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DR.

OSCAR RODOLFO RODAS SUÁREZ


Definiciones

Metabolismo: (metabole = cambio) actividad celular muy coordinada y


dirigida en la que muchos sistemas multi- enzimáticos cooperan para
cumplir 4 funciones:

• Obtener energía química a partir de nutrientes ricos en energía

• Convertir moléculas nutrientes en moléculas características de la propia


célula de la propia célula

• Polimerizar precursores monoméricos a proteínas, ácidos nucleícos,


lípidos, polisacáridos y otros

• Sintetizar y degradar biomoléculas requeridas en funciones celulares


especializadas
O
METABOLISM
R
O
I
G SE DERIVA DE
E metabole
N SE DEFINE COMO
QUE SIGNIFICA
D
E CAMBIO O TRANSFORMACIÓN

¿EN QUE SE TRANSFORMA ?


L
A A LOS NUTRIENTES
PARA OBTENER
LOS CUALES SON
P A TRAVÉS DE
NECESARIAS
A
CARBOHIDRATOS REACCIONES QUÍMICAS MASA Y ENERGÍA
L
LÍPIDOS
A PROTEÍNAS CONOCIDAS COMO NECESARIA PARA
B VITAMINAS
R MINERALES REACCIONES CRECER, REPARARSE
A AGUA METABÓLICAS REPRODUCIRSE, ETC.
Metabolismo
Proteína péptido + aa
NH4 Enzima extracelular NO2, NO3, N2,
H20, CO2,
PO4=,
Sº, SO4=

DNA Proteínas Ácidos orgánicos


mRNA

Polisacáridos

Enzima
extracelular Mono y Ácidos orgánicos,
Polisacáridos Alcoholes,
disacáridos
Hidrocarburos
DEFINICIONES
• Metabolito: es una substancia producida por el metabolismo.

• Metabolito esencial: es un constituyente necesario de un proceso metabólico.

• Metabolismo

• Catabolismo (cata bole = hacia abajo): es la desasimilación o degradación de


moléculas complejas, generalmente para propósitos de obtener energía o
compuestos simples necesarios para la síntesis de otras moléculas

• Anabolismo (ana bole = hacia arriba): es un proceso de biosíntesis de


macromoléculas a partir de moléculas pequeñas (bajo PM)

• Anfibolismo (anfi = doble): reacciones metabólicas que tiene como fin proporcionar
precursores biosintéticos (anabolismo) y obtener energía (catabolismo)

• Anaplerosis (ana = volver a llenar): enlace entre procesos metabólicos, flujo invertido
del C
DEFINICIONES

• Metabolismo periférico: es la conversión de la fuente de C a

un número de precursores biosintéticos.

• Heterotrófo es catabólico

• Autótrofo es anabólico

• Metabolismo central: es la conversión de los productos del

metabolismo periférico en los demás precursores biosintéticos.

• Heterótrofo es anfibólico

• Autótrofo es anabólico
Definiciones

Cinco características principales del metabolismo:

1. Las vías metabólicas son irreversibles

2.Las vías anabólicas y catabólicas deben ser diferentes

3. Cada vía metabólica tiene un primer paso limitante

4.Todas las vías metabólicas están reguladas finamente

5. En los eucariotes las vías metabólicas transcurren en


localizaciones celulares específicas
DEFINICIONES
• Nutrición: es la acción y efecto de aumentar las substancias celulares por
medio del nutriente reparando las partes que van perdiendo en virtud de las
acciones metabólicas.

• Nutrimento: es una substancia que los microorganismos necesitan tomar del


ambiente para satisfacer los requerimientos del organismo en materias
primas para la biosíntesis y obtención del energía.

• Digestión: proceso por medio del cual un compuesto es transformado en uno


de menor peso molecular por acción de enzimas.

• Asimilación: es la transformación de los nutrimentos en constituyentes


protoplásmicos
¿Cómo se define el metabolismo?

Es el conjunto de reacciones químicas que


le permiten a la célula o al organismo, la
producción de masa y energía
REACCIONES METABÓLICAS
EL INTERIOR
SON DE DOS TIPOS OCURREN EN
DE LA CÉLULA

DEL DEL
CATABÓLICAS GRIEGO Catabole Anabole GRIEGO
ANABÓLICAS

SON LAS QUE QUE SIGNIFICA SON LAS QUE

DEGRADAN MOLÉCU- HACIA ABAJO HACIA ARRIBA PRODUCEN


LAS COMPLEJAS MOLÉCU- LAS
HASTA MOLÉCULAS COMPLEJAS A
SIMPLES PARTIR DE
MOLÉCU-LAS
POR LO QUE
SIMPLES
SE POR LO QUE
DESGASTAN CRECER, REPARARSE
SE PRODUCEN
MATERIALES REPRODUCIRSE, ETC.
Y SE PRODUCE NUEVOS MATE-
RIALES Y SE
NECESARIO PARA
ENERGÍA Y AL-MACENA
MA-TERIA ENER-GÍA
PRIMA EJEMPLO
EJEMPLO
CARBOHIDRATOS CO2 + H2O + ENERGÍA
Nutrientes
1- Fuente de energía luz
química
2- Macronutrientes
H K
O Mg
C Na
N 95% Ca
S Fe
P
3- Micronutrientes (elementos traza)
Co, Zn, Mo, Cu, Mn, Ni, Se, W
4- Factores de crecimiento
•Vitaminas
•Bases nitrogenadas (Purinas y pirimidinas)
•Aminoácidos
NUTRIENTES

Son las sustancias que se encuentran en el ambiente, las


cuales son requeridas por los organismos para la síntesis de
materiales celulares y para la generación de energía.

Estos se pueden dividir en dos clases:

1. Macronutrientes, los que se requieren en grandes cantidades.

2. Micronutrientes, aquellos que se necesitan en pequeñas


cantidades.

ver la parte de requerimientos nutricionales de la clase de cultivo de microorganismos.


Macronutrientes

Fuente de - CO2
carbono - Compuestos Carbohidratos, azúcares,
orgánicos proteínas, aminoácidos,
lípidos, ácidos grasos,
glicerol
Fuente de - Inorgánica NH4, NO3-, N2
nitrógeno - Orgánica Proteínas, peptonas, aa,
bases púricas y
pirimídicas, urea
Fuente de - Inorgánica Fosfatos
fósforo - Orgánica Esteres del ácido
fosfórico
Fuente de - Inorgánica Sulfuros y sulfatos
azufre - Orgánica Aminoácidos sulfurados,
vitaminas
Las bacterias necesitan fundamentalmente para sobrevivir:

Ø Agua

Ø Fuente de Carbono:

Ø Nitrógeno (N2):

Ø Azufre (S):

Este elemento es utilizado por la bacteria para sintetizar


aminoácidos azufrados, tales como cisteína y metionina.
También, forma parte de vitaminas, como biotina y tiamina.

Ø Donadores y aceptores de electrones.


Ø Iones inorgánicos (P, K, Mg):

El fósforo es esencial en estructuras como ácidos nucleicos, ATP, fosfolípidos de


membrana y algunas coenzimas, como NAD y FAD.

Ø Elementos traza u oligoelementos:

Son aquellos elementos que las bacterias requieren en cantidades muy pequeñas,
como Fe, Cu, Mo, Zn. Generalmente, basta con la cantidad que contiene el H2O u otros
elementos del medio..

Ø Factores de crecimiento:

Aquellas sustancias que son indispensables para la vida de la bacteria, pero que esta
es incapaz de sintetizar
Ej.: vitaminas, bases nitrogenadas, aminoácidos y colesterol.

