KARAKTERISTIK NANO KITOSAN

CANGKANG UDANG VANNAMEI (Litopenaeus vannamei)

DENGAN METODE GELASI IONIK

DESIE RACHMANIA

DEPARTEMEN TEKNOLOGI HASIL PERAIRAN

FAKULTAS PERIKANAN DAN ILMU KELAUTAN
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
BOGOR
2011
 RINGKASAN

DESIE RACHMANIA. C34070088. Karakteristik Nano Kitosan Cangkang

Udang Vannamei (Litopenaeus vannamei) dengan Metode Gelasi Ionik.
Dibimbing oleh PIPIH SUPTIJAH dan AGOES M. JACOEB.

Kemampuan kitosan yang diterapkan dalam berbagai bidang industri modern,

misalnya farmasi, biokimia, kosmetika, industri pangan, dan industri tekstil
mendorong untuk terus dikembangkannya berbagai penelitian yang menggunakan
kitosan, termasuk melakukan modifikasi kitosan secara kimia atau fisik. Sejauh ini
sistem pengahantar obat dengan menggunakan kitosan hanya terbatas pada modifikasi
kima pada kitosan saja. Oleh karena itu, modifikasi fisik melalui pengaturan ukuran
partikel kitosan menjadi hal yang sangat penting. Akan tetapi dalam pembuatan
kitosan yang berstabilitas dan berkualitas tinggi, biasanya diperlukan metode yang
cukup sulit. Pembuatan nanopartikel dipengaruhi oleh beberapa faktor, antara lain
komposisi material dan metode yang digunakan.
Tujuan dari penelitian ini adalah mendapatkan rendemen kitosan tertinggi
akibat pengaruh lama waktu perendaman HCl, menentukan proses gelasi ionik terbaik
dengan berbagai perlakuan sizing, menentukan karakteristik nanopartikel yang
meliputi morfologi, efisiensi, dan ukuran nanopartikel, menganalisa karakteristik
partikel kitosan yang dilakukan dengan metode gelasi ionik menggunakan Fourier
Transform InfraRed (FTIR) dan Scanning Electron Microscopy (SEM), menentukan
metode pembuatan kitosan yang sederhana, dapat diterapkan dengan mudah di
laboratorium. Pengujian yang dilakukan meliputi analisis proksimat, mutu kitosan,
perhitungan rendemen kitosan dan nano kitosan, analisis Scanning Electron
Miscroscopy (SEM), serta analisis Fourier Transform InfraRed (FTIR).
Pembuatan nanopartikel kitosan dengan metode gelasi ionik dengan perlakuan
menggunakan perbedaan alat sizing berhasil dilakukan dari hasil preparasi kitosan
dengan perlakuan waktu perendaman HCl 1 N selama 72 jam dengan rendemen
sebesar 13,50% (bk) dan yang terendah diperoleh dengan perlakuan waktu
perendaman HCl 1 N selama 0 jam dengan rendemen sebesar 11,57% (bk).
Rendemen kitosan nanopartikel tertinggi terdapat pada kitosan nanopartikel dengan
perlakuan pengecilan ukuran menggunakan alat magnetic stirrer yaitu sebesar
81,30%. Sedangkan rendemen terendah ditunjukkan oleh kitosan nanopartikel dengan
menggunakan alat homogenizer, yaitu sebesar 40,00%. Ukuran partikel yang
diperoleh dengan menggunakan magnetic stirrer sebesar 400 - 450 nm. Nilai derajat
deasetilasi dari kitosan nanopartikel terkecil yang dihasilkan yaitu sebesar 99% dan
menunjukan bahwa nano kitosan yang dihasilkan merupakan kitosan murni.
 KARAKTERISTIK NANO KITOSAN
CANGKANG UDANG VANNAMEI (Litopenaeus vannamei)
DENGAN METODE GELASI IONIK

Skripsi

Sebagai salah satu syarat untuk mendapatkan gelar Sarjana Perikanan

pada Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan
Institut Pertanian Bogor

Oleh:

DESIE RACHMANIA
C34070088

DEPARTEMEN TEKNOLOGI HASIL PERAIRAN

FAKULTAS PERIKANAN DAN ILMU KELAUTAN
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
BOGOR
2011
 LEMBAR PENGESAHAN

Judul : Karakterisasi Nano Kitosan Cangkang Udang Vannamei

(Litopenaeus vannamei) dengan Metode Gelasi Ionik
Nama : Desie Rachmania

NIM : C34070088

Program Sarjana : Teknologi Hasil Perairan

Menyetujui:

Pembimbing I Pembimbing II

Dra. Pipih Suptijah, MBA Dr. Ir. Agoes M. Jacoeb, Dipl.-Biol

NIP. 19531020 1985 03 2 001 NIP. 19591127 1986 01 1 005

Mengetahui:
Ketua Departemen Teknologi Hasil Perairan

Dr. Ir. Ruddy Suwandi, MS., Mphil.

NIP. 19580511 1985 03 1 002

Tanggal Lulus:
PERNYATAAN MENGENAI SKRIPSI DAN SUMBER INFORMASI

Dengan ini saya menyatakan bahwa skripsi yang berjudul ” Karakteristik

Nano Kitosan Cangkang Udang Vannamei (Litopenaeus vannamei) dengan
metode gelasi ionik” adalah karya sendiri dan belum diajukan dalam bentuk
apapun kepada perguruan tinggi manapun. Sumber informasi yang berasal atau
dikutip dari karya yang diterbitkan dari penulis lain telah disebutkan dalam teks
dan dicantumkan dalam daftar pustaka di bagian akhir skripsi ini.

Bogor, Agustus 2011

Desie Rachmania
NRP C34070088
 DAFTAR RIWAYAT HIDUP

Penulis dilahirkan di Jakarta, pada tanggal 18 Desember

1989. Penulis merupakan anak bungsu dari dua bersaudara
pasangan Bapak (Alm.) Momon Nurachman dan Ibu Sri
Handayani.
Penulis memulai jenjang formal pada pendidikan di
Sekolah Dasar Islam Pelita dan lulus pada tahun 2001.
Penulis melanjutkan Sekolah Menegah Pertama
di SMP Negeri 41 Jakarta dan lulus pada tahun 2004, selanjutnya penulis
melanjutkan Sekolah Menengah Atas di SMA Negeri 28 Jakarta dan lulus pada
tahun 2007.
Pada tahun 2007 penulis diterima di IPB melalui jalur Seleksi Penerimaan
Mahasiswa Baru (SPMB). Penulis diterima di Departemen Teknologi Hasil
Perairan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan. Selama menjalani pendidikan
akademik di IPB penulis pernah aktif sebagai anggota Himpunan Mahasiswa
Teknologi Hasil Perikanan tahun 2009, Paguyuban Penerima Beasiswa Karya
Salemba Empat Institut Pertanian Bogor tahun 2010 - 2011, asisten praktikum
m.k. Pengembangan KitinKitosan dan m.k. Teknologi Pengolahan Hasil Perairan
tahun ajaran 2010-2011. Penulis juga aktif dalam kepanitiaan kegiatan mahasiswa
di Institut Pertanian Bogor.
Sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Perikanan pada
Departemen Teknologi Hasil Perairan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan,
Institut Pertanian Bogor, penulis melakukan penelitian dengan judul
Karakteristik Nano Kitosan Cangkang Udang Vannamei (Litopenaeus vannamei)
dengan Metode Gelasi Ionik dengan dosen pembimbing yaitu
Dra. Pipih Suptijah, MBA. dan Dr. Ir. Agoes M. Jacoeb, Dipl.-Biol.
 KATA PENGANTAR

Puji dan syukur penulis panjatkan kepada Tuhan Yang Maha Esa, karena
berkat rahmat serta karunia-Nya penulis dapat menyelesaikan skripsi sebagai
tugas akhir yang berjudul Karakteristik Nano Kitosan Cangkang Udang Vannamei
(Litopenaeus vannamei) dengan Metode Gelasi Ionik dengan baik.
Penulis mengucapkan terima kasih kepada semua pihak yang telah
membantu dalam penulisan ini, terutama kepada:
1) Ibu Dr. Pipih Suptijah, MBA dan Bapak Dr. Ir. Agoes M. Jacoeb, Dipl.-Biol,
selaku dosen pembimbing yang telah memberikan bimbingan dan
pengarahannya kepada penulis.
2) Bapak Dr. Ir. Ruddy Suwandi MS., M.Phil selaku Ketua Departemen
Teknologi Hasil Perairan sekaligus dosen penguji yang telah memberikan
nasihat, kritik dan saran dalam penulisan skripsi.
3) Bapak Dr. Ir. Agoes Mardiono Jacoeb,-Dipl. Biol selaku Ketua Program Studi
Teknologi Hasil Perairan atas bimbingan kepada penulis.
4) Mama dan (Alm.) Papa yang selalu memberikan doa, semangat, cinta kasih
dan dukungan yang diberikan, baik moril maupun materil serta kasih sayang
kepada penulis.
5) Febri Ika Suseno, S.St.Pi yang selalu meberikan motivasi, semangat doa dan
perhatiannya kepada penulis.
6) Teman-teman seperjuangan ”Tim Nano ”(Nani, Icha dan Zahid). Terima
kasih atas kebersamaannya.
7) Sahabat - sahabat dan teman seperjuangan: Siska, Ria, Medal, Fasta atas
semangat, bantuan dan canda tawa selama ini.
8) Teman – teman ”Kost Tiara” : Mba Tatay, Fasta, Tatha, Aul, Ayu,dan Desti
atas semangat dan doa yang selalu diberikan.
9) Tim Nano Kitosan: Taufik (THP 45) dan Yunko atas kebersamaan,
kekompakan dan perjuangan menuju PIMNAS.
10) Teman-teman THP 44, 43 dan 45 yang telah mendukung dan memberikan
semangat kepada penulis.
 Penulis menyadari bahwa penulisan tugas akhir ini belum sempurna. Oleh
sebab itu penulis mengharapkan masukan berupa saran dan kritik yang bersifat
membangun dari pembaca dan semoga tulisa ini dapat bermanfaat bagi pihak yang
memerlukannya.

Bogor, Agustus 2011

Penulis
 DAFTAR ISI
Hal.

DAFTAR TABEL………………………………………………………. vii

DAFTAR GAMBAR…………………………………............................. viii
DAFTAR LAMPIRAN…………………………………………………. x
1 PENDAHULUAN………………………………………………......... 1
1.1 Latar Belakang………………………………………………………... 1
1.2 Tujuan Penelitian……………………………………………………... 3
2 TINJAUAN PUSTAKA....................................................................... 4
2.1 Komposisi Kimia Kulit Udang………………………………………. 4
2.2 Karakteristik………………………………………………………...... 5
2.2.1 Kitosan………………………………………………………..... 5
2.2.2 Nano Kitosan…………………………………………………... 7
2.3 Gelasi Ionik………………………………………………………....... 7
2.4 Tripolifosfat (TPP)………………………………………………….... 8
2.5 Surfaktan…………………………………………………………....... 9
2.6 Sonikasi……………………………………………………………..... 9
2.7 Pengeringan Semprot (Spray Dryer)……………………………….... 10
2.8 Scanning Electron Microscopy (SEM)……………………………..... 11
2.9 Fourier Transform Infrared (FTIR)…………………………………. 12
3 METODOLOGI……………………………………………………... 13
3.1 Waktu dan Tempat Penelitian……………………………………….. 13
3.2 Bahan dan Alat………………………………………………………. 13
3.3 Tahap penelitian……………………………………………………... 14
3.3.1 Penelitian Pendahuluan………………………………………... 14
3.3.2 Penelitian Utama……………………………………………..... 15
3.4.2.1 Tahapan pembuatan nano kitosan dengan
metode gelasi ionik…….………………………………... 15
3.4.2.2 Tahapan pengujian dan analisis sifat karakteristik
nano kitosan……………………………………………... 15
3.4 Analisis Fisik dan Kimia Sampel……………………………………. 17
3.4.1 Analisis Proksimat…………………………………………….. 17
3.4.1.1 Analisis kadar air………………………………………... 17
3.4.1.2 Analisis kadar abu………………………………………. 17
3.4.1.3 Analisis kadar lemak……………………………………. 18
3.4.1.4 Analisis kadar protein…………………………………… 18
3.4.1.4 Analisis kadar karbohidrat (by difference)…...…………. 19
3.4.1 Rendemen Kitosan Cangkang
Udang Vannamei (Litopenaeus vannamei)…………………..... 19

