AGRARIA LA MOLINA
CURSO:
Química de Alimentos
TITULO:
ALUMNOS:
PROFESOR:
Melgarejo, Silvia
GRUPO:
A*
2017– I
I. INTRODUCCIÓN
Las proteínas son solubles en agua cuando adoptan una conformación globular. La
solubilidad es debida a los radicales (-R) libres de los aminoácidos que, al ionizarse,
establecen enlaces débiles (puentes de hidrógeno) con las moléculas de agua. Así,
cuando una proteína se solubiliza queda recubierta de una capa de moléculas de agua
(capa de solvatación) que impide que se pueda unir a otras proteínas lo cual
provocaría su precipitación (insolubilización). Esta propiedad es la que hace posible la
hidratación de los tejidos de los seres vivos.
Los datos de solubilidad resultan muy útiles para determinar las condiciones óptimas
para la extracción y purificación de proteínas, a partir de sus fuentes naturales y para
separar fracciones proteicas. El grado de insolubilidad de una proteína es una medida
práctica de la desnaturalización + agregación de la proteína, una proteína que se
presenta desnaturalizada, parcialmente agregada suele ser poco eficaz en los
procesos de gelificación, emulsificación o formación de espuma. La solubilidad
proteica a pH neutro o al pI es con frecuencia la primera de las propiedades
funcionales que se mide en cada una de las etapas de preparación y procesado de un
ingrediente proteico.
OBJETIVO:
SOLUBILIDAD DE PROTEINAS
- Proteínas solubles
- Proteínas insolubles, las cuales incluyen a las proteínas fibrilares
(escleroproteínas).
Las proteínas solubles están divididas en los siguientes seis grupos:
1. La influencia del pH
Una proteína con valores de pH superiores o inferiores al punto isoeléctrico,
tiene una carga negativa o positiva y las moléculas de agua reaccionan con
estas cargas contribuyendo así a su solubilización. Además, las cadenas
proteicas que llevan cargas eléctricas del mismo signo, tienen tendencia a
repelerse y por tanto a disociarse y desdoblarse. La mayoría de las proteínas
son estables para una determinada zona de pH y frecuentemente se
desnaturalizan cuando se someten a valores de pH muy altos o muy bajos.
2. La acción de sales
SO42- , F- , CH3COO- , Cl-, Br-, NO3-, I-, ClO4-, SCN-, NH4+, K+, Na+, Li+, Mg2+,
Ca2+
Los aniones multivalentes son más efectivos que los aniones monovalentes
mientras que los cationes divalentes son menos efectivos que los cationes
monovalentes. (Belitz, 2009)
3. Acción de metales
Los iones de metales alcalinos (tal como los iones sodio y potasio) solo
reaccionan de una forma limitada con las proteínas, mientras que los alcalinos
térreos, tales como calcio y el magnesio, son más reactivos. Los iones de
metales de transición, tales como los iones de Cu, Fe, Hg y Ag reaccionan
rápidamente con las proteínas. Entre estos son numerosos los que forman
complejos estables con el grupo tiol.
HUEVO:
El huevo fue apreciado durante mucho tiempo por sus cualidades nutritivas, ya que era
una fuente económica para obtener proteínas de alto valor nutricional, y además
contiene otros nutrientes que hacen de él un alimento para incluir en la alimentación
cotidiana de una familia.
La clara o albumen, en un fluido acuoso, que suele ser color blanquecino opalescente,
compuesto por capas de diferente viscosidad. Sus principales componentes son agua
y proteínas de naturaleza viscosa también contienen otros componentes en pequeñas
cantidades (Rodríguez, V. y Simón, E.; 2008). Para Hernandez, M. y Sastre A. (1999);
la clara o albumen está formada fundamentalmente por agua (86%) y proteínas, entre
las que predominan la ovoalbúmina y la ovoglobulina; también contiene sodio y algo
de vitamina B2 y es destacable la ausencia de lípidos.
La yema o vitelo, tiene una forma esférica constituida por un disco germinal rodeado
de la membrana vitelina de naturaleza proteica. Es una emulsión de grasa en agua; su
composición es principalmente lipídica (dos tercios) y proteica (un tercio), con otros
minoritarios (Rodríguez, V. y Simón, E.; 2008).
