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CROMATOGRAFIA EN PAPEL

Técnicas de Laboratorio Químico


CROMATOGRAFIA
La cromatografía comprende un conjunto de técnicas que tienen como
finalidad la separación de mezclas basándose en la diferente capacidad
de interacción de cada componente en otra sustancia. De forma
general, consiste en pasar una fase móvil líquida o gas (una muestra
constituida por una mezcla que contiene el compuesto deseado en el
disolvente) a través de una fase estacionaria fija líquida o sólida. La fase
estacionaria retrasa el paso de los componentes de la muestra, de
forma que los componentes la atraviesan a diferentes velocidades y se
separan en el tiempo. Cada uno de los componentes de la mezcla
presenta un tiempo característico de paso por el sistema,
denominado tiempo de retención. Cuando el tiempo de retención del
compuesto deseado difiere del de los otros componentes de la mezcla,
éste se puede separar mediante la separación cromatográfica

Separación de una mezcla por la


interacción diferencial de sus
componentes con una fase
estacionaria sólida o líquida en
una fase móvil líquida o gas.
CROMATOGRAFIA EN
PAPÉL
• La cromatografía en papel es una
técnica simple, y económica muy
utilizado en los laboratorios para
realizar análisis cualitativos ya que no
requiere de ningún tipo de
equipamiento sofisticado. La fase
estacionaria está constituida
simplemente por una tira de papel filtro.
COMO SEPARAR LOS COMPONENTES DE
UN PLUMÓN DE COLOR POR CROMATOGRAFIA
Materiales
- Una tira de papel poroso que puede ser papel filtro de una cafetera
- Rotuladores de diferentes colores. (analito)
- Un vaso de vidrio.
- Alcohol.
- Un lápiz grafito.
Procedimiento
COMO SEPARAR LOS COMPONENTES DE
A PLUMÓN DE COLOR
• Primero se prepara el papel. Se recorta una tira de papel
poroso con unas dimensiones de 1,5 cm de ancho y que sea
un poco más larga que la longitud del vaso que se va a
utilizar para realizar la cromatografía.

• Luego de cortado el papel, se deberá marcar con lápiz grafito


una línea paralela y a un cm de la base.

Papel horizontal

• Al centro de esta linea se marcará un punto de la muestra,


repitiendo unas tres veces para cargar mejor el color
(mas concentrado). Esta mancha debe ser intensa pero
no muy grande, como una especie de punto grueso.
FASE MÓVIL
• Es momento de adicionar al vaso una cantidad de
solvente(alcohol, acetona, agua o mezclas
líquidos) aproximadamente 1 cm de altura, medida
desde el fondo del vaso. Ocupar un solvente en
que la muestra es soluble.
CAMARA CROMATOGRAFICA
• Preparada la muestra se coloca el listón fijo con cinta
adhesiva dentro del vaso, soportándolo con una varilla
de manera que quede colgando en un vaso que
contiene hasta aproximadamente 1 cm de solvente.

• El extremo del papel debe quedar contactando el


líquido, la mancha de muestra queda ubicada fuera
del líquido.

• Se tapa el vaso para evitar la evaporación del solvente.


LA SEPARACIÓN
• A medida que el agua (el disolvente) va
desplazándose por el papel filtro (el medio
poroso), arrastra consigo los pigmentos que
contiene la mancha de tinta.
• Como no todos son arrastrados con la misma
velocidad, al cabo de un rato se forman unas
franjas de colores que corresponden a los
componentes de la tinta del rotulador
• Se observan como aparecen manchas de
diversos colores sobre el papel, lo que indica
la variedad de tintas utilizadas para crear un
color determinado.

• Este experimento, lo podemos repetir con


diversas tintas de colores para poder
comparar los componentes de cada una de
ellas.
Cámara cromatografíca

El disolvente asciende
entonces por capilaridad a
lo largo de la placa,
arrastrando a los
compuestos a diferentes
velocidades, según el grado
de adsorción
Factor de retención (Rf)
CROMATOGRAMA

Al comparar el valor del factor de retension en el


cromatograma obtenido
con otros de sustancias patrones , es posible identificar
los componentes de la muestra.
Si dos cromatogramas responden al mismo valor ;
entonces se trata del mismo compónene
Pigmentos vegetales
• Para preparar una muestra de
pigmentos vegetales, es necesario la
previa disminución del tamaño y mezcla
de la muestra con el solvente.
EXTRACCION
• Se extrae la mezcla de pigmentos y a través
de su paso por la fase estacionaria, será
posible separar los diferentes componentes
de esta muestra.

• Utilizando el solvente adecuado


Se pueden separar e identificar las
clorofilas, Xantofilas y carotenos,

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