TUGAS IMUNOLOGI

The Expression Patterns of Some Pro-inflammatory and Anti-inflammatory Cytokines

Genes Pre and Post A Pola

( Ekspresi beberapa sitokin Pro-inflamasi dan anti-inflamasi Gen Pre and Post Acute Exercise

cute Exercise )

Disusun oleh :

FRYLIA RANTESAU

G1C2309

KELAS. E

PROGRAM STUDI D IV ANALIS KESEHATAN

FAKULTAS ILMU KEPERAWATAN DAN KESEHATAN
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SEMARANG
2018
 Pola Ekspresi beberapa sitokin Pro-inflamasi dan anti-inflamasi Gen Pre
and Post Acute Exercise

Post exercise stress telah menyebabkan upregulation beberapa gen dalam tubuh manusia
termasuk gen limfositik yang menunjukkan pola ekspresi meningkat dalam waktu 1 sampai 4
jam setelah stimulasi.

dikaitkan dengan pergeseran produksi sitokin terhadap pola anti-inflamasi dengan

peningkatan kortisol dan katekolamin sebagai mediator yang mungkin Telah ditetapkan bahwa
tekanan pada pelajar akademis adalah penghambatan terhadap proliferasi limfosit CD 4+
limfosit T dengan peningkatan kortisol serum sebagai mediator yang mungkin. Hal ini juga telah
dilaporkan bahwa stres akademik secara signifikan meningkatkan serum. tingkat kortisol siswa
Namun, ada kekurangan informasi tentang pola ekspresi gen sitokin pro-inflamasi dan anti-
inflamasi pada latihan yang dilatih oleh para sarjana muda laki-laki. Penelitian ini dirancang
untuk menentukan pola ekspresi beberapa gen sitokin pro-inflamasi dan anti-inflamasi pada
beberapa sarjana laki-laki muda yang menjalani latihan lengkap dengan menggunakan protokol
Bruce untuk latihan akut submaksimal karena penelitian telah menunjukkan bahwa latihan
menyeluruh mengaktifkan pelepasan beberapa gen sitokin yang memodulasi respon kekebalan
individu yang tertekan . Ini akan menambah tingkat informasi olahraga yang ada yang
bermanfaat

Penelitian ini dirancang untuk menentukan pola ekspresi beberapa gen sitokin pro-
inflamasi dan anti-inflamasi pada beberapa sarjana laki-laki muda yang menjalani latihan
lengkap dengan menggunakan protokol Bruce untuk latihan akut submaksimal karena
penelitian telah menunjukkan bahwa latihan menyeluruh mengaktifkan pelepasan beberapa gen
sitokin yang memodulasi respon imun individu yang stres.

Bahan dan metode

siswa sarjana yang sehat dengan usia rata-rata 23 tahun dan indeks massa tubuh 22,7 ± 1,8
(Kg / m2) berpartisipasi sepenuhnya dalam penelitian ini. Persetujuan pasien diperoleh dari
subyek penelitian. Penelitian dilakukan di Fakultas Ilmu Kesehatan dan Teknologi, Universitas
Nnamdi Azikiwe.
2.2. Kriteria inklusi
Penelitian ini dilakukan pada siswa sarjana muda laki-laki muda yang sehat dari Fakultas Ilmu
Kesehatan, Universitas Nnamdi Azikiw, dalam usia 18 dan 35 tahun yang bersedia
berpartisipasi dalam penelitian ini.
2.3. Kriteria pengecualian
Pria muda dengan riwayat penyakit yang mendasar usianya . Hipertensi, denyut jantung tidak
teratur, gangguan pemanfaatan glukosa, asma, anemia dan bentuk anemia lainnya tidak
disertakan.

mahasiswa didorong untuk makan diet dua jam sebelum lomba ketahanan dan menghindari
aktivitas berat selama penelitian berlangsung. Setibanya di tempat penelitian, tinggi badan
mereka (H) dan berat (W) diukur dan dicatat dan mereka diizinkan untuk beristirahat setidaknya
selama sepuluh menit. Subyek ditekankan pada kelelahan menggunakan protokol treadmill
Bruce untuk latihan maksimal. Protokol stres akibat latihan dimulai pada 1jam dan tingkat 10%
dan meningkat 2% setiap 3 menit dengan cara yang tidak melangkah ke tahap akhir pada 9,6
km / jam dengan nilai 22% Target detak jantung pada treadmill adalah 60-80 persen dari

cadangan maksimal jantung (HRR). Perbedaan antara denyut jantung maksimal (MHR)
dan denyut jantung istirahat (RHR). HRR dihitung dengan menggunakan rumus:
HRR = MHR-RHR.
MHR = 220 tahun.
Seperti yang dijelaskan oleh Ogwumike dkk [10]. Subjek melanjutkan ini selama dua puluh satu
menit atau turun saat mereka lelah. Empat belas dari dua puluh lima subjek kelelahan sebelum
dua puluh satu menit. Sampel darah dikumpulkan pada empat titik waktu yang berbeda:
sebelum, satu jam, empat jam dan dua puluh empat jam setelah tahap latihan.
Sampel Darah