3.4.2 Derajat Deasetilasi…………………………………………….. 19

4 HASIL DAN PEMBAHASAN……………………………………… 21

4.1 Penelitian Pendahuluan…………………………………………….... 21
4.2 Rendemen Kitosan………………………………………………….. 22
4.3 Mutu Kitosan………………………………………………………... 23
4.4 Penelitian Utama……………………………………………….......... 26
4.4.1 Rendemen Kitosan Nanopartikel………………………………. 26
4.4.2 Hasil Analisis Scanning Electron Microscopy (SEM)………… 28
4.4.3 Hasil Analisis Fourier Transform Infrared (FTIR)………….... 35
5 KESIMPULAN DAN SARAN……………………………………… 37
5.1 Kesimpulan…………………………………………………………... 37
5.2 Saran…………………………………………………………………. 37
DAFTAR PUSTAKA………………………………………………….. 38
LAMPIRAN…………………………………………………………..... 42
 DAFTAR TABEL
Nomor Teks Halaman
1 Komposisi kimia kulit udang (Litopenaeus vannamei).………... 4
2 Spesifikasi kitosan niaga………………………………………… 6
3 Komposisi kimia kulit udang hasil uji proksimat……………….. 21
4 Rendemen kitosan dari cangkang udang terhadap lamanya
waktu perendaman HCl 1N…………………………………….. 22
5 Mutu kitosan dari rendemen hasil perendaman 72 jam HCl…….. 24
6 Rendemen kitosan nanopartikel dengan perbedaan perlakuan
alat penegcilan ukuran…………………………………………. 27
7 Ukuran partikel hasil foto SEM……………………………….. 29
 DAFTAR GAMBAR
Nomor Teks Halaman
1 Struktur kitosan……………………………………………....... 5
2 Kitosan nanopartikel dengan gelasi ionik…………………….... 8
3 Proses pembuatan kitosan……………………………………… 14
4 Diagram alir pengujian stabilitas nanopartikel kitosan dengan
metode gelasi ionik……………………………………………. 16
5 Grafik hasil rendemen kitosan terhadap pengaruh waktu
perendaman HCl …………………..…………………………... 23
6 Grafik hasil rendemen kitosan nanopartikel dengan perbedaan
perlakuan metode pengecilan ukuran…………………………... 28
7 Hasil analisis uji SEM…………………………………………... 34
7a. Morfologi partikel kitosan (magnetic stirrer)……………….. 34
7b. Morfologi partikel kitosan (ultrasonik)……………………... 34
7c. Morfologi partikel kitosan (homogenizer)…………………... 34
8 Grafik derajat deasetilasi pada kitosan berukuran nano
(partikel kitosan) dengan alat magnetic stirrer………………….. 35
 DAFTAR LAMPIRAN
Nomor Halaman
1. Analisis kadar air cangkang udang vannamei….………………... 43
2. Analisis kadar abu cangkang udang vannamei.…………………. 43
3. Analisis kadar protein cangkang udang vannamei…….………... 44
4. Analisis kadar lemak cangkang udang vannamei……...………... 45
5. Analisis kadar karbohidrat cangkang udang vannamei secara
by difference………………………………………………….…. 45
6. Data rendemen kitosan udang vannamei………………………... 46
7. Analisis kadar air kitosan udang vannamei.…………………….. 46
8. Analisis kadar abu kitosan udang vannamei…….……………… 47
9. Analisis kadar protein cangkang udang vannamei……………… 48
10. Data hasil perhitungan derajat deasetilasi (DD)………………… 48
 1

I PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Udang merupakan komoditas andalan dan bernilai ekonomis sebagai salah
satu hasil perikanan utama Indonesia. Pusat Data, Statistik dan Informasi
Departemen Kelautan dan Perikanan tahun 2008 menunjukkan ekspor udang
Indonesia meningkat selama periode tahun 2003 – 2007 sebesar 4,15 % yaitu dari
137.636 ton pada 2003 menjadi 160.797 ton pada tahun 2007. Peningkatan
volume ekspor tersebut mendorong peningkatan nilai produksi udang, yaitu dari
US$ 850,222 juta pada 2003 menjadi US$ 1,048 miliar tahun 2007. Nilai ekspor
udang ini mencapai hampir 50 % dari nilai ekspor perikanan sebesar
US$ 2,3 miliar. Selain itu produksi udang juga meningkat sebesar 16,9 % selama
periode 2003 – 2007 yaitu dari 192.926 ton pada 2003 menjadi 352.220 ton pada
tahun 2007.
Sekitar 80 – 90% ekspor udang dilakukan dalam bentuk udang beku tanpa
kepala dan kulit sehingga menghasilkan limbah yang bobotnya mencapai
25 – 30% dari bobot udang utuh (Sudibyo 1991 dalam Maulana 2009). Limbah
udang yang potensial ini mudah sekali rusak karena degradasi enzimatik
mikroorganisme sehingga menimbulkan masalah misalnya pencemaran
lingkungan bagi indutri pengolah dan membahaykan kesehatan. Selain itu limbah
ini sangat menyita ruang sehingga dibutuhkan tempat tertutup yang luas untuk
menampungnya. Disisi lain limbah ini dapat didayagunakan sebagai sumber
bahan mentah penghasil kitin, kitosan dan turunan keduanya yang berdaya guna
dan serta bernilai tinggi.
Kulit udang atau kepiting merupakan bahan baku penghasil kitin dan kitosan.
Kitosan adalah kitin yang telah diasetilasi. Kitosan merupakan polisakarida
dengan struktur yang mirip dengan selulosa (Savant et al. 2000 dalam
Kencana 2009). Terdapat 75% dari berat total udang merupakan bagian kulit dan
kepala. Kulit udang mengandung 15-20% kitin dan kitosan sebesar 50% dari
kandungan kitin, kadar abu sebesar 20% serta kadar protein sebesar 35% pada
basis kering (Kelly et al. 2005 dalam Rini 2010). Studi terhadap kitosan telah
banyak dilakukan baik dalam bentuk serpih, butiran, membran, maupaun gel.
 2

Kemampuan kitosan yang diterapkan dalam berbagai bidang industri modern,

misalnya farmasi, biokimia, kosmetika, industri pangan, dan industri tekstil
mendorong untuk terus dikembangkannya berbagai penelitian yang menggunakan
kitosan, termasuk melakukan modifikasi kitosan secara kimia atau fisik.
Modifikasi kimia menghasilkan perbaikan stabilitas kitosan melalui
fungsionalisasi gugus fungsi yang ada, perbaikan ukuran pori kitosan dengan
menggunakan senyawa porogen, dan dapat menaikkan kapasitas adsorpsi kitosan
apabila kitosan dipadukan dengan polimer lain. Modifikasi fisik pada kitosan
mencakup perubahan ukuran partikel atau butir kitosan menjadi lebih kecil untuk
pemanfaatan yang lebih luas. Oleh karena itu, perkembangan modifikasi fisik
mengarah ke bentuk nanopartikel (Wahyono 2010).
Pembuatan nanopartikel dipengaruhi oleh beberapa faktor, antara lain
komposisi material dan metode yang digunakan. Untuk nanopartikel kitosan,
komposisi material yang digunakan adalah kitosan, TPP dan surfaktan (asam
oleeat). Metode pembuatan nanopartikel merupakan faktor lain yang menentukan
selain komposisi material. Banyak metode yang dikembangkan untuk
menghasilkan nanopartikel dan morfologi yang seragam (Wahyono 2010). Sampai
saat ini penelitian nanopartikel kitosan terus dikembangkan, baik dalam penentuan
komposisi maupun pencarian metode yang sesuai. Akan tetapi dalam pembuatan
kitosan yang berstabilitas dan berkualitas tinggi, biasanya diperlukan metode yang
cukup sulit. Untuk itu, dilakukan teknik atau metode yang prosesnya lebih efisien
dan sederhana untuk memudahkan dalam pembuatan nano kitosan.
Pengujian karakteristik nano kitosan dilakukan dengan proses gelasi ionik,
serta perlakuan pengecilan ukuran (sizing) dilakukan dengan metode magnetic
stirer, metode homogenizer ultrasonik dan metode sonokimia. Metode ini
bertujuan untuk mengetahui dan mendapatkan nano kitosan yang terbaik diantara
ketiga metode tersebut agar nano kitosan yang dihasilkan memiliki stabilitas
konstan, berukuran partikel terkecil, berkualitas baik, serta mendapatkan metode
yang paling sederhana dalam pembuatannya, sehingga dapat meningkatkan skala
produksi.
 3

1.2 Tujuan
Penelitian ini bertujuan untuk
- Mendapatkan rendemen kitosan tertinggi akibat pengaruh lama waktu
perendaman HCl.
- Menentukan proses gelasi ionik terbaik dengan berbagai perlakuan sizing.
- Menentukan karakteristik nanopartikel yang meliputi morfologi, efisiensi,
dan ukuran nanopartikel dengan SEM.
- Menganalisis karakteristik partikel kitosan yang dilakukan dengan metode
gelasi ionik menggunakan Fourier Transform InfraRed (FTIR) dan
Scanning Electron Microscopy (SEM).
- Menentukan metode pembuatan kitosan yang sederhana, dapat diterapkan
dengan mudah di laboratorium.
 4

2 TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Komposisi Kimia Kulit Udang

Untuk kebutuhan ekspor udang beku, bagian tubuh udang yang dibekukan
adalah bagian badan (abdomen) hingga ekor (uropod). Bagian kepala dan dada
(cephaloporax) yang dibungkus oleh kulit udang keras merupakan bagian yang
dibuang oleh industri pembekuan udang. Kulit udang mengandung
25-40 % protein, 30-50% kalsium karbonat dan 15-20 % kitin serta komponen
lain sebagaimana tercantum pada Tabel 1.

Tabel 1 Komposisi kimia kulit udang Penaeus sp.

Komposisi Jumlah (%)
Air 12,86
Protein 32,75
Lemak 2,04
Abu 37,24
Karbohidrat 36,96
Kalsium 13,29
Magnesium 0,85
Fosfor 1,84
Besi 0,02
Mangan 0,0003
Kitin 18
Kalium 0,37
Tembaga 0,005
Natrium 0,436
Seng 0,005
Sulfur 0,419
Sumber: Arlius (1991) dalam Maulana (2007)

Limbah udang merupakan bahan yang mudah busuk karena adanya proses
degradasi oleh bakteri pembusuk dan enzim yang berjalan dengan cepat. Hal ini
 5

menyebabkan menurunya mutu komponen yang terdapat dalam limbah, sehingga

apabila komponen tersebut rusak maka akan mengahsilkan produk yang bermutu
rendah. Oleh karena itu perlu diupayakan penanganan limbah yang baik agar tidak
cepat terdegradasi dengan tujuan untuk memperoleh produk yang lebih baik
(Suptijah et al. 1992 dalam Maulana 2007).

2.2 Karakteristik
2.2.1 Kitosan
Kitosan adalah jenis polimer alami yang dihasilkan dari proses deasetilasi
kitin. Kitosan mempunyai sifat yang khas yakni bioaktifis, biodegradasi dan tidak
beracun. Kitosan merupakan jenis polimer alam yang mempunyai rantai tidak
linier dan mempunyai rumus (C 6 H 11 NO 4 )n. Mempunyai sifat tidak
berbau,berwarna putih dan terdiri dari dua jenis polimer yaitu
poli (2-deoksi,2-asetilamin,2-glukosa) dan poli(2-deoksi,2- amino glukosa) yang
berikatan secara beta (1,4). Kitosan larut dalam pelarut organik, HCl encer, HNO 3
encer, dan H 3 PO 4 0,5%, tetapi tidak larut dalam basa kuat dan H 2 SO 4 . Sifat
kelarutan kitosan ini dipengaruhi oleh bobot molekul dan derajat deasetilasi.
Bobot molekul kitosan beragam, bergantung pada degradasi yang terjadi selama
proses deasetilasi (Sugita 2010). Struktur kitosan dapat dilihat pada Gambar 1.

Gambar 1. Struktur kitosan

(Sumber: Mardliyati 2010)

Parameter mutu kitosan biasanya dilihat dari nilai derajat deasetilsi, kadar air,
kadar abu, bobot molekul, dan viskositas. Viskositas kitosan dipengaruhi oleh
beberapa faktor seperti derajat deasetilasi, bobot molekul, konsentrasi pelarut, dan
suhu. Gel kitosan terjadi karena terbentuknya jaringan tiga dimensi antara molekul
kitosan yang terentang pada seluruh volume gel yang terbentuk dengan
menangkap sejumlah air di dalamnya. Sifat jaringan serta interaksi molekul yang
mengikat keseluruhan gel menentukan kekuatan, stabilitas, dan tekstur gel. Untuk
 6

memperkuat jaringan di dalam gel biasanya digunakan molekul lain yang

berperan sebagai pembentuk ikatan silang (Keuteur 1996).
o
Penggunaan suhu yang terlalu tinggi (di atas 150 C) menyebabkan
pemecahan ikatan polimer (depolimerisasi) rantai molekul kitosan sehingga
menurunkan berat molekulnya. Kitosan dengan berat molekul rendah akan lebih
tepat diterapkan sebagai antibakteri, antifungi, antioksidan dan antitumor. Kitosan
menunjukkan sifat-sifat polimer biomedis misalnya nono-toksik, biokompatibel,
dan biodegradable. Struktur kitosan yang mirip dengan selulosa dan
kemampuanya membentuk gel dalam suasana asam, membuat kitosan memiliki
sifat-sifat sebagai matriks dalam sistem pengantar obat (Sutriyo et al. 2005).
Kitosan biasa dipakai sebagai pengantar obat berdasarkan kekuatan mekanik dan
keteruraian hayatinya yang lambat. Kitosan berbentuk gel atau lembaran telah
digunakan sebagai pengantar obat yang merupakan zat antikanker
(Dhanikula et al. 2004).
Derajat deasetilasi menyatakan banyaknya gugus amino bebas dalam
polisakarida. Kitosan merupakan kitin dengan derajat deasetilasi lebih dari 70%.
Deasetilasi adalah proses pengubahan gugus asetil (-NHCOCH 3 ) dan rantai
molecular kitin menjadi gugus amina lengkap (-NH 2 ) pada kitosan dengan
penambahan NaOH konsentrasi tinggi. Kemampuan kitosan bergantung pada
derajat kimia reaktif yang tinggi gugus aminonya(Kusumaningsih et al. 2004
dalam April 2008).

