UNIDAD ESPECIALIZADA EN ENERGÍAS RENOVABLES

Ingeniería en Energías Renovables

LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA

Nombre del estudiante: Ithan Sebastian Carrillo Estrada

Fecha: 11 de Octubre de 2018

Práctica No. 4

CULTIVO DE MICROORGANISMOS:
Bacterias

En Microbiología se entiende como siembra el proceso mediante el cual se lleva una porción de
una población de microorganismos, denominada entonces inóculo, de su medio natural o de un
cultivo crecido a un medio nutritivo para su crecimiento. Todo este proceso hay que llevarlo a
cabo con instrumentos y medios previamente esterilizados y siguiendo las instrucciones de los
monitores de prácticas. La principal advertencia consiste en trabajar siempre próximos a la llama
del mechero que, debido a las corrientes de convección verticales que genera, es capaz de crear
un ambiente estéril en la zona inmediatamente alrededor y debajo de la llama.

El instrumento portainóculos más frecuentemente utilizado el asa de siembra también

conocida como asa bacteriológica, con la que se puede tomar inóculo a partir de colonias o de
medio líquido, debido a que mantiene un pequeño volumen de agua por tensión superficial. Para
depositar el inóculo en líquido basta con introducir el extremo en el medio y agitar ligeramente.
Sobre sólido hay que hacer un recorrido largo sobre la superficie salvo en el caso de medios en
los que también hay que inocular picando en profundidad para observar reacciones metabólicas
en anaerobiosis o movilidad por flagelos.

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OBJETIVO DE LA PRÁCTICA:

1. Aprender el proceso correcto para inocular un medio de cultivo líquido.

2. Comprender la importancia de realizar la siembra de microorganismos en ambientes de
esterilidad para mantener los cultivos axénicos.
3. Conocer el proceso de siembra por estría cruzada en placas de Petri con medio sólido.

MATERIAL Y EQUIPO:

 Tubos de ensayo de 13x100 mm con medio infusión cerebro corazón (BHI).

 Gradillas para tubos de 13x100 mm.
 Placas Petri con medio BHI.
 Hisopos de algodón.
 Asa bacteriológica.
 Mecheros Fisher.
 Incubadora a 37 °C.

DESARROLLO Y OBSERVACIONES DE LA PRÁCTICA:

1. Primero con unos hisopos esterilizados tomamos muestras de diferentes microorganismos,
por ejemplo yo tome muestras de popo de paloma. Después cerca del mechero metimos el
hisopo en el tubo de ensayo con bhi la muestra para evitar que le entraran mas
microorganismos. Y de ahí los pasamos a poner en el refrigerador todas las muestras.

Fig2. Muestra de popo de paloma.

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Fig1. Colocando el hisopo.
2. El siguiente paso fue esperar una semana para sacar los tubos y las placas Petri donde se
encontraba el bhi solido que también se refrigero para comenzar con la siembra del
microorganismo.

Fig.3 tubos de ensayo

Fig4.Placas petri.
3. Cada integrante del equipo tomo su tubo con su muestra y visualizamos si tenia mucha
bacteria o poca eso se logro observando en la parte inferior del tubo de ensayo si se veía
un botoncito blanco es por que había mucha bacteria si no es por que no se había formado
mucho y con esta información se decidió el tipo de estriado que se realizaría si el de 5
campos o el estriado general. Y se nombro la placa Petri.

Fig5. Placa petri marcada.

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Fig.6 Boton blanco en tubo con muestra de la bacteria.

4. Despues comenzaríamos con la siembra primero se limpio la mesa con etanol para
desinfectar y evitar que se contaminara la siembra y se prendio el mechero.

Fig.7 Desinfectando el lugar de trabajo

5. Después pasamos al paso del estriado, se comienza esterilizando el haza bacteriológica ya
cuando este al rojo vivo la alejamos del mechero esperamos que se enfrié y sacamos una
pequeña muestra de la bacteria del tubo de ensayo después con esa muestra se realizara el
estriado en la placa Petri, en mi caso fue el de 5 campos, acabando con el estriado se tapa
la placa.