6 sampel darah vena dikumpulkan dari vena dengan menggunakan vacutainer dan jarum dari
masing-masing mahasiswa dibagi sama rata ke wadah kosong dan vacumainer RNA untuk
isolasi RNA limfosit total.
Penentuan Kadar Kortisol Serum
Uji immunosorbent enzyme-linked digunakan untuk menentukan kadar serum cortisol dalam ,
20 μl standar atau sampel ditambahkan per microplates. 200 μl konjugat hormon kortisol
ditambahkan ke standar atau sampel dan ditutup dengan pita segel. Itu diinkubasi pada suhu
kamar selama 1 jam. Larutannya dibuang dan lempeng mikro dicuci tiga kali dengan larutan
pembersih 300 ml dari 1 X. 100 μl substrat tetrametil benzidin satu langkah ditambahkan ke
masing-masing lempeng mikro dan diinkubasi selama 15 menit pada suhu kamar dalam tempat
gelap 100 μl larutan stop ditambahkan ke masing-masing lempeng mikro. Intensitas warna
yang dikembangkan diukur pada panjang gelombang 450 nm menggunakan pembaca faks
microzer 4100 mic.
2.8. Metode Reaksi Rantai Polimerase
Total RNA diekstraksi menggunakan ZR Whole -Blood RNA Mini Prep dengan nomor katalog R
1020 dan R 1021 oleh ZYMO RESEARCH CORPORATION sesuai dengan spesifikasi pabrik.
RNA Total yang diekstraksi dicabut dan diamplifikasi dengan kit One Taq One Step RT-PCR
dengan nomor NEB E 5315 S oleh penggabungan BioLink BARU ENGLAND sesuai dengan
spesifikasi pabrik. Primer yang dipilih digunakan untuk menargetkan gen sitokin menggunakan
mesin pelacak reaksi eksperimental berenergi MJ seri peltier di Laboratorium Penelitian dan
Pusat Kesehatan Lahor, 121, BeninAgbor Lama, Benin City, negara bagian Edo, Nigeria. Tabel
1 menunjukkan rincian primer yang digunakan. Komponen sistem dicairkan dan dicampur
dengan pembalik sepuluh kali. PCR dilakukan dalam campuran reaksi 50 μl yang mengandung
25 μl Satu Taq satu langkah campuran master master (2 x), 2 μl Satu Taq satu enzim campuran
(2 x), 2 μl masing-masing primer maju gen spesifik 10 μM), 2 μ dari masing-masing primer
reverse gen-specific (10 μM), 9 μl air bebas nuklease dan 10 μl dari template RNA ditambahkan
terakhir. PCR segera dimulai sebagai berikut: Reverse transcriptase 30 menit, denaturasi awal
pada 94 "° C" selama 1 menit, diikuti dengan 39 siklus denaturasi pada suhu 94 ° C selama 15
detik, annealing pada TM-5 ° C selama 30 detik, perpanjangan 68 ° C selama 1 menit. Lima liter
mikro produk PCR yang diperkuat dianalisis pada gel agarosa 1% yang mengandung etidium
bromida dalam buffer 1 X Tris EDTA.
Elektroforesis dilakukan pada 90 V selama 30 menit dengan mesin elektroforesis tetra sumber
EDVOTEK, Bethesda, AS. Gen yang ditargetkan divisualisasikan oleh Weegaec Dolphin-Doc
UV transilluminator dan difoto. Bobot molekul dihitung dengan menggunakan standar berat
molekul penanda.

Hasil
Studi tersebut mengungkapkan bahwa 11 dari 25 peserta memiliki gen faktor nekrosis tumor
mereka yang diregulasi pada 1 jam setelah latihan dan berlanjut sampai 24 jam setelah latihan.
Selain itu, gen interferon gamma dan interleukin 10 diregulasi pada latihan 4 jam dan
bertahan sampai 24 jam pasca latihan di sebagian besar mahasiswa Studi ini juga
mengungkapkan bahwa rata-rata ± mahasiswa. Di tingkat kortisol subyek yang kelelahan
sebelum akhir latihan (21 menit) adalah 293,1 ± 150,86 nmol / L sebelum latihan, 411,0 ±
169,71 nmol / L satu jam setelah olahraga, 246,0 ± 155,12 nmol / L latihan empat jam dan
183,4 ± 72,83 nmol / L dua puluh empat jam setelah latihan. Tingkat kortisol secara signifikan
lebih tinggi pada satu jam setelah latihan bila dibandingkan dengan preexercise (P = 0,000).
Namun, tidak ada perbedaan yang signifikan bila dibandingkan dengan latihan empat dan dua
puluh empat jam (P = 0,222). Rata-rata ± S. D tingkat kortisol subjek yang kelelahan pada dua
puluh satu menit latihan adalah 226,4 ± 67,95 nmol / L sebelum latihan, 355,6 ± 153,62 nmol / L
satu jam setelah latihan, 190,1 ± 64,05 nmol / L empat jam latihan dan 183,6 ± 58,11 nmol / L
dua puluh empat jam setelah latihan. Tingkat kortisol secara signifikan lebih tinggi pada satu
jam setelah latihan bila dibandingkan dengan pre exercise (P = 0,000). Demikian pula, tidak ada
perbedaan yang signifikan bila dibandingkan dengan latihan postingan empat jam (P = 0,494)
dan latihan post dua puluh empat jam (P = 0,420)