipotetis Holtfreter tentang suatu sel tinous yang
menyelimuti kongruen dengan sitoplasma atau digabung erat dengan membran sel.
Karasaki (22) tidak menemukan bukti lapisan permukaan dalam mikrograf elektron dari
ektoderm dari Triturus embrio pyrrhogaster mulai usia dari awal blastula hingga akhir
tunas, juga tidak Matsumoto (29) yang meneliti sel-sel pelat syaraf dan sel-sel dari alur
blastoporal pada spesies yang sama. The elec- mikrograf tron dari alur blastoporal di
katak Phrynobatrachus natalensis (3) mengungkapkan tidak ada tambahan- penutup atau
mantel selular. Struktur Sel Blastoporal Penelitian ini, sesuai dengan penelitian pada
Triturus dan Phrynobatrachus, tidak menunjukkan bukti dari lapisan permukaan.
Mungkin ada tambahan- mantel mucopolysaccharide seluler, seperti itu terlihat pada
mikroskop cahaya di sekitarnya yang dibuahi telur (9) atau dihapus oleh USG (5), hadir
tetapi tidak dapat dilihat dengan metode fiksasi yang digunakan dalam mikroskop
elektron. Namun, diragukan, itu semacam penutup memainkan peran langsung dalam
morfogenik gerakan. Sulit membayangkan sebuah penutup, melekat erat pada
permukaan sel dan di bawah elastis ketegangan, yang bisa ditembus oleh panjang,
gelombang mikro bergelombang terlihat dalam Gambar. 2, 5, dan 6 atau yang mana
akan memungkinkan ketidakteraturan permukaan sel terlihat pada Gambar. 9. Mungkin,
permukaan sel eksterior dilemparkan ke mikrovili saat sel kuboid berubah untuk wedge
dan kemudian sel-sel labu. The microvilli adalah terpanjang di sel yang permukaan
distalnya paling banyak dikompresi. Bandingkan microvilli (saya) dalam termos (] c)
dan sel baji yang berdekatan (wc) dengan permukaan dari sel berbentuk kubus (cc) pada
Gbr. 2. Temuan saya mendukung orang-orang dari Holffreter (16) itu leher panjang
seperti batang adalah karakteristik sel-sel flask dalam invaginasi awal; sel-sel ini
ditemukan di Tahap 10A, tetapi tidak di Tahap 10B. Leher dari
sel-sel flask tampak cukup gelap dalam mikrograf cahaya. Ini dianggap karena
pigmentasi berat dari daerah-daerah ini (16, 26, 36), tetapi elektron mikroskop
mengungkapkan bahwa opacity disebabkan oleh partikel padat, membran, dan vesikula
di leher dan ujung distal sel-sel labu (Gambar. 2, 5, 9, dan 10), dan bukan untuk butiran
pigmen. Struktur umum bagian tengah dari lubang blastoporal di Phrynobatrachus
natalensis (3) kembali memiliki area yang sama di Hyla regilla (Gambar 6); itu leher
sel-sel flask, bantalan microvilli panjang, orang banyak dasar alur. Balinksy tidak
mengamati sel-sel labu berleher panjang yang terlihat pada Gambar. 2 dan 5, pra-
karena bagiannya berasal dari sagital bidang bulan sabit blastoporal. Dia mengamati
tidak lapisan padat atau lapisan vesikular sebanding dengan itu terlihat dalam Gambar. 5
dan 6. Sel-sel blastoporal di Phrynobatrachus tampaknya bergabung dengan erat di
mereka tepi terluar; seringkali membran sel lebih elektron-buram di wilayah ini.
Balinsky berpikir bahwa zat elektron-buram mungkin sebuah semen. Saya setuju
dengan interpretasinya bahwa adhesi sel di permukaan distalnya, baik dengan "semen"
(panah, Gbr. 7) atau dengan saling mengunci (Gambar 4, 6, dan 15), dapat menjelaskan
sebagian untuk gerakan massa terpadu sel-sel involuting. Meskipun Balinsky (3) tidak
mengamati yang padat lapisan di bawah permukaan sel blastoporal di gastrula awal
Phrynobatrachus, mikro-nya grafik menunjukkan pita partikel 0,08 hingga 0,2 g
lebarnya di bawah microvilli sel di tengah plat saraf. Dia mendalilkan bahwa band ini
adalah a lapisan kontraktil yang bertanggung jawab atas irisan bentuk lempeng saraf.