Tabel 2 Spesifikasi kitosan niaga

No Parameter Ciri
1 Ukuran partikel Serbuk sampai bubuk
2 Warna Putih kelabu
3 Kelarutan 97% dalam 1% asam asetat
4 Kadar abu (%) ≤ 2,0
5 Kadar air (%) ≤ 10,0
6 Warna Larutan Tak berwarna
7 N-deasetilasi (%) ≥70,0
Sumber: (Kencana 2009)
 7

2.2.2 Nano Kitosan

Nano kitosan yaitu kitosan yang memiliki pertikel yang berbentuk padat
dengan ukuran sekitar 10 – 1000 nm. Kitosan dalam bentuk nanopartikel ini pun
bersifat netral, tidak toksik, dan memiliki stabilitas yang konstan. Nanopartikel ini
digunakan dalam berbagai rute (aplikasi parental, mucosal misal oral, nasal, dan
ocular mucosa) yang sangat tidak invasive. Dalam sistem pengantaran obat,
nanopartikel berperan sebagai pembawa (carrier) dengan cara melarutkan,
menjebak, mengenkapsulasi, atau menempelkan obat di dalam matriksnya. Baru-
baru ini, nanopartikel yang berasal dari bahan polimer digunakan sebagai sistem
pengantaran obat yang potensial karena kemampuan penyebarannya di dalam
organ tubuh selama waktu tertentu, dan kemampuannya untuk mengantarkan
protein atau peptida (Mohanraj dan Chen 2006).
Nanopartikel dari bahan polimer yang biodegradable dan kompatibel
merupakan salah satu perkembangan baik untuk pembawa obat karena
nanopartikel diduga terserap secara utuh di dalam system pencernaan setelah
masuk ke dalam tubuh (Wu et al. 2005 dalam Wahyono 2010). Tujuan utama
dalam melakukan rancangan nanopartikel sebagai sistem pengantar obat adalah
untuk mengatur ukuran partikel, sifat-sifat permukaan, dan pelepasan zat aktif
pada tempat yang spesifik di dalam tubuh sebagi sasaran pengobatan. Aplikasi
nanoteknologi membuat revolusi baru dalam dunia industri dan diyakini
pemenang persaingan global di masa yang akan datang adalah negara-negara yang
dapat menguasai nanoteknologi. Ruang lingkup nanoteknologi meliputi usaha dan
konsep untuk menghasilkan material atau bahan berskala nanometer,
mengeksplorasi dan merekayasa karakteristik material atau bahan tersebut, serta
mendesain ulang material atau bahan tersebut ke dalam bentuk, ukuran dan fungsi
yang diinginkan.

2.3 Gelasi ionik

Gelasi atau pembentukan gel merupakan gejala penggabungan atau
pengikatan silang rantai-rantai polimer membentuk jaringan tiga dimensi yang
sinambung dan dapat memerangkap air di dalamnya menjadi suatu struktur yang
kompak dan kaku yang tahan terhadap aliran bertekanan (Fardiaz 1989 dalam
Latifah 2010). Gel yang dapat menahan air dalam strukturnya disebut hidrogel
 8

(Wang et al. 2004 dalam Napthaleni 2010). Hidrogel dapat diklasifikasikan

menjadi hidrogel kimia dan hidrogel fisika. Contoh hidrogel kimia adalah hidrogel
kitosan yang berikatan silang secara kovalen (Keuteur 1996). Larutan kitosan
pada batas konsentrasi tertentu dalam asam asetat 1% dapat membentuk gel. Gel
kitosan yang terbentuk dapat diperbaiki sifatnya (menurunnya waktu gelasi dan
meningkatnya kekuatan mekanik gel) dengan penambhan PVA (Wang et al. 2004
dalam Wahyono 2010).
Metode yang paling umum dalam pembuatan nanopartikel melalui proses
gelasi ionik yaitu metode magnetic stirer, metode homogenizer ultrasonik dan
metode high speed. Banyak penelitian difokuskan untuk membuat nanopartikel
dari polimer yang biodegradable: kitosan, gelatin, dan sodium alginat. Salah satu
contoh metode gelasi ionik ini adalah mencampurkan polimer kitosan dengan
polianion sodium tripoliposfat yang menghasilkan interaksi antara muatan positif
pada gugus amino kitosan dengan muatan tripolifosfat. Tripolifosfat dianggap
sebagai zat pengikat silang yang paling baik (Mohanraj dan Chen 2006).
Proses terbentuknya kitosan nanopartikel dengan gelasi ionik dapat dilihat pada
Gambar 2.
Sizing Gelasi Ionik

Chitosan solution chitosan nanoparticle

Gambar 2 Kitosan nanopartikel dengan gelasi ionik

2.4 Tripolifosfat (TPP)

Pembentukan ikatan silang ionik salah satunya dapat dilakukan dengan
menggunakan senyawa tripolifosfat. Tripolifosfat dianggap sebagai zat pengikat
silang yang paling baik. Shu dan Zhu (2002) melaporkan bahwa penggunaan
tripolifosfat untuk pembentukan gel kitosan dapat meningkatkan mekanik dari gel
yang terbentuk. Hal ini karena tripolifosfat memiliki rapatan muatan negatif yang
tinggi sehingga interaksi dengan polikationik kitosan akan lebih besar. Menurut
Yongmei dan Yumin (2003) dalam Wahyono (2010), pembentukan nanopartikel
hanya terjadi pada konsentrasi tertentu kitosan dan TPP. Peran TPP sebagai zat
 9

pengikat silang akan memperkuat matriks nanopartikel kitosan. Dengan semakin

banyaknya ikatan silang yang terbentuk antara kitosan dan TPP maka kekuatan
mekanik matriks kitosan akan meningkat sehingga partikel kitosan menjadi
semakin kuat dan keras, serta semakin sulit untuk terpecah menjadi bagian -
bagian yang lebih kecil (Wahyono 2010).

2.5 Surfaktan
Penelitian nanopartikel kitosan termodifikasi menggunakan emulsifier yang
merupakan senyawa pengikat silang dan surfaktan. Berdasarkan penelitian
Silva et al. (2006) diketahui bahwa penambahan surfaktan dapat memperkecil
ukuran partikel kitosan. Zat pengikat silang yang sering digunakan adalah
glutaraldehida, sedangkan surfaktan yang banyak dipakai adalah surfaktan
nonionik (Tween 80 dan Span 80). Beberapa contoh surfaktan nonionik adalah
Tween 80 (polietilena sorbitan monooleat) dan Span 80 (sorbitan monooleat).
Tween 80 dan Span 80 bersifat nontoksik yang umumnya digunakan sebagai
emulsifier dan penstabil pada bidang pangan dan farmasi. Tarirai (2005) dalam
Wahyono (2010) telah melakukan penelitian tentang pembuatan gel kitosan
sebagai pembawa obat ibuprofen dengan menggunakan senyawa pengikat silang
tripolifosfat dan senyawa surfaktan yang sekaligus berfungsi sebagai pengikat
silang, yaitu asam oleat, sodium laurit sulfat (SLS) dan Tween 80.

2.6 Sonikasi
Gelombang ultrasonik merupakan gelombang mekanik longitudinal yang
memiliki frekuensi 20 KHz ke atas. Pada alat Ultrasonics Processor Cole-Parmer,
spesifikasi yang dapat diperoleh yaitu frekuensi yang tidak bisa diubah-ubah
sebesar 20 KHz dan daya sebesar 130 watt. Pada alat tersebut juga terdapat waktu
sonikasi, amplitude, dan pulsa gelombang yang dapat diatur sesuai kebutuhan.
Gelombang suara ultrasonik dapat didengar dan digunakan sebagai alat
komunikasi oleh pendengaran beberapa jenis binatang, seperti anjing, kelelawar
dan lumba - lumba (Tipler 1998).
Batas atas rentang ultrasonik mencapai 5 MHz untuk gas dan mencapai
500 Mhz untuk cairan dan padatan. Penggunaan ultrasonik berdasarkan
rentangnya yang luas ini dibagi menjadi dua bagian. Yang pertama termasuk suara
 10

beramplitudo rendah (frekuensi lebih tinggi) dan berkaitan dengan efek fisik
medium pada gelombang dan biasanya disebut “gelombang energi rendah” atau
“ultrasonik frekuensi tinggi”. Biasanya, gelombang amplitudo rendah digunakan
dalam tujuan analisis untuk mengukur kecepatan dan koefisien absorpsi
gelombang dalam medium pada rentang 2 sampai 10 MHz. Yang kedua adalah
gelombang energi tinggi (frekuensi rendah), yang dikenal dengan “ultrasonik
energi tinggi” dan terletak antara 20 – 100 KHz. Jenis kedua ini digunakan untuk
pembersihan, pembentukan plastik, dan yang terbaru adalah untuk sonokimia
(Mason et al. 2002 dalam Komariah 2010).
Efek kimia dari gelombang ultrasonik, tidak secara langsung berinteraksi
dengan molekul – molekul untuk menginduksi suatu perubahan kimiawi. Ini
karena panjang gelombang ultrasonik yang terlalu panjang jika dibandingkan
dengan panjang gelombang molekul – molekul. Interaksi gelombang ultrasonik
dengan molekul – molekul terjadi melalui media perantara berupa cairan.
Gelombang yang dihasilkan oleh tenaga listrik (lewat tranduser) diteruskan oleh
media cair ke medan yang dituju melalui fenomena kavitasi akustik
(Wardiyati et al. 2004 dalam Wulandari 2010), yang menyebabkan terjadinya
temperatur dan tekanan lokal ektrem dalam cairan dimana reaksi terjadi.

2.7 Pengeringan Semprot (spray drying)

Metode pengerinagn semprot (spray drying) merupakan metode yang paling
mudah dan sederhana untuk mengenkapsulasi suatu bahan karena larutan suspensi
yang akan dinanoenkapsulasi cukup dimasukkan ke dalam alat pengering semprot
dengan serbuk nanokapsul sebagai produk. Metode ini dapat dilakukan melalui
beberapa tahap, yaitu (1) produk yang berupa cairan didispersikan dalam
penyemprot (sprayer), (2) kontak antara semprotan dengan udara panas, (3)
pengeringan semprotan, dan (4) pemisahan antara produk kering (aliran serbuk
bebas) dan udara.
Keuntungan nanoenkapsulasi dengan metode pengeringan semprot ini
diantaranya ialah (1) meningkatkan stabilitas serbuk, (2) teknik yang dapat
dipercaya, (3) biaya yang murah, (4) menghasilkan serbuk berupa mikrokapsul
yang kecil, (5) teknik yang ramah, terhindar dari penggunaan pelarut organik, (6)
 11

dilakukan satu tahap, atau dengan kata lain prosesnya sinambung (continuous),
dan (7) merupakan metode yang fleksibel, dapat digunakan untuk enkapsulasi
polimer – polimer yang berbeda dan suhu berbeda (Yundhana 2008).

2.8 Scanning Electron Microscopy (SEM)

Mikroskop merupakan alat untuk melihat benda yang berukuran kecil (mm).
Salah satu jenis mikroskop adalah SEM (scanning electron microscopy). Scanning
Electron Microscopy (SEM) menggunakan elektron dan cahaya tampak sebagai
sumber cahayanya. Elektron menghasilkan gelombang yang lebih pendek
dibandingkan cahaya foton dengan ukuran 0,1 nm dan menghasilkan gambar
dengan resolusi yang lebih baik (Lee 1993 dalam Rini 2010).
Scanning electron microscopy (SEM) menghasilkan gambar dari suatu
permukaan spesimen dengan kedalaman fokus 500 kali lebih besar dibandingkan
mikroskop cahaya. Gambar yang dihasilkan memiliki fokus yang baik pada
kedalaman spesimen, sehingga gambar yang dihasilkan berupa bentuk tiga
dimensi spesimen. Hal ini disebabkan oleh ketajaman pancaran elektron yang
menyinari spesimen. Mikroskop SEM memiliki perbesaran hingga 50.000 kali
(Fujita et al. dalam Rini 2010).
Mikroskop SEM memiliki lensa yang berbeda dengan mikroskop cahaya.
Bagian electron gun berfungsi memancarkan elektron. Condensing lenses
berfungsi untuk memantulkan elektron. Lensa yang berdekatan dengan sampel
adalah lensa objek. Pancaran elektron yang mengenai permukaan sampel
diteruskan oleh detektor, sehingga penampakan permukaan sampel dapat terlihat
pada monitor (Chandler 1980 dalam Rini 2010).
Elektron bermuatan negatif sehingga untuk mengamati permukaan sampel,
diperlukan pelapis sampel yang bersifat konduktor. Pelapis yang umumnya
digunakan antara lain platina, emas, dan perak. Namun, platina relatif mahal
dibandingkan dengan emas dan perak. Perak memiliki harga yang relatif lebih
murah dibandingkan dengan platina dan emas, namun memiliki daya konduktor
yang kurang baik. Sehingga emas lebih banyak digunakan sebagai pelapis sampel
(Lee 1993 dalam Rini 2010).
 12

