TESIS
PARA OBTENER EL GRADO DE MAESTRIA EN ACUACULTURA
PRESENTA
ASESOR DE TESIS:
DR. ALEJANDRO OTTO MEYER WILLERER
Atentamente
Sinodal Propietario
_’
INDICE
Resumen i
Agradecimientos ii
Dedicatoria iV
Introducción 1
Antecedentes 6
Generales 6
Normatividad 13
Justificación 24
Objetivos 26
Material y Métodos 27
Localización del Área de Estudio 27
Procedencia de los camarones 27
Tratamiento de los camarones en laboratorio 28
Obtención de los camarones, agua y sedimento 29
Técnica Lab. Nutrición Fac. de Veterinaria 31
Técnica Instituto de Fisiol. Celular 32
Técnica Lab. Fisicoquímica ICMyL 33
Resultados 41
Patrones de plaguìcìdas organoclorados estándares 41
Patrones de plaguìcidas organofosforados estándares 42
Blanco 43
Camarón húmedo por la Técnica de Fac. Veterinaria 44
Camarón seco Técnica de Fisiol. Celular 45
Camarón Material de Referencia (Soxhlet) 46
Camaron Material de Referencia (Microondas) 47
Camarón Lab. Ciencias Mar. (Soxhlet) 48
Camarón Isla Navidad (Soxhlet) 49
Camarón Lab. de Ciencias Marinas (Microondas) 50
Camarón Isla Navidad (Microondas) 51
Plaguicidas en Agua 52 .’
Plaguicidas en Sedimento 53
Plaguicidas en Alimento 54
Discusión 55
Conclusiones 60
Recomendaciones 62
Bibliografía 64
Anexos 72
INDICE DE FIGURAS
ABSTRACT
Deseo hacer un reconocimiento a la famila Navarro Ólíver por todos sus ánimos y
buena voluntad, asimismo a mí Madre Gloria Rodríguez Rueda por todo su ejemplo
y respaldo moral.
Las tierras que son útiles para la agricultura se ven expuestas a ser
atacadas por plagas de insectos; por practicar el monocultivo (por no cultivarlas en
forma rotativa) con la presencia de alguna plaga, se utilizan estos biocidas para
proteger las siembras, pero al esparcir hidrocarburos organoclorados tales como
aldrín, lindano, dieldrin, DDT, DDD y DDE, se afectan también las aves
insectívoras y hasta el ser humano a través de los productos extraídos del campo.
2. ANTECEDENTES
2.1. Generales
que fabrican los ingredientes activos (grado técnico), que para su procesamiento
requiere de materias primas básicas y productos intermedios que pueden ser
derivados de la industria petroquímica, metalúrgica, y de fermentación. Son
ingredientes de alta concentración y toxicidad, por lo que su manejo inadecuado
es muy riesgoso. (Albert, 1990)
2.2. NORMATIVIDAD
2.2.1. Internacional
@CH)
Mercurio Orgánico Paraquat Paratión etílico
Paratión Metílico 2,4,5, T
15
2.2.2. Nacional.
LINDAN0
MALATION
2.3 JUSTIFICACIÓN:
3. OBJETIVO GENERAL
4. MATERIALES Y METODOS
Una vez congelados los dos lotes de camarón a -15”C, congelados junto
con el agua colectada en el Lab. Ciencias Marinas y de Isla Navidad así como el
sedimento de la Laguna de Barra de Navidad fueron transportados vía aérea a la
Ciudad de México, hasta su procesamiento.
El método Foltch.
vaso se llenó de agua y se metió en un reciupiente lleno de agua. Asi se hace una
extracción. Los vasos quedaron parados en el fondo del recipiente). Después de
12 horas aproximadam&te se sacaron los vasos y se retiró la mayor cantidad de
agua posible, se agregó Cloroformo hasta que cambió el color blanco. Se evaporó
a sequedad con luz infraroja y se pesó. para la extracción de los analitos se
purificó el extracto y se concentró con nitrógeno.
Estos materiales son muy útiles para saber la presición que tiene una
técnica, ya sea la que se este realizando o cuando se quiere probar una nueva.
Por lo tanto los extractos y son comparados con los resultados de
referencia.
El sedimento fue extraído por soxhlet y por microondas, la técnica fue muy
similar, sólo que se realizó una maceración en mortero con mazo y liofilización en
el caso del soxhlet utilizándose 50 gramos como muestra. Se realizó también un
blanco (sulfato de sodio anhidro) con estándar interno para ambos casos. Esta
técnica para evaluar plaguicidas organoclorados en sedimento fue según
GERG(1992), ASTM, (1991), E.P.A. (1990) y en soxhlet. Para la extracción con
microondas según Onuska et al (1993). Estos autores mostraron que un proceso
de extracción en períodos de 30 segundos repetido en una secuencia de 5 veces
provee generalmente mejor recuperación que 8 horas de extracción por equipo
soxhlet. ..
de 75mL el cual fue concentrado en Kuderna danish hasta 2ml. Después fue
secado y purificado respectivamente con sulfato de sodio anhidro y florisil activado
y desactivado, eluyéndolo con IOOml de hexano y luego fue reconcentrado en
Kuderna danish hasta 5ml y secado con nitrógeno hasta sequedad. Se le adicionó
1 mL de Metil Terbutil Eter y posteriormente se inyectó al cromatógrafo de gases.
entrar a la columna y por lo tanto llegarían después para ser detectados y generar
una señal cualificable y cuantificable.