Estos compuestos hay que aportarlos al medio, puesto que su carencia no es


compatible con la vida bacteriana.
Tipos nutricionales Fuente de Fuente de Ejemplos
energía C
Cianobacterias,
Fotoautótrofos Luz CO2 bacterias
púrpuras y
verdes
Compuestos Algunas
Fotoheterótrofos Luz orgánicos bacterias
púrpuras y
verdes
Compuestos Algunas
Quimioautótrofos o inorgánicos CO2 Eubacterias y
litótrofos ej.: H2, NH3, muchas Archaea
NO2-, H2S
La mayoría
Quimioheterótrofos Compuestos Compuestos Eubacterias,
o heterótrofos orgánicos orgánicos algunas Archaea
NUTRICION:

Tiene por objeto el aporte de sustancias necesarias para el


proceso de síntesis de componentes celulares o biosíntesis.

Este proceso requiere energía, la cual puede ser obtenidas por


las bacterias desde dos fuentes: LUZ y COMPUESTOS QUÍMICOS.

En base a la fuente de energía, las bacterias pueden ser


clasificadas como organismos:
FOTOSINTÉTICOS O QUIMIOSINTÉTICOS, respectivamente.

En ambos grupos, la energía se conserva en forma de ATP.


METABOLISMO MICROBIANO

Es la actividad química, osmótica y quimiosmótica,


catalizada por enzimas, a través de la cual las células
intercambian materia y energía con el medio.

ANABOLISMO:
Es el metabolismo constructivo o de biosíntesis.

CATABOLISMO .
Es el metabolismo degradativo de aquí se obtiene la
energía requerida en el anabolismo.

ANFIBOLISMO.
Es el metabolismo simultáneamente catabólico y anabólico.
La mayoría de las reacciones en los organismos vivos no
ocurren espontáneamente, sino que requieren la acción de un
catalizador, el cual incrementa la velocidad de la reacción.

Los catalizadores de las reacciones biológicas son


proteínas llamadas ENZIMAS.

Las enzimas son catalizadores específicos: cada enzima


cataliza un solo tipo de reacción, y casi siempre actúa sobre un
único sustrato o sobre un grupo muy reducido de ellos.
Las enzimas bacterianas pueden clasificarse según su lugar de acción en:

ENDOENZIMAS (Intracelulares) Y EXOENZIMAS (Extracelulares).

Las endoenzimas (intracelulares):

Son aquellas enzimas que actúan en el interior de la célula.


Vr.Gr., oxidasas, reductasas y transaminasas.

Las exoenzimas (extracelulares):

Son enzimas que siendo también sintetizadas en el interior de la célula, para


ejercer su función deben ser exportadas al medio extracelular.

Su función principal es degradar macromoléculas, las que por su


tamaño no atraviesan las capas superficiales de la célula procariótica.
Sustrato
Sustrato Productos
Productos

Enzimas

Enzima Complejo
Complejo Enzima Enzima
EnzimaEnzima-Sustrato
Enzima-Sustrato

Catalizadores
Catalizadores biol
biológicos deógicos
Catalizadores biológicos de
naturaleza proteíca. Reducen
naturaleza proteíca. Reducen
lade naturaleza
energía de activaciónprote
de íca.
la energía de activación de
una reacción química. Son
Reducen laun sustrato.
una reacción
específicos para energ
química.íaSonde
específicos para un sustrato.
activación de una reacció
n química. Son específicos
para un sustrato.
Las enzimas bacterianas, también pueden ser clasificadas considerando sí su
síntesis es o no modificada por el medio ambiente.

De acuerdo a esto, las enzimas pueden ser:

CONSTITUTIVAS o INDUCIBLES.

Enzimas constitutivas: son aquellas cuya síntesis es independiente del medio


externo. Se sintetizan siempre, Ej. enzimas que degradan la glucosa.

Enzimas inducibles: son aquellas cuya síntesis depende de la presencia o


ausencia del sustrato en el medio, p.e. La enzima β-galactosidasa, la cual
actúa sobre la lactosa, sólo es sintetizada cuando existe lactosa en el medio.

Las bacterias son metabólicamente eficientes ya que la mayoría de sus


enzimas son inducibles.
Clasificación

— Exoenzimas (extracelulares): se sintetizan en el interior de la


célula y son secretadas por las células y catalizan las
reacciones fuera de la célula.
proteasa
◦ Proteína peptonas o péptidos
a-amilasa
◦ Almidón maltosa

◦ Maltosa maltasa glucosa

◦ Lactosa + H2O b-galactosidasa glucosa + galactosa

◦ Sacarosa + H2O invertasa glucosa + fructosa

◦ Triglicéridos lipasa glicerol + 3 R-COOH


Clasificación

— Endoenzimas (intracelulares): se sintetizan dentro de la


célula y catalizan las reacciones dentro de la célula:

◦ Permeasas o translocasas

◦ Hidrolasas

◦ Oxido-reductasas

◦ Deshidrogenasas

◦ Catalasa
Clasificación

— Constitutivas: se sintetizan independientemente de la


presencia del sustrato

— Inducibles: se sintetizan sólo en presencia del sustrato


En una reacción catalizada por una enzima:

La sustancia sobre la que actúa el enzima se llama sustrato.

El sustrato se une a una región concreta del enzima, llamada


centro activo.

El centro activo comprende:

Ø Un sitio de unión formado por los aminoácidos que están en


contacto directo con el sustrato y
Ø Un sitio catalítico, formado por los aminoácidos directamente
implicados en el mecanismo de la reacción

Una vez formados los productos el enzima puede comenzar un


nuevo ciclo de reacción
REACCION ENZIMATICA

1.- El enzima y su sustrato 2.- Unión al centro activo 3.- Formación de productos

Las enzimas, a diferencia de los catalizadores inorgánicos


catalizan reacciones específicas.

Las enzima actúa con máxima eficacia sobre el sustrato natural y


con menor eficacia sobre los sustratos análogos. Entre los enzimas
poco específicos están las proteasas.
Modificación de Actividad de la
enzima

la actividad
PROPIEDADES DE LAS ENZIMAS

enzimática
Estas derivan del hecho de ser proteínas y de actuar como pH

catalizadores. Como proteínas, poseen una conformación natural

icación de !El pH que al influir sobre las cargas Actividad de la


más estable que las demás conformaciones
Actividad de la posibles. Así,enzima
cambios en la
eléctricas, podrá alterar enzimala estructura

ividad
conformación suelen
del centro activoir y,asociados
por lo tanto,en cambios en la actividad
también
catalítica. influirá que
Los factores sobre la actividad
influyen de manera más directa sobre la

ática enzimática.
actividad de un enzima son:
!La temperatura elevada
pH
Temperatura

desnaturaliza las moléculas


al influir sobre
Actividad de lalas cargas por lo Actividad
proteicas que
de la
los sitios activos
enzima
Actividad de la
enzima
podrá alterar lase
enzima
estructura
ven modificados.
activo y, por lo tanto,
!La enzima se satura a cierta
luirá sobre la actividad
. concentración del sustrato. Temperatura Concentración
del sustrato
pH

atura elevada
za lasActividad
moléculasde la
enzima Actividad de la
or lo que los sitios activos enzima
Estructura

Cofactores y coenzimas
apoenzima + grupo prostético
= holoenzima

Apoenzima Cofactor o Holoenzima


(porción proteica) coenzima (toda la enzima)

Moléculas no proteícas que pueden ser orgánicas o


inorgánicas,
Apoenzima: parte se unen a la
proteica, enzima
alto PM,ycoloidal
dan afinidad al sustrato
y termosensible
con la enzima para catalizar la reacción.
Estructura

Cofactor, coenzima: parte no proteica, bajo PM, no coloidal


y termorresistente
Algunas enzimas dependen para su actividad
catalítica además de la estructura proteica, de otras
moléculas de naturaleza no proteica. Estas
estructuras reciben el nombre de:

COFACTORES.

Estos son resistentes al calor mientras que las


proteínas generalmente no lo son.
COFACTORES.

Los cofactores pueden ser simplemente IONES METÁLICOS


como el Fe++, Mg++, Mn++, Zn++ etc.