Matsumoto (29) mikrograf elektron stadium awal 12 gastrula dari
Triturus pyrrhogaster menunjukkan band yang padat, 25 hingga 60 m / ~ lebar, terdiri
dari mikropartikel di bawah mikrovili dari mesuting mesodermal di dalam blastoporal
groove (lokasi persisnya dari ceils) tidak dibuat jelas). Lapisan serupa 150 hingga 200
mtz dalam ketebalan terlihat di bawah membran sel di mikrografnya dari bagian tengah
saraf piring di 19 tahap embrio. Karasaki (22) melaporkan lapisan padat di dasar
microvilli di elec- mikrograf tron dari ektoderm saraf di Triturus pyrrhogaster di Stage
14. Baik Matsumoto maupun Karasaki berspekulasi tentang fungsi lapisan ini. Band-
band padat yang dijelaskan dalam literatur semble lapisan padat terlihat di mikrograf
saya. Di semua kasus, band ini terdiri dari erat partikel dan terletak di bawah microvilli
di permukaan sel distal. Lapisan tampaknya menyajikan penghalang untuk inklusi
seluler, dan telah ditemukan hanya dalam flask dan baji sel embrio di bawah- akan
gerakan morfogenik. Hanya di Hyla fibril yang terlihat pada lapisan padat (Gambar. 5,
7, dan 11). Ini mungkin karena mikrograf sebelumnya Balinsky, Karasaki, dan
Matsumoto tidak ada resolusi atau pembesaran yang cukup untuk diungkapkan fibril
jika ada. Holtfreter (16) mengamati bahwa, sebagai invaginasi hasil dan blastopore
menjadi lebih dalam, lebih dan lebih banyak sel wedge diubah menjadi labu sel,
mengambil tempat sel-sel flask yang memiliki mi- parut ke dalam massa sel interior
atau ke dalam blas- tocoel. Beberapa sel baji yang terlihat pada Gambar, 2 prob- cakap
mewakili bentuk peralihan dalam konversi dari sel mesodermal atau entodermal yang
menyulitkan ke dalam sel labu. Saat leher menyempit dan panjang- Jadi, lapisan padat
melebar dan vesikula menjadi
padat di leher sel. Inklusi lainnya bergeser ke proksimal. Ada kemungkinan bahwa
vesikel pada Tahap 10B coalese sebagai leher memendek ke membentuk lapisan
membran yang terlihat pada Tahap 10B. Itu lapisan vesikuler, seperti lapisan padat,
hanya ditemukan pada sel-sel gastro yang terlibat dalam morfogenik gerakan. Sangat
mungkin bahwa vesikula Panggung 10A dan membran Tahap 10B adalah elemen dari
retikulum endoplasma yang terlibat dalam sintesis dari lapisan padat. Ini akan dibahas
lebih lanjut detail dalam makalah selanjutnya. Vakuola besar di leher sel-sel labu
melapisi archenteron mungkin memiliki ekskresi atau fungsi sekretorik. ~ Pemendekan
dan pencabutan dari leher sel, yang mungkin terjadi di sel-sel flask mundur ke interior
(16), dapat dicapai, sebagian, oleh ekskresi cairan dari sitoplasma leher sel. Atau itu
vakuola dapat bersifat pinositosis. Balinsky dan Walther (4) telah mengamati vesikula
besar dalam sel-sel labu coretan primitif dalam cewek; mereka menganggap vesikel
menjadi pinocytotic, tetapi mereka tidak berkomentar tentang pentingnya proses
semacam itu. Holtfreter (7) tidak dapat menjelaskan apa yang terjadi dituliskan ke
cairan blastocoelic ketika archen- rongga teric menggantikan blastocoel, sebagai