2.9 FTIR (Fourier Transform InfraRed)

FTIR (Fourier Transform InfraRed) merupakan suatu metode spektroskopi IR.
Spektroskopi InfraRed (IR) dapat mengidentifikasi kandungan gugus kompleks
dalam senyawa tetapi tidak dapat menentukan molekular unsur penyusunnya.
Pada spektroskopi IR, radiasi IR dilewatkan pada sampel. Sebagian dari radiasi IR
diserap oleh sampel dan sebagian lainnya diteruskan. Jika frekuensi dari suatu
fibrasi spesifik sama dari frekunsi radiasi IR yang langsung menuju molekul,
molekul akan menyerap radiasi tersebut. Spektrum yang dihasilkan
menggambarkan absoprsi dan transmisi molekular, membentuk sidik jari
molekular suatu sampel (Kencana 2009).
Sistem optik Spektrofotometer FTIR dilengkapi dengan cermin yang bergerak
tegak lurus dan cermin diam. Dengan demikian radiasi infra merah akan
menimbulkan perbedaan jarak yang ditempuh menuju cermin yang bergerak (M)
dan jarak cermin yang diam (F). Perbedaan jarak tempuh radiasi tersebut adalah 2
yang selanjutnya disebut sebagai retardasi (δ). Hubungan antara intensitas radiasi
IR yang diterima detektor terhadap retardasi disebut sebagai interferogram.
Sedangkan sisitem optik dari Spektrofotometer IR yang didasarkan atas
bekerjanya interferometer disebut sebagai sistim optik Fourier Transform
Infra Red.
Pada sistim optik FTIR digunakan radiasi LASER (Light Amplification by
Stimulated Emmision of Radiation) yang berfungsi sebagai radiasi yang
diinterferensikan dengan radiasi infra merah agar sinyal radiasi infra merah yang
diterima oleh detector secara utuh dan lebih baik. Detektor yang digunakan dalam
Spektrofotometer FTIR adalah TGS (Tetra Glycerine Sulpahte) atau MCT
(Mercury Cadmium Telluride). Detektor MCT lebih banyak digunakan karena
memiliki beberapa kelebihan disbanding detector TGS, yaitu memberikan respon
yang lebih baik pada frekuensi modulasi tinggi, lebih sensitif, lebih cepat, tidak
dipengaruhi oleh temperatur, sangat selektif terhadap energi vibrasi yang diterima
dari radiasi infra merah.
 13

3 METODOLOGI

3.1 Waktu dan Tempat Pelaksanaan

Penelitian ini dilaksanakan pada bulan Febuari 2011 sampai April 2011.
Pembutan kitosan dilakukan di Laboratorium Biokimia Hasil Perairan,
Departemen Teknologi Hasil Perairan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan,
Institut Pertanian Bogor. Pengujian analisis Proksimat Kitosan dilakukan di Pusat
Antar Universitas, Institut Pertanian Bogor. Pembuatan nano kitosan dilakukan
dengan gelasi ionik dan perlakuan pengecilan ukuran (sizing) dengan metode
magnetic stirer dilakukan di Laboratorium Biokimia Hasil Perairan, Departemen
Teknologi Hasil Perairan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Institut
Pertanian Bogor. Pembuatan nano kitosan menggunakan metode homogenizer
ultrasonik dilakukan di Laboratorium Kimia Fisik, Departemen Kimia, Fakultas
Matematikan dan Ilmu Pengetahuan Alam, Institut Pertanian Bogor. Pembuatan
nano kitosan menggunakan metode sonikasi dilakukan di Laboratorium Biofisik,
Departemen Fisika, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Institut
Pertanian Bogor. Pengujian nano kitosan dengan SEM dilakukan di Pusat
Penelitian dan Pengembagan Kehutanan, Bogor dan Laboratorium Geologi
Kuarter, Institut Teknologi Bandung. Pengujian FTIR (Fourier Transform
InfraRed) dilakukan di Laboratorium Terpadu, Universitas Islam Negeri,
Tangerang.

3.2 Bahan dan Alat

Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah cangkang udang vannamei
(Litopenaeus vannamei), aquades, asam asetat 0,3%, dan tripoliphospat
(TPP) 0,1 %, dan surfaktan (Tween 80) 0,1 %.
Alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah beaker glass, timbangan
digital, gelas ukur, kertas pH, kompor listrik, saringan, alat pengaduk, termometer,
magnetic stirer, homogenizer ultrasonik, Ultrasonics Processor (Cole-Parmer 20
kHz 130 watt), pipet, spray dryer, alat uji SEM dan alat uji FTIR.
 14

3.3 Tahap Penelitian

Tahapan yang dilakukan dalam penelitian ini yaitu dimulai dari penelitian
pendahuluan dengan membuat kitosan dan pengujian proksimat kitosaan.
Penelitian utama membuat nano kitosan dengan perlakuan perbedaan pengecilan
ukuran menggunakan metode gelasi ionik, dan pengujian serta menganalisis
karakteristik nanopartikel. Adapun proses penelitian nano kitosan ini dapat dilihat
sebagai berikut.
3.3.1 Penelitian pendahuluan
Penelitian pendahuluan terdiri dari uji proksimat kitosan dari kulit udang
meliputi uji kadar air, uji kadar abu, uji kadar protein, dan kadar lemak. Diagram
alir pembuatan kitosan dapat dilihat pada Gambar 3.

Cangkang udang

Perendaman HCl 1:7

(selama 0 jam, 24 jam, 48 jam, 72 jam)

Demineralisasi HCl 1 N, 90 0C, 1 h

Netralisasi

Deproteinasi NaOH 3 N, 90 0C, 1 h

Netralisasi

Kitin

Deasetilasi NaOH 50 %, Kitosan

1400C, 1 h

Gambar 3 Proses pembuatan kitosan

(Sumber : Suptijah et al. 1992)
 15

Pembuatan kitosan diawali dengan perendaman kulit udang dalam larutan

HCl 1 N dengan perlakuan waktu perendaman 0 jam, 24 jam, 48 jam dan 72 jam.
Setelah itu, dilakukan demineralisasi dengan HCl 1 N, pada suhu 90 °C selama 60
menit. Setelah 60 menit, dilakukan netralisasi menggunakan aquades sampai pH
netral. Kemudian dilakukan deproteinasi dengan NaOH 3 N, pada suhu 90 °C
selama 60 menit, dan dilakukan kembali netralisasi sampai pH netral untuk
mendapatkan kitin. Setelah itu, dilakukan deasetilasi dengan NaOH 50 %, pada
suhu 140 % selama 60 menit dan didapatkan kitosan.
3.3.2 Penelitian Utama
Perlakuan perendaman kulit udang yang menghasilkan rendemen kitosan
tertinggi dilanjutkan dalam penelitian utama. Penelitian utama meliputi tahapan
pembentukan gel yang lunak berantai panjang lurus dari 0,2 gr kitosan 0,2 % yang
dilarutkan dalam 100 ml asam asetat 0,3%. Hal ini bertujuan agar dengan mudah
memutuskan polimer tersebut. Kemudian dilakukan pencampuran bahan-bahan
dengan terlebih dahulu menentukan konsentrasi bahan (kitosan, asam oleat, dan
TPP) yang akan dibentuk menjadi emulsi cair.
3.3.2.1 Tahapan pembuatan nano kitosan dengan metode gelasi ionik
Kitosan yang telah dilarutkan dalam asam asetat, yang memiliki bentuk gel
lunak berantai panjang lurus, diambil sebanyak 50 ml. Setelah itu, dilakukan
pembuatan nanopartikel kitosan dengan gelasi ionik dan perlakuan pengecilan
ukuran (sizing) dengan metode magnetic stirer, metode homogenizer ultrasonik
dan metode sonikasi 60 menit. Kemudian ditambahkan 25 ml emulsifier (Tween
80) 0,2 % yang dapat memisahkan gel antara gel satu dengan gel lainnya.
Surfaktan (Tween 80) diberikan dengan cara tetes demi tetes ke dalam kitosan
yang telah mengalami pemotongan, dan didiamkan memutar selama 30 menit.
Setelah itu, ditambahkan 10 ml tripoliphospat 0,1 % yang bertujuan agar ukuran
partikel yang dihasilkan tetap stabil. Kemudian didiamkan selama 30 menit.
3.3.2.2 Tahapan pengujian dan analisis sifat karakteristik nano kitosan
Sampai tahap ini kemudian dilakukan analisis karakterisasi nanopartikel yang
dihasilkan dengan SEM untuk mengetahui karakteristik, ukturan dan morfologi
nanopartikel kitosan serta keadaan missel yang memiliki stabilitas yang konstan.
 16

Diagram alir pengujian stabilitas nanopartikel kitosan dengan metode gelasi ionik
dapat dilihat pada Gambar 4.

Kitosan dilarutkan
dalam asam asetat

Larutan kitosan dimixer selama

60 menit dengan 3 metode

Metode Ultrasonik Metode

magnetic stirer homogenizer

Ditambahkan emulsifier
(Tween 80) 0,2 % secara tetes demi tetes

Didiamkan selama 30

Ditambahkan tripoliphospat 0,1 %

Diamkan selama 30 menit

Larutan Nano kitosan

Dikeringkan dengan spray dryer

Uji SEM
Nano Kitosan yang stabil
Uji FTIR

Gambar 4 Diagram alir pengujian stabilitas nanopartikel kitosan dengan metode

gelasi ionik
 17

3.4 Analisis Fisik dan Kimia Sampel

Analisis yang dilakukan untuk kitosan pada penelitian ini antara lain yaitu
analisis fisik dan kimia. Analisis fisik pada kitosan dilakukan perhitungan
rendemen kitosan dan nilai derajat deasetilasi. Analisis kimia yang dilakukan
yaitu analisa proksimat meliputi analisis kadar air, lemak, protein, abu, dan
karbohidrat (by difference).
3.4.1 Analisis Proksimat
Analisis proksimat merupakan suatu analisis yang dilakukan untuk
mengetahui komposisi kimia yang ada pada suatu bahan. Analisis proksimat yang
dilakukan meliputi:
3.4.1.1 Analisis kadar air (AOAC 1995)
Tahap pertama yang dilakukan untuk menganalisis kadar air adalah
mengeringkan cawan porselen dalam oven pada suhu 105 oC selama 1 jam.
Cawan tersebut diletakkan ke dalam desikator (kurang lebih 15 menit) dan
dibiarkan sampai dingin kemudian ditimbang. Cawan tersebut ditimbang kembali
hingga beratnya konstan. Sebanyak 5 gram contoh dimasukkan ke dalam cawan
tersebut, kemudian dikeringkan dengan oven pada suhu 105 oC selama 5 jam,
kemudian cawan dimasukkan ke dalam desikator sampai dingin dan selanjutnya
ditimbang kembali.

Keterangan:
B = berat sampel (gram)
B 1 = berat (sampel+cawan) sebelum dikeringkan
B 2 = berat (sampel+cawan) setelah dikeringkan

3.4.1.2 Analisis kadar abu (AOAC 1995)

Cawan pengabuan dikeringkan di dalam oven selama 1 jam pada
suhu 600 oC, kemudian didinginkan selama 15 menit di dalam desikator dan
ditimbang hingga didapatkan berat yang konstan. Sampel sebanyak 5 gram
dimasukkan ke dalam cawan pengabuan dan dipijarkan di atas nyala api hingga
tidak berasap lagi. Setelah itu dimasukkan ke dalam tanur pengabuan dengan suhu
600 oC selama 1 jam, kemudian ditimbang hingga didapatkan berat yang konstan.
 18

Kadar abu ditentukan dengan rumus:

Kadar abu (berat basah)

3.4.1.3 Analisis kadar lemak (AOAC 1995)

Contoh seberat 5 gram (W 1 ) dimasukkan ke dalam kertas saring pada kedua
ujung bungkus ditutup dengan kapas bebas lemak dan selanjutnya sampel yang
telah dibungkus dimasukkan ke dalam labu lemak yang sudah ditimbang
berat tetapnya (W 2 ) dan disambungkan dengan tabung Soxhlet. Selongsong lemak
dimasukkan ke dalam ruang ekstraktor tabung Soxhlet dan disiram dengan
pelarut lemak (n-heksana), kemudian dilakukan refluks selama 6 jam. Pelarut
lemak yang ada dalam labu lemak didestilasi hingga semua pelarut lemak
menguap. Pada saat destilasi pelarut akan tertampung di ruang ekstraktor, pelarut
dikeluarkan sehingga tidak kembali ke dalam labu lemak, selanjutnya labu lemak
dikeringkan dalam oven pada suhu 105 oC, setelah itu labu didinginkan dalam
desikator sampai beratnya konstan (W 3 ).

