2014

UNIVERSIDAD PRIVADA NORBERTWIENER

FACULTAD FARMACIA Y BIOQUIMICA

ASIGNATURA: BIOQUIMICA II

SECCIÓN: FB6N1

INFORME N° (3)

TEMA: DETERMINACION DEL COLESTEROL EN SANGRE

Docente de la Asignatura: Dra. BENAVIDES RIVERA, Elena

Estudiantes:

LIMA - PERÚ

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INTRODUCCION

El colesterol es un lípido (grasa). Se forma en el hígado a partir de alimentos

grasos y es necesario para el funcionamiento normal del organismo. El
colesterol está presente en la membrana plasmática (capa exterior) de todas
las células del organismo.

El colesterol se desplaza por la sangre mediante unas moléculas denominadas

lipoproteínas. Los tres tipos principales son:

Las lipoproteínas de baja densidad (LDL) o “colesterol malo”; se cree que

causan enfermedades arteriales. Las LDL transportan el colesterol desde el
hígado a las células y pueden causar una acumulación nociva si hay más de lo
que las células pueden usar.

Las lipoproteínas de alta densidad (HDL) o “colesterol bueno”; se cree que

previenen las enfermedades arteriales. Las HDL se llevan el colesterol de las
células y lo devuelven al hígado donde se descompone y se elimina como
residuo corporal.

Los triglicéridos se forman en el hígado y están presentes en productos lácteos,

carne y aceites culinarios. La obesidad y la alimentación rica en grasas
aumentan el riesgo de tener niveles altos de triglicéridos.

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MARCO TEORICO
El colesterol es un esteroide de alto peso molecular que contiene una
estructura Ciclopentanofenantreno. Aunque se le considera un lípido, no sirve,
como fuente de energía para el metabolismo, el organismo no puede degradar
el anillo de colesterol.

Las Lipoproteínas LDL transportan de 65 al 75 % del colesterol plasmático. La

hipercolesterolemia está casi siempre asociada con la elevación del colesterol
LDL (tipo IIa). Es muy raro que la elevación este asociada con incremento en el
colesterol HDL. Las elevaciones del colesterol LDL pueden ser el resultado de
alteraciones monogénicas, alteraciones poligénicas o secundario a otras
enfermedades. Ejemplos: hiprcolesterolemiafamiliar, defecto familiar de Apo
B100, hipercolesterolemia poligénica, cáncer de cabeza de páncreas, diabetes,
hipotiroidismo, síndrome nefrótico, etc.

El colesterol de la dieta se absorbe parcialmente y también se sintetiza en el

hígado y otros tejidos. El colesterol se excreta a la bilis como tal o tras su
transformación en sales biliares primarias y secundarias.

Las concentraciones elevadas de colesterol LDL se asocian con un riesgo

progresivamente creciente de ateroesclerosis y enfermedad de las arterias
coronarias.

Las concentraciones séricas de colesterol disminuyen (hipocolesterolemia) en:

desnutrición, esteatorrea idiopática, hepatitis, hipertiroidismo, infecciones
agudas, anemia, cáncer, malabsorción y anorexia nerviosa.

El diagnóstico clínico no debe realizarse teniendo en cuenta el resultado de un

único ensayo, sino que debe integrar los datos clínicos y de laboratorio. Para
las pruebas de perfil lipídico el paciente debe estar en ayuno total excepto
agua, durante un lapso de 12 a 24 horas antes de la prueba. No debe haber
realizado ejercicio vigoroso y bajo la dieta corriente el día anterior de la prueba.

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MATERIALES

 Espectrofotómetro.
 Centrifuga.
 Baño María regulado a 37ºC.
 Jeringas descartables x 5ml. con aguja hipodérmica estéril.
 Algodón, ligadura.
 Tubos de prueba de 13 x 100mm.
 Pipetas de 10 mL.
 Micropipetas de 0 a 50 uL.
 Punteras amarillas, gradillas y
baguetas.

Reactivos

 Set de reactivos para colesterol

(enzimático).
 Muestra biológica.
 Alcohol medicinal.

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RESULTADOS

Para obtener la concentración de colesterol de la muestra problema, se aplica la siguiente

fórmula.

VALORES OBTENIDOS EN EL SPECTOFOTOMETRO

ABSORVANCIA
BLANCO 0.380
STANDAR 0.230
MUESTRA 0.205
PROBLEMA

Determinamos la formula a partir de la ley de Beer donde nos indica la absorvancia es

directamente proporcional a la concentracion de la especie absorvente .

STÁNDAR =200 mg/dl

M.P =?

mg de colesterol/ dL = absorbancia del problema X standar

absorbancia del standard

mg de colesterol/ dL= 0.205x 200

0.230

mg de colesterol/ dL= 178 .26 mg/ dl

El resultado obtenido de colesterol en plama esta dentro del rango indicado

valores 150 a 200 mg/ dl .

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RECOMENDACIONES

 Es importante su correcta realización ya que ayuda en el diagnóstico

oportuno deformación de ateromas que provocan los infartos.
 Los materiales utilizados deben estar correctamente esteriles pues podrian
alterar los resultados.
 Que el pasciente este en ayunas antes de realizarse la prueba en el
laboratorio.
 Que el pasciente este en estado de relajacion pues si esta agitado altera la
presion arterial en la toma de muestra.

