Anda di halaman 1dari 6

Biosensor dan Bioelectronics 87 (2017) 587 - 592

daftar isi yang tersedia di ScienceDirect

Biosensor dan Bioelectronics

jurnal homepage: www.elsevier.com/locate/bios

Karakterisasi elektroda selektif ion berbasis ionofor baru untuk penentuan potensiometri
kreatinin dalam urin

Tomáš Guinovart Sebuah . Daniel Hernández-Alonso b . Louis Adriaenssens b . c . Pascal Blondeau Sebuah .
F. Xavier Rius Sebuah . pablo Ballester b . d . Francisco J. Andrade Sebuah . n
Sebuah Departament de Quimica analitica i QUIMICA Organik, Universitat Rovira i Virgili (URV), C / Marcel lí Domingo 1, 43.007 Tarragona, Spanyol b Institut
Penelitian Kimia dari Catalonia (ICIQ), The Barcelona Institut Sains dan Teknologi, Av. Paisos Catalans, 16, 43.007 Tarragona, Spanyol c Sekolah Kimia,
University of Lincoln, Brayford Pool, Lincoln, LN6 7TS, UK
d Lembaga Catalan untuk Penelitian dan Advanced Studies (ICREA) Pg. Lluís Companys 23, 08010 Barcelona, Spanyol

articleinfo abstrak

Pasal sejarah: Optimasi, karakterisasi analitis dan validasi elektroda selektif ion baru untuk penentuan yang sangat sensitif dan selektif kreatinin dalam urin
Menerima Juni 2016 13 diterima
disajikan. A [4] molekul baru disintesis kaliks berbasis pirol digunakan sebagai ionofor untuk pengakuan ditingkatkan kation creatininium.
dalam bentuk revisi 29 Juli 2016
Perhitungan konstanta pembentukan kompleks dalam membran polimer dengan creatininium, kalium dan natrium con fi rms interaksi selektif yang
kuat antara Ionofor dan target. Optimalisasi sensor potensiometri yang disajikan di sini menghasilkan kinerja analitik yang luar biasa, dengan
Diterima 9 Agustus 2016 Tersedia online
10 Agustus 2016
berbagai linear yang membentang dari 1 m M untuk 10 mM dan batas deteksi 10 6.2 M. Perhitungan koefisien selektivitas fi koefisien terhadap
gangguan yang paling umum ditemukan juga menunjukkan signi fi perbaikan tidak bisa bila dibandingkan dengan sensor lain yang sudah
Kata kunci: dilaporkan. Kinerja sensor novel ini diuji dengan mengukur kreatinin dalam sampel urine nyata (N ¼ 50) dan membandingkan nilai terhadap
kreatinin
pendekatan kolorimetri standar (reaksi Jaffe ini). Hasil penelitian menunjukkan bahwa sensor ini memungkinkan penentuan cepat dan akurat
Selektif ion elektroda kaliks [4]
kreatinin dalam sampel nyata dengan manipulasi sampel minimal.
pirol Ionofor Membran Sensor

potensiometri & 2016 Elsevier-undang.

1. Perkenalan ekskresi) juga penting untuk mengevaluasi bersihan kreatinin. Last but not least, dari sudut pandang
analisis konsentrasi kreatinin dalam urin digunakan sebagai faktor normalisasi untuk meminimalkan

Kreatinin adalah produk sampingan metabolisme normal dihasilkan oleh tubuh selama produksi variabilitas karena volume pengenceran ( Viau et al., 2004 ; Wagner et al., 2010 ). Untuk semua alasan ini,
penentuan kreatinin adalah salah satu rutinitas yang paling umum dari laboratorium klinis.
energi ( Burtis et al., 2012 ). Sejak akumulasi merupakan racun bagi sel-sel, sebuah fi Mekanisme ne-
tuned ekskresi untuk menghindari tingkat berbahaya dari zat ini sangat penting untuk mempertahankan
hidup. Untuk alasan ini, kreatinin diangkut oleh aliran darah sebagian besar ke ginjal, di mana itu adalah
fi disaring dan diekskresikan melalui buang air kecil. Oleh karena itu, pemantauan kadar kreatinin dalam Kemudian mungkin datang sebagai sesuatu yang mengejutkan bahwa, meskipun relevansi ini, metode

darah dan urin kepentingan utama. Sebagai indikator kunci dari fungsi ginjal ( Israni dan Kasiske 2012 ), saat digunakan untuk penentuan kreatinin menunjukkan begitu banyak kelemahan ( Jacobs et al., 1991 )
Tingkat kreatinin merupakan parameter penting untuk mendiagnosa dan memantau kedua penyakit Yang telah menimbulkan kekhawatiran serius di antara komunitas medis ( Delanghe et al., 2008 ). Hari ini,
ginjal kronis dan akut seperti infeksi, kegagalan kronis, efek obat, dll Hal ini secara luas diketahui bahwa pendekatan yang paling banyak digunakan untuk menentukan kreatinin didasarkan pada reaksinya dengan
konsentrasi kreatinin dalam darah melebihi ambang batas tertentu adalah mengancam kehidupan asam pikrat (reaksi Jaffe ( Pizzolante 1989 )), Sebuah metode yang telah dilaporkan lebih dari satu abad

