SEPARAÇÃO DE PIGMENTOS DE FOLHAS VERDES

Introdução

As clorofilas dão a cor verde às plantas

A clorofila não é solúvel em água e é mais instável em pH ácido.
As clorofilas podem ser extraídas das proteínas usando um solvente orgânico como a acetona
ou o metanol, e separadas através de cromatografia em papel. A separação é possível dada à
diferença no número de grupos polares entre as clorofilas a e b:
A fórmula molecular da clorofila a é C55H72N4O5Mg, e a da clorofila b
C55H70N4O6Mg.
I - Materiais e regentes
- Éter de petróleo (p.e. 80 –100 oC) ou hexano - Béquer de 50 mL
- Etanol - Erlenmeyer de 25 mL
- Acetona - Proveta de 10 mL
- Clorofórmio - Papel de filtro
- Sulfato de sódio anidro - Placa de Petri
- Folhas de espinafre ou chanana - Capilares
- Almofariz
- Pipeta de Pasteur
- Funil de separação de 60 mL

II - PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL
1. Colocar em um almofariz 5-10 folhas de espinafre e alguns mililitros de uma
mistura de 2:1 de éter de petróleo (fração de p.e. 80 -100o C) ou hexano e
etanol.
2. Triturar bem as folhas.
3. Filtrar o extrato, transferindo-o para um funil de separação.
4. Adicionar, igual volume de água.
5. Girar lentamente o funil, pois a agitação brusca pode causar a formação de
emulsão.
6. Separar e descartar a fase aquosa.
7. Repetir esta operação de lavagem, por mais duas vezes, sempre descartando
a fase aquosa.
8. Transferir a solução de pigmentos para um Erlenmeyer e adicionar
aproximadamente 2 g de sulfato de sódio anidro.
9. Após alguns minutos, utilizando uma pipeta de Pasteur, decantar a solução
de pigmentos do sulfato de sódio, transferindo para um béquer.
10. Separar os pigmentos através da cromatografia: umedecer a parte inferior de
um giz com o extrato, num béquer adicionar um pouco de acetona, colocar o
giz em pé sob essa solução, tampar o conjunto e observar a separação
pigmentos.