mantelnya menutupi sel-sel archenteron relatif kedap air. Dalam terang saat ini belajar
akan tampak seperti itu, karena beberapa sel-sel labu lepaskan koneksi mereka secara
distal dan tarik ke dalamnya interior, kanal sementara dibuka ke dalam archenteron
(lihat panah, Gambar. 10) yang, dalam tidak adanya mantel, akan memungkinkan cairan
blastocoelic di bawah tekanan dari massa sel yang invaginating masuk ke rongga
archenteric. Mekanika Gastrulasi Kesimpulan tentang proses dinamis diambil dari studi
struktur sel harus tenta tive, tetapi mikrograf sebelumnya menyarankan dukungan port
untuk beberapa teori yang telah ada lanjut menjelaskan gerakan morfogenik. Itu
mekanisme pita kontraktil diusulkan oleh Balinsky (3) untuk neurulasi sekarang dapat
didalilkan untuk gas-
trulasi. Lapisan padat juga menawarkan struktur untuk Mekanisme prediksi gas dari
Waddington (40) trulasi (yaitu, serat atau matriks protein yang bisa mengalami
"fibrisasi" dan dengan kontraksi dan ekspansi menyebabkan gerakan morfogenik),
seperti sekaligus mekanisme untuk kontraksi dan ekspansi permukaan sel proksimal
(19-21). Jika kita berasumsi bahwa lapisan padat mengalami kontraksi dan ekspansi,
lalu invaginasi (yaitu, insinking, blas- formasi groove toporal, dan archen- berikutnya
formasi teron) dapat dicapai dengan labu dan baji lonjong dalam cara ganda: nate
pemendekan dan pemanjangan lapisan padat di leher dan ujung distal sel, dan migra-
tion dari ujung-ujung dalam sel oleh periodik con- traksi dan ekspansi lapisan padat di
bawahnya permukaan sel luar. Dalam diskusi berikut, referensi akan dibuat ke diagram
garis pada Gambar. 16 yang menawarkan skema hipotetis untuk aksi sel-sel flask dalam
gastrulasi. Apakah inpocketing awal dari entoderm adalah disebabkan oleh kontraksi
band padat atau oleh tarikan yang diberikan oleh ujung proksimal yang bermigrasi, atau
keduanya, tidak diketahui. Saya belum mengamati yang pertama tahapan invaginasi.
Mikrograf Balinsky (3) dari apa yang mungkin tahap awal dari Panggung saya 10A
tidak mengungkapkan lapisan padat di blastoporal sel, yang menunjukkan bahwa
insinking awal mungkin disebabkan oleh migrasi saja. Pada saat blasto- pori muncul
sebagai bulan sabit yang berbeda (Gbr. 1 A), Namun, lapisan padat hadir di bawah
permukaan lonjong yang melapisi anterior paling luas sion dari blastopore dan di leher
panjang sel-sel flask (Gbr. 2). Kontraksi yang padat lapisan dalam bidang sejajar dengan
permukaan sel (Gbr. 2) akan mempersempit ujung sel dan memperdalam blastoporal
groove (b dan c, Gambar. 16). Sebuah kontraksi leher panjang dalam bidang tegak lurus
terhadap Permukaan sel distal akan semakin memperdalam alur (e dan f, Gambar. 16).
Meskipun tindakan di leher mungkin sebagian bertanggung jawab untuk invaginasi,
tarikan ke dalam utama diberikan oleh ujung proksimal yang bermigrasi dari sel (16-19,
38). Tarikan semacam itu mengandaikan suatu
penahan permukaan sel dalam beberapa cara. Itu panah pada Gambar. 13 dapat
menunjukkan adhesi seluler di ujung microvilli dan pada undulations permukaan.