5. RESULTADOS
5.1. Patrones de plaguicidas organoclorados estándares.
En la Fig.1 se presenta la mezcla de estándares de once plaguicidas
organoclorados. Éstos fueron comprados al Accustandard. La mezcla se diluyó
con MTBE para obtener concentraciones del orden de 15 ppb. Las Condiciones
del cromatógrafo se mantuvieron con las mismas características que las descritas
en Materiales y Métodos.
8000 -
7000
l-
6000 $
0 5 10 1’5 20 25
Tiempo de retención (minutos)
1.0 e 4
3
l /
5 1'0 15 20 25 $0
Tiempo de retención (minutos)
1.1 e4-
1 .O e4-
8000 .-
8
2
7000 -
6000 -
0 10 1’5 20 25
Tiempo de retención (Minutos)
1.0 e4
.z 9000
8000
7000
6000 -
// / / * * I
I , * /
0 55 10 11 55 20
20 2255
Tiempo de Retención (Minutos)
::
1.1 e4- n
1.0 e4-
I
*d
9000 -
8000--
6000
1’0 15 i0 25
Tiempo de Retención (Minutos)
1
1.1 e4-
1.0 e4-
9000 -
2
8000--
I I I I
5 10 15 20
Tiempo de Retención (Minutos)
1.1 e4
l.Oe4 1 ,
9000-1
1 I II
8000 i 18
6000 4
0 ii 1’0 1'5 20 25
..
1 .Oe
9000
6000-JIL
7000
6 0 0 0
1.6e
1.5e
1.4e
1.3e
1.2e
l.le
1 .Oe
9 0 0 0
8 0 0 0
,_
Sig. 1 in C:\HPCHEM\l\DATA\JUDITHO3.D
4
1.1 e4-
I I I 1
5 10. 15 20
5.4.7. Aquí mismo se extrajo músculo de camarón liofilizado de Isla Navidad Col.,
UAG. Se llevó la extracción con horno de microondas utilizando como solvente
acetona-hexano 1 :l , y se concentró con rotavapor y gas nitrógeno y la elucion de
los analitos se llevó a cabo con MTBE.
1.1 e4
1.0 e4
9000
.i$ 8000
7000
6000
0 5 10 1’5 2 0 2 5
Tiempo de retención (minutos)
Figura 12. Cromatograma del análisis de agua marina de los estanques de cultivo
de camarón en el Laboratorio de Ciencias Marinas, Barra de Navidad, Jal.
Detector de Captura de Electrones. Temp. Iny. 32O”C, Temp. Detector 33O”C,
Rampa : Inicio 80°C 1 min. Sube 30°C hasta 120°C y a una velocidad de 6°C por
minuto hasta 300°C.
53
¿3000-
1 ’ 1 1 ’ ’ ’ m I ’ I
0 5 1 0 1 6 2 0
Tiempo de Retención (Minuh)
Esi=. 1 í n C:\HPCHEM\l\DATA\JUDITHO8.D
c3
c-2
0
.-LL --,---- C--
C?OOO
eooo i .~---+.---~-----l-- ---T--(----
0 5 10 1 5 SC 35
Timpa de Rst*“cion (Mnutorl
Figura 14. Cromatograma del análisis de alimento comercial para camarón adulto,
analizado según la técnica 4. Condiciones Cromatográficas : Detector de Captura
de Electrones. Temp. Iny. 32O”C, Temp. Detector 33O”C, Rampa : Inicio 80°C 1
min. Sube 30°C hasta 120°C y a una velocidad de 6°C por minuto hasta 300°C.
55
6. DISCUSIÓN
Universidad de Texas A&M en la que por medio de equipo soxhlet y gracias a que
se consiguió una liofilizadora en el Instituto de Investigaciones Biomédica, se
liofilizó el tejido de los camarones y se tuvo una materia prima diferente, ya
pulverizada, la cual permitió una homogenización del tejido mejor para la
extracción de los analitos. Cabe mencionar que las pruebas de textura y de
apariencia coinciden con el Iiofilizado del músculo y el estándar de referencia.
7. CONCLUSIONES.
@ Los picos que se observan y no son reconocidos pueden ser otros plaguicidas
de los que no se tuvo el estándar para su identificación, así como también
pueden ser compuestos orgánicos del mismo camarón.
8. RECOMENDACIONES.
Q Efectuar una vigilancia constante para evitar que se sigan usando plaguicidas
prohibidos.
0 Evitar que se reutilicen los envases de plaguicidas, porque esto ocasiona desde
leves infecciones hasta envenenamientos a las personas que los operan.