CONCLUSIÓN
La determinación de un perfil lipidico tiene gran importancia clínica ya que se
puede emplear como un diagnostico primario de ciertas enfermedades, así
como también en el seguimiento de algunas enfermedades como: diabetes
mellitas, necrosis, obstrucción biliar y varias anormalidades metabólicas que
resultan de disturbios endocrinos.

El colesterol es el principal esterol del organismo humano y precursor de todos

los demas esteroides corporales, un aumento del colesterol puede causar
enfermedades cardiovasculares.

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CUESTIONARIO

A. Describa como se realiza la biosíntesis del colesterol.

Este proceso tiene lugar en el retículo endoplasmático liso de virtualmente

todas las células de los animales vertebrados. Los pasos principales de la
síntesis de colesterol son:

• Tres moléculas de acetil-CoA se combinan entre sí formando

mevalonato, el cual es fosforilado a 3-fosfomevalonato 5-pirofosfato.

• El 3-fosfomevalonato 5-pirofosfato es descarboxilado y desfosforilado a

3-isopentil pirofosfato.

• Ensamblaje sucesivo de seis moléculas de isopentil pirofosfato para

originar escualeno, vía geranil pirofosfato y farnesil pirofosfato.

• Ciclación del escualeno a lanosterol.

• El lanosterol se convierte en colesterol después de numerosas

reacciones sucesivas, enzimáticamente catalizadas, que implican la eliminación
de tres grupos metilo (–CH3), el desplazamiento de un doble enlace y
reducción del doble enlace de la cadena lateral.

b. ¿Qué ocurre cuando el LDL-colesterol no es fagocitado?

LDL- colesterol no pasa por su estado de lisis y como moléculas de magno

peso pasan a acoplarse al organismo y generar lipoacifulacion

Esto también se entiende como la formación de grasas malas o más conocidas

como grasas no degradables.

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C. Mencione cuatro métodos para la determinación de colesterol en sangre,

indicando ¿cuál? de ellos es el más exacto y porque. y ¿Por qué?

1. MÉTODO ENZIMÁTICO.

La determinación de muchos metabolitos se hace uso de las enzimas, a esos

procesos se les llama ensayos enzimático, en este caso las enzimas se
emplean como parte de las soluciones reactivas para cual nos permiten la
determinación específica y exacta de la concentración de metabolitos
individuales en los líquidos corporales. Siendo este método el más exacto.

2. MÉTODO FLEGG.

3. MÉTODO DE PRECIPITACIÓN.

4. LIPIDOGRAMA.

D. Mencione lo requisitos indispensables que debe observar una persona,

para que su determinación de colesterol sea real.

Para obtener resultados precisos, usted no debe comer ni beber nada durante
9 a 12 horas antes del examen. Puede tomar agua, pero se deben evitar otras
bebidas como café, té o gaseosa. Para propósitos de detección sistemática, el
colesterol total a menudo se hace sin ayunar de un día para otro.

El médico le puede solicitar que deje de tomar medicamentos que puedan

afectar el examen. Como por ejemplo la metformina; Sin embargo, nunca deje
de tomar ningún medicamento sin consultar primero con el médico.

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E. Explicité la biosíntesis de colesterol a partir de la ingesta de carbohidratos

Un poco menos de la mitad del colesterol en el cuerpo se deriva de la

biosíntesis de novo. Cada día, aproximadamente el 10% de la biosíntesis del
colesterol se hace en el hígado, y aproximadamente 15%, en el intestino. La síntesis
del colesterol se hace en el citoplasma y los microsomas a partir del grupo acetato
de dos carbonos la acetil-CoA.
La acetil-CoA que se utiliza para la biosíntesis del colesterol se deriva de una
reacción de oxidación (e.g., los ácidos grasos o piruvato) en las mitocondrias y es
transportada al citoplasma por el mismo proceso que esta descrito para la síntesis
del ácido grasos (véase la figura abajo). Acetil-CoA también puede ser sintetizado a
partir de acetato de citosólicas derivados de citoplasma la oxidación del etanol, que
se inicia por la alcohol deshidrogenasa citoplasmática (ADH3). Todas las reacciones
de la reducción de la biosíntesis del colesterol utilizan NADPH como cofactor. Los
intermediarios isoprenoides de la biosíntesis del colesterol se pueden ser dirigidos a
otras reacciones de síntesis, tal como para el dolicol (usado en la síntesis
deglicoproteínas N-ligadas, coenzima Q (de la fosforilación oxidativa) o la cadena
lateral del heme-a. Además, estos intermedios se utilizan en la modificación con
lípidos de algunas proteínas.

Vía de transporte de las unidades del acetil-CoA desde la

mitocondria al citoplasma para la biosíntesis de lípidos y del
colesterol. Observe que la reacción catalizada por la enzima málica
citoplásmica genera NADPH que se utiliza para las reacciones
biosintéticas reductoras tales como las de la síntesis del ácido

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grasos y del colesterol. SLC25A1 es el transportador de citrato.
SCL16A1 es el transportador de piruvato.

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