kondisi ( Davila dan Gardner, 1987 ). Pada penyakit ginjal kronis (suatu kondisi yang mempengaruhi yang lalu. Alternatif berbasis enzim-pendekatan kolorimetri juga digunakan. Namun, sebagian besar
hampir 10% dari populasi dunia ( Eknoyan et al., 2013 )) Evolusi pasien dipantau melalui tingkat darah metode kolorimetri tunduk kesalahan berasal dari warna sampel dan gangguan umum seperti aseton dan

kreatinin. tingkat kemih (khususnya 24 h kemih glukosa yang dapat mengganggu pembentukan warna ( Jacobs et al., 1991 ).

Potensiometri adalah pilihan yang sangat menarik untuk laboratorium klinis, sebagian besar
karena ketahanan dan kesederhanaan operasi dan instrumentasi. Saat ini, metode potensiometri
menggunakan elektroda selektif ion (ISES) merupakan bagian dari toolkit rutin untuk penentuan pH
n Penulis yang sesuai. dan ion di biologi fl UID ( Bakker dan
Alamat email: franciscojavier.andrade@urv.cat (FJ Andrade).

http://dx.doi.org/10.1016/j.bios.2016.08.025
0956-5663 / & 2016 Elsevier-undang.
588 T. Guinovart et al. / Biosensor dan Bioelectronics 87 (2017) 587 - 592

Meyerhoff, 2007 ). Sebagai bukti lebih lanjut dari keuntungan mereka, penggunaannya telah bahkan 2.3. Penentuan dalam sampel nyata
diperluas ke titik-of-perawatan pendekatan ( Novell et al., 2014 ). Buhlmann dan rekan kerja
memperkenalkan ISE untuk penentuan langsung kreatinin ( Buhlmann et al., 2001 ). ISE ini tidak sampel urin diencerkan dengan 50 mM HOAc / Mg (OAc) 2 pada pH
menggunakan spesifik apa saja fi c reseptor untuk kreatinin. Sebaliknya, itu menggunakan membran 3,8 untuk memastikan kreatinin dalam keadaan (creatininium kation) yang bermuatan positif. Sampel
polimer dengan ion-exchanger dan chloroparaf fi n sebagai plasticizer. Sementara kreatinin dapat diencerkan pada 1: 2, 1:10 dan 1: 100 rasio untuk mengevaluasi di fl pengaruh dari komponen matriks.
ditentukan dalam larutan air, yang biofouling diproduksi oleh lipid netral menjadi keterbatasan serius Hasil yang diperoleh dibandingkan terhadap metode Jaffe standar. prediksi terbaik diperoleh ketika
dalam aplikasi praktis. Terbukti, cara untuk meningkatkan selektivitas dari ISE adalah penggabungan sampel diencerkan 1: 100, karena akan dibahas di bawah. Oleh karena itu, faktor pengenceran ini
dari Ionofor, yaitu, reseptor sintetis mampu mengikat analit melalui selektif interaksi host-tamu. digunakan untuk penentuan kreatinin dalam semua sampel urin. EMF tercatat sampai pembacaan
Sebuah ISES kreatinin berdasarkan pendekatan ini telah diusulkan beberapa dekade yang lalu, tetapi - potensial yang stabil diperoleh (biasanya kurang dari satu menit) dan setelah itu, elektroda
sekali lagi-kinerja yang diperoleh tidak cukup baik untuk diterapkan pada analisis sampel nyata ( Elmosallamydibersihkan dengan air suling ganda.

2006 ; Hassan et al., 2005 ; Kelly et al., 1995 ). Baru-baru ini, kami melaporkan, untuk fi pertama kalinya, ISE
mampu menentukan kreatinin dalam sampel nyata ( Guinovart et al., 2016 ). Dalam karya ini, kami
memberikan wawasan baru mengenai karakterisasi, optimasi dan kinerja analitik dari sensor novel

ini, bersama-sama dengan validasi melalui penentuan kreatinin dalam sampel urine nyata. ISE ini Dalam kondisi optimal, penentuan kolorimetri kreatinin menggunakan reaksi Jaffe ini dilakukan
dengan menggunakan 2 ml 10 mM dari asam pikrat di media yang sangat dasar (250 mM NaOH) di
bergantung pada penggunaan kaliks phosphonatebridged [4] pirol Ionofor yang menunjukkan
kuvet di mana 2 m L standar (atau sampel) ditambahkan dan biarkan bereaksi selama 30 menit.
selektivitas yang sangat baik untuk kreatinin. Di sini, kami melaporkan konstanta pembentukan
kompleks dari Ionofor dengan target dalam membran polimer, yang con fi RMS keunggulannya Absorbansi produk diikuti di 505 nm. Mengingat konsentrasi sebenarnya dalam kuvet tersebut ( yaitu,