Lacto suero: A diferencia de las caseínas, las proteínas de lacto suero si contienen
una gran cantidad de cisteína. Además, contienen cantidades considerables de lisina,
leucina, triptófano y acido glutámico y aspártico. En general, las proteínas del lacto
suero tienen un alto valor nutricional (Gorriti L.,2012).
Las proteínas de lacto suero aportan cisteína (2.5%), aminoácido dador de azufre y
precursor de la síntesis de glutatión (antioxidante esencial que protege al organismo
contra el daño producido por la generación de los radicales libres), y otras
microfracciones que favorecen la liberación de factores de crecimiento como la
somatomedina (IGF-1) que estimula la recuperación y crecimiento muscular
(Naclero,2012 citado por Gorriti L. ,2012).
Caseína: La caseína es una de las proteínas más importantes para el hombre tanto
desde el punto de vista alimenticio como industrial. En general se puede decir que la
química pura de la caseína ha sido bastante bien estudiada, mientras que todavía hay
mucho que investigar referente a sus propiedades físico-químicas.
Las combinaciones de la caseína con álcalis son los caseinatos solubles en agua, que
constituyen las colas de la caseína industrial. Esta facultad de la caseína de
combinarse a la vez con los ácidos y las bases, se explica fácilmente por la existencia
en la molécula de funciones básicas aminas (NH2) y de funciones acidas carboxilas
(COOH).
Finalmente, si se coagula la leche fresca por cuajo, sin adición del ácido, conservando
un ph elevado, se obtiene una caseína muy mineralizada, insoluble en los álcalis
diluidos y sin llegar a formar cola (Gorriti.2012).
Caseína al acido: La caseína existe en la leche unida al calcio, que si se precipita por
la acción de un ácido, se desliga en gran parte de este mineral al combinarse el ácido
con el calcio, quedando por esto, desprovista de su mayor parte de materias
minerales. (Gorroti,2012).
Leche
HCl 0.2N
NaOH 2N
Beacher de 250ml
Sulfato de amonio
Tubos de ensayo
3.1.2. Método para la leche
50ml
50ml leche
leche
41ml
41ml Ac.
Ac. Acético
Acético 0.1M
0.1M ++ 9ml
9ml
acetato de sodio 0.1N
acetato de sodio 0.1N
Mezclar
Mezclar yy llevar
llevar aa
pH = 4.6
pH = 4.6
Reposar*5min
Reposar*5min yy filtrar
filtrar
(bomba
(bomba de
de vacío)
vacío)
Filtrado
Filtrado
10ml
10ml del
del filtrado
filtrado ++ 10ml
10ml sulfato
sulfato 20ml
20ml del
del filtrado+
filtrado+ baño
baño maría
maría
de
de amonio
amonio (mezclar
(mezclar yy reposar
reposar hirviendo
hirviendo por
por 10min
10min
por
por 55 minutos)
minutos)
10ml 10ml+
10ml+ NaOH
NaOH
Centrifugar
Centrifugar por
por 10min
10min 10ml +HCl
+HCl
0.2N 2N
2N
(5000rpm)
(5000rpm) 0.2N
Liquido
Liquido sobresaliente+8gr
sobresaliente+8gr
de
de sulfato
sulfato de
de amonio
amonio hasta
hasta
saturación
saturación
III.2.1. Materiales
Leche de soya
Ácido clorhídrico 0.2 N
Cristales de sulfato de amonio
Hidróxido de sodio 2N
Solución de acetato de sodio 0.1 M
Solución de acido acético 0.1 M
Solución saturada de sulfato de amoni
III.2.2. Procedimiento
III.3. Extracción de las globulinas de la torta de soya
3.3.1 Materiales:
3.3.2 Procedimiento
III.4.1. Materiales
Huevo
Probeta
Tubos de ensayo
Beacker 50 ml
Reactivos (los mismos para 3.1.1. )
III.4.2. Procedimiento
Medir el volumen de la clara (V), batir ligeramente y luego
añadir 4 partes de agua (4V)
Adicionar 1,5
gramos de
sulfato de
amonio
HCl
Se observa partículas en suspensión de
color blanco.