Cuando el cofactor es una molécula orgánica se llama


COENZIMA. Muchos de estas coenzimas se sintetizan a partir de
vitaminas.

Cuando los cofactores y las coenzimas se encuentran unidos


covalentemente a la enzima se llaman GRUPOS PROSTÉTICOS.

La forma catalíticamente activa de la enzima, es decir, el enzima


unida a su grupo prostético, se llama holoenzima.
ACTIVADORES METALICOS

Elemento Enzima Activada

Zn++ Deshidrogenasas, anhidrasa carbónica, RNA y DNA polimerasas.

Mg++ Fosfohidrolasas, fosfotransferasas, fosfatasas.

Mn++ Arginasas, peptidasas, quinasas.

Mo Nitratoreductasa, nitrogenasa.

Fe2+, Fe3+ Citocromos, catalasas, ferredoxina, peroxidasas, nitritoreductasa.

Cu2+ Citocromo oxidasa, tirosinasa, ácido ascórbico oxidasa, plastocianina

Ca2+ 1,3 b glucan sintetasa, calmodulina.

K+ Piruvato fosfoquinasa, ATPasa.

Co Vitamina B12 hallada en microorganismos y animales, pero no en


plantas. Importante en la fijación simbiótica de nitrógeno.

Ni Ureasa.
ACTIVADORES COENZIMAS

Moléculas orgánicas necesarias para la actividad de la enzima. Muchos de estas


coenzimas se sintetizan a partir de vitaminas:

q NADPH + H (nicotinamida adenina dinucleótido fosfato reducido),

q NAD (nicotinamida adenina dinucleotido).

q FAD (flavina adenina dinucleótido).

q Piridoxal.

q Biotina.

q Tiamina.

q Ácido tetra hidrofólico.

q Cobalamina.
NAD ↔ NADH
NAD ↔ NADH

Nicotinamida Adenina
Nicotinamida Adenina Di-nucleótido
Di-nucleótido (NAD), es
(NAD), es la principal
coenzima de óxido-reducción.
la principal coenzima de óxido-reducción.
RNA CATALÍTICO O RIBOZIMAS
Las ribozimas son moléculas
de RNA con actividad
catalítica, capaces de
catalizar reacciones químicas
en el interior celular.

El RNA catalítico o ribozima,


funciona como enzima. En las
células se utiliza como
auxiliar en el procesamiento
de los productos finales:
rRNA, tRNA y mRNA
RIBOZIMA:
Se creó este nombre cuando se descubrió que existen ciertas
moléculas de RNA que ejercen actividad catalítica y, por tanto,
no todas las moléculas con actividad enzimática son proteínas.
A
Inhibidores enzimáticos Sustrato
Sitio
activo
Enzima
A) El sustrato se une a la enzima en
Sitio
el sitio activo. alostérico

B Sustrato

B) Un inhibidor competitivo se une Sustrato


2

a la enzima en el sitio activo, Inhibidor


Enzima competitivo

impidiendo la entrada y unión del


sustrato.
C
Sustrato

C) Un inhibidor alostérico modifica la


Efector
afinidad de la enzima por el sustrato, al alostérico Enzima

unirse en un sitio distinto (sitio alosté-


rico)al sitio activo.
Regulación de vías metabólicas
Regulación
de vías
Sustrato

Enzima 1 Producto final

metabólicas
Intermediario 1

Regulación de una vía Enzima 2


Inhibición por
Regulación de una retro-
vía metabólica
metabólica mediante Intermediario 2
alimentación

mediante inhibición
inhibicienzimática
ón enzim ática
por Enzima 3

producto final.
por producto final. Intermediario 3

Enzima 4

Producto final
Regulación de la expresión y
Regulación de la expresión y síntesis de las
síntesis de las enzimas
enzimas
Nivel transcripcional
Ø Nivel transcripcional

Ø Procesos de inducci
!Procesos n y represi
de óinducción y ón.
represión.
Ø Atenuaci ón y procesamiento
!Atenuación del
y procesamiento
del ARNm.
mARN.
Nivel traduccional
Ø Nivel traduccional
!Regulación de la síntesis de las
Ø Regulaci ón de ribosómicas.
proteínas la síntesis de las
!Inhibición de la síntesis de
proteínas ribosómicas. Inhibición
proteínas.
de la síntesis de proteínas.
ATP ATP
ATP

Compuesto Compuesto
Compuesto de alta de
dealta altaía,
energ
energía, se produce
seenergía,
produce sepor
produce
fosforilación
por fosforilación
por fosforilación a a
a nivel nivel
niveldede de sustrato,
sustrato,
sustrato, cadena
cadena cadena respiratoria
respiratoria y y
respiratoria y fotofos-
fotofosforilación.
fotofosforilación.
forilación.
Oxidación-reducción
Oxidación-reducción
Par redox
Par redoxoxidado/reducido
oxidado/reducido

Donador de electrones
Donador de electrones H+ →2e +2H
H2 → 2e- + 2H
- +
2

Aceptor de electrones
½O2 + 2e- →
Aceptor de electrones
O2-
1⁄2O +2e →O - 2-
2

Formación de agua
Formaci2H
ón de+agua
O2- →
2H H+2O
+
+ O →HO 2-
2

Reacción total
H2 + ½O2 → H2O
Reacción total H2+1⁄2O2 →H2O
FUNCIONES DEL METABOLISMO

— El metabolismo tiene cuatro funciones relevantes:

1. Abastecimiento

– De energía. La célula toma del entorno ciertas formas de energía,


como la luz o una molécula oxidable, las cuales son transformadas,
a través de las vías metabólicas adecuadas, en las formas que
definimos como energía metabólica .

– De materia. La célula toma del entorno ciertas formas de materia,


como el CO2 o una molécula carbonada reducida (las únicas fuentes
de carbono que no son utilizadas son el grafito y el diamante), las
cuales son transformadas, a través de las vías metabólicas
adecuadas, en las formas que definimos como precursores
biosintéticos:
– Glucosa-6p, dihidroxiacetona-p, gliceraldehído-3p, glicerato-3p, fosofenolpiruvato, piruvato,
acetil-coa, a-ceto-glutarato, succcinil-coa, oxalacetato, ribosa-5p, eritrosa-4p.
FUNCIONES DEL METABOLISMO
Abastecimiento
Quinasa
Glucosa Glucosa-6P

Glucosa Glucosa-6P
PEP
Piruvato
Mutasa
(Glucosa)n (Glucosa)n-1 + Glucosa-1P Glucosa-6P

Pi
Glucosa-6P Gliceraldehído-3P
Vías de degradación
•Embden-Meyer-Parnas
•Etner-Doudorof
•Fosfocetolasa
•Bifidiobacterias
•Pentosas
FUNCIONES EL METABOLISMO
Abastecimiento

Oxidación de azúcares (obtención y almacenamiento de energía)

Pi
Gli-3P DHasa Quinasa
Gli-1,3-Bi-P Gli-3P Gli-2P
NAD+ NADH+ ADP ATP
Independiente del aceptor de e-
PEP
ADP

NADH+ TCA Acetil CoA Con O2 ATP


ATP
CO2 Colplejo Piruvato-DHasa
Pirúvico
Ganancia neta
de energía Fermentación Sin O2
FUNCIONES DEL METABOLISMO

Respiración aeróbica
Productos de H O
2
Sustrato oxidable la respiración

F ADP + Pi
NAD+ ATP + H2O F
A
A
N
C
S
ATP + H2 NADH T
ADP + Pi
E

Pir Aceptor de e-
O2
Funciones del metabolismo

Respiración anaeróbica
Alcoholes
Productos de SO
Sustrato oxidable la respiración
3 Ácidos
NO2 excepto láctico
F ADP + Pi
NAD+ ATP F
A
A
N
C
S
ATP + H2 NADH T
ADP + Pi
E