dibandingkan dengan ionofor dilaporkan sebelumnya. Kami lebih menunjukkan di fl pengaruh dari pH faktor pengenceran 1: 100 untuk standar dan sampel), rentang linear membentang dari 1 μ M untuk 100 μ M
kreatinin.
pada parameter deteksi. Terakhir, penekanan khusus diberikan kepada analisis sampel nyata dan
pendekatan untuk mengurangi gangguan matriks. Dilusi muncul sebagai cara penting untuk membeli
hasil yang dapat diandalkan, sehingga 50 sampel urine nyata dianalisis menggunakan sensor
potensiometri dan memberikan nilai-nilai yang berkorelasi sangat baik dengan metode standar Jaffe ini.

3. Hasil dan Pembahasan

3.1. Kaliks [4] pirol Ionofor

The kaliks [4] molekul pirol digunakan sebagai ionofor dalam penelitian ini ( Gambar. 1 b) baru-baru
ini dilaporkan oleh kelompok kami ( Guinovart et al., 2016 ). Ada beberapa interaksi host-tamu yang
membuat reseptor yang ideal sintetis untuk menjebak kreatinin dalam rongga nya. Ini dapat dilihat dalam
struktur kristal dihitung dengan X-ray dari kompleks hostguest menampilkan Ionofor dan kreatinin netral (
Gambar. 1 c). Spesies kationik, kation creatininium ( Gambar. 1 a), mengikat ionofor yang berbeda,
membuat kompleks dengan 2: stoikiometri host: 1 tamu. Namun, modus mengikat dalam rongga yang
mendalam dari kaliks [4] pirol telah terbukti untuk menjadi serupa. Hal ini relevan dalam potensiometri
sejak spesies yang dikenakan
2. Percobaan

2.1. persiapan elektroda

Kaca karbon (GC) (Sigradur-G, Jerman) batang (panjang: 4 cm, diameter: 0,3 cm) diperkenalkan ke
Te fl pada tubuh (panjang: 2 cm, diameter: 0,6 cm). Salah satu ujung GC itu fi pertama dipoles dengan
kertas abrasif (Carbimet 600 / P1200, Buehler, USA) dan setelah itu dengan alumina dari berbagai ukuran
butir (1 dan 0,03 mm, Buehler, USA).

Dalam informasi pendukung itu merinci komposisi membran selektif untuk kreatinin dan
membran komposisi yang digunakan untuk perhitungan konstanta pembentukan kompleks.

2.2. Instrumentasi

gaya gerak listrik (EMF) diukur pada suhu kamar (24 ° C) dengan impedansi input tinggi (10 15 Ω)
EMF16 data perangkat multichannel akuisisi (Lawson Laboratories, Inc. Malvern). Sebuah ganda junction Ag /
AgCl / KCl 3 M referensi elektroda (tipe

6.0726.100, Metrohm AG) yang berisi 1 M LiOAc elektroda jembatan digunakan dalam semua
percobaan potensiometri.

Konstanta pembentukan kompleks diperoleh dengan menggunakan Philips IS-561 (Elektroda


Tubuh ISE, Selectophore) dari Sigma-Aldrich (Spanyol). Prosedur yang diuraikan oleh Bakker dan
rekan kerja ( Mi dan Bakker, 1999 ) Diikuti untuk menghitung konstanta mengikat (lihat SI untuk
informasi lebih lanjut). Ini harus menunjukkan bahwa untuk perhitungan konstanta ini, kedua efek
ion-pasangan dan difusi membran-internal tidak diperhitungkan.
Gambar. 1. struktur molekul a) creatininium kation, b) kaliks [4] molekul pirol dan c) struktur kristal X-Ray dari kaliks [4]

Ionofor pirol dengan kreatinin dalam rongga.


T. Guinovart et al. / Biosensor dan Bioelectronics 87 (2017) 587 - 592 589

Gambar. 2. a) efek pH pada respon potensiometri sensor menggunakan solusi kreatinin 1 mM dalam 1 mM penyangga universal dan b) kalibrasi kurva kreatinin pada pH yang berbeda: 2,8, 3,8 dan 6,5 (RSD 0,8% untuk N ¼ 5).

