Absorciom. CL 4 Bioing 2017

ABSORCIOMETRO
Seleccionador de ƛ
b
P° P
INSTRUMENTACIÓN EN ABSORCIOMETRÍA
ABSORCIÓMETROS
FOTÓMETROS DE FILTRO
ESPECTROFOTÓMETROS
Dra. C. Mardones / Dr. D. von Baer, Depto. A. Instrumental. Fac. Farmacia, U.de Concepción
ABSORCIÓMETROS
FOTÓMETRO DE FILTRO
SELECIONADOR
DE LONGITUD DE
FUENTE ONDA (FILTRO)
LUMINOSA
DETECTOR SISTEMA DE
PRESENTACIÓN
DE DATOS
CONTROL DE PORTAMUESTRA
INTENSIDAD AMPLIFICADOR
LUMINOSA DE SEÑAL
ABSORCIÓMETROS
ESPECTROFOTÓMETRO
SELECIONADOR DE
LONGITUD DE ONDA
(MONOCROMADOR)
FUENTE
LUMINOSA DETECTOR
SISTEMA DE
PRESENTACIÓN
DE DATOS
CONTROL DE PORTAMUESTRA
INTENSIDAD AMPLIFICADOR
LUMINOSA DE SEÑAL
ESPECTROGRAMA OBTENIDO CON ESPECTROFOTÓMETRO
Log. onda (λ) nm
NO SE PUEDE OBTENER ESPECTROGRAMA CON FOTÓMETRO DE FILTRO

PARTES DE UN ABSORCIÓMETRO
FUENTES
LUMINOSA FUNCIÓN: Proporcionar la REM de trabajo
TIPOS: Continuas, que emiten dentro de cierto rango de λs

Discontinuas, que emiten ciertas λs discretas
P Teórico REQUISITOS:
Emisión constante: Potencia luminosa constante en función del
Real
tiempo
Tiempo
P = f (t) = cte.
P Teórico b) Distribución espectral constante: Que a las distintas longitudes de

onda de emisión, la potencia luminosa sea constante.
Real
P = f (l) = cte.
λ
En la práctica, que emita en el rango espectral en el que se hará
la medición .
Lámpara de filamento de wolframio o tungsteno
(medidas absorciométricas en región Vis-IR)
FUNCIONAMIENTO:
Vidrio
Se calienta el filamento de W a través de una corriente
Filamento estabilizada e igual como un cuerpo caliente, emite
de W radiación dependiendo de la temperatura de
calentamiento.
Vacío CARACTERÍSTICAS:
Emite un espectro continuo entre 350 nm y 2,5 um.
La potencia luminosa depende directamente de la
temperatura de calentamiento del filamento. A mayor
temperatura, menor λ.
Se utiliza para hacer determinaciones absorciométricas
en la región visible e infrarroja.
Lámparas de tungsteno-halógeno:
Contiene una pequeña cantidad de I2 en
el filamento, lo que le da un tiempo de
vida útil mayor y emiten radiación
abarcando parte de la región UV.
En este caso el bulbo es de cuarzo.
Lámpara de deuterio e hidrógeno
(medidas absorciométricas en región UV)
FUNCIONAMIENTO:
Cuarzo Una descarga eléctrica disocia al deuterio o hidrógeno
contenido en la lámpara, el cual, al recombinarse
emite radiación en la región UV.
Deuterio o
hidrógeno a CARACTERÍSTICAS:
baja presión Emite un espectro continuo desde 160-375 nm.
También emite espectro discontinuo (líneas) a λs
superiores de 400 nm
Electrodo Es la lámpara de elección para trabajar en la en la
metálico región UV.
El espectro discontinuo muchas veces es utilizado para
Filamento la calibración de escalas de longitudes de ondas de
calentado espectrofotómetros.
Otras lámparas de descarga eléctrica usadas en absorciometría
Espectro lámpara de xenon
Lámpara de arco de xenón:

•Se hace pasar una corriente por
una atmósfera de xenón
•Emite radiación continua entre
200 -1000 nm
Espectro lámpara de mercurio
Lámpara de vapor de
mercurio: Emite radiación
discontinua (espectro de líneas)
Lámpara de vapor de sodio
Lámpara de vapor de Neón, etc
RESUMEN DE LOS ESPECTROS DE EMISIÓN DE DISTINTAS
FUENTES DE EMISIÓN
CONTROL DE
INTENSIDAD FUNCIÓN: Regular potencia luminosa que sale de la Fuente luminosa
LUMINOSA
TIPOS: a) Aquellas que actúan sobre la fuente luminosa, variando la
corriente de alimentación de ésta.
b) Aquellas que actúan sobre la luz emitida, mediante :
Diafragmas, cuñas o ranuras.
Cuña Diafragma Ranura
PORTA
MUESTRAS FUNCIÓN: Contener la muestra, tanto si esta es líquida o si es gaseosa
CARACTERÍSTICAS: Deben ser transparentes a la radiación en la región
espectral donde se está trabajando
Su colocación debe ser reproducible
Debe ser resistente a la muestra
Debe tener un espesor óptico definido (b)
MATERIAL ÓPTICO: Su elección es exclusivamente dependiente de la región espectral

donde se está trabajando.
VISIBLE: Vidrio Transparente entre 325 nm – 3um

Poliestireno Transparente entre 340 nm – 3um
Metacrilato Transparente entre 285 nm -750 nm
UV: Cuarzo Transparente entre 200 nm – 3um

Metacrilato Con ciertas limitaciones y precauciones (λ<285 nm)
ESPESOR ÓPTICO (b) : 1 -100 mm

NORMALMENTE 10 mm (1 cm)
TRANSMISIÓN DE MATERIALES ÓPTICOS MÁS USADOS EN ABSORCIOMETRÍA
CUARZO
VIDRIO
FORMAS Y TIPOS DE CUBETAS
Tipos:
A. Cilíndricas
B. Prismáticas
C. Semi-micro cubetas
D. Micro-cubetas
E. Cubetas de Flujo
F. Cubetas de succión
A B B C/D E E F

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Log. onda (λ) nm

NO SE PUEDE OBTENER ESPECTROGRAMA CON FOTÓMETRO DE FILTRO

TIPOS: Continuas, que emiten dentro de cierto rango de λs

P Teórico b) Distribución espectral constante: Que a las distintas longitudes de

Lámpara de arco de xenón:

Espectro lámpara de mercurio

Cuña Diafragma Ranura

MATERIAL ÓPTICO: Su elección es exclusivamente dependiente de la región espectral

VISIBLE: Vidrio Transparente entre 325 nm – 3um

UV: Cuarzo Transparente entre 200 nm – 3um

ESPESOR ÓPTICO (b) : 1 -100 mm

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