Perhitungan kadar lemak : % Kadar lemak =

Keterangan : W 1 = Berat sampel (gram)

W 2 = Berat labu lemak kosong (gram)
W 3 = Berat labu lemak dengan lemak (gram)

3.4.1.4 Analisis kadar protein (AOAC 1995)

Tahap-tahap yang dilakukan dalam analisis protein terdiri dari
tiga tahap, yaitu destruksi, destilasi, dan titrasi. Pengukuran kadar protein
dilakukan dengan metode mikro Kjeldahl. Sampel ditimbang sebanyak 0,25 gram,
kemudian dimasukkan ke dalam labu Kjeldahl 100 ml, lalu ditambahkan satu butir
kjeltab dan 3 ml H 2 SO 4 pekat. Contoh didestruksi pada suhu 410 oC selama
kurang lebih 1 jam sampai larutan jernih lalu didinginkan. Setelah dingin,
ke dalam labu Kjeldahl ditambahkan 50 ml akuades dan 20 ml NaOH 40 %,
kemudian dilakukan proses destilasi dengan suhu destilator 100 oC. Hasil destilasi
ditampung dalam labu Erlenmeyer 125 ml yang berisi campuran 10 ml asam borat
(H 3 BO 3 ) 2 % dan 2 tetes indicator bromcherosol green-methyl red yang berwarna
merah muda. Setelah volume destilat mencapai 40 ml dan berwarna
 19

hijau kebiruan, maka proses destilasi dihentikan. Lalu destilat dititrasi dengan
HCl 0,1 N sampai terjadi perubahan warna merah muda. Volume titran dibaca dan
dicatat. Larutan blanko dianalisis seperti contoh.
Kadar protein dihitung dengan rumus sebagai berikut :

%N =

Keterangan : Fp = Faktor pengenceran

fk = 6,25

3.4.1.5 Analisis kadar karbohidrat (AOAC 1995)

Analisis karbohidrat dilakukan secara by difference, yaitu hasil pengurangan
dari 100 % dengan kadar air, kadar abu, kadar protein dan kadar lemak, sehingga
kadar karbohidrat tergantung pada faktor pengurangannya. Hal ini karena
karbohidrat sangat berpengaruh terhadap zat gizi lainnya. Analisis karbohidrat
dapat dihitung dengan menggunakan rumus:
% Karbohidrat = 100% - (kadar air + kadar abu + kadar lemak + kadar protein)

3.4.2 Rendemen Kitosan Cangkang Udang Vannamei (Litopenaeus vannamei)

Rendemen merupakan persentasi dari perbandingan serbuk kitosan terhadap
bobot kulit udang sebelum mengalami perlakuan. Perhitungan persentase
rendemen dengan rumus sebagai berikut:

3.4.3 Derajat Deasetilasi (Domsay 1985)

Kitosan sebanyak 0,2 gram digerus dengan KBr dalam mortar agate
sampai homogen, kemudian dimasukkan dalam cetakan pelet, dicetak dengan
dipadatkan dan divakum sampai optimum, selanjutnya pelet ditempatkan dalam
sel dan dimasukkan ke dalam tempat sel pada spektrofotometer inframerah IR-
408 yang sudah dinyalakan dan stabil, Kemudian tombol pendeteksian ditekan,
akan muncul histogram FTIR pada rekorder yang memunculkankan puncak-
puncak dari gugus fungsi yang terdapat pada sampel kitosan. Histogram yang
diperoleh dapat digunakan untuk analisis kualitatif dan kuantitatif misalnya
 20

analisis kuantitatif derajat deasetilasi dari kitosan.

Pengukuran derajat deasetilasi berdasarkan kurva yang tergambar oleh
spektrofotometer. Puncak tertinggi (P 0 ) dan puncak terendah (P) dicatat dan
diukur dengan garis dasar yang dipilih. Nisbah absorbansi dihitung dengan
rumus:

Log P0
A=
P

Keterangan:
P 0 = Jarak antara garis dasar dengan garis singgung antara dua puncak tertinggi
dengan panjang gelombang 1.655cm-1 atau 3.450 cm-1.
P = Jarak antara garis dasar dengan lembah terendah dengan panjang gelombang

1.655cm-1 atau 3.450 cm-1.

Perbandingan absorbansi pada 1.655cm-1 dengan absorbansi 3.450 cm-1

digandakan satu per standar N-deasetilasi kitosan (1,33). Dengan mengukuran
absorbansi pada puncak yang berhubungan, nilai persen N-deasetilasi dapat
dihitung dengan rumus:

A1.655 1
% N-deasetilasi = 1- X
A3.450 1,33

Keterangan: A 1.655 = Absorbansi pada panjang gelombang 1.655 cm-1.

A 3.450 = Absorbansi pada panjang gelombang 3.450 cm-1.
1,33 = konstanta untuk derajat deasetilasi yang sempurna.
 21

4 HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 Penelitian Pendahuluan

Pada penelitian pendahuluan dilakukan uji proksimat kulit udang. Uji
proksimat kulit udang yang dilakukan pada penelitian ini meliputi penentuan
kadar air, kadar lemak, kadar protein dan kadar abu. Berdasarkan uji proksimat,
kulit udang vanamei memiliki kadar air yakni 15,04 % (bb). Kadar air cangkang
udang Penaeus notabilis berdasarkan penelitian Emmanuel et al. (2008)
sebesar 13,3%. Perbedaan kadar air tersebut dipengaruhi oleh perbedaan jenis
udang dan tingkat kekeringan sampel yang digunakan pada penelitian.
Berdasarkan uji proksimat, kulit udang vanamei memiliki kadar lemak
sebesar 0,57% (bb), hal ini menunjukan bahwa kadar lemak pada kulit udang
tergolong rendah. Menurut literatur kadar lemak pada kulit udang yakni 9,8% (bk)
(Ravichandran et al. 2009). Perbedaan kadar lemak dipengaruhi oleh jenis udang
dan fase hidup udang saat panen. Udang pada fase molting mengandung
kadar lemak yang lebih tinggi (Cuzon dan Guillaume 2001 dalam Rini 2010).
Hasil analisis kadar protein dan kadar abu kulit udang vanamei menunjukkan
nilai yang relatif sama dengan hasil penelitian Ravichandran et al. 2009.
Komposisi kimia kulit udang vanamei hasil penelitian dapat dilihat pada Tabel 3.

Tabel 3 Komposisi kimia kulit udang hasil uji proksimat

Komposisi Jumlah (%)
(bb)
Air 15,04
Abu 18,02
Protein 34,69
Lemak 0,57
Karbohidrat 31,75
Keterangan: bb = berat basah
Kadar protein kulit udang vanamei sebesar 34,69 % (bb). Menurut penelitain
yang dilakukan oleh Kim et al. (2011) kadar protein cangkang udang
Litopenaeus vannamei sebesar 40,35% (bb). Kadar abu pada kulit udang
vannamei sebesar 18,02% (bk). Nilai kadar abu ini lebih rendah dibandingkan
 22

kadar abu yang diteliti oleh Ravichandran et al. (2009) sebesar 21,5% (bk).
Perbedaan nilai kadar abu diduga dapat disebabkan oleh perbedaan hábitat dan
lingkungan hidup.
Hasil perhitungan kadar karbohidrat dengan metode by difference
menunjukkan bahwa cangkang udang vannamei mengandung karbohidrat sebesar
31,75%. Hasil perhitungan karbohidrat dengan metode by difference ini
merupakan metode penentuan kadar karbohidrat dalam bahan pangan secara
kasar, dimana serat kasar juga terhitung sebagai karbohidrat (Winarno 2008).

4.2 Rendemen Kitosan

Rendemen kitosan ditentukan berdasarkan persentase berat kitosan yang
dihasilkan terhadap bahan baku kulit udang kering dengan lamanya
waktu perendaman HCl. Rendemen kitosan dari kulit udang yang diperoleh
dengan perlakuan waktu perndaman HCl 1 N selama 0 jam, 24 jam, 48 jam, dan
72 jam tertera pada Tabel 4 dan Gambar 5.

Tabel 4 Rendemen kitosan dari cangkang udang terhadap lamanya waktu

perendaman HCl 1 N
No. Perlakuan Rendemen (%)
(Jam) + stdev
1. 0 11,57 ± 0,14
2. 24 12,00 ± 0,7
3. 48 13,20 ± 0,37
4 72 13,50 ± 0,37

Rendemen yang diperoleh untuk setiap perlakuan 11,43% - 13,87%. Hasil

percobaan Suptijah et al. (1992) menunjukkan rendemen kitin kitosan yang
diperoleh dari limbah udang 20% - 30%.
Perlakuan waktu perendaman HCl 1 N yang berbeda memberikan
pengaruh terhadap rendemen kitosan tersebut. Perlakuan dengan perendaman
HCl 1 N (72 jam) menghasilkan rendemen tertinggi yakni sebesar 13,50%.
Perlakuan waktu perendaman HCl 1 N (0 jam) menghasilkan rendemen terendah
yakni sebesar 11,57 %. Hal ini dipengaruhi oleh kadar air pada kitosan tersebut
yang relatif rendah yakni sebesar 5,09 %. Data selengkapnya dapat dilihat pada
 23

Lampiran 7. Grafik rendemen kitosan menurut waktu perendaman dengan HCl

dapat dilihat pada Gambar 5.

Gambar 5 Grafik rendemen kitosan terhadap pengaruh waktu perendaman HCl

Perlakuan perendaman dengan HCl 1 N yang berbeda memberikan pengaruh

terhadap rendemen kitosan. Mineral memiliki sifat larut asam, oleh karena itu
perendaman cangkang udang dengan HCl 1 N menyebebkan mengembangnya
matrik cangkang udang sehingga memudahkan pelarut masuk ke dalaam matriks.
Berdasarkan hal tersebut, waktu perendaman (retention time) kulit udang di dalam
larutan HCl 1 N akan mempengaruhi penurunan kadar mineral pada proses
pembuatan kitin. Semakin lama waktu perendaman, maka akan menghasilkan
semakin banyak rendemen dari kitosan. Hal ini dikarenakan, perendaman
menyebabkan terbukanya pori-pori cangkang udang yang maksimal, sehingga
ruang-ruang yang terbentuk memudahkan dicapai oleh pengestrak (HCl), dengan
demikian mineral mudah terlepas atau terekstrak dengan optimum (Suptijah 1992
dalam Ariesta 2008).

4.3 Mutu kitosan

Kitosan harus memiliki mutu yang baik, dan pengukurannya dapat dilihat dari
ukuran partikel, warna larutan, kadar air, kadar abu, dan kadar nitrogen. Setelah
dilakukan proses pembuatan kitosan dengan pengaruh waktu perendaman HCl,
 24

dihasilkan rendemen kitosan terbanyak dan mutu yang memenuhi persyaratan

Protan Biopolimer (Suptijah et al. 1992). Berdasarkan hasil analisa terhadap
rendemen kitosan tertinggi, didapatkan mutu kitosan yang dapat dilihat pada
Tabel 5.

Tabel 5 Mutu kitosan dari rendemen hasil perendaman 72 jam HCl 1 N

Parameter Nilai (Penelitian) Protan Biopolimer

(Suptijah et al. 1992)
Ukuran partikel Serpihan - serbuk Serpihan – serbuk
Warna larutan Jernih Jernih
Kadar air 15 % ≤ 10 %
Kadar abu 0,11 % ≤ 2 %.
Kadar nitrogen 4,73 % ≤ 5 %.

Berdasarkan Tabel 5 dapat dilihat bahwa ukuran partikel pada kitosan dari
kulit udang berupa serpihan – serbuk. Hal ini sesuai dengan Suptijah et al. (1992)
yaitu ukuran partikel pada kitosan berupa serpihan – serbuk. Pada proses
pembuatan kitosan dengan ektraksi bahan baku terlihat hancur. Warna larutan
kitosan tersebut jernih, yang berarti tidak ada zat pengotor yang menempel pada
permukaan kitosan.
Kadar abu merupakan parameter untuk mengetahui mineral yang terkandung
dalam suatu bahan yang mencirikan keberhasilan proses demineralisasi yang
dilakukan. Kadar abu kitosan hasil penelitian ini yaitu 0,11%. Hal ini
menunjukkan bahwa kitosan yang dihasilkan telah memenuhi standar mutu sesuai
ketentuan Protan Biopolimer, yakni sebesar≤ 2 %. Kadar abu ini dipengaruhi
proses pengadukan yang dilakukan selama proses pembuatan kitosan. Pada proses
tersebut dilakukan pengadukan yang cukup kostan sehingga kadar abu dari kedua
kitosan tersebut cukup rendah.
Kadar abu yang rendah menunjukan kandungan mineral yang rendah.
Semakin rendah kadar abu yang dihasilkan maka mutu dan tingkat kemurnian
kitosan akan semakin tinggi. Selain itu proses pencucian yang baik dan
diperolehnya pH netral, juga berpengaruh terhadap kadar abu. Dengan pencucian
ini, mineral yang telah terlepas dari bahan dan berikatan dengan pelarut dapat
 25

terbuang dan larut bersama air (Angka dan Suhartono 2000). Pencucian yang
kurang sempurna akan mengakibatkan mineral yang sudah terlepas dapat melekat
kembali pada permukaan molekul kitin.
Kadar air merupakan salah satu parameter yang sangat penting untuk
menentukan mutu kitosan. Protan Biopolimer menetapkan standar mutu kadar air
kitosan adalah ≤ 10 % (Bastaman 1989). Dari Tabel 5 diketahui bahwa kadar air
kitosan sebesar 15 %. Kitosan yang dihasilkan memiliki kadar air yang masih
cukup tinggi dan melebihi batas maksimum standar mutu kadar air kitosan yang
telah ditetapkan. Kadar air yang terkandung pada kitosan dipengaruhi oleh proses
pengeringan, lama pengeringan yang dilakukan, jumlah kitosan yang dikeringkan
dan luas tempat permukaan tempat kitosan yang dikeringkan (Saleh et al. 1994).
Benjakula dan Sophanadora (1993) juga menyatakan bahwa kadar air kitosan
tidak dipengaruhi oleh jumlah bahan, nisbah bahan, dan waktu proses tetapi
dipengaruhi oleh waktu pengeringan yang dilakukan terhadap kitosan.
Kadar air yang tinggi dipengaruhi oleh kurang meratanya peletakan kitosan
pada tempat pengeringan, sehingga ada kitosan yang saling menggumpal dan akan
mempersulit proses pengeringan. Instensitas sinar matahari yang tidak stabil
(berubah-ubah) juga akan menyebabkan proses pengeringan berlangsung kurang
sempurna. Selain itu, kadar air kitosan sangat dipengaruhi oleh keadaan
lingkungan, khususnya kelembaban relatif dari tempat kitosan tersebut disimpan.
Pada umumnya kitosan disimpan di dalam ruangan. Hal yang harus diperhatikan
agar dihasilkan kitosan dengan kadar air yang memenuhi persyaratan adalah
dengan cara pengeringan, cara pengemasan dan cara penyimpanan yang baik.
Penyimpanan yang baik dengan penutupan yang sempurna merupakan upaya
untuk mempertahankan mutu kitosan, khususnya kadar airnya.
Kadar nitrogen merupakan salah satu parameter yang juga diukur untuk
menentukan mutu kitosan. Kadar nitrogen menentukan sifat kitosan yang
berinteraksi dengan gugus lainnya. Keberadaan senyawa lain dalam kitosan yaitu
bentuk gugus amin (NH 2 ) menyebabkan kitosan memiliki reaktivitas kimia yang
cukup tinggi, sehingga kitosan mampu mengikat air dan larut dalam asam asetat.
Menurut Protan Biopolimer standar mutu kadar nitrogen kitosan yang telah
ditetapkan adalah ≤5 %. Pada Tabel 5 di atas ditunjukkan bahwa kadar nitrogen
 26