diperlukan untuk menghasilkan perbedaan potensial listrik. Dengan demikian, bukti menunjukkan kalibrasi plot dengan pengurangan berbagai linear dan peningkatan LOD oleh 2 lipat. Percobaan
bahwa modus mengikat yang sama ditampilkan dalam struktur X-ray juga beroperasi di ISE disajikan di kontrol dilakukan dalam larutan buffer yang sama tetapi tanpa penambahan kreatinin untuk menilai
sini. Ionofor itu meskipun tergabung dalam matriks polimer untuk membangun sensor kreatinin (Lihat efek dari pH pada perilaku elektroda ( Gambar. S1 a, SI). Dalam hal ini, sedikit penurunan potensi ini
SI untuk rincian percobaan). juga diamati sebagai pH menurun 3,8-2,8, sehingga con fi rming efek diamati sebelumnya dengan
kreatinin. Semua dalam semua, pH kerja optimum ditetapkan pada 3,8 dan 10 mM asam asetat /
magnesium asetat penyangga (HOAc / Mg (OAc) 2) disesuaikan pada pH 3,8 kemudian digunakan

3.2. Optimalisasi pH bekerja untuk sisa percobaan.

Karena respon yang optimal dari sensor harus berkorelasi dengan jumlah ion creatininium hadir dalam
larutan, kontrol pH larutan adalah sangat penting untuk penentuan. Creatininium memiliki pK Sebuah 4,8, (
Gao et al., 2013 ) Yang berarti bahwa itu akan menjadi spesies dominan pada pH di bawah 4,8. Dalam
rangka untuk menguji pengaruh pH pada respon analitis, percobaan dilakukan dalam sel menggunakan 3.3. Karakterisasi kinerja analitik
sensor sebagai elektroda kerja dalam 1 mM penyangga yang universal mengandung konsentrasi konstan 1
mM kreatinin. pH awalnya disesuaikan dengan HCl untuk mencapai nilai 2,8, dan kemudian meningkat
Evaluasi kinerja analitis untuk penentuan kreatinin pada pH optimum dilakukan. The potensiometri
dengan penambahan berturut-turut 0,1 M NaOH saat merekam respon potensiometri. Hasil percobaan ini
waktu jejak dan kurva kalibrasi yang sesuai dapat dilihat di Gambar. 3 . sensor menunjukkan respon
ditunjukkan pada
Nernst dengan sensitivitas 54,1 7 0,6 mV Desember 1, sebuah LOD dari 10 6.2 M, nilai yang

Gambar. 2 Sebuah. plot menunjukkan bahwa respon potensiometri maksimum dicapai pada pH 3,8.
Tanggapan menurun terus dari pH

3,8 dan seterusnya, re fl ecting respon yang dipengaruhi oleh distribusi spesies kreatinin. Gambar. 2 b
menunjukkan kurva kalibrasi dilakukan pada pH 2,8, 3,8 dan 6,5; parameter analisis yang sesuai
dirangkum dalam tabel T2 dari informasi pendukung. Sedangkan sensitivitas Nernst diperoleh dalam
semua tiga kasus, rentang linear dan batas deteksi (LOD) memiliki signi fi variasi tidak bisa dengan pH.
hasil yang optimal dalam hal LOD terendah dan linier maksimum diperoleh pada pH 3,8. Dari diagram
dari distribusi spesies, estimasi cepat fraksi creatininium dapat dihitung: 99,0%, 90,9% dan 2,0% pada pH
2,8,

3,8 dan 6,5, masing-masing. Terbukti, dari pH 3,8 - 2.8 peningkatan dalam fraksi creatininium relatif
kecil perubahan begitu sedikit potensi yang harus diharapkan. Juga, Gambar. 2 a menunjukkan bahkan
sedikit penurunan besarnya sinyal pada keasaman yang lebih tinggi, yang dapat menunjukkan
beberapa deteksi miskin di nilai-nilai pH yang sangat rendah. Sebagai soal fakta, pada pH 2,8 LOD
meningkat dan berbagai linear berkurang hampir satu urutan besarnya. Namun, untuk tujuan
pekerjaan ini, ini tidak dianggap sangat relevan. Di sisi lain, dari pH 3,8 sampai pH 6,5 fraksi
creatininium kation berkurang hampir fi kali puluh, menghasilkan

Gambar. 3. Potensi waktu jejak sensor menggabungkan Ionofor untuk konsentrasi kreatinin yang berbeda.
Inset menunjukkan kurva kalibrasi yang sesuai (RSD
0,6% untuk N ¼ 5).
590 T. Guinovart et al. / Biosensor dan Bioelectronics 87 (2017) 587 - 592