Baru-baru ini Lesseps (24) telah menunjukkan bahwa reaggregat- ing hati dan sel
retina berpigmen pada anak ayam embrio membuat kontak awal di puncak
permukaan undulations atau di ujung pseudopodium-like proses. Dia menyarankan
bahwa tonjolan ini berfungsi. tion untuk mengurangi gaya tolak antara ap-
proaching sel, memungkinkan pembentukan perekat obligasi yang kemudian dapat
memperluas area yang lebih luas. Ikatan seperti itu dapat terjadi sementara di
blasto- sel poral, memberikan traksi sel saat bergerak batin. Setelah pekerjaan
eksperimental ekstensif pada terisolasi sel embrio, Hohfreter (19, 20)
menyimpulkan itu mereka tidak bergerak dengan transformasi sol-gel sup- dengan
berani bertanggung jawab atas pergerakan amoeboid, tapi dengan selang kontraksi
dan ekspansi dari permukaan sel. Dalam sel-sel blastoporal ini "tiga- langkah maju,
dua langkah mundur dari "suksesi gerakan terbatas pada ujung dalam, yang
dihasilkan dalam gerakan bersih menuju interior. Pertanyaan tion segera muncul
seperti bagaimana struktur permukaan sel dari sel blastoporal yang bermigrasi
dibandingkan dengan pseudopodia dari ameba. Dalam con Trast ke ujung migrasi
yang sangat terstruktur sel blastoporal, mikroskopi elektron telah kembali struktur
kecil disurvei di daerah bergerak sitokin plasm dalam amoebae (32). Mikrograf
elektron dari Wohlfarth-Botterman (41, 42) menunjukkan lighdy sitoplasma
granular dalam pseudopodia yang pra- bisa bergerak pada saat fiksasi, dan
Lehmann (23) telah menunjukkan adanya berserat materi di bawah plasmalemma
Amoeba proteus. 1 Pseudopodia dari reagregasi jantung dan sel retina pada anak
ayam juga diisi dengan 1 Catatan ditambahkan sebagai bukti: Sejak penerimaan
manu skrip untuk publikasi, mikrograf elektron miliki telah diterbitkan
menunjukkan keberadaan yang padat matriks dan benang atau elemen fibrillar
disubstansi lebih padat dari sitoplasma sel (24). Seseorang dapat berspekulasi, lalu,
migrasi dari ujung proksimal sel terjadi dengan cara berikut. Lapisan padat
mengembang untuk membentuk proyeksi permukaan sel yang sementara menjadi
jangkar lainnya sel (p dan panah, Gambar. 13). Lapisan tebal itu kontrak. Jika
pergerakan bersih ke depan berhutang ekspansi melebihi gerakan bersih ke
belakang karena kontraksi, hasilnya adalah "tiga langkah maju, gerakan mundur
dua langkah mundur dijelaskan oleh Hohfreter (19, 20, 38) dalam isolasi sel
blastoporal. Pseudopodia baru berkembang dan melekat, dan sel labu terus bergerak
di- bangsal, memperdalam alur blastoporal. Jaring gerakan ke dalam dari ujung
proksimal adalah rep dibenci oleh panah yang lebih panjang putus-putusnya pada
Gambar. 16. Karena persimpangan yang ketat antara yang berdekatan sel,
pergerakan sel-sel labu akan berakibat menghitung, sebagian, untuk gerakan
terkoordinasi engsel berhimpun. Sebagai kontrak yang berunding jauh dan
bermigrasi ke dalam mereka menyeret tetangga mereka- bors di belakang mereka,
seolah-olah mereka melekat pada penutup supraseluler. Gerakan pasif ini bukan
keseluruhan cerita tentang involusi, bagaimanapun, sebagai sel chordamesodermal
telah terbukti memiliki self-stretching tendencies (16, 25, 36), dan the sel
mesoderm khusus yang terlihat pada Gambar. 14 dapat memainkan peran aktif
dalam involusi. Ada kemungkinan bahwa tion dan perluasan lapisan padat dalam
waktu yang lama jari sel menarik sel mesodermal yang berdekatan menuju bagian
dalam embrio. Pertanyaannya tetap tentang mekanisme oleh dimana lapisan padat
berkontraksi. Agaknya, itu lapisan terdiri dari matriks matriks inter- direndam
dengan serat protein; apakah matriks atau serat mengalami kontraksi adalah
masalah untuk spec- memindahkan sebagian dari tanah plasm dari amuba
Hyalodiscus simplex, Amoeba proteus, dan jamur lendir Physarum (43). Bukti
morfologis ini menambahkan mendukung teori kontraktilitas amoeboid
gerakan.ulasi. Diharapkan bahwa metode fiksasi yang lebih baik dikombinasikan
dengan pekerjaan eksperimental pada terisolasi
labu dayung akan membantu dalam solusi masalah ini lems. Teori kontrak dan
perluasan
lapisan padat menawarkan, tentu saja, hanya sebagian penjelasan bangsa mekanika
gastrisi. Tidak ada diketahui tentang mengapa sel-sel labu mulai invagination, apa
yang membentuk polaritas aksial mereka, atau apa menentukan sel mana yang akan
memanjang. Tulisan ini adalah bagian dari tesis yang diajukan secara parsial
pemenuhan persyaratan untuk Ph.D. gelar. Ucapan terima kasih diberikan kepada
Prof. Richard M. Eakin untuknya murah hati dan tak ternilai harganya bantuan
dalam mempersiapkan makalah ini untuk publikasi, untuk Prof William E. Berg
untuk membaca kritis
naskah, untuk Mrs. Emily E. Reid untuk gambar, dan ke Layanan Kesehatan Publik
Amerika Serikat untuk dukungan persekutuan.