Pirúvico Aceptor de e-
acetaldehído
NO3
SO4
Fumarato
EN PRESENCIA DE 02 EN AUSENCIA DE 02 4 ATP

4 ATP

Glucosa Glucosa
GLICOLISIS 2 H2O GLICOLISIS 2 H2O
2ATP 2ATP

2 NADH
FANS
2 NADH

OXIDACIÓN DEL PIRUVATO 2 NADH

2 CO2

FERMENTACIÓN
2 FADH2

6 NADH 2 Lactato
2 Etanol

2 H2O
CICLO DE KREBS
(Ciclo del citrato) 2 CO2
4 CO2

RENDIMIENTO TOTAL
2 ATP
2 ATP

O2 FACTE

RENDIMIENTO TOTAL
34 ATP 38 ATP
RUTA DEL EMPLEO DE GLUCOSA EN CONDICIONES AEROBIAS
RENDIMIENTO: 30 ATP (procedentes de 10xNADH) + 4 ATP (procedentes de 2xFADH2) + 6 ATP – 2 ATP= 38 ATP
(2 ATP pueden emplearse en la entrada de 2xNADH de la glicolisis en la mitocondria)

Glicolisis

NAD+ NADH
ATP ADP ATP ADP Pi H+
ADP
Glucosa Glucosa 6P Fructosa 6P Fructosa 1,6 diP Gliceraldehido 3P Gliceraldehido 1,3 diP
(6 C) (6C) (6C) (6C) (3C) (3C)
ATP

Oxidación del piruvato x2 3-fosfoglicérico


(3C)
NADH
H+ NAD+ ATP ADP

Oxalacetato Acetil CoA Piruvato Fosfoenolpiruvato 2-fosfoglicérico


(4C) (2C) (3C) (3C) (3C)
NADH
H+ CO2 CoA H2O
Citrato
NAD+ (6C)
x2
Málico
(4C)

H2O Isocitrato
(6C)
Fumárico
(4C)
x2 NAD+

NADH
FADH2 H+
Cadena respiratoria
CO2
α-cetoglutarico Cadena de transporte electrónico Síntesis ATP
FAD+
Succínico (5C) MME
(4C) CoA H+ H+ H+ H+ H+
H+ H+ H+ H+ H+
NAD+ H+ H+

GTP MMI
NADH e-
Succinil co A H+
H + H+
ADP GDP (4C) NADH H+
H+
+ CO2 NAD+
ATP Pi FADH2 2H + ½ O2 H2O ADP+Pi H+ ATP

Ciclo del citrato (ciclo de Krebs)


RUTA DEL EMPLEO DE GLUCOSA EN CONDICIONES ANAEROBIAS RENDIMIENTO: 4 ATP – 2 ATP = 2 ATP

Glicolisis

NAD+ NADH
ATP ADP ATP ADP Pi H+
ADP
Glucosa Glucosa 6P Fructosa 6P Fructosa 1,6 diP Gliceraldehido 3P Gliceraldehido 1,3 diP
(6 C) (6C) (6C) (6C) (3C) (3C)
ATP

x2 3-fosfoglicérico
(3C)

ATP ADP

Piruvato Fosfoenolpiruvato 2-fosfoglicérico


(3C) (3C) (3C)
H2O
CO2
NAD+
Acetaldehido
(2C) Etanol Fermentación alcohólica
(2C)
NAD+
Lactato
(3C)
Fermentación láctica

x2
RUTAS IMPLICADAS EN LA OBTENCIÓN DE ENERGÍA A PARTIR DE
GLUCOSA

Glicolisis

NAD+ NADH
ATP ADP ATP ADP Pi H+
ADP
Glucosa Glucosa 6P Fructosa 6P Fructosa 1,6 diP Gliceraldehido 3P Gliceraldehido 1,3 diP
(6 C) (6C) (6C) (6C) (3C) (3C)
ATP

Oxidación del piruvato x2 3-fosfoglicérico


(3C)
NADH
H+ NAD+ ATP ADP

Oxalacetato Acetil CoA Piruvato Fosfoenolpiruvato 2-fosfoglicérico


(4C) (2C) (3C) (3C) (3C)
NADH
H+ CO2 CoA H2O
Citrato CO2
NAD+ (6C)
x2 NAD+
Málico Acetaldehido
(4C) (2C) Etanol Fermentación alcohólica
(2C)
NAD+
Lactato
H2O Isocitrato (3C)
Fermentación láctica
(6C)
Fumárico x2 NAD+ x2
(4C)
NADH
FADH2 H+
Cadena respiratoria
CO2
α-cetoglutarico Cadena de transporte electrónico Síntesis ATP
FAD+
Succínico (5C) MME
(4C) CoA H+ H+
H+ H+ H+ H+ H+ H+ H+
H+
NAD+ H+ H+

GTP MMI
NADH e-
Succinil co A H+ H + H+
ADP GDP (4C) NADH H+
H+
+ CO2 NAD+
ATP Pi FADH2 2H + ½ O2 H2O ADP+Pi H+ ATP

Ciclo del citrato (ciclo de Krebs)


FUNCIONES DEL METABLISMO

— Conservación de la energía (1ª ley de la termodinámica)

— Transducción de la energía

◦ Las únicas estructuras donde se lleva a cabo el proceso


es la membrana citoplásmica en procariotes y
membrana interna de mitocondria y cloroplastos de
eucariotes
FUNCIONES DEL METABOLISMO

ADP + Pi ATP + H2O


DG°’ = -7.3 kcal/mol

Redox ATP
Gliceraldehído-3P Glicerato-3P
DG°’ = -7.3 kcal/mol
Proceso
Lítico no “Evento exergónico”
Redox
Piruvato Acetil CoA Acetato

ATP
FUNCIONES DEL METABOLISMO
Estructuras de alta energía
No hay relación temporal entre eventos
FANS Si hay relación física (forma un gradiente de e-)
Proceso exergónico (DG°’ = positivo), alta energía

Redox (DHasa) Estructura de alta energía


Lítico (Liasa)
Compuesto químico PEP, ATP
Acil-P, Aciltioester

Proceso endergónico (DG°’ = negativo), baja energía


Fermentación y piruvato quinasa: AMP y Glu-6P
FUNCIONES DEL METABOLISMO

No hay relación física


FACTE Si hay relación temporal

Redox Cadena tranportadora de e- (gradiente de e-)

Sistemas ATP sintetasas endergónico


FUNCIONES DEL METABOLISMO
2. Biosíntesis: a partir de los precursores biosintéticos
obtenidos en la fuente de C, y con el aporte energético
(ATP) obtenido de la fuente de energía, y del NADH
obtenido del donador de electrones, la célula construye los
llamados “bloques de construcción”, moléculas de bajo PM,
todas orgánicas, a partir de las cuales la célula forma
moléculas poliméricas.

Ejemplos de estos bloques de construcción son:


monoazúcares, aminoácidos, nucleótiods, ácidos grasos,
vitaminas, etc.
FUNCIONES DEL METABOLISMO
3. Polimerización: es una función del metabolismo, los bloques de construcción son
polimerizados a macromoléculas, es decir:

Monoazúcares polisacáridos

Aminoácidos proteínas

Nucleótidos ácidos nucleícos

Ácidos grasos lípidos

Etc.

La polimerización es un proceso que consume una gran cantidad de energía metabólica,


principalmente de hidrólisis en su forma de nucleósidos trifosfato (atp)
FUNCIONES DEL METABOLISMO

4. Ensamble: finalmente, las estructuras subcelulares se

forman del ensamble de los polímeros.

Por ejemplo: proteínas y lípidos forman membranas,

proteínas y ácidos nucleícos forman ribosomas, etc.

Esta última función del metabolismo no significa un gran

gasto de energía metabólica.