Tabel 1 dalam larutan untuk yang sesuai 1: 1 kompleks, yaitu di di-klorometana ( Guinovart et al., 2016 ).
selektivitas koe fi koefisien (log K Kreatinin, J) untuk sensor untuk zat yang paling relevan hadir dalam urin. Diperlukan
Dibandingkan dengan ionofor komersial seperti valinomisin (untuk K þ) dan turunannya eter mahkota
nilai ambang batas untuk mengukur dalam urin juga mengingat menggunakan kesalahan ditoleransi maksimum (P
AKU J) dari 10%.
untuk (Na þ), nilai konstan mengikat terlihat di sini untuk creatininium lebih rendah dengan beberapa kali
lipat. Hal ini dapat terkait dengan sifat dan kekuatan interaksi yang terlibat dalam struktur Ionofor:
analit ( J) Sensor ( log K Kreatinin, J) diperlukan ( P AKU J ¼ 10%) biasanya, ionofor untuk kation alkali didasarkan pada interaksi ion-dipol yang kuat, sedangkan reseptor ini
mempekerjakan ikatan hidrogen lemah dan CH- π interaksi, karena sifat lebih terdelokalisasi dari muatan
urea 4.3 7 0,1 2.3
positif dari kation creatininium. Konstanta mengikat lebih tinggi untuk kation creatininium dibandingkan
ca 2 þ 4.8 7 0,1 0,5
na þ 3.7 7 0,1 2.6
dengan kalium dan natrium kemungkinan dijelaskan oleh berkurangnya jumlah kelompok yang tersedia

NH 4 þ 2.3 7 0,1 1,6 yang dapat berinteraksi secara bersamaan dengan ion campur dibandingkan dengan kation creatininium.
Kþ 2,5 7 0,1 2.3 Ion-ion alkali kemungkinan akan terbatas untuk membangun interaksi ion-dipol dengan kelompok
creatine 3,5 7 0,1 0,9 fosfonat. Sementara itu pertandingan unggul dalam fungsi dan ukuran ada antara Ionofor dan kation
sasaran kreatinin. Pengikatan nilai konstan dibandingkan dengan koefisien selektivitas fi koefisien dihitung
dengan metode SSM. Pembentukan konstan untuk Ionofor yang: K þ kompleks 2,5 kali lipat lebih kecil dari

jauh lebih rendah dari yang lain dilaporkan sebelumnya untuk ionofor sintetis untuk kreatinin ( Elmosallamy itu untuk Ionofor: kompleks creatininium. Hal ini sesuai baik dengan selektivitas Coef fi sien
2006 ; Hassan et al., 2005 ), Dan berbagai linear luas, dari 1 m M dan sampai 10 mM.

Tantangan utama dalam penentuan potensiometri kreatinin adalah selektivitas diperlukan di


hadapan campur ion umumnya ditemukan di sampel nyata. Tingginya kadar selektivitas diperlukan
karena peningkatan konsentrasi kation seperti natrium dan kalium, serta beberapa lipid netral alami

yang dapat berinteraksi dengan fase organik (membran) dan mengganggu penentuan kreatinin ( Buhlmann
et al., 2001 ). Pada kenyataannya, ini adalah salah satu alasan utama mengapa sensor potensiometri untuk
kreatinin dilaporkan dalam literatur belum menemukan aplikasi praktis ( Buhlmann et al., 1998 ). Untuk itu, 2,5 diperoleh dengan
dalam fl pengaruh dari beberapa kation biasanya ditemukan di biologi sensor. Demikian pula untuk Na þ, konstanta mengikat berbeda dengan
4.3 lipat yang sedikit lebih tinggi dari selektivitas koefisien yang diperoleh fi sien 3.7.

3.5. Analisis sampel nyata

fl UID dievaluasi dan masing-selektivitas koe mereka fi koefisien dihitung. Tabel 1 menunjukkan
koefisien selektivitas fi koefisien dihitung untuk kation ini untuk sensor dan ambang batas yang Penentuan potensiometri akurat kreatinin dalam sampel biologis adalah tugas yang menantang. Di
diperlukan, sehingga kesalahan ditoleransi maksimal 10% (lihat SI untuk perhitungan error), untuk luar selektivitas yang diperlukan, sensor harus tahan terhadap unspeci fi c gangguan - seperti biofouling-
prediksi dalam urin nyata, seperti yang dilaporkan di tempat lain ( Oesch et al., 1986 ). karena lampiran komponen dari matriks ke membran, yang dapat mengakibatkan signi fi drift sinyal tidak
bisa ( Buhlmann et al., 2001 ) Dan bahkan kerusakan permanen dari permukaan penginderaan elektroda.
Masalah unspeci fi c gangguan sulit untuk mengatasi karena variabilitas yang melekat dari komposisi
Seperti yang ditunjukkan sebelumnya ( Guinovart et al., 2016 ), Sensor matriks sampel biologis yang nyata.

