Cromatografía de gases

Jhon Sequeda1; José Payares1

Estudiante perteneciente al grupo de investigación de productos naturales

La cromatografía de gases es la técnica más adecuada para la separación de

compuestos orgánicos e inorgánicos térmicamente estables y volátiles.
Es la separación física de dos o más compuestos, fundamentada en la diferente
contribución de dos fases una de las cuales es estacionaria y la otra es móvil.
Consiste en que una muestra se volatiliza, esta es inyectada en la cabeza de un
mechero de una columna cromatográfica. La elución se produce por el flujo de
una fase móvil de gas inerte. Esta técnica se diferencia de los otros tipos de
cromatografía, porque la fase móvil no interactúa con las moléculas del analito.
Existen dos tipos de cromatografía de gases (GC): la cromatografía gas-sólido
(GSC) y la cromatografía gas-líquido (GLC), siendo GLC la más utilizada en las
investigaciones por lo cual esta se puede llamar simplemente cromatografía de
gases (GC). En la GSC la fase estacionaria es sólida y la retención de los
analitos. Se basa en el proceso de adsorción. El cual no es lineal, por esta misma
razón provoca que este tipo de cromatografía tenga aplicación limitada, ya que
la retención del analito sobre la superficie es semipermanente y se obtienen
picos de elución con colas. Su única aplicación es la separación de especies
gaseosas de bajo peso molecular. La GLC utiliza como fase estacionaria
moléculas de líquido inmovilizadas sobre la superficie de un sólido inerte.
La GC se lleva a cabo en un cromatógrafo de gases. Éste consta de diversos
componentes como el gas portador, el sistema de inyección de muestra, la
columna (generalmente dentro de un horno), y el detector.

Esta técnica es usada desde 1850 se descubrió que los compuestos orgánicos
se separaban por migración diferencial, aunque fue a partir de 1955 que se
observa en los campos científicos y técnicos un avance importante de la
cromatografía de gases ya que constituye una herramienta muy fuerte para
separar e identificar los componentes volátiles y semivolátiles de las mezclas
complejas.
Componentes de un cromatógrafo de gases
* El gas portador
* El sistema de inyección de la muestra
* La columna (generalmente dentro de un horno)
* El detector
* Soporte
* El registrador

Gas portador: El gas portador tiene dos objetivos principales:

* Transportar los componentes de la muestra
* Crear una matriz adecuada para el detector

Este gas debe reunir ciertas condiciones:

* Debe ser inerte para evitar interacciones (tanto con la muestra como con la
fase estacionaria)
* Debe ser capaz de minimizar la difusión gaseosa
* Fácilmente disponible y puro
* Económico
*Adecuado al detector a utilizar

El gas portador tiene que ser un gas inerte, para prevenir su reacción con el
analíto o la columna. Generalmente se emplean gases como el helio, argón,
nitrógeno, hidrogeno o dióxido de carbono, y la elección de este gas en
ocasiones depende del tipo de detector empleado. En el caso de la universidad
de sucre se trabaja con el gas helio, puesto que para el equipo es más factible
la utilización de este. El almacenaje del gas puede ser en balas normales o
empleando un generador, especialmente en el caso del nitrógeno y del
hidrogeno.
La pureza de los gases es realmente importante, se demandan de 4.5 o mayores
es decir 99.995% de pureza. Sin embargo debido al cuidado que se debe tener
en la fase activa de la columna, se hace completamente necesario la instalación
de trampas a la entrada del gas carrier, estas trampas tienen la capacidad
limitada, pero son de mucha importancia al momento de usar el cromatógrafo
estas trampas evitan el ingreso de hidrocarburos, agua, CO entre otros.

Sistema de inyección de la muestra

La inyección de la muestra es una operación muy delicada, puesto que se debe
inyectar una cantidad apropiada y debe introducirse así como un tapón de vapor
igualmente debe ser rápida para evitar el ensanchamiento de las bandas de
salida, este efecto se da con cantidades elevadas de analíto.
El método más común emplea una micro jeringa (de capacidades de varios micro
litros) para introducir el analíto en una cámara de vaporización instantánea, el
material de la aguja es de acero inoxidable al igual que el embolo, mientras que
el cuerpo de la columna es de vidrio borosilicatado. Esta cámara está a 50°C por
encima del punto de ebullición del componente menos.