Quimioheterótrof
Quimioheterótrofos
La célula oxida moléculas orgánicas
para producir la energía (catabolismo)
y luego usa la energía de sintetizar el
material celular de estas moléculas or-
gánicas (anabolismo). Todos los hongos
y los protozoarios son heterótrofos,
muchas bacterias, pero solo algunas
aqueobacterias. El metabolismo
heterotrófico conduce a dos procesos:
fermentación y respiración.
Metabolismo central Metabolismo central
ATP ATP m
NADPH
Glucosa Glucosa 6P Gluconato 6P Gluconato G

Fructosa 6P Pentosas P CO2, EM


Las vías del metabolismo central: ATP
ATP
NADPH

Fructosa 1,6 biP Dou


Glucólisis (Embden- Meyerhof- Glucólisis Pentosa
Entner
Gliceraldehído P
Parnas EMP), de las Pentosas ATP, NADH
Doudoroff
ot
pa
fosfato y Entner- Doudoroff Fosfoenolpiruvato
ATP

proveen de precursores metabó Piruvato


á
NADPH, CO2 Las tres vías convierten
licos para otras vías, son las vías Acetil CoA la glucosa en glic
oxidado por la m
para el metabolismo de
Las tres vías convierten por diferentes
carbohidratos y ácidos carboxí-
rutas la glucosa en gliceraldehído, que
licos.
es oxidado por la misma reacción para
formar piruvato.
Glucólisis
Glicólisis
La vía de la glucólisis
La vía de la glicólisis (Embden-
(Embden-Meyerhof-
Meyerhof-
ParnasParnas
EMP), seEMP), se
encuentra
en todos
encuentra enlos eucariotes
todos losy
en muchas especies de
eucariotes y en muchas
bacterias.
especies de bacterias.
En la primera
En la primera etapaetapa hay
hay gasto
gasto de 2 moléculas de
de 2 moléculas de ATP por mo-
ATP por molécula de
lécula de glucosa.
glucosa.
En la segunda parte se forman
En la segunda parte se
4 moléculas de ATP por
forman 4 moléculas de
fosforilaci n fosforilación
ATPópor a nivel ade
nivel
sustrato y 2de
de sustrato
NADH.y 2 de
NADH.
Ciclo de las pentosas fosfato

Importancia:
Produce los precursores de la
ribosa, desoxirribosa en los ácidos

a nucleicos y provee de eritrosa


fosfato como precursor de amino
e ácidos aromáticos.
Se produce en está vía, NADPH,
la mayor fuente de electrones de
la biosíntesis y varias de sus
reacciones las comparte con el
ciclo de Calvín.
Vía Entner-Doudoroff
Vía Entner-Doudoroff
Muchos tipos de bacterias no
poseen la enzima
fosfofructocinasa-1
Muchos tipos de bacteriasyno
noposeen
puedenla
convertir la glucosa-6P a
enzima fosfofructocinasa-1 y no
Fructosa 1,6-bifosfato.
pueden convertir la glucosa-6P a
Una1,6-bifosfato.
Fructosa vía alterna es Entner-
Duodoroff, en la cual la glucosa
Una vía alterna es Entner- Duodoroff,
6P es convertida a piruvato y
Gliceraldehído-3-fosfato
en la cual por la
la glucosa 6P es convertida
desidratación
a piruvato poco usual
y Gliceraldeh del
ído-3-fosfato
6-fosfogluconato para formar
por la desidratación poco usual del 6-
2-ceto-3-desoxi-6-fosfogluconato
(KDPG). para formar 2-ceto-3-
fosfogluconato
desoxi-6-fosfogluconato (KDPG).
Compuesto orgánico
(reducido)
Fosforilación a nivel de sustrato
o Intermediario A
El sustrato orgánico (donador de e-)
pasa por una ruta catabólica (ej., la
NAD+
Pi
NADH glucólisis), y uno de los intermediarios
Intermediario B P de esa ruta es oxidado por un

Acarreador coenzima, se origina un intermediario


electrónico
no fosforilado con una gran energía de
Intermediario C P

ADP hidrólisis. El intermediario


ATP
experimenta enseguida una sustitució
Intermediario D n con un fosfato, para dar la
(oxidado)
NADH correspondiente forma acil- fosfato
NAD+ (enlace de alta energía). Este acil-
Producto final
(reducido)
fosfato dona su fosfato de alta energía
al ADP, que pasa a ATP.
Fermentación
+ ácido
Acido láctico +2H Ácido pirúvico pirúvico Acido

Fermentación -CO2 α-acetoláctico


Streptococcus ATP -CO2
• Se realiza en Lactobacillus
Staphylococcus H2
!Se realiza
condiciones en
anaeróbicas. ADP
Acetoina

condiciones
• +CO2
CO2 +2H
anaeróbicas.
Emplea como aceptor de Acido oxaloacético
2,3-butanediol
electrones a
!Emplea como una +2H
Shigella Klebsiella
aceptor
molécula de
orgánica. Acido málico
Ácido fórmico
Acetil-S-CoA Enterobacter
Bacillus
electrones a una -H2O +4H
• Utiliza el NADH
molécula +2H -CoA-SH -CoA-SH
Acido succinico Etanol
orgánica. en
producido la CO2 H2
-CO2 Acido
+Acetil S-CoA
glicólisis.
!Utiliza el NADH E. coli Acético
-CoA-SH
Acido propionico Salmonella
producido
• Se conserva la en la
energía Clostridium

glucólisis. Bifidobacterium Acetoacetil-S-CoA


de la fosforilación a Propionibacterium

nivel !Se conserva la Acetona -CO2 +4H Butiril-S-CoA


de sustrato
energía de la -CoA-SH
+4H
(FANS).
fosforilación a nivel
+2H -CoA-SH

de sustrato (FNS). Isopropanol Ácido Butirico Butanol


ENZIMAS INDUCIBLES
Pruebas Bioquímicas

E + S ↔ ES ↔ E + P

Se pueden resumir en los siguientes puntos: •Sustrato


(contenido en el medio de cultivo)
•Enzima o vía metabólica (secretada o en el interior del
microorganismo)
•Producto
•Revelador y/o indicador (aunque algunas no los emplean)

Los fundamentos completos de estas pruebas y demás información


pueden encontrarlos en el libro: Pruebas bioquímicas para la identificaci
ón de bacterias de importancia clínica de Jean F. MacFaddin, Editorial
Médica Panamericana.
AGAR ALMIDÓN

•YODO
HIDRÓLISIS DE LA CASEÍNA

•La caseasa es una enzima


extacelular que hidroliza a la
proteína presente en la leche.
•El medio contiene caseína,
extracto de carne y peptona.
•Si el microorganismo produce
la caseasa, se verá un halo
claro alrededor del crecimiento
de la bacteria
HIDRÓLISIS (LICUEFACCIÓN) DE
LA GELATINA
FOSFOLIPASAS

Las fosfolipasas hidrolizan uno de los grupos acilo de los


fosfoglicéridos o los o los glicerofosfatidatos. La fosfolipasa A1
hidroliza el grupo acilo unido a la posición 1 y la fosfolipasa A2
hidroliza el grupo acilo unido a la posición 2.
FOSFOLIPASAS

a: Se abren poros en la membrana de


los glóbulos rojos y se libera la
hemoglobina. El grupo hemo de la
hemoglobina es oxidado hasta
biliverdina. Por eso el color verde del
medio.
b: Hay hemolisis completa de los
glóbulos rojos. Y por eso se observa
translúcido
LECHE TORNASOLADA (LITMUS
MILK):

1. Acidificación:

Fermentación Indicador tornasol


Lactosa ácido rosa
LECHE TORNASOLADA (LITMUS
MILK):

2. Alcalinización :

Digestión Indicador tornasol


Caseína Aminas Azul
LECHE TORNASOLADA (LITMUS
MILK):

3. Coagulación (fermentación tormentosa):

Caseína Coagulación
coágulo
Fermenta
ción
tormento
Fermentación sa
Lactosa ácido + gas
LECHE TORNASOLADA (LITMUS
MILK):

4. Licuefacción:

Peptidasas
Fermentac
ión
tormentos
a

Precipitado
blanco (Ca+2)
LECHE TORNASOLADA (LITMUS
MILK):

5. Reducción:

Indicador redox

e-
De donde obtienes su energía las células para realizar sus
funciones metabólicas?