kitosan yang dihasilkan telah memenuhi standar yang ditetapkan yakni sebesar
4,73%.
Pada penelitian ini dilakukan proses deasetilasi yang sesuai dengan penelitian
Ariesta (2008), yaitu dengan konsentrasi NaOH 50 % dan suhu proses deasetilasi
140 °C. Hasil analisis kadar nitrogen menunjukkan nilai yang relatif sama dengan
hasil penelitian Ariesta (2008) yaitu ≤5 %. Konsentrasi NaOH dan suhu
deasetilasi yang semakin tinggi, menyebabkan kadar nitrogen cenderung semakin
kecil. Hal ini didukung oleh pernyataan Benjakula dan Sophanodora (1993)
bahwa kadar total nitrogen berupa protein yang dapat dihilangkan
(pada pembuatan kitin) sangat dipengaruhi oleh konsentrasi NaOH yang
digunakan, waktu ekstraksi dan suhu ekstraksi. Protein yang masih terikat setelah
proses deasetilasi dilakukan dengan suhu yang semakin meningkat dan
konsentrasi NaOH yang tinggi. Proses pengadukan yang konstan juga merupakan
salah satu faktor yang mempermudah panghilangan protein dari kulit udang
melalui reaksi antara larutan NaOH dengan bahan.
Menurut Saleh et al. (1994) kadar nitrogen dipengaruhi oleh konsentrasi
NaOH dan waktu proses deproteinasi. Semakin tinggi konsentrasi NaOH yang
digunakan dan semakin lama waktu deproteinasi yang digunkan maka reaksi
antara protein dengan larutan pembentuk ester (Na-proteinat) akan semakin
sempurna, sehingga protein yang dihilangkan akan semakin banyak.

4.4 Penelitian Utama

Pada penelitian utama dilakukan perhitungan rendemen kitosan nanopartikel
yang dihasilkan dari berbagai metode alat yang berbeda antara lain magnetic
stirrer, ultrasonik dan homogenizer. Tahap berikutnya, dari hasil rendemen yang
tertinggi dilakukan proses karakteristik fisik dari kitosan nanopartikel dengan
metode gelasi ionic menggunakan ketiga alat tersebut. Parameter yang diamati
pada penelitian utama meliputi ukuran partikel melalui analisis SEM (Scanning
Electron Microscopy) dan FTIR (Fourier Transform InfraRed).

4.4.1 Rendemen Kitosan Nanopartikel

Rendemen kitosan nanopartikel ditentukan berdasarkan persentase berat
kitosan nanopartikel yang dihasilkan terhadap berat serbuk kitosan yang
 27

digunakan. Rendemen yang diperoleh untuk setiap perlakuan adalah

38,5% - 85%. Hasil rendemen kitosan nanopartikel dengan perlakuan metode
yang berbeda dapat dilihat pada Tabel 6.

Tabel 6. Rendemen kitosan nanopartikel dengan perbedaan perlakuan alat

pengecilan ukuran
No. Perlakuan Rendemen (%)
(Alat) + stdev
1. Magnetic stirrer 81,30 ± 5,30
2. Ultrasonik 46,88 ± 0,88
3. Homogenizer 40,00 ± 2,06

Penggunaan alat ultrasonik atau mekanik dengan waktu sonikasi 60 menit dan
amplitudo 30% menghasilkan rendemen kitosan nano sebesar 46,88 %. Rendemen
kitosan nano menggunakan alat homogenizer dengan waktu homogenisasi
60 menit kecepatan 3000 rpm yaitu sebesar 40,00 %. Sedangkan rendemen
kitosan nano yang dihasilkan menggunakan alat magnetic stirrer dengan waktu 60
menit dan 6000 rpm yaitu sebesar 81,30 %. Tabel 6 menunjukkan rendemen
kitosan nanopartikel tertinggi terdapat pada perlakuan metode pengecilan ukuran
dengan alat magnetic stirer yaitu sebesar 81,30 %. Sedangkan rendemen terendah
ditunjukkan oleh kitosan nanopartikel dengan perlakuan menggunakan alat
homogenizer yaitu sebesar 40,00 %.
Rendemen yang rendah ini dapat disebabkan oleh proses yang digunakan. Alat
ultrasonik memiliki kelemahan yaitu memerlukan energi tinggi untuk
dekomposisi kimia. Selain itu, metode pemecahan menggunakan homogenizer
memiliki kelebihan antara lain cocok untuk senyawa yang kelarutannya rendah,
sedangkan kekurangan metode ini antara lain pemecahan partikel padatan
memerlukan energi dan waktu yang lebih besar, dapat menghasilkan panas, dan
ukuran partikel yang dihasilkan terbatas, yaitu lebih besar dari 1000 nm.
Berdasarkan hasil yang diperoleh, rendemen nano kitosan yang tertinggi yaitu
menggunakan magnetic stirrer, karena dengan alat magnetic stirrer memiliki
kelebihan yaitu proses homogenisasi antara kitosan serbuk awal dengan bahan
gelasi ionik, dapat dikendalikan secara merata dengan kecepatan yang tinggi,
dibanding dengan menggunakan alat lainnya, sehingga lebih efektif menghasilkan
 28

nanopartikel dan dapat menghasilkan rendemen 81,30%, yang sesuai dengan

persentasi kitosan awal yang digunakan (Wahyono 2010).
Proses pengeringan semprot (spray drying) juga mempengaruhi rendemen
hasil nano kitosan yang dihasilkan. Pada pengeringan semprot terjadi kontak
antara semprotan dengan udara panas, pengeringan semprotan, dan pemisahan
antara produk kering (aliran serbuk bebas) dan udara (Yundhana 2008). Grafik
hasil rendemen kitosan nanopartikel dengan perbedaan pengecilan ukuran dapat
dilihat pada Gambar 6.

Gambar 6 Grafik hasil rendemen kitosan nanopartikel dengan perbedaan

perlakuan metode pengecilan ukuran

4.4.2 Hasil Analisis Scanning Electron Microscopy (SEM)

SEM (Scanning Electron Microscopy) digunakan untuk mengamati morfologi
suatu bahan. Prinsip kerja mikroskop SEM adalah sifat gelombang dari elektron
berupa difraksi pada sudut yang sangat kecil. Elektron dapat dihamburkan oleh
sampel yang bermuatan karena memiliki sifat listrik (Samsiah 2009 dalam
Wulandari 2010). Hasil karakteristik SEM kitosan nanopartikel yang dibuat
dengan berbagai metode yaitu magnetic stirrer, ultrasonik, dan homogenizer
menunjukan partikel yang berupa bulatan menyerupai bola dan berkerut. Ukuran
partikel dapat ditentukan dengan mengukur diameter bola tersebut. Perbesaran
yang digunakan yaitu mulai dari 1000 kali hingga 20.000 kali.
 29

Setelah dilakukan pengukuran diameter berdasarkan foto SEM diperoleh data

yang ditunjukkan pada Tabel 7.

Tabel 7. Ukuran partikel nano kitosan hasil foto SEM

Perlakuan BPPT (2010) Penelitian
Metode
H 1 (nm) H 2 (nm) H 1(nm) H 2(nm)
Magnetic Stirrer 25,9 28 400 450
Ultrasonik 1,2 25 1222 1600
Homogenizer 1,2 25 1375 2000

Pada Tabel 7 terlihat bahwa dengan menggunakan magnetic stirrer dihasilkan

ukuran partikel terkecil dan lebih stabil yaitu sebesar 400 nm (H1) dan 450 nm
(H2). Sedangkan pada perlakuan ultrasonik dan homogenizer dihasilkan ukuran
pertikel yang lebih besar dan tidak stabil, yaitu dengan perlakuan ultrasonik
didapatkan ukuran partikel sebesar 1222 nm (H1) dan 1600 nm (H2). Dengan
perlakuan homogenizer dihasilkan ukuran partikel sebesar 1375 nm (H1) dan
2000 nm (H2). Hal ini sesuai dengan penelitian BPPT (2010) yaitu partikel
terkecil dan stabil didapatkan dengan perlakuan magnetic stirrer sebesar 25,9 nm
(H1) dan 28 nm (H2). Sedangkan partikel yang lebih besar serta tidak stabil
diperoleh dengan perlakuan ultrasonik dan homogenizer sebesar 1,2 nm (H1)
dan 25 nm (H2).
Berdasarkan Gambar 7, kerutan pada partikel semakin berkurang dengan
adanya pengaruh pemberian surfaktan, TPP dan perlakuan pengecilan ukuran.
Perbedaan metode pengecilan ukuran pada gelasi ionik ini, memperlihatkan
bahwa pengaruh alat homogenisasi cenderung mempengaruhi ukuran partikel dan
meningkatkan kehomogenan ukurannya. Karakteristik nanopartikel kitosan
dilakukan dengan menggunakan analisis SEM. Secara umum, nanopartikel
kitosan seluruh formula memiliki ukuran partikel tidak seragam. Hal ini diduga
karena dalam proses pembuatan nanopartikel, menggunakan perbedaan alat
pengecilan ukuran dengan kecepatan pengadukan yang berbeda- beda sehingga
pengendapan partikel-partikel berukuran besar menjadi kurang efektif. Akibatnya,
partikel yang dihasilkan masih berupa partikel yang berukuran mikro. Hasil
analisis SEM menunjukkan bahwa peggunaan alat magnetic stirrer dengan waktu
 30

60 menit dan kecepatan maksimal, kisaran nanopartikel yang nanopartikel

dihasilkan adalah 400 - 450 nm.
Nanopartikel adalah butiran atau partikel padat dengan kisaran ukuran
10 - 1000 nm (Mohanraj dan Chen 2006). Nano partikel yang dihasilkan oleh
magnetic stirrer rata-rata berukuran sekitar 400 - 450 nm. Berdasarkan teori
kinetik molekul menyatakan bahwa molekul dapat bertumbukan satu dengan
lainnya. Jadi, reaksi kimia berlangsung sebagai akibat dari tumbukan antara
molekul-molekul satu dengan lainnya dalam reaksi. Dari segi teori tumbukan dari
kinetika kimia, maka laju reaksi akan berbanding lurus dengan banyaknya
tumbukan molekul per detik, atau berbanding lurus dengan frekuensi tumbukan
molekul. Semakin cepat putaran, memperbesar intensitas bersentuhan molekul
pelarut dengan kitosan, sehingga semakin besar intensitas kecepatan putaran dari
magnetic stirrer maka partikel yang dihasilkan semakin kecil (Chang 2005).
Pada alat ultrasonik, semakin tinggi persen amplitudo serta lama waktu
kontak, maka semakin kecil ukuran partikel dan seragam. Hasil dari ultrasonik
dan homogenizer masih berukuran lebih dari 1000 nm dan partikel masih
menempel satu sama lain. Hal ini dapat dipengaruhi oleh proses emulsi yang
kurang stabil sehingga saat proses ultrasonik dan homogenizer partikel yang
terpecah membentuk partikel yang lebih kecil tetapi mudah bergabung kembali.
Faktor pengeringan dengan menggunakan pengering semprot juga dapat
mempengaruhi ukuran partikel karena suhu yang terlibat di dalamnya cukup
tinggi (±180 °C). Selain itu, sifat surfaktan (Tween 80) juga mudah larut dalam
air, sehingga kemungkinan terjadi dalam proses difusi Tween 80 dalam air
menyebabkan penggabungan partikel proses penggumpalan kembali terjadi. Pada
dasarnya partikel yang dihasilkan melalui metode ultrasonik dan metode
homogenizer lebih kecil dibandingkan menggunakan magnetic stirrer. Partikel
yang lebih kecil mempunyai luas permukaan yang lebih besar. Konsentrasi
penstabil yang diberikan belum dapat mempertahankan partikel yang sudah
tersalut sehingga membutuhkan penstabil yang lebih kuat agar tidak bergabung
atau menyatu kembali (Latifah 2008).
Berbeda dengan sampel yang menggunkan alat magnetic stirrer, penyebaran
energi cenderung merata, sehingga seluruh molekul terkena energi yang sama dan
 31