DISCUSIONES
Proteinas de leche
Respecto de la solubilidad en proteínas de la leche se observó la
desnaturalización de las proteínas, más específicamente de la caseína por
acción del HCl , la caseína perdió parte de su solubilidad .
Todas las macromoléculas de la naturaleza adquieren una carga cuando se
dispersan en agua. Una característica de las proteínas y otros biopolímeros es
que la carga total que adquieren depende del pH del medio. Así, todas las
proteínas tienen una carga neta dependiendo del pH del medio en el que se
encuentren y de los aminoácidos que la componen. Debido a la composición
en aminoácidos de la proteína, los radicales libres pueden existir en tres formas
dependiendo del pH del medio: catiónicos, neutros y aniónicos.
Cualquier proteína tendría una carga neta positiva si se encuentra en un medio
lo suficientemente ácido debido a que los grupos COOH de los aminoácidos
aspártico y glutámico estarían en su forma neutra pero los grupos amino de
Arginina y Lysina estarían protonados (-NH3 + ).
De igual forma si la proteína se encuentra en un medio con un pH muy alto
estaría cargada negativamente ya que en este caso los grupos carboxilo
estarían desprotonados (COO- ) y los grupos amino estarían en su forma
neutra (NH2). En el punto isoeléctrico, se encuentran en el equilibrio las cargas
positivas y negativas por lo que la proteína presenta su máxima posibilidad
para ser precipitada al disminuir su solubilidad y facilitar su agregación. La
propiedad característica de la caseína es su baja solubilidad a pH 4,6. Si se
añade ácido a la leche, la carga negativa de la superficie de la micela se
neutraliza (los grupos fosfato se protonan) y la proteína neutra precipita. Las
otras dos sustancias añadidas a los tubos de muestra, son dos grandes
modificadores de pH: el HCl y el NaOH. Según Blylund (2003), la presencia de
un exceso de iones hidrógeno (HCl) hace que las moléculas adquieran una
carga neta positiva, repeliéndose entre sí y favoreciendo la estabilidad de la
solución. En el caso contrario de añadir una solución fuertemente alcalina
como el NaOH, todas las proteínas tomarán una carga negativa, lo cual
también mantiene la solución. Esto explica por qué el grado de precipitación
después de la adición del NaOH fue menor que antes de ella. Pero en el caso
del HCl, la turbidez aumento ligeramente, tal vez por la aproximación al punto
isoeléctrico de las proteínas (carga neta cero).
Ruíz-Díaz (2013) menciona que los iones de sales de metales pesados, como
el Pb2+ del acetato de plomo utilizado en la práctica, rompen los enlaces salinos
y casi siempre causan la precipitación de las proteínas. En la práctica, a causa
de lo mencionado anteriormente, se observaron la precipitación por
consiguiente la formación de dos fases.
Según Quesada, S. (2007); la sal (sulfato de amonio) extrae el agua unida a las
proteínas y, por lo tanto, estas precipitan al perder solubilidad. La albumina
presente en el plasma, clara de huevo y muchos otros fluidos biológicos,
pueden ser separadas de otras proteínas como la globulina, ya que la albumina
precipita únicamente si la solución en la que se encuentra es saturada con
sulfato de amonio, mientras que las globulinas precipitan cuando se
encuentran en un 50% (m/V) de concentración en sulfato de amonio. En el
Cuadro 4, se puede observar que hay precipitación pero es mínima.
Según Quesada, S. (2007); la ovoalbúmina tiene un punto isoeléctrico
alrededor de 4,7. Si a una solución de esta proteína se le agrega un ácido,
como el pícrico o el tricloroacetato, el pH disminuye y los aniones (picrato o
tricloroacetato) reaccionan con la ovoalbúmina; el producto es insoluble en la
solución y precipita. Pero si la proteína se encuentra en una solución a un pH
mayor a la de su punto isoeléctrico, presenta carga negativa y, en este caso,
reacciona con catines de metales; y el producto (proteinato del catión) también
precipita. En el Cuadro 4-c se puede observar que hubo un abundante
precipitado blanquecino.
IV. CONCLUSIONES
-La proteínas de leche, específicamente la caseína tiene menor solubilidad en
un medio acido que en un medio básico ya que se está mucho más cerca de su
punto isoeléctrico, a pH=4.6
V. BIBLIOGRAFIA