Las células pueden utilizar 3 tipos distintos de fuente de


energía:

1. LUZ

2. COMPUESTOS ORGÁNICOS

3. COMPUESTOS INORGÁNICOS.

Cuando estos compuestos químicos se rompen originan


compuestos más simples, con la consiguiente liberación de
energía.
Este proceso se denomina catabolismo. Las células
también necesitan energía para otras funciones celulares
como es la motilidad (movimiento celular) y transporte de
nutrientes.
CLASIFICACIÓN DE LOS ORGANISMOS SEGÚN
SU FUENTE DE CARBONO Y ENERGÍA
FUENTE DE FUENTE DE CARBONO
ENERGIA
FOTOTROFOS Física (LUZ)
QUIMIOTROFOS QUIMICA
AUTOTROFOS CO2

HETEROTROFOS COMPUESTOS
ORGANICOS

FUENTE DE FUENTE DE CARBONO


ENERGIA
FOTOAUTOTROFOS LUZ CO2
FOTOHETEROTROFOS LUZ COMPUESTOS
ORGANICOS
QUIMIOAUTOTROFOS QUIMICA CO2
QUIMIOHETEROTROFOS COMPUESTOS
QUIMICA ORGANICOS
Ejemplos de organismos:

Fotoautotrofos: Vegetales, algas, bacterias


fotosintéticas.

Fotoheterotrofos: Bacterias

Quimioautotrofos: Bacterias.

Quimioheterotrofos: Animales, Protozoos, bacterias.


DONADOR ACEPTOR FINAL DE
INICIAL DE ELECTRONES
ELECTRONES

LITOTRÓFICOS INORGÁNICA
ORGANOTRÓFICOS ORGÁNICA

FERMENTACIÓN ORGÁNICO

RESPIRACIÓN INORGÁNICO
ANAEROBIA

RESPIRACIÓN O2
AEROBIA

FOTOSÍNTESIS CO2
PROCESOS QUE CONDUNCEN A LA OBTENCIÓN DE ENERGÍA
y SU CONVERSION A ATP

Fermentación:
Se obtiene el ATP por fosforilación a nivel de sustrato.

Respiración:
Se obtiene ATP por fosforilación oxidativa.

Se utiliza al oxígeno molecular o algún otro agente oxidante


como aceptor final de electrones.

Aeróbica: oxígeno

Anaeróbica: Nitrato, Sulfato, Fumarato, Oxido de Trimetilamina.

Fotosíntesis:
Se obtiene ATP por fotofosforilación.
FERMENTACIÓN:

Oxidación parcial de los átomos de carbono del


compuesto orgánico, aquí se produce poca energía.

La glucosa, tanto en el metabolismo respiratorio como en


el fermentativo, se transforma en ácido pirúvico

Las bacterias pueden producir productos fermentativos


finales distintos al ácido láctico y al etanol debido a las
diferencias en el metabolismo del ácido pirúvico.

Entre los productos finales pueden ser: ácido fórmico, 2,3


butanodiol, isopropanol, ácido butírico, butanol. La mayor
parte de las fermentaciones bacterianas pueden originar varios
productos finales, pero ninguna fermentación da lugar a todos
los productos finales.

Fermentación butanodiólica
La glucosa, tanto en el metabolismo respiratorio como en el
fermentativo, se transforma en ácido pirúvico por una de las
siguientes rutas:

a) Embden-Meyerhof (eucariotas y procariotas)


b) Pentosa fosfato (eucariotas y procariotas)
c) Entner Doudoroff (sólo en ciertos procariotas como alternativa a
la ruta Embden-Meyerhof)

Glucosa + 2ATP + 4ADP + 2Pi + 2NAD+ =>

Acido pirúvico + 2ADP + 4ATP + 2NADH + 2H+ + 2H2O


PRUEBA DE DURHAM
Caldo rojo de fenol
•Peptona
•Tubo invertido: tubo
de Durham o campana
de fermentación
•Un carbohidrato
•Indicador de pH, es el
rojo de fenol: a pH <
6.8 vira a amarillo
(ácido); a pH 7 el medio
es rojo; a pH > 7.4 es
rojo fucsia (alcalino)
Agar Hierro de Kligler (KIA)
Agar Hierro de Kligler (KIA)
•Las bacterias incapaces de fermentar

No fermentadores utilizan las peptonas y liberan aminas


•Las bacterias incapaces de
No fermenta O2
Pico de flauta
alcalino y fondo
que alcalinizan
fermentar utilizan todo el medio.y
las peptonas
alcalino
liberan
•Las aminas queque
alcalinizan todo el la
pH = 7.4 Péptidos !
Aminas bacterias solo fermentan
medio.
No fermentadores de lactosa glucosa, inicialmente también utilizan
Glucosa
O2
Reacción inicial:
Pico de flauta
•Las bacterias que
aeróbicamente lasolo fermentan
glucosa. la a la
Debido
Ácidos Mixtos Péptidos !
Aminas
ácido y fondo
ácido
glucosa, inicialmente también utilizan
baja concentración de glucosa (0.1%),
aeróbicamente la glucosa. Debido a
Glucosa
O2
Reacción final:
Pico de flauta
lametabolizan
baja concentración de glucosa
las peptonas alcalinizando
Ácidos Mixtos Péptidos !
Aminas
alcalino y
fondo ácido
(0.1%), metabolizan
la superficie las peptonas
del medio.
alcalinizando la superficie del medio.
Fermentadores de lactosa •Las bacterias fermentadoras de glucosa
Glucosa + Pico de flauta •Las bacterias fermentadoras de
Lactosa O2
ácido y fondo y lactosa, fermentan la glucosa 0.1% y al
Péptidos ! ácido glucosa y lactosa, fermentan la
Aminas
término
glucosa de esta,
0.1% fermentan
y al término la lactosa 1%,
de esta,
Ácidos Mixtos

fermentan
permitiendola lactosa 1%, permitiendo
la acidificación completa del
la acidificación completa del medio.
medio.
MEDIO DE KLIGLER

Por la fermentación de los


azúcares, se producen
ácidos, que se detectan por
Lactosa medio del indicador rojo de
fenol, el cual vira al color
amarillo (pH < 6.8) en
medio ácido. El tiosulfato
de sodio se reduce a sulfuro
H2S de hidrógeno el que

Glucosa reacciona luego con una sal


Gas de hierro forma el típico
sulfuro de hierro de color
negro.
ROJO DE METILO
La fermentación de la
glucosa produce como
productos finales ácidos
orgánicos (ácidos fórmico,
acético, láctico y succínico)
que provocan un fuerte
descenso del pH inicial del
medio. Puede detectarse por
el viraje del indicador de
rojo de metilo que
permanece amarillo por
encima de pH 5.1 y rojo por
debajo de 4.4.
VOGES-PROSKAUER
Los productos finales de la fermentación
de la glucosa son compuestos neutros
como el butanodiol y el etanol,
produciéndose acetil metil carbinol
(acetoína) como intermediario que
podrá ser detectada añadiendo al medio
KOH (reactivo A de Voges-Proskauer) y
alfa-naftol (reactivo B de Voges-
Proskauer) que reaccionarán con este
compuesto produciendo un color rojo
característico.
VOGES-PROKAUER
VOGES-PROSKAUER
CITRATO DE SIMMONS
El medio de cultivo es diferencial en base a que los
microorganismos capaces de utilizar citrato como
única fuente de carbono, usan sales de amonio como
única fuente de nitrógeno, con la consiguiente
producción de alcalinidad.
El metabolismo del citrato se realiza, en aquellas
bacterias poseedoras de citrato permeasa, a través del
ciclo del ácido tricarboxílico. El desdoblamiento del
citrato da progresivamente, oxalacetato y piruvato.
Este último, en presencia de un medio alcalino, da
origen a ácidos orgánicos que, al ser utilizados como
fuente de carbono, producen carbonatos y
bicarbonatos alcalinos. El medio entonces vira al azul
y esto es indicativo de la producción de citrato
permeas