Columnas y sistemas de control de temperatura

En GC se emplean dos tipos de columnas: las empacadas o de relleno y las
tubulares abiertas o capilares. Siendo estas últimas las más utilizadas en la
actualidad, precisamente por su mayor rapidez y eficiencia. La longitud de estas
columnas es variable, de 2 a 60 metros, y están construidas de acero inoxidable,
vidrio, sílice fundida o teflón. Debido a su longitud y a la necesidad de
introducirlas en un horno, las columnas suelen enrollarse en una forma helicolidal
con longitudes de 10 a 30 cm, dependiendo del tamaño del horno.
La temperatura es una variable importante, ya que de ella va a depender el grado
de separación de los diferentes analítos. Para ello, debe ajustarse con una
precisión de décimas de grado. Dicha temperatura depende del punto de
ebullición del analíto como también la máxima temperatura de funcionamiento
de la columna (fase estacionaria), y comúnmente se ajusta a un valor igual o
levemente superior a él. Para estos valores, el tiempo de elución va a oscilar
entre 2 y 30-40 minutos. Si existen varios componentes con diferentes puntos de
ebullición, se ajusta la llamada rampa de temperatura con lo cual ésta va
aumentando ya sea de forma continua o por etapas. En muchas ocasiones, el
ajustar correctamente la rampa puede significar separar bien o no los diferentes
analítos. Es indispensable usar temperaturas bajas para la elución, ya que mayor
temperatura la elución es más rápida y se corre el riesgo de descomponer el
analíto. Se puede programar la rampa tanto para aumentar como para disminuir
la temperatura del horno para que no haya solapamiento de los picos.

Detectores
-El detector es la parte del cromatógrafo que se encarga de determinar cuándo
ha salido el analíto por el final de la columna. Las características de un detector
ideal son:
-Sensibilidad: Es necesario que pueda determinar con precisión cuándo sale
analíto y cuando sale sólo el gas portador. Tienen sensibilidades entre 10-8 y 10-
15 g/s de analíto.
-Respuesta lineal al analíto con un rango de varios órdenes de magnitud.
-Tiempo de respuesta corto, independiente del caudal de salida.
-Intervalo de temperatura de trabajo amplio, por ejemplo desde temperatura
ambiente hasta unos 350-400 °C, temperaturas típicas trabajo.
-Estabilidad y reproducibilidad, es decir, a cantidades iguales de analíto debe dar
salidas de señal iguales.
-Alta fiabilidad y manejo sencillo, o a prueba de operadores inexpertos.
-Respuesta semejante para todos los analíto.
-Respuesta selectiva y altamente predecible para un reducido número de
analitos.

Columnas y tipos de fases estacionarias

Columnas de relleno
Las columnas de relleno o empacadas consisten en unos tubos de vidrio, metal
(inerte a ser posible como el acero inoxidable, níquel, cobre o aluminio) o teflón,
de longitud de 2 a 3 metros y un diámetro interno de unos pocos milímetros,
típicamente de 2 a 4. El interior se rellena con un material sólido, finamente
dividido para tener una máxima superficie de interacción y recubierto con una
capa de espesores entre 50 nm y 1 μm.
Columnas capilares
Las columnas capilares son de dos tipos básicos: las de pared recubierta
(WCOT) y las de soporte recubierto (SCOT). Las WCOT son simplemente tubos
capilares donde la pared interna se ha recubierto con una finísima capa de fase
estacionaria. Las columnas SCOT tienen en su parte interna una fina capa de
material absorbente como el empleado en las columnas de relleno (tierra de
diatomeas) donde se ha adherido la fase estacionaria. Las ventajas de las WCOT
frente a las SCOT es la mayor capacidad de carga, ya que en su fabricación se
emplean mayores cantidades de fase estacionaria, al ser la superficie de
intercambio mayor. Por orden de eficacia, en primer lugar están las WCOT, luego
las SCOT y por último las columnas de relleno.

La fase estacionaria
Las propiedades necesarias para una fase estacionaria líquida inmovilizada son:
-Características de reparto (factor de capacidad κ' y factor de selectividad α)
adecuados al analito.
-Baja volatilidad, el punto de ebullición de la fase estacionaria debe ser al menos
100 °C mayor que la máxima temperatura alcanzada en el horno.
-Baja reactividad.
-Estabilidad térmica, para evitar su descomposición durante la elución.

Aplicaciones
La GC tiene dos campos de aplicación importantes.
-Capacidad para separar mezclas orgánicas complejas, compuestos
organometálicos y sistemas bioquímicos.
-Método para determinar cuantitativa y cualitativamente los componentes de la
muestra. Para el análisis cualitativo se suele emplear el tiempo de retención, que
es único de cada compuesto en condiciones determinadas (mismo gas portador,
rampa de temperatura y flujo), o el volumen de retención. En aplicaciones
cuantitativas, integrando las áreas de cada compuesto o midiendo su altura, con
los calibrados adecuados, se obtiene la concentración o cantidad presente de
cada analito.

Conclusión
Este método es muy importante en la actualidad, a la hora de separar mezclas
orgánicas, compuestos complejos al igual que sistemas bioquímicos.
Es importante no solo para una determinada ciencia como lo es la biología si no
en muchas otras como ingeniería civil.
 Referencias

1. Skoog, Douglas A. y Leary, James J. (1994). Análisis Instrumental.

Armenia: McGraw-Hill. ISBN 84-481-0191-8.

2. McNair, Harold M. & Miller, James M. (1998). Basic Gas Chromatography.

Canada: John Wiley & Sons, Inc. ISBN 0-471-17260-8