molekul larutan emulsi akan terpecah dengan ukuran yang sama serta distribusi
ukuran partikelnya cenderung labih homogen. Hal inilah yang menyebabkan
nanopartikel di dalamnya juga akan dapat terpisah satu sama lain sehingga
didapatkan nanosfer dengan ukuran terkecil. Selain itu, penggunaan tripolipospat
dalam proses gelasi juga besar pengaruhnya, yaitu dapat menstabilkan missel
(emulsi homogen dan sangat kecil) sehingga missel tersebut menjadi lebih stabil.
Hal ini sesuai dengan hasil penelitian BPPT yang dilakukan dengan uji PSA
(Particle Size Analyzer) (Tabel 7), bahwa ultrasonik dan homogenizer memiliki
kestabilan rendah. Sedangkan dengan magnetic stirrer menghasilkan kestabilan
tetap, yang bisa dilihat dalam waktu/hari. Magnetic stirrer lebih stabil dalam
waktu 24 jam, sementara pada ultrasonik dan homogenizer bisa berubah
kestabilannya mencapai 25 kali lebih meningkat (BPPT 2010).
Surfaktan yang digunakan untuk obat secara farmakologi harus nontoksik.
Oleh karena itu dalam penelitian ini digunakan surfaktan dari golongan nonionik
yang bersifat tidak toksik, yaitu Tween 80. Surfaktan merupakan molekul yang
diadsopsi oleh permukaan partikel untuk mencegah terjadinya gumpalan (Mustika
et al. 2006 dalam Latifah 2008). Pengaruh surfaktan dapat menurunkan tegangan
permukaan antar lapisan larutan bahan dengan kitosan semakin baik dengan
terbentuknya misel – misel, artinya bahan akan menyaluti permukaan matriks
kitosan atau berada pada inti matriks.
Penggunaan tripolipospat mengingat sifatnya yang nontoksik.
Menurut Mi et al. (1999) dalam Wahyono (2010), penambahan TPP bertujuan
untuk membentuk silang ionik antara molekul kitosan sehingga dapat digunakan
sebagai bahan penguat. Hal ini dapat disebabkan oleh peran TPP sebagai zat
pengikat silang yang akan memperkuat matriks nanopartikel kitosan. Dengan
semakin banyaknya ikatan silang yang terbentuk antara kitosan dan TPP maka
kekuatan mekanik matriks kitosan akan meningkat sehingga partikel kitosan
menjadi semakin kuat dan keras, serta semakin sulit untuk terpecah menjadi
bagian-bagian yang lebih kecil.
Pada penelitian ini, konsentrasi kitosan yang digunakan sebesar 0,2% (50 ml)
dan konsentrasi surfaktan sebesar 0,2% (25 ml), sesuai dengan penelitian
Kencana (2009) dalam mendapatkan nanokitosan dengan ukuran partikel terkecil
 32

yaitu 300 - 600 nm. Penambahan surfaktan berfungsi untuk menstabilkan emulsi
partikel dalam larutan dengan cara mencegah timbulnya penggumpalan
(aglomerasi) antarpartikel. Dengan adanya surfaktan, partikel-partikel kitosan di
dalam larutan akan terselimuti dan terstabilkan satu dengan yang lain sehingga
proses pemecahan partikel akan semakin efektif. Partikel yang telah terpecah akan
kembali terstabilkan dalam emulsi larutannya, sehingga mencegah terjadinya
aglomerasi. Silvia et al. (2006) melaporkan bahwa menambahan surfaktan
Tween 80 dan Span 80 ke dalam larutan kitosan dapat menurunkan diameter
partikel berturut-turut dari 198 µm menjadi 181,3 µm dan dari 132,6 µm
menjadi 24,9 µm.
Menurut Yongmei dan Yumin (2003), pembentukan nanopartikel hanya
terjadi pada konsentasi kitosan dan TPP tertentu. Yongmei dan Yumin berhasil
membuat nanopartikel kitosan berukuran 20 - 200 nm dengan menggunakan
konsentrasi kitosan 1,5mg/ml dan konsentrasi TPP 0,7 mg/ml. Selain itu,
Wu et al. (2005) dalam Wahyono (2010) juga berhasil membuat nanopartikel
kitosan berukuran 20 - 80 nm dengan menggunakan konsentrasi kitosan 1,44
mg/ml dan konsentrasi TPP 0,6 mg/ml. Hal ini diduga karena analisis ukuran
partikel menggunakan peralatan yang memiliki akurasi yang tinggi sehingga
ukuran partikel yang diperoleh mendekati ukuran sebenarnya.
Menurut Mi et al. (1999) dalam Komariah (2010), penambahan TPP bertujuan
untuk membentuk silang ionik antara molekul kitosan sehingga dapat digunakan
sebagai bahan penjerap. Penambahan jumlah TPP akan menurunkan jumlah
nanopartikel kitosan. Hal ini dapat disebabkan oleh peran TPP sebagai zat
pengikat silang akan memperkuat matriks nanopartikel kitosan. Dengan semakin
banyaknya ikatan silang yang terbentuk antara kitosan dan TPP maka kekuatan
mekanik matriks kitosan akan meningkat sehingga partikel kitosan menjadi
semakin kuat dan keras, serta semakin sulit untuk terpecah menjadi bagian-bagian
yang lebih kecil. Oleh karenanya jumlah partikel kitosan yang dihasilkan akan
semakin sedikit. Untuk itu, pada penelitian ini digunakan formulasi pada ketiga
metode pengecilan ukuran dengan konsentrasi TPP 0,1% (10 ml) dan
konsentrasi kitosan sebesar 0,2% (50 ml), agar tidak terjadi penggumpalan
(aglomerasi) molekul-molekul kitosan. Alasan lain pada konsentrasi kitosan yang
 33

tinggi hingga mencapai 3,0% (b/v) dengan jumlah TPP yang tetap, menyebabkan
terjadinya penggumpalan (aglomerasi) molekul-molekul kitosan sehingga proses
pemecahan menjadi kurang efektif, akibatnya jumlah nanopartikel yang dihasilkan
akan semakin sedikit. Namun, seiring dengan penambahan jumlah konsentrasi
kitosan, akan menyebabkan peningkatan jumlah nanopartikel kitosan. Hal ini
menyatakan bahwa, konsentrasi kitosan harus lebih besar dibandingkan dengan
konsentrasi TPP yang digunakan (Wahyono 2010).
Pengaruh cara penegecilan ukuran dengan magnetic stirrer dengan kecepatan
tinggi, akan menyamaratakan energi yang diterima oleh partikel diseluruh bagian
sisi larutan sehingga ukuran partikel semakin homogen. Meningkatnya
kehomogenan ukuran partikel juga dapat dilihat pada Gambar 7. Jika dilihat dari
kehomogenan distribusi ukuran partikel, sampel yang menggunakan alat magnetic
stirrer (A1) distribusi ukuran partikelnya cenderung lebih homogen dibandingkan
dengan alat lainnya (A2 dan A3), karena penyebaran energi yang dipantulkan dari
magnetic stirrer terhadap molekul disekitarnya lebih rata dan lebih konstan.
Sedangkan, ketika menggunakan homogenizer ultrasonik (A3) dan ultrasonik
(A2), penyebaran energinya tidak sama, sehingga energi yang dipantulkan pada
molekul larutan emulsi berbeda – beda pula. Terjadinya pemantulan yang berbeda
– beda ini menyebabkan molekul larutan ada yang pecah lebih cepat dan ada juga
yang pecah lebih lama sehingga menghasilkan ukuran partikel yang lebih besar
dan tidak homogen (Wulandari 2010).
Dalam waktu yang relatif singkat, sebenarnya sonikasi dapat memecahkan
partikel hingga ukuran yang sangat kecil. Lamanya sonikasi dapat mengakibatkan
partikel-partikel yang telah terpecah untuk menggabungkan diri kembali sehingga
terlihat adanya penggumpalan partikel pada citra SEM tersebut (Kencana 2009).
Selain itu, sifat tween 80 juga mudah larut dalam air, sehingga kemungkinan
dalam proses difusi tween 80 juga larut sebagian dalam air sehingga proses
penggumpalan kembali terjadi.
Berbeda dengan sampel yang menggunakan alat magnetic stirrer (A1),
penyebaran energi cenderung merata, sehingga seluruh molekul terkena energi
yang sama dan molekul larutan emulsi akan terpecah dengan ukuran yang sama
serta distrinbusi ukuran partikelnya cenderung labih homogen. Hal inilah yang
 34

menyebabkan nanopartikel yang terkungkung di dalamnya juga akan dapat

terpisah satu sama lain sehingga didapatkan nanosfer dengan ukuran terkecil.

A1 (magnetic stirrer), H1 A1 (magnetic stirrer), H2

A2 (ultrasonik), H1 A2 (ultrasonik), H2

A3 (homogenizer), H1 A3 (homogenizer), H2

Gambar 7 Morfologi partikel kitosan; A1 (magnetic stirer) H1 dan H2, A2

(ultrasonik) H1 dan H2, dan A3 (homogenizer) H1 dan H2
 35

Gambar foto SEM pada kode sampel A3 berbeda dengan kode sampel lainnya
(Gambar 7). Hal tersebut karena terjadi penundaan proses spray dryer setelah
melakukan proses homogenisasi. Larutan yang telah diproses sebaiknya langsung
dilakukan proses spray drying agar larutan tersebut tetap terjaga stabilitas
distribusi partikelnya. Tujuan dilakukan spray drying agar menghasilkan serbuk
berupa partikel nanokapsul yang kecil, teknik yang ramah sehingga dapat
terhindar dari penggunaan pelarut organik, dan dapat meningkatkan stabilitas
serbuk (Yundhana 2008).

4.4.3 Hasil Analisis FTIR

Spektrum inframerah digunakan untuk penentuan derajat deasetilasi kitosan
yang digunakan, mengetahui gugus fungsi kitosan, serta penentuan indeks
kristalinitas kitosan awal dan kitosan yang telah dilakukan metode pengecilan
ukuran (magnetic stirrer). Derajat deasetilasi adalah penghilangan gugus asetil
(COCH 3 ) yang terdapat pada kitin. Kitin yang mengalami proses deasetilasi
disebut kitosan. Hasil analisis FTIR pada kitosan menunjukkan derajat deasetilasi
sebesar 99 %. Grafik derajat deasetilasi dapat dilihat pada Gambar 8.

22.0 Laborato ry T es t Res ult

J (2)
20

18

16
3901.52 2342.47
14
3854.88
12 3839.58
3818.17
3803.28
10
%T 3751.96
3735.87 651.62
8 3690.79
3672.48
6
1152.06

2
1412.31
1076.14
0 3392.84
1575.13
-2.0
4000.0 3000 2000 1500 1000 450.0
cm-1

Gambar 8 Grafik derajat deasetilasi pada kitosan berukuran nano (partikel

terkecil) dengan alat magnetic stirrer
 36

Dari nilai tersebut dapat diketahui bahwa kitosan tersebut telah sesuai dengan
standar mutu yang telah ditentukan oleh laboratorium Protan diacu dalam Suptijah
et al. (1992) yaitu ≥70 %. Derajat deasetilasi yang tinggi menunjukkan kemurnian
dari kitosan yang dihasilkan (Bastaman 1989).
Derajat deasetilasi dari kitosan menentukan banyaknya gugus asetil yang telah
hilang selama proses deasetilasi kitin menjadi kitosan. Semakin besar derajat
deasetilasi, maka kitosan akan semakin aktif karena semakin banyak gugus amina
menggantikan gugus asetil. Gugus amina lebih reaktif diabandingkan gugus asetil
karena adanya pasangan elektron bebas pada atom nitrogen dalam struktur kitosan
(Muzzarelli dan Peter 1997 dalam Kencana 2009).
 37

5 KESIMPULAN DAN SARAN

5.1 Kesimpulan
Pembuatan nanopartikel kitosan dengan metode gelasi ionik dengan perlakuan
menggunakan perbedaan alat sizing berhasil dilakukan dari hasil preparasi kitosan
dengan perlakuan waktu perendaman HCl 1 N selama 72 jam dengan rendemen
sebesar 13,50% (bk) dan yang terendah diperoleh dengan perlakuan waktu
perendaman HCl 1 N selama 0 jam dengan rendemen sebesar 11,57% (bk).
Rendemen kitosan nanopartikel tertinggi terdapat pada kitosan nanopartikel
dengan perlakuan pengecilan ukuran menggunakan alat magnetic stirrer yaitu
sebesar 81,30%. Sedangkan rendemen terendah ditunjukkan oleh kitosan
nanopartikel dengan menggunakan alat homogenizer, yaitu sebesar 40,00%.
Penggunaan TPP pada penelitian ini dapat menguatkan sifat mekanik kitosan
yang mudah rapuh dan dapat membentuk ikatan silang ionik antara molekul
kitosan. Lamanya waktu homogenisasi dapat meningkatkan kehomogenan ukuran
partikel. Magnetic stirrer dapat mendistribusikan ukuran partikel yang lebih
homogen dibandingkan menggunakan homogenizer ultrasonik dan ultrasonik.
Sampel dengan pengaruh alat magnetic stirrer, konsentrasi TPP, surfaktan dan
waktu yang sesuai menunjukkan bahwa kerutan pada partikel semakin berkurang.
Gelasi ionik dengan surfaktan dan TPP, menghasilkan partikel sangat kecil
dan tidak berpolimerisasi. Ukuran partikel yang diperoleh dengan menggunakan
magnetic stirrer sebesar 400 - 450 nm. Nilai derajat deasetilasi dari kitosan
nanopartikel terkecil yang dihasilkan yaitu sebesar 99% dan menunjukan bahwa
nano kitosan yang dihasilkan merupakan kitosan murni.

5.2 Saran
Penelitian selanjutnya dapat divariasikan lagi konsentrasi TPP, surfaktan dan
waktu yang lebih lama. Hal ini bertujuan agar kitosan tersebut lebih homogen dan
lebih sedikit, sehingga didapatkan ukuran partikel akhir sesuai standar nano.
 38

DAFTAR PUSTAKA

Angka SL, Suhartono MT. 2000. Bioteknologi Hasil Laut.. Bogor: PKSPL,
Institut Pertanian Bogor.