Indicador de pH: azul de bromotimol > 7.6 azul de Prusia


CALDO MALONATO

La capacidad que tienen los


microorganismos de utilizar el
malonato como única fuente de
carbono.
El malonato es un inhiobidor
(inhibición competitiva) de la enzima
succinico deshidrogenasa
Principio igual al del citrato de
Simmons

+
METABOLISMO DE
AMINOÁCIDOS

•La descarboxilación se lleva acabo por


enzimas inducibles, son sintetizadas en
medio ácido.
•La cadeverina se produce en
condiciones anaeróbicas, el proceso es
Desaminación irreversible y requiere de la coenzima
+
fosfato piridoxal-
•Las desaminación es un proceso
aeróbico (oxidativo)

•Púrpura de bromocresol a pH 5.2 vira a


amarillo y a púrpura cuando el pH > 6.8
•Rojo de cresol a pH 7.2 amarillo y 8.3 es
Descarboxilación + rojo
SIM
La triptofanasa deasmina dejando intacto
el anillo (indol).
Coenzima: piridoxal fosfato
Ruta: oxidativa y reductiva
Productos: indol, amoníaco, pirúvico y
energía
CHO
HCl
alcohol
+ CondensaciÛn por
Color rojo viol·ceo

N
calentamiento
H CH N(CH3)2
N(CH3)2

HN
La estructura pirrólica por medio de una
reacción de condensación con el p-
dimetilamino-benzaldehído y
deshidratación con el alcohol forma una
estructrura quinoide ce color rojo
CALDO TRIPTONA

NH3+ +

A B
Indol +
RESPIRACIÓN

La respiración se desarrolla en dos etapas:

a) El ciclo de Krebs y
b) El transporte terminal de electrones (cadena respiratoria).

En el curso de la
respiración, las moléculas de tres
carbonos de ácido pirúvico
producido por la glicólisis son
degradadas a grupos acetilo de
dos carbonos, que luego entran
al ciclo de Krebs.
En el ciclo de Krebs, el
grupo acetilo es oxidado
completamente a dióxido de
carbono.
En el ciclo de Krebs. los carbonos
donados por el grupo acetilo se oxidan a
dióxido de carbono y los electrones pasan a
los transportadores de electrones.

En el ciclo de Krebs se producen


una molécula de ATP, tres moléculas de
NADH y una molécula de FADH2.

Se necesitan dos vueltas del ciclo


para completar la oxidación de una
molécula de glucosa.

El rendimiento energético total del


ciclo de Krebs para una molécula de
glucosa es dos moléculas de ATP, seis
moléculas de NADH y dos moléculas de
FADH.
Anfibolismo
La etapa final de la respiración es el transporte
terminal de electrones, que involucra a una cadena de
transportadores de electrones y enzimas embebidas en la
membrana interna de la mitocondria (EUCARIOTES) Y
MEMBRANA CITOPLASMICA (PROCARIOTES).
Fosforilación oxidativa: Respiraciones.
Fosforilación
Respiración es la obtención de energía por
Respiracione
R
oxidación de sustratos reducidos DH2 (orgá NADH
o
nicos en quimiorganótrofas, e inorgánicos (o
e-
en quimiolitótrofas), pero las coenzimas in
reducidas (como el NADH) transfieren los c
electrones a un aceptor final oxidado, no Respiración tr
H+ aerobia
o
directamente (como en la fermentación), O2 H2O
H+ fe
sino através de una cadena transportadora Respiración
c
anaerobia
de electrones al final de la cual existe un e- NO3- NO2- fin
aceptor exógeno oxidado, que se reduce. ADP + Pi o
Respiración aerobia: el aceptor final es el H+
ATP !R
O2.
O
Respiración anaerobia: el aceptor final es
!R
distinto del O2 (nitrato, sulfato, etc.). d
A lo largo de esta serie de
transportadores de electrones, los electrones
de alta energía transportados por el NADH
de la glucólisis y por el NADH y el FADH2
del ciclo de Krebs van "cuesta abajo" hasta el
oxígeno.
En tres puntos de su pasaje a lo
largo de toda la cadena de transporte de
electrones, se desprenden grandes cantidades
de energía libre que impulsan el bombeo de
protones (iones H+) hacia el exterior de la
matriz mitocondrial (eucariotes) y espacio
periplásmico (procariotes). Esto crea un
gradiente electroquímico a través de la
membrana interna de la mitocondria. Cuando
los protones pasan a través del complejo de
ATP sintetasa, la energía liberada se utiliza
para formar moléculas de ATP a partir de
ADP y fosfato inorgánico.
En esta representación de la
cadena respiratoria, las
moléculas que se indican:
flavina mononucleótido (FMN),
coenzima Q (CoQ) y los
citocromos b, c, a y a3, son los
principales transportadores de
electrones de la cadena
La transferencia de electrones se da en
la dirección de mayor potencial redox
Transporte
positivo, de electrones
con la liberación de energía
libre.
La La energía
transferencia libre se seva
de electrones daaentraducir en
la dirección de mayor
unpotencial
potencial
redoxelectroquímico deóprotones,
positivo, con la liberaci n de energía libre. La
cuya disipación a través de ATP-asas de
energía libre se va a traducir en un potencial electroquímico
membrana origina ATP, conociéndose
de protones, cuya disipación a través de ATP-asas de
este proceso como fosforilación
membrana origina ATP, conociéndose este proceso como
oxidativa.
fosforilación oxidativa.
Transportadores de electrones
Transportadores de electrones
Proteínas
Proteínas
ü NADH deshidrogenasas.
!NADH deshidrogenasas.
Transfieren los e- y los H+.
Transfieren
ü Flavoprote ínas.los e y los H .
- +

Transfieren los e- y losTransfieren


!Flavoproteínas. H+.
los e- y los H+.
ü Proteínas de hierro y
!Proteínas
azufre. de hierro ydeazufre.
Acarreador
Acarreador de electrones.
electrones.
!Citocromos. Acarreador de
ü Citocromos. Acarreador
electrones.
de electrones.

No prote ínas
No proteínas
ü Quinonas.
!Quinonas.Transfieren los los e- y
Transfieren
los H
e- y los H++..
ATPasa
ATPasa
La ATP sintasa es una proteína con
una de sus fracciones embebida en
la membrana y la otra en la cara
citoplasmática:
Complejo catalítico F1 (subunidades
α3β3γεδ), responsable de la
interconversión de ADP+ Pi y ATP.
Complejo F0 (subunidades ab2c12),
responsable de la transferencia de
protones através de la membrana.
Formación
Formación de de ATP
ATP
Formación de ATP

El movimiento de protones a través de F0 dirige la rotación de las


El movimiento
proteínas de protones
c generando a travéslade
la rotación, F0 dirige
energía es la rotación de
transmitido a las
F1 por
El movimiento
proteínasde protones a través
c generando de F0 la
la rotación, dirige la rotación
energía de las a F1
es transmitido
la rotación de las subunidades , es
esto causa a unaF1 cambio
proteínas c generando
por la rotación delalasrotación,
subunidades γε,γεesto
la energía transmitido
causa una cambio
por la rotación de las en
conformacional
conformacional subunidades
en ββ que γε, esto
que permite
permite causa
lalaformación unade
formación cambio
ATPATP
de en cada
en cada
conformacional
subunidad.Deen que permite
Deβigual
igual modolalala formación
ATPasa es de ATP en cada
subunidad. modo ATPasa es reversible
reversible generando
generando fuerza
subunidad. De igual modo
fuerza protón motriz. la ATPasa es reversible generando
protón
fuerza motriz.
protón motriz.
Respiración
Respiración Fuera
Fuera Citoplasma
Citoplasma

