II.

TÍTULO: GUIA DE LABORATOEIO Nº 02

“CULTIVO DE EUBACTERIAS”

III. OBJETIVOS
3.1. Objetivos Generales: Observar los diferentes medios de cultivo de las
bacterias.
3.2. Objetivos Específicos.- Comprobar la importancia de lavarse las manos
y la boca para evitar contraer enfermedades producidas por microorganismos.
IV. HIPÓTESIS
Si practicamos hábitos de higiene, entonces evitaremos
enfermedades producidas por bacterias.
V. MARCO TEORICO
El cultivo de bacterias en el laboratorio

El cultivo de bacterias, es uno de los sistemas más importantes para la

identificación de microorganismos observando su crecimiento en sustancias
alimenticias artificiales preparadas en el laboratorio químico.

En el cultivo de bacterias, la mayoría de las patógenas requieren nutrientes

complejos similares en composición a los líquidos orgánicos del cuerpo
humano, es por eso por lo que la base de muchos medios de cultivo es una
infusión de extractos de carne y Peptona a la que se añadirán otros
ingredientes.

Si hablamos de cómo se cultivan las bacterias tenemos que hacerlo también de

unas condiciones generales que deben darse:

Nutrientes adecuados disponibles. Un cultivo de bacterias adecuado para

investigar ha de contener como mínimo carbono, nitrógeno, azufre, fósforos y
sales inorgánicas. Actualmente, la forma más extendida de aportar estas
sustancias a los medios es utilizar peptona que, además, representa una fuente
fácilmente asequible de nitrógeno y carbón. A menudo se añaden al medio de
cultivo ciertos colorantes.

Consistencia del medio. Partiendo de un medio líquido podemos modificar su

consistencia añadiendo productos como la albúmina, gelatina o agar.
Luz ambiental. La mayoría de los microorganismos de un cultivo de bacterias
crecen mucho mejor en la oscuridad que en presencia de luz solar.

Temperatura. En líneas generales los patógenos humanos crecen en rangos

de temperatura mucho más cortos, alrededor de 37ºC.

Humedad y pH. Un mínimo de humedad en medio y atmosfera es necesario

para el desarrollo, así como un pH neutro.

Esterilidad. Fundamental recordar que todos los medios de cultivo han de

estar perfectamente estériles para evitar la aparición de formas de vida que
puedan alterar, enmascara o impedir el crecimiento.

Características

Un microorganismo se puede sembrar en un medio líquido o en la superficie de

un medio sólido de agar. Los medios de cultivo contienen distintos nutrientes
que van, desde azúcares simples hasta sustancias complejas como la sangre o
el extracto de caldo de carne. Para aislar o purificar una especie bacteriana a
partir de una muestra formada por muchos tipos de bacterias, se siembra en un
medio de cultivo sólido donde las células que se multiplican no cambian de
localización; tras muchos ciclos reproductivos, cada bacteria individual genera
por escisión binaria una colonia macroscópica compuesta por decenas de
millones de células similares a la original. Si esta colonia individual se siembra
a su vez en un nuevo medio crecerá como cultivo puro de un solo tipo de
bacteria.

La principal diferencia entre un medio de cultivo sólido y uno líquido es que el

medio de cultivo sólido contiene un 1,5–2% de agar-agar, mientras que el
medio líquido no contiene agar-agar.

VI. METODOLOGÍA:

Materiales:
 100 gramos de gelatina suelta sin sabor
 3 contenedores de vidrio pequeño con tapa
 Guantes esterilizados
 Un cubito de pollo
 Un vaso Baeker
 Hisopos y mondadientes
 Agua hervida
 Una baqueta o varilla de agitación
 Agua hervida

Procedimientos:

1. Para iniciar el experimento nos lavamos las manos con agua.

2. Se procedió a encender el mechero y se colocó el recipiente con
agua, luego se agregó la gelatina sin sabor y un cubo de caldo de
pollo removiéndola con la baqueta hasta disolverla.
3. Luego, cuidadosamente llenamos en 3 frascos la mezcla anterior se
dejó enfriar y se cubrió con sus tapas.
Muestra 1.- Se procedió a llenar en el frasco de vidrio número 1, la
suciedad que se recogió de la palma de las manos, luego de removió
suavemente, obteniendo el cultivo1.
Muestra 2.- Se echó al frasco de vidrio número 2, el frotis de las
ranuras de la mesa, removiendo constantemente y se obtuvo el cultivo 2.
Muestra 3.- En el frasco de vidrio número 3 se llenó el frotis de mucosa
bucal, removiendo cuidadosamente y se obtuvo el cultivo3.
4. A continuación se roturaron todas las muestras.
5. Finalmente, los tres frascos se guardaron en el refrigerador por 7
días, con una temperatura de 30 a 34 grados.
VII. ANÁLISIS DE RESULTADOS:
1. Después del tiempo previsto se retiraron los frascos del refrigerador
con mucho cuidado y los colocamos sobre la mesa, para no romper
los envases de vidrio donde se encontraban las muestras.
2. Se procedió a abrir una por una las muestras para observarlas en el
microscopio.
3. Con una pipeta se absorbió unas gotitas del cultivo y se dejó caer
sobre el portaobjetos y se tapó con el cubre objetos, luego se llevó al
microscopio.
4. Para las siguientes nuestras se desinfecto la pipeta para retirar todos
los residuos de la muestra anterior y se realizó el mismo
procedimiento.
 Cultivo 1 Cultivo 2 Cultivo 3
De la manos De las De la boca
carpetas
Verde con Verde con Verde con
Color superficie superficie superficie
blanca blanca y blanca y una
manchas viscosidad
negras blanca
Forma Circular Circular Circular

El más grande El más grande El más grande

Tamaño de 1 cm. Y el de 1 cm., el de 1 cm., el
más pequeño siguiente de 0.5 siguiente de 0.5
es de 0.3mm. mm. Y el más mm. Y el más
pequeño es de pequeño es de
0.2mm. 0.2mm.

¿La hipótesis que asumimos al principio fue correcta? ¿Por qué?

Sí, porque se ve claramente colonias de bacterias en los cultivos y estas
colonias se han formado solo con las cosas que tocamos diariamente sin
usar precauciones de higiene.
VIII. CONCLUSIONES:
- De la práctica de laboratorio se aprendió que en nuestra vida diaria
estamos expuestos a muchas enfermedades, por la presencia de las
bacterias en diversos lugares; por ello se debe practicar hábitos de
higiene.
- Si no practicamos los hábitos de higiene de 4 a siete días, las
bacterias forman sus colonias y afectarían al organismo produciendo
enfermedades diversas.

PREGUNTAS APRECIACIONES

¿Qué otras preguntas te plantearías - ¿Por qué hubo tantas bacterias en

sobre este tema?
¿Cuáles son los aspectos de las
características de estos seres vivos te
ha llamado la atención? ¿Por qué?
las muestras?
- ¿Cómo combatir a las bacterias?
- Que pueden formar colonias de
bacterias rápidamente, porque no
sabía que se multiplicaban tan
rápido produciendo enfermedades.
- La presencia de hongos en las
muestras después de 7 días, porque
no me imagine que las muestra
 tendrán hongos ya que se les dejó
en la refrigeradora´.

¿Cómo fue tu participación en el trabajo - Paripé activamente desde el

colaborativo con tu equipo?
principio hasta el final del
experimento, realizando las
indicaciones de la profesora y
apoyando en todo a mis
compañeros.

IX. RECOMENDACIONES:

- En las prácticas de laboratorio se recomienda seguir las

instrucciones al pie de la letra de la maestra, para que el experimento
sea confiable y exitoso.
- Que todos los integrantes del equipo colaboren en el desarrollo de la
experimentación para que se obtenga mejores resultados y todos
conozcan sobre el tema tratado.
- Tener cuidado en el uso de los instrumentos del laboratorio, ya que
muchos de ellos son de vidrio y podrían romperse con facilidad.

X. BIBLIOGRAFÍA:

https://alkemi.es/blog/como-cultivar-bacterias-en-el-laboratorio/
HORA: 8:06 PM FECHA: 23/06/18
https://es.wikipedia.org/wiki/Cultivo_(microbiolog%C3%ADa)
HORA: 8:20PM FECHA: 23/06/18