pameran diperlukan koe selektivitas fi nilai koefisien untuk Na þ dan K þ dalam urin. Selain itu, baru
COEF fi koefisien dihitung untuk NH 4 þ, ca 2 þ,

creatine dan urea (lihat tabel T4 dalam SI) satu hingga dua lipat di bawah nilai ambang batas. Yang perlu
diperhatikan, gangguan dari urea, salah satu spesies paling melimpah di urin, adalah signi fi cantly Untuk menggambarkan masalah ini, penentuan kreatinin dalam sampel urine nyata dipelajari.
berkurang dibandingkan dengan sensor kosong (nilai untuk kosong ditampilkan dalam SI, tabel T4 ). Selain Pertama, isi kreatinin sampel ditentukan dengan menggunakan metode kolorimetri standar (Jaffe),
itu, gangguan yang paling umum dilaporkan untuk metode kolorimetri seperti asam urat dan glukosa menghasilkan nilai 13 mM. Setelah itu, tiga pengenceran sampel, yaitu 1: 2, 1:10 dan 1: 100, dilakukan
(reaksi Jaffe ini) disaring dengan sensor. Tidak ada signi fi respon tidak bisa terdeteksi sehingga selektivitas dengan menggunakan 50 mM HAC / Mg (Ac) 2 pH 3,8 penyangga. pengenceran ini diukur secara
koe sangat rendah fi koefisien diperkirakan ( Hai 4). Selektivitas koe fi koefisien yang diperoleh dengan
potensiometri menggunakan sensor kreatinin. Sebuah kreatinin 1 mM larutan standar diukur di antara
sensor kami dibandingkan dengan yang dilaporkan sebelumnya ISES berdasarkan ionofor yang berbeda
sampel untuk memeriksa integritas dari sensor. The potensiometri waktu jejak yang diperoleh
dan laporan sensor selektivitas unggul terutama terhadap kalium campur utama (Lihat
ditampilkan dalam Gambar. 4 . Sebagai perbandingan, ini fi angka juga menunjukkan respon
potensiometri ideal yang harus diharapkan untuk setiap pengenceran mempertimbangkan konsentrasi
ditentukan pada awal percobaan. Hasil ini menunjukkan bahwa, untuk larutan sampel yang paling
terkonsentrasi (pengenceran 1: 2), sinyal tidak menentu diperoleh. Memang, setelah kenaikan tajam awal
tabel T5 SI).
(jauh di atas nilai yang diharapkan), sinyal hanyut dengan kemiringan positif (sekitar 7 mV min 1,

3.4. Mengikat konstanta dari Ionofor dengan creatininium di membran polimer

Dalam rangka untuk mendapatkan wawasan yang lebih dalam kontribusi dari Ionofor, konstanta
pembentukan ( β I: L, di mana saya berkaitan dengan analit target dan L Ionofor) dari kompleks antara tabel T6 ) Dan tidak stabil. Untuk pengenceran kedua (01:10), masih melayang, tetapi kurang jelas (3 mV
Ionofor dan masing-masing kation terpisah di membran polimer dari sensor dihitung ( tabel T3 ) ( Mi min 1). Akhirnya, untuk pengenceran 1: 100, drift berkurang ke 0,4 mV min 1( saya.
dan Bakker, 1999 ) (Lihat SI

e, hampir tidak ada penyimpangan) dan prediksi kreatinin menjadi jauh lebih akurat. Sinyal untuk 1
untuk deskripsi eksperimental yang lebih rinci dan perhitungan). Nilai-nilai konstanta pembentukan ini mM kreatinin standar mengungkapkan bahwa respon sensor tidak diubah selama percobaan. Hasil ini
adalah log β I: L ¼ 6.60 7 0,09 untuk kation creatininium, 4,08 7 0,13 untuk K þ dan 2.24 7 0,12 untuk Na þ. Konstantadirangkum dalam tabel T6 , Di mana prediksi kreatinin untuk setiap pengenceran disajikan dan
mengikat kation creatininium adalah 2 dan 4 lipat lebih tinggi daripada kalium dan natrium dibandingkan dengan nilai referensi. Nilai-nilai pemulihan dihitung antara rasio tingkat kreatinin
masing-masing ( Mi dan Bakker, 1999 ). Hebatnya, konstanta mengikat diukur untuk kation diperoleh secara potensiometri dan nilai yang diperoleh dengan metode kolorimetri standar. Hal ini
creatininium dalam membran polimer adalah 2 lipat lebih tinggi dari yang dihitung jelas bahwa tidak semua sampel urin akan menunjukkan derajat yang sama
T. Guinovart et al. / Biosensor dan Bioelectronics 87 (2017) 587 - 592 591

koe fi koefisien terhadap ion umumnya ditemukan mungkin menunjukkan bahwa penentuan dalam
sampel nyata adalah mungkin, unspeci fi c gangguan biasanya ditemukan dalam sampel klinis dapat
berubah penentuan ini tidak layak. Karena faktor-faktor ini menunjukkan variasi sampel-to-sampel
tinggi, satu-satunya cara untuk bermain aman adalah dengan melakukan pengenceran sampel. Hanya
ketika sistem cukup sensitif untuk mentolerir pengenceran (dalam hal ini, 1: 100) dan tetap beroperasi
penentuan sampel nyata praktis, dan mungkin.