Q Efectuar una vigilancia constante para evitar que se sigan usando plaguicidas
prohibidos.
0 Evitar que se reutilicen los envases de plaguicidas, porque esto ocasiona desde
leves infecciones hasta envenenamientos a las personas que los operan.
9. LITERATURA CITADA :
ASTM, 1993. Standard $ractice for extraction of solid waste samples for chemical
analysis using soxhlet extraction. D5369-93 Vol. 11.04
Cossa D., Auger, D., Averty B., Lucen M., Masselin, P., Noel, J., 1992 Flounder
(Platichthys flesus) Muscleas an indicator o f m e t a l a n d organochlorine
contaminatíon of french atlantic coastal waters. AMBIO, 21 (2). 176-182.
EPA, 1990, National Survey of Pesticides in Drinking Water Wells- Phase 1. EPA
rept 570/9-90-015, US Environmental Protection Agency, Washington. U.S.A.
EPA. 1992 Another look : National Survey of Pesticides in Drinking Water Wells.
Phase II, EPA. Report 579/09-91 020 US. Environmental Protection Agency,
Washington. USA.
FAO 1986 International code of conduct for the distribution and utilízation of
pesticídes, resolution 10/85, Rome, Food and AgriculturaI Organization.
Galindo Reyes, J.G., Medina Jasso A y Villagrana Lizárraga, C., 1996. Toxic
effects of organochlorine pesticides on Pennaeus vannamei shrimps in Sinaloa,
México. Chemosphere, 33 (3) pp 567-575 Gran Bretaña.
Galindo Reyes, J.G., Fossato V.U., Villagrana Lizarraga, C., and Dolci F., 1999
Pesticides in Water Sediments, and Shrimp from a Coastal Lagoon off the Gulf of
California. Marine Pollution Bulletin, 38 (9)837-841.
68
Hernández, J.E. Benerely A., 1982. Nuevos conceptos de los plaguicidas, Ciencia
y Desarrollo, México.
Hewlett Packard, 1989, The analysis of clorínated pesticidaes and PCB’s using
HP-608 capillary column, USA . .
Llauger O.S.G., 1994. Efecto de metales pesados (Cd, Cu, Pb, y Zn) y agentes
quelantes (EDTA y DTPA) sobre la eclosión, sobrevivencia y metamorfosis a zoea
de Pennaueus vanname’i (Bonne). Tesis de Licenciatura. Escuela de Biología.
Universidad Autónoma de Guadalajara.
Mearns A.J. Matta, M.B., Simecek-Beatty, D., Buchman, M.F., Shigenaka G.,
1998. PC6 and chlorinated pesticide contamination in U.S. fkh and shelitkh : A
historical assessment NOAA/TM/NOS/OMA-39. NOAA TECH MEMO NIST Order
No. PB., 91-172742 GAR. 150.
Onuska F.I., and K.A. Ten-y., 1993. Extraction of Pesticídes from sediments
using a Mícrowave Technique. Environment Canada, National Water Research
Instifute. Chromatographía Vol 36 191-I 94.
Pérez Farfante I., Kensey B.F., 1997. Penaeoid and sergestoid shrimps and
prawns of the world : Keys and diagnosis for the families and genera. Memoires du
Museum National D Histoire Naturelle 175f, 1-233.
70
Willet J., 1991, Gas Chromatography. Editor John Wiley & Sons. Great Brifain.
ANEXO
73
14
12
10
8
6
4
2
0
0 99
0 98
0 j7
03 6
01 5
0 14
0 33
0 !2
0 31
Ii¡ plomo. es otro ión que pudo provocar la reabsorcicjn de la hueva de camarones
hembra en el LCM de la UAGuadalajara, Barra de Navidad, Jal., en el año de 1995
al entrar al estadío IV de maduración. La adición de ll mg/L de sal disódica del
ácido etilen-diamin-tetraacético (Na2 l EDTA) neutralizaba este efecto. La cantidad
de plomo reportada para langostino bajo condiciones normales es entre 0.3 y 11.6
mg/Kg de peso húmedo con una media de 1.6 mg/Kg (Sikorski E.E. 1994.
Tecnología de los productos del mar: recursos, composición nutritiva y
conservación. Ed. Acribia, España, tabla 13, página 67).
77
0 7
1
J
0 61
/
015
014
013
012
0 I1
0
I1UNA ALíCUOTA
TOMAR EL EMBUDO DE SEPARAC!QN
DE 40mL DE AGUA MUESTREADA
I
1 AGREGAR 24 mL DE CLORURO DE METILENO )
I 1
INYECTAR EN CROMATÓGRAFO
DE GASES CON DETECTOR
DE CAPTURA DE ELECTRONES
L
UNIR TIJBO CONCENTRADOR AL
MATRAZ DE LA KUDERNA DANISH (K.D.)
ANADIR 4 PERLAS DE EBULLICIÓN
- - -
CONCENTRAR HASTA OBTENER UN VOLUMEN
“APARENTE” DE 2 mL