[AOAC] Association of Official Analytical Chemyst. 1995. Official Method of

Analysis of The Association of Official Analytical Chemyst.
Arlington, Virginia, USA: Association of Official Analytical
Chemyst, Inc.

Ariesta A. 2008. Karakteristik mutu dan kelarutan kitosan dari ampas silase
kepala udang windu (Penaeus monodon) [skripsi]. Bogor: Fakultas
Perikanan dan Ilmu Kelautan, Institut Pertanian Bogor.

Bastaman S. 1989. Studies on Degradation and Extraction of Chitin and Chitosan

from Prawn Shells. Belfast : The Department of Mechanical
Manufacturing, Aeronautical and Chemical Engineering. The
Queen’s University.

Benjakula S, Sophanodora P. 1993. Chitosan Production from Carapace and Shell

of Black Tiger Shrimp (Penaeus monodon) Asean Food Jurnal.
8(4): 145-148.

BPPT. 2010. Pembuatan Partikel Nano Kitosan dengan Metode Gelasi Ionik
Menggunakan Magnetic Stirrer. Tanggerang: Balai Pengkaji dan
Penerapan Teknologi.

Chang R. 2005. Kimia Dasar: Konsep-Konsep Inti Jilid 2. Jakarta: Erlangga.

Dhanikula AB, Pachagnula R. 2004. Development and characterization of

biodegradable chitosan films for local delivery of paclitaxel.
www.aapsj.org [10 Oktober 2010].

Domsay T M, Robert. 1985. Evaluation of Infra Red Spectroscopic Techniques

for analyzing Chitosan. Macromol Chem 186, 1671
Emmanuel, Adeyeye I, Habibat O. Adubiaro, Awodola OJ. 2008. Comparability
of Chemical Composition and Functional Properties of Shell and
Flesh of Penaeus notabili. Journal of Nutrition 7(6):741-747.
Kencana A. 2009. Perlakuan sonikasi terhadap kitosan: viskositas dan bobot
molekul kitosan [skripsi]. Bogor: Fakultas Matematika dan Ilmu
Pengetahuan Alam, Institut Pertanian Bogor.

Keuteur J. 1996. Nanoparticles and Microparticles for drug and vaccine delivery.
Eur J of Pharmaceutics and Biopharmaceutics 189: 19-34.
 39

Kim, T. Y and Cho S. Y. 2005. Adsorpsi Equilibria of Reactife Dye Onto Highly
Polyaminatid Porous Chitosan Bead. Korean J. Chem Eng. 22 (5)
691- 696.
Kim JD, Nhut TM, Hai TN, Ra CS. 2011. Effect of Dietary Essential Oils on
Growth, Feed Utilization and Meat Yields of White Leg Shrimp L.
Vanname. Journal Anim. Sci 24(8):1136-1141.
Komariah S. 2010. Kombinasi emulsi dan ultrasonikasi dalam nanoenkapsulasi
ibuprofen tersalut polipaduan poli (as.laktat) dan poli (ε-
Kaprolakton). [skripsi]. Bogor: Fakultas Matematika dan Ilmu
Pengetahuan Alam, Institut Pertanian Bogor.

Latifah S. 2010. Stabilitas mikrokapsul ketoprofen dengan penyalut kitosan

alginat [skripsi]. Bogor: Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan
Alam, Institut Pertanian Bogor.

Malvern. 2010. Berbagai Industri Partikel Nano . http://www.eNews.com

[12 Desember 2010].

Mardliyati E. 2010. Pengenalan Pemanfaatan Nanopartikel Kitosan sebagai

Matriks Enkapsulasi. Jakarta: Badan Pengkaji dan Penerapan
Teknologi.

Marimin. 2004. Teknik dan Aplikasi Pengambilan Keputusan Kriteria Majemuk.

Jakarta: PT Gramedia Widiasarana Indonesia.

Maulana H. 2007. Stabilitas larutan kitosan 1,5% sebagai antibakteri pada

penyimpanan suhu ruang [skripsi]. Bogor: Fakultas Perikanan dan
Ilmu Kelautan, Institut Pertanian Bogor.

Mohanraj UJ and Y chen. 2006. Nanoparticles - A Review. Tropical Journal of

Pharmaceutical Research 5(1): 561-573.

Napthaleni. 2010. Nanoenkapsulasi ketoprofen tersalut kitosan-alginat

berdasarkan jenis dan ragam konsentrasi surfaktan [skripsi]. Bogor:
Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Institut Pertanian
Bogor.

Pusat Data Statistik. 2008. Jumlah Ekspor Udang di Indonesia. Jakarta:

Departemen Kelautan dan Perikanan.

Rini I. 2010. Recovery dan karakterisasi kalsium dari limbah demineralisasi kulit
udang jerbung (Penaeus merguiensis deMan) [skripsi]. Bogor:
Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Institut Pertanian Bogor.
 40

Saleh MR, Abdillah, Suerman E, Basmal J, Indriati N. 1994. Pengaruh Suhu,

Waktu dan Konsentrasi Pelarut pada Ekstraksi Kitosan dari Limbah
Pengolahan Udang Beku terhadap Beberapa Parameter Mutu
Kitosan. Jurnal Pasca Panen Perikanan 81:30 43.

Shu XZ and Zhu KJ. 2002. Controlled Drug Release Properties of Ionically Cross-
Linked Chitosan beads: The Influence of Anion Structure.
International Journal of Pharmaceutics 233: 217-225.

Silvia. SS. 2005. Physical Propertis and Biocompatibility of Chitosan/ Sury

Blendet Membran, Jurnal of Material Science 16. 575- 579.

Steel RGD, JH Torrie. 1989. Prinsip dan Prosedur Statistika. Bambang Sumantri,
penerjemah. Jakarta: Gramedia Pustaka Utama.

Sugita. 1992. Isolasi kitin dan komposisi senyawa kimia limbah udang windu
(Penaeus monodon) [tesis]. Bandung: Program Pascasarjana,
Institut Pertanian Bogor.

Suptijah, P, Salamah E, Sumaryanto H, Purwaningsih S, Santoso J. 1992.

Pengaruh Berbagai Isolasi Khitin Kulit Udang TerhadapMutunya.
Laporan Penelitian Jurusan Teknologi Hasil Perikanan. Fakultas
Perikanan. IPB. Bogor. 30 hal.
Sutriyo, Joshita D, Indah R. 2005. Perbandingan pelepasan propanol hidroklorida
dari matriks kitosan, etil selulosa, dan hidroksipropil metal selulosa.
Majalah Ilmu Kefarmasian 2: 145-153.

Tripler, Paul A. 2001. Fisika Untuk Sains dan Teknik. Jilid 2. Edisi ketiga.
Soegiyono B. Penerjemah. Terjemahan dari Physics for Scientist
and Engineers Volume 2 Third Edition. Jakarta: Erlangga.

Wahyono D. 2010. Ciri nanopartikel kitosan dan pengaruhnya pada ukuran

partikel dan efisiensi penyaluran ketoprofen [tesis]. Bogor: Program
Pascasarjana, Institut Pertanian Bogor.

Widjhati R. 2010. Aplikasi Nanoteknologi pada Industri Farmasi. Jakarta: Balai

Pengkajian dan Penerapan Teknologi.

Wulandari T. 2010. Sintesis nanopartikel ekstrak temulawak (Curcuma

xanthorrhiza Roxb.) berbasis polimer kitosan, TPP dengan metode
gelasi emulsi [skripsi]. Bogor: Fakultas Matematika dan Ilmu
Pengetahuan Alam, Institut Pertanian Bogor.

Winarno FG. 2008. Kimia Pangan dan Gizi. Edisi Revisi. Jakarta:
PT. Gramedia Pustaka Utama.
 41

Yongmei X, Yumin D. 2003. Effect of moleculer structure of chitosan on protein

delivery properties of chitosan nanoparticles. International Journal
of Pharmaceutics 250: 215-226.
 42

LAMPIRAN
 43

Lampiran 1. Analisis kadar air cangkang udang vannamei

Keterangan Ulangan
1 2
Berat sampel (gram) (B) 1,0024 1,0031
Berat (sampel+cawan) sebelum dikeringkan (B1) 48,1175 48,0204
Berat (sampel+cawan) setelah dikeringkan (B2) 47,9663 47,8699
Kadar air (% bb) 15,08 15,00
Rata-rata (%) 15.04± 0.05

Perhitungan kadar air

% Kadar air =

Lampiran 2 Analisis kadar abu cangkang udang vannamei

Ulangan
Keterangan
1 2
Berat sampel (gram) 1,0134 1,0115
Berat sampel dan cawan akhir (gram) 46,1763 45,8999
Berat cawan kosong (gram) 45,9963 45,7149
Kadar abu (%) 17,76 18,28
Rata-rata (%) 18,02± 0,36

Perhitungan Kadar abu cangkang udang vannamei

 44

Lampiran 3 Analisis kadar protein cangkang udang vannamei

Ulangan
Keterangan
1 2
Berat contoh (g) 0,1243 0,1217
Volume HCl titrasi sampel (ml) 12,90 12,50
N HCl 0.096 0.096
Faktor pengencer 10 10
Kadar Protein (% bb) 34,87 34,51
Rata-rata (% bb) 34,69±0,25
Perhitungan kadar protein cangkang udang vannamei

% N (U1) = x 100 %

= x 100 %

= 5,579 %

% Protein (U1) = 6,25 x % N

= 6,25 x 5,579 %

= 34,87 %

% N (U2) = x 100 %

= x 100 %

= 5,521 %

% Protein (U2) = 6,25 x % N

= 6,25 x 5,521 %

= 34,51 %

% Protein rata-rata=
= 34,69 %
 45

Lampiran 4 Analisis kadar lemak cangkang udang vannamei

Ulangan
Keterangan
1 2
Berat sampel (gram) 2,0043 2,0012
Berat labu lemak kosong (gram) 38,0190 40,1502
Berat labu lemak dengan lemak (gram) 38,0298 40,1624
kadar lemak (%) 0,54 0,61
Rata-rata (%) 0,57±0.05

Perhitungan Kadar lemak

% Lemak 1 = x 100 %

= x 100 %

= 0,54 %

% Lemak 2 = x 100 %

= x 100 %

= 0,61 %

% Lemak rata-rata =

= 0,57%

Lampiran 5 Analisis kadar karbohidrat cangkang udang vannamei secara

by difference

% Karbohidrat = 100% - (kadar air + kadar abu + kadar lemak + kadar protein)

% Karbohidrat = 100% - (15,08% + 17,76% + 0,54% + 34,87%)

% Karbohidrat = 31,75%
 46

Lampiran 6. Data uji rendemen kitosan udang vannamei

No. Perlakuan Rendemen Rata – rata
(Jam) Ulangan 1 Ulangan 2 (%) ± stdev
1. 0 11,56 11,58 11,57 ± 0,14
2. 24 12,00 13,00 12,5 ± 0,7
3. 48 13,20 13,73 13,46 ± 0,37
4. 72 13,50 14,03 13,77 ± 0,37

Lampiran 7 Analisis kadar air kitosan udang vannamei (Litopenaeus vannamei)

No. Perlakuan Kadar air Rata – rata
(Jam) Ulangan 1 Ulangan 2 (%) ± stdev
1. 0 4,79 5,38 5,09 ± 0,42
2. 24 5,09 5,00 5,05 ± 0,06
3. 48 6,78 7,05 7,00 ± 0,20
4. 72 15,08 15,00 15,04 ± 0,06

Contoh perhitungan:
Perhitungan kadar air pada sampel kulit udang:
Keterangan: A= Berat cawan kosong (gr)
B= Berat cawan dengan sampel kulit udang (gr)
C= Berat cawan dengan sampel kulit udang setelah dikeringkan
Diketahui: A= 47,1151
B= 48,1181
C= 47,9663

% kadar air =

= 15,00 %
 47

Lampiran 8 Analisis kadar abu kitosan udang vannamei (Litopenaeus vannamei)

Kode Berat sampel Berat cawan Berat cawan Hasil (%)
setelah oven
U1 1,0134 25,9669 25,968 0,11
U2 1,0115 29,2438 29,245 0,12

Contoh Perhitungan:
Perhitungan kadar abu pada sampel kulit udang

Keterangan: A= Berat cawan abu porselen kosong (gr)

B= Berat cawan abu porselen dengan sampel kulit udang (gr)
C= Berat cawan abu porselen dengan sampel kulit udang setelah
dikeringkan (gr)

U1 (ulangan 1):

A= 25,9669 gr
B= 26,9803 gr
C= 25,968 gr

= 0,11 %

U2 (ulangan 2):

A= 29,2438 gr
B= 30,2553 gr
C= 29,245 gr

= 0,12 %

Rata – rata kadar abu = 0,115 %

 48

Lampiran 9 Analisis kadar protein kitosan udang vannamei

Kode Berat sampel Titrasi (ml) N HCl Hasil (bk)
(%)
U1 0,1340 11,80 0,096 30,80
U2 0,1345 11,85 0,096 29,63

Contoh perhitungan:
Perhitungan kadar protein kulit udang

Kadar protein U1 ulangan 1:

Volume titran HCl sampel = 11,80 ml
Volume titran HCl blanko = 0 ml
Bobot sampel = 0,1340

= 4,73%

Lampiran 10 Data Hasil Perhitungan DD (Derajat Deasetilasi)

DD = [1 - ( -( ) ] x 100%

A
1575 =

A
3392 =

DD = [1 -[ ( -( ) ] ] x 100%
= [1 -[0,76 – 0,75] ] x 100%
= [1– 0,01] x 100%
= [0,99] x 100%

DD = 99 %