4. Kesimpulan

Karya ini telah ditandai penggunaan sensor potensiometri berbasis ionofor baru untuk penentuan
akurat kreatinin dalam urin. Sensor melaporkan sensitivitas yang sangat baik, selektivitas terhadap ion
campur umum dan batas deteksi. Konstanta mengikat dari Ionofor dengan creatininium, ion natrium dan
kalium dalam membran polimer ditentukan. Nilai yang diperoleh lebih lanjut menunjukkan keunggulan
Ionofor dibandingkan dengan orang lain yang sudah dilaporkan. Penyesuaian pH dan pengenceran
sampel dua aspek kunci untuk deteksi optimal dalam sampel nyata; yaitu pH ditingkatkan parameter
deteksi sementara pengenceran berkurang signifikan fi cantly masalah biofouling dari sampel nyata.
Sebagai bukti kegunaan sensor potensiometri kreatinin ini baru, penentuan sederhana dan akurat
Gambar. 4. Diharapkan (garis putus-putus) dan eksperimental (garis penuh) respon potensiometri diperoleh untuk kreatinin dalam 50 sampel urin nyata telah dibuktikan. Oleh karena itu, dapat diharapkan bahwa alat ini
1: 2 (a), 01:10 (b) dan 1: 100 (c) pengenceran urin (kuning) untuk sensor. Baseline di antara sampel (hijau) sesuai
akan meringankan beberapa masalah saat ini dalam analisis akurat kreatinin, dan dapat membuka jalur
dengan standar kreatinin 1 mM. Semua solusi dibuat dengan 50 mM dari HOAc / Mg (OAc) 2 pH 3,8. (Untuk
interpretasi referensi untuk warna dalam ini fi Legenda angka, pembaca disebut versi web artikel ini.) baru menuju pemantauan diagnostik dan penyakit ginjal. pekerjaan saat sedang dilakukan untuk
optimalisasi penentuan kreatinin dalam serum dan darah. Selain itu, dengan perkembangan biaya-
rendah, sel potensiometri solidstate ( Novell et al., 2014 ), Penentuan akurat, sederhana dan terjangkau
kreatinin dalam pengaturan desentralisasi bisa menjadi kenyataan.

Ucapan Terima Kasih

Para penulis terima Gobierno de España MINECO (proyek CTQ2014-56295-R, CTQ2014-52974-

REDC, CTQ2013-46404-R dan Severo Ochoa Excellence Akreditasi 2014 - 2018 SEV-2013-

0319), dana Feder (Project CTQ2014-56295-R), yang Ramón y Cajal Program, FPI persekutuan
(BES-2.011-048.297) dan Yayasan ICIQ untuk pendanaan. Para penulis juga ingin mengakui

Gambar. 5. nilai kreatinin diperoleh di beberapa sampel urin (N ¼ 50) dengan kreatinin ion-selektif
fi dukungan keuangan dari Uni Eropa, Marie Curie Hibah PCIG09GA-2.011-293.538 (Project
elektroda dibandingkan dengan metode standar kolorimetri-metodologi standar -Jaffé ini.
FlexSens), Fundación Recercaixa (Project SensAge) dan Program CaixaImpulse (Project
CreatSens).

gangguan. Namun, hasil menunjukkan bahwa gangguan yang parah dapat diatasi dengan
pengenceran 1: 100. Untuk alasan ini, faktor pengenceran ini diterapkan untuk semua sampel urin.

Lampiran A. materi Tambahan


Sampel yang digunakan untuk menganalisis kreatinin diperoleh dari kedua sehat dan orang
dengan penyakit ginjal. Untuk melakukan tekad, sensor yang fi pertama dikalibrasi dengan solusi
Tambahan data yang terkait dengan artikel ini dapat ditemukan dalam versi online di http://dx.doi.org/10.1016
kreatinin standar, dan kemudian direndam dalam sampel urin diencerkan. Dalam rangka untuk
.
menilai prediksi dari sensor potensiometri, metode validasi wasit menggunakan reaksi Jaffe ini ( Pizzolante
1989 ), (Rutin digunakan di rumah sakit) digunakan untuk membandingkan semua nilai yang

diperoleh. Gambar. 5 menunjukkan semua nilai yang diperoleh untuk 50 sampel urin. Korelasi linier
Referensi
yang sangat baik dengan metode standar Jaffe, dengan sensitivitas mendekati 1 dan intercept dekat
dengan 0 diperoleh, sehingga memvalidasi hasil yang diperoleh.
Bakker, E., Meyerhoff, ME, 2007. Ion-selektif elektroda untuk pengukuran di
biologis fl UID, Ensiklopedia Elektrokimia. Wiley-VCH, Alabama, AS, pp. 277 - 307 .