Respiración aerobia
aerobia
2 2HH
+ + FpFp NADH
NADH+ +HH+
+

aerobia 2e-
2e-

Fe-S
Fe-S

QQ 2 2H+H+

2e-
2e-
2 2HH
+ +

Cyt
Cytb556
b556
Cyt b562
Cyt b562
3 3H+H+ ½O
+ + ½O
2 2

Cyt
Cyto o

2 2HH
+ + H2HOO
2

ADP
ADP+ +PiPi
HH
+ + ATPasa
ATPasa H+H+

ATP
ATP
Respiración
Respiración
anaerobia
Respiración anaerobia
Fuera
2 H+ Fp Citoplasma
NADH + H+

anaerobia
2 H+ 2e- Fp NADH + H+

2e- Fe-S

Fe-S

Q 2 H+

Q 2e- 2 H+
2 H+
2e-b556
Cyt
2 H+

Cyt b556
NO3- + 2 H+

Nitrato reductasa NO3- + 2 H+


NO2- + H2O
Nitrato reductasa
NO2- + H2O ADP + Pi

H+ ATPasa HADP
+
+ Pi

H+ ATPasa H+ ATP

ATP
REDUCCIÓN DEL AZUL DE
METILENO

Reductasa

NADH +H+ NAD+

N NH

2H
(H3C)2N N(CH3)2 Reductasa (H 3C)2N N(CH 3)2
AZUL DE METILENO
(ESTADO OXIDADO) S
(COLOR AZUL)
LEUCO-AZUL DE METILENO
(ESTADO REDUCIDO)
(INCOLORO)
REDUCCIÓN DE NITRATOS

Nitrato (NO3-)
ß
A Nitrito (NO2-)
B ß
Oxido nítrico (NO)
ß
Oxido nitroso (N2O)
ß
Nitrógeno (N2)

NH2 N
N

+ + HNO2 + 2H2O
SO 3H NH 2
NH 2
Alfa-naftilamina SO3H
Acido Sulfanilico p-sulfobenceno-azo-alfa-naftilamina
Reducción de Nitratos
Caldo nitratos
Sustrato: Nitrato de sodio. Enzima: Nitrato
reductasa. Producto: Nitritos.
Revelador: Reactivos de Griess.

•Nitrato reductasa (NAR).


•Nitrito reductasa (NIR).
N03- →NO2- →NO→N2O→N2 •NO reductasa (NOR).
•N2O reductasa (N2OR).
Reducción
Reducción dede Nitra
Nitrato
REDUCCIÓN DE NITRATOS

Caldo
Cuando
Caldo nitratos
nitratos
la prueba resulta negativa para nitritos se utiliza la
Sustrato:
Sustrato: Nitrato
Nitrato de de sodio.
sodio.
prueba del zinc para reducir químicamente los nitratos
Enzima:
Enzima: Nitrato
Nitrato reductasa.
reductasa.
presentes a nitritos y formar con los reactivos de Griess el
Producto:
Producto: Nitritos.
Nitritos.
compuesto colorido.
Revelador:
Revelador: Reactivos
Reactivos de Griess.
de Griess.
•Nitrato
•Nitrato re
OXIDASA

H3 C CH3
N

H3 C CH3
N OH

O2 +2H 2O
+ N

NH 2
Alf a-naf tol
Dimetil-p-f enildiamina
O
Azul de indof enol
CATALASA
El mecanismo completo de la catalasa no se conoce, aun así la
reacción química se produce en dos etapas:
H2O2 + Fe(III)-E → H2O + O=Fe(IV)-E
H2O2 + O=Fe(IV)-E → H2O + Fe(III)-E + O2
FOTOSÍNTESIS:

La fotofosforilación es la forma por la que los organismos


fotosintéticos capturan la energía de la luz solar mediante pigmentos
fotosinteticos y la utilizan para sintetizar ATP. Este mecanismo se realiza
en los cloroplastos (EUCARIOTES) gracias a una oxidación de agua a
oxígeno utilizando el NADP como aceptor electrónico fundamental.

La fotosíntesis oxigénica resulta ser el principal mecanismo


biológico para la reducción de CO2 en nuestro planeta.
Podemos resumir dicho proceso en la siguiente ecuación:

6CO2 + 12H2O + ENERGIA RADIANTE (CH2O)6 + 6O2 + 6H2O


LA FOTOSÍNTESIS PROCEDE EN DOS ETAPAS:

Una etapa es mediada por reacciones dependientes de luz (fase


luminosa) mientras que la otra es dirigida por reacciones no-
dependientes de luz (fase obscura).

Las reacciones dependientes de luz


son las que permiten la conversión de energía
radiante a energía química (ej. ATP) y en
adición aportan los electrones (en forma del
coenzima reducido NADPH), para la
reducción de CO2 a materia orgánica.

El donador de electrones en estas


reacciones es el agua, liberándose oxígeno
como un producto de dichas reacciones.
Las reacciones no-dependientes de luz son las que promueven
la reducción de CO2 a materia orgánica a expensas del ATP y el
NADPH generados en las reacciones dependientes de luz.

Existen varios trayectos


metábolicos para lograr la
reducción biológica del
bióxido de carbono, no
obstante, el principal de estos
trayectos en organismos
fototróficos es el llamado
CICLO DE CALVIN.
Ciclo de
Ciclo de Calvin-Benson
Calvin-Benson
Consta Consta
de tres fases:
de tres fases:
§ Fijación por la enzima
!Fijación por la enzima
Rubisco.
Rubisco.
§ Reducción a Gliceraldehído
!Reducción a
3- Gliceraldehído
fosfato 3-
(formación de
fosfato (formación de
compuestos orgánicos).
compuestos
§ Regeneración
orgánicos).de Ribulosa
bifosfato, sustrato para
!Regeneración de la
Ribulosa bifosfato,
fijación.
sustrato para la
fijación.
Fot ó trofos
Fotótrofos
Los organismos fotótrofos convierten la energía luminosa en energía
Los organismos fotótrofos convierten la energía luminosa en
químicaenergía
para formar
químicaATP.
para formar ATP.
!Fotosíntesis
Fotosíntesis oxigénica.oxigénica. Cianobacterias,
Cianobacterias, algas yyplantas
algas plantas Fotosíntesis
!Fotosíntesis anoxigénica. Bacterias púrpura, verdes y
anoxigénica. Bacterias
heliobacterias. púrpura, verdes y heliobacterias.
!Fotofosforilación no fotosíntetica (mediada por el pigmento
Fotofosforilaci´n no fotosíntetica (mediada por el pigmento
bacteriorodopsina). Halobacterias (arquea halofílica)
bacteriorodopsina). Halobacterias (arquea halofílica)

Chloroflexus (bacteria
Chloroflexus (bacteria verde
verde no del no del Rhodospirillum
azufre, Chloroflexaceae), azufre, (bacteria
Chloroflexaceae),
púrpura,
Rhodospirillaceae), Chlorobium (bacteria verde del azufre, Chlorobiaceae), Heliobacterium
Rhodospirillum (bacteria ypNostoc
(Gram-positiva, Heliobacteriaceae), úrpura, Rhodospirillaceae),
(cianobacteria, Nostocaceae). Chlorobium
(bacteria verde del azufre, Chlorobiaceae), Heliobacterium (Gram-
positiva, Heliobacteriaceae), y Nostoc (cianobacteria, Nostocaceae).
Fase luminosa Fase obscura