Fig.8 Realizando el estriado

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6. Para finalizar las placas se pasan a una estufa especial a 37°C para que se desarrollen las
bacterias.

Fig.9 Estufa con placas.

CONCLUSIÓN DE LA PRÁCTICA:
El conocimiento que adquirí fue el poder realizar una siembra de cultivos de manera correcta sin
arruinar el cultivo permitiendo el paso de microorganismos simplemente siguiendo al pie de la
letra las instrucciones. Podemos concluir que un medio de cultivo se puede arruinar muy
fácilmente con el simple error de hablar teniendo la placa abierta asi que hay que tener mucho
cuidado al momento de realizar la practica.

CUESTIONARIO:

(Investiga y resuelve las siguientes preguntas, recuerda agregar la referencia de donde obtuviste
la información)
1. ¿Qué es un cultivo axénico?
Consiste en una sola especie microbiana, proveniente de una sola célula.
Los cultivos axénicos son muy extraños en la naturaleza. En los medios naturales como
por ejemplo, en el suelo, agua, o en el cuerpo humano.
2. ¿En qué consiste el proceso de dilución seriada y para que se usa en microbiología?
Una dilución seriada es la disolución repetida de una solución para ampliar el factor de
dilución rápidamente.Las diluciones en serie son ampliamente utilizadas en las ciencias

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experimentales como bioquímica, microbiología, farmacología y física. En microbiología
para saber la densidad de las bacterias.
3. ¿Por qué el etanol funciona como antiséptico y cuál es la concentración óptima para
usarse con este fin?
Es un bactericida rápido, más que bacteriostático, contra formas vegetativas de
bacterias.También es tuberculicidas, funguicidas y virucidas, pero no destruyen las
esporas bacterianas la concentración recomendada es la de 70%.
4. ¿Cuál es la historia de las placas Petri?
Julius Richard Petri nació el 31 de mayo de 1852, y aunque no logró ningún premio Nobel
fue un científico fundamental en la historia de la microbiología. Tras estudiar en la
academia militar Kaiser Wilhelm-Akademie para médicos y doctorarse en la Clínica
Charité de Berlín, en 1876 estuvo trabajando para el famoso Robert Koch, premio Nobel
de Fisiología y Medicina en 1905. Y fue precisamente mientras colaboraba con el famoso
científico alemán cuando inventó su famosa placa de Petri.

Básicamente unió dos tapas redondas de vidrio transparente que permitían aislar las
muestras de distintos microorganismos y hacerlos crecer en condiciones controladas. Lo
que parecía algo simple y actualmente más que normal, en su momento fue una auténtica
revolución para la microbiología y para la medicina.

Y es que durante el siglo XIX grandes epidemias muy contagiosas estaban mermando la
población de medio mundo. Gracias a las placas de Petri se consiguieron aislar los
microorganismos que provocaban enfermedades como la cólera o la difteria, encontrando
posteriormente la cura a los mismos.
5. En microbiología existen las pruebas bioquímicas, ¿Qué son?, elije tres y explica su
fundamento.
Las pruebas bioquímicas permiten determinar las características metabólicas de las bacterias de
objeto de identificación.

·Catalasa

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La catalasa es una enzima presente en la mayoría de los microorganismos que poseen citocromos.
Las bacterias que sintetizan la catalasa hidrolizan el Hidrogeno en agua y el oxígeno gaseoso que
se libera produce burbujas.
·
Oxidasa
Sirve para determinar la presencia se enzimas oxidantes. La reacción de la oxidasa se debe a la
presencia de un sistema citromooxidasa que activa la oxidación del citocromo el cual es reducido
por el oxígeno molecular produciendo agua o peróxido de hidrogeno según la especie Moraxella
Helicobacter y Brucella.

Indol
Mediante esta prueba se detecta la liberación de Indol en un cultivo bacteriano. Dicha liberación
se debe a la degradación del aminoácido triptófano mediante la enzima triptófanosa.

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