Buhlmann, P., Hayakawa, M., Ohshiro, T., Amemiya, S., Umezawa, Y., 2001. Dalam fl pengaruh
dari alam, lipid netral pada respon potensiometri elektroda membran polimer cationselective. Anal. Chem.
Hal ini penting untuk menekankan sekali lagi interaksi penting antara sensitivitas, selektivitas dan
73, 3199 - 3205 .
rentang linear yang memungkinkan penentuan ini.
Buhlmann, P., Pretsch, E., Bakker, E., 1998. Pembawa berbasis elektroda selektif ion dan optodes massal.
Memang, sementara selektivitas konvensional 2. Ionofor untuk sensor potensiometri dan optik. Chem.
592 T. Guinovart et al. / Biosensor dan Bioelectronics 87 (2017) 587 - 592

Wahyu 98, 1593 - 1688 . Elektroanalisis 17, 2246 - 2253 .


Burtis, C., Ashwood, E., Bruns, D., 2012. Bagian III - analit. Tietz Textbook of Israni, AK, Kasiske, BL, 2012. Evaluasi pasien dengan penyakit ginjal, di: The
Kimia Klinik dan Diagnostik Molekuler 63043. Elsevier Inc, St Louis, Missouri, pp. 669 - 707 . Ginjal, Elsevier, Philadelphia, PA 19103-2899, pp. 868 - 888.
Jacobs, RM, Lumsden, JH, Taylor, JA, Grift, E., 1991. Pengaruh interferents pada
Davila, E., Gardner, LB, 1987. nilai klinis clearance kreatinin sebelum pemberian reaksi kinetik Jaffe dan tes kolorimetri enzimatik untuk konsentrasi kreatinin serum. Bisa. J. Vet. Res. 55, 150 - 154

kemoterapi dengan cisplatin. Kanker 15, 161 - 164 . .


Delanghe, JR, Cobbaert, C., Galteau, MM, Harmoinen, A., Jansen, R., Kruse, R., Kelly, PM, Kataky, R., Parker, D., Patti, AF, 1995. penginderaan Selektif guanidinium
Laitinen, P., Thienpont, LM, Wuyts, B., Weykamp, C., Panteghini, M., 2008. trueness verifi kasi tes kreatinin dan ion tetraalkylammonium menggunakan siklodekstrin lipofilik. J. Chem. Soc. Perkin Trans. 2, 1955 - 1963 .
yang sebenarnya di pasar Eropa menunjukkan variabilitas mengecewakan bahwa perlu perbaikan
substansial. Clin. Chem. Laboratorium. Med. 46, 1319 - 1325 . Mi, Y., Bakker, E. 1999. Penentuan konstanta pembentukan kompleks dari ionofor netral lipofilik di membran
polimer pelarut dengan membran sandwich yang tersegmentasi. Anal. Chem. 71, 5279 - 5287 .
Eknoyan, G., Lameire, N., Eckardt, K.-U., 2013. KDIGO 2012 Klinik praktek panduan-
line untuk evaluasi dan pengelolaan penyakit ginjal kronis. Int ginjal. (Suppl. 3), S63 - S72 . Novell, M., Guinovart, T., Blondeau, P., Rius, FX, Andrade, FJ, 2014. A berbasis kertas
sel potensiometri untuk pemantauan desentralisasi dari tingkat Li di seluruh darah. Laboratorium. Chip 14, 1308 - 1314 .
Elmosallamy, MAF, 2006. sensor potensiometri Baru untuk kreatinin. Anal. Chim. elektroda membran Oesch, U., Ammann, D., Simon, W., 1986. Ion-selektif
Acta 564, 253 - 257 . untuk penggunaan klinis. Clin. Chem. 32, 1448 - 1459 .
Gao, J., Hu, Y., Li, S., Zhang, Y., Chen, X. 2013. tautomerik keseimbangan kreatinin Pizzolante, JM, 1989. stabil alkali picrate reagen untuk Jaffe kreatinin
dan kation creatininium dalam larutan air dieksplorasi oleh Raman spektroskopi dan kepadatan perhitungan de-pemutusan, US1989 / 4.818.703.
teori fungsional. Chem. Phys. 410, 81 - 89 . Viau, C., Lafontaine, M., Payan, JP, 2004. Kreatinin normalisasi di biologi
Guinovart, T., Hernández-Alonso, D., Adriaenssens, L., Blondeau, P., Martinez-Bel- pemantauan ditinjau kembali. Int. Lengkungan. Occup. Mengepung. Kesehatan 77, 177 - 185 .
monte, M., Rius, FX, Andrade, FJ, Ballester, P., 2016. Pengakuan dan penginderaan kreatinin. Angew. Chem. Wagner, BD, Accurso, FJ, Laguna, TA 2010. penerapan kreatinin urin
Int. Ed. 55, 2435 - 2440 . sebagai metode spesimen normalisasi di kistik yang fi populasi fibrosis. J. Kista. Fibros. 9, 212 - 216 .
Hassan, SSM, Elnemma, EM, Mohamed, AHK, 2005. sensor biomedis Novel untuk fl ow injeksi
penentuan potensiometri kreatinin dalam serum manusia.