REFERENSI 1. BAKER, P. C., Perubahan dalam tubuh lipid selama gastrulasi di


trcefrog, Hyla regilla, Exp. Penelitian Sel, 1963, 31, 451. 2. BAKER, P. C.,
Uhrastructure dari gastrula Hyla regilla, tesis Doktor, Universitas Indonesia California,
Berkeley, 1964. 3. BALINSKY, B. I., mekanisme Uhrastruktur gastrulasi dan neurulasi,
di Simposium pada Sel dan Pengembangan Gizi, Institut International d'Embryologie
dan Fondazione A, Baselli (1960), Pallanza, 1961, 550. 4. BALINSKY, B. I., dan
WALTHER, H., The immigra- tion dari mesoblast dugaan dari prim- beruntun itive
pada cewek seperti yang dipelajari dengan mikroskop elektron, Acta Embryol. et
Morphol. Exp., 1961, 4, 261. 5. BELL, E., Disosiasi sel ektodermal dan dari "lapisan
permukaan" dari embrio amfibi dengan cara USG terfokus: karakter dari "lapisan
permukaan," Anat. Rek, 1958, 131, 532. 6. BELL, E., Beberapa pengamatan pada
lapisan permukaan dan material matriks interseluler dari amphibian ectoderm, Exp.
Penelitian Sel, 1960, 20, 378. 7. DALTON, A. J., Sebuah fiksatif krom-osmium untuk
elektronmicroscopy, Anat. Rek, 1955, 121, 281.8. DEnAAN, R. L., migrasi Sel dan
morfo-
gerakan genetik, dalam The Chemical Basis of Pengembangan, (W. D. McElroy dan B.
Glass, editor), Baltimore, The Johns Hopkins Press, 1958. 9. DOLLANDER, A.,
Pengamatan perhatian la struktur du cortex de l'oeuf de terrains
amphibiens urod ~ les mise en 6videnee du
"mantel" de Holffreter, Compt. membelah. Assoc. Anat.,
1951, 38, 430.
10. DOLLANDEn, A., Pengamatan keluarga seorang
taines propri6t6s du cortex de l'oeuf d'amphi-
bien, Arch. Anat. Micr. et Morphol. Exp., 1953,
42, 185.
I I. DOLLANDER, A., struktur La du cortex de l'oeuf
de Triton mengamati ~ e sur coupes denda et ultra-
denda au microscope ordinaire, et au microscope
~ lectronique, Compt. membelah. Soc. biol., 1954, 148 ~
152.
12. EAKIN. ~ .. M., Actinomycin D penghambatan sel
diferensiasi dalam pengisap amfibi, Z.
Zellforsch., 1964, di media.
13. EArdrq, R. 1V [., Dan LEHMANN, F. E., Elektro
studi mikroskopis mengembangkan amfibi ektoderm, Roux 'Arch., 1957, 150, 177.
14. Nya, W., Unsere K6rperform und das physiolo- Masalah gische ihrer
Entstehung, Leipzig, 1874. 15. HOLTFI ~ TER, J., Properties dan fungsi dari
lapisan permukaan dalam embrio amfibi, J. Exp. Zool., 1943, 93, 251. 16.
HOLTFRETeR J., Sebuah studi tentang mekanika gastrulasi. Bagian I, atau.
Exp. Zool., 1943, 94, 261. 17. HOLTFRETER J., Sebuah studi tentang
mekanika gastrulasi. Bagian II, J. Exp. Zool., 1944, 95, 171. 18. HOLT ~
ETEIZ J., Struktur, motilitas dan locomo- tion dalam sel amfibi embrio
terisolasi, J. Morphol., 1946, 79, 27. 19. HOLTFREaXR J., Pengamatan tentang
migrasi, agregasi dan fagositosis embrio sel, J. Morphol., 1947, 80, 25. 20.
HOLTFRETER J., Perubahan struktur dan kinetika diferensiasi sel embrio, J.
Morphol., 1947, 80, 57. 21. t-IoLTFRETER J., Signifikansi dari sel sel brane
dalam proses embrio, Ann. New York Acad. Sc., 1948, 49, 709. 22. KARASAr,
I, S., studi mikroskop elektron pada struktur sitoplasma sel ektoderm dari
Triturus embrio selama fase awal diferensiasi, Embryologia, 1959, 4, 247. 23.
LEHMANN, F. E., Der Feinbau der Organoide bon Amoeba proteus und seine
Beeinflussung durch versehiedene Fixierstoffe, Ergebn. Biol., 1958, 21, 88. 24.
L ~ ssEPS, R.J., proyeksi permukaan sel: peran mereka dalam agregasi sel
cewek embrio sebagai diungkapkan dengan mikroskop elektron, J. Exp. Zool.,
1963, 153, 171. 25. LEwis, W. H., Mekanika invaginasi, Anat. Rek, 1947, 97,
139. 26. LEwis, W. H., Gel lapisan sel dan telur dan peran mereka dalam
perkembangan awal, Lea. Set. Roscoe B. Jackson Mem. Lab., 1949, 59. 27. Lg
~ VTRUP, S., Pada lapisan permukaan di amphib- embrio ian, atau. Exp. Zool.,
1962, 150, 197. 28. LUFT, J. H., Perbaikan dalam resin epoxy em- metode
tempat tidur, J. Biophysic. dan Biochem. Cytol., 1961, 9, 409. 29.
MATSUMOTO, A., Electron microscopic observa- tions pada proses
sitoplasma di Triturus
embrio pada tahap perkembangan awal, J. Electronmicroscopy, 1961, 10, 39. 30.
NIu, M. C., dan TWlTTY, V. C ,, The differentia- tion gastrula ectoderm pada
kondisi sedang disebut oleh mesoderm aksial, Proc. Nat. Acad. Sc., 1953, 39,
985. 31. PARSONS, D. F., Metode sederhana untuk mendapatkan peningkatan
kontras pada bagian Araldite dengan menggunakan pewarnaan postfixation
jaringan dengan potasium permangenat, J. Biofisika. dan Biochem. Cytol.,
1961, 11, 492. 32. PITELKA, D., Studi Mikroskop Elektron dari Protozoa, New
York, MacMillan Co., 1963. 33 REYNOLDS, E. S., Penggunaan timbal sitrat
pada tinggi pH sebagai pewarnaan elektron padat dalam elektron mikroskopi, J.
Cell Biol., 1963, 17, 208. 34. RHUMBLER, L., Zur Mechanik des
Gastrulations- vorganges, insbesondere der Invagination, Lengkungan.
Entwcklngsmechn., 1902, 14, 401. 35. RUFFINI, A., Fisiogenia, Milano, F.
Vallardi, 1925. 36. SCHECHTMAN, A. M., Mekanisme amfib ian gastrulasi,
Univ. Pub California. Zool. 1942, 51, 1. 37. SHUMWAY, W., Tahapan dalam
perkembangan normal dari Rana pipiens. I. Bentuk eksternal, Anat. Rekam,
1940, 78, 139. 38. TowN ~, P. L., dan HOLTrRETER, J., Sutradara gerakan
dan adhesi selektif dari em- sel amfibi bryonic, J. Exp. Zool., 1955, 128, 53. 39.
VocT, W., Gestaltungsanalyse am Amphibien- keim mit 6rtlicher Vitafiirbung.
II. Teil, Gastrulasi dan Mesodermbildung bei Urodelen und Anuren, Arch.
Entwcklngsmechn., 1929, 120, 384. 40. WADDINGTOI ~, C. H.,
Penyelenggara dan Gen, Cambridge University Press, 1940. 41.
WOHLFARTH-BoTTERMAN, K. E., Protistenstu- dien. X. Licht- und
elektronen-mikroskopische Untersuchungen an der Amobe Hyalodiscus
simplex n. sp., Protoplasma, 1960, 52, 58. 42. WOHLFARTH-
BOTTERMANN, K. E., Cytologische Studien. VII. Strukturaspekte der Grund-
substanz des Cytoplasmas nach Einwirkung verschiedener Fixierungsmittel,
Protoplasma, 1961, 53, 259. 43. WOHLFARTH-BOTTERMAN, K. E.,
Struktur sel dan signifikansi mereka untuk gerakan ameboid, dalam Tinjauan
Internasional Sitologi, (G. H. Bourne dan J. F. Danielli, editor), New York, The
Academic Press, Inc., 1964.