FISIOLOGÍA MOLECULAR DE PLANTAS

PRÁCTICA 1. ESTIMACIÓN DEL POTENCIAL HÍDRICO Y SUS COMPONENTES

DETERMINACIÓN DEL POTENCIAL HÍDRICO MEDIANTE EL MÉTODO DEL INCREMENTO DE

PESO

Introducción

Existen diferentes métodos para medir el potencial hídrico de un tejido vegetal y sus distintos
componentes. En esta práctica utilizaremos el método del incremento de peso para estimar el
potencial hídrico del tejido de tubérculo de patata y un osmómetro crioscópico para la
determinación de su potencial osmótico.

Material y Métodos

El método del incremento de peso se basa en la determinación de las ganancias/pérdidas de

agua de un tejido al entrar en contacto con distintas soluciones de potencial hídrico
conocido. Estas se estiman midiendo el incremento de peso del tejido en cada solución. El
osmómetro crioscópico proporciona la osmolaridad de una muestra (extracto del tejido)
basándose en la determinación del punto de congelación la misma.

Estimación del potencial hídrico

Incubar tres cilindros de tubérculo de patata (de aprox. 1 cm de longitud), extraídos con un
sacabocados, en soluciones de sacarosa de concentración conocida (0, 0.1, 0.2, 0.3, 0.4, 0.5
M). Medir el peso de los cilindros en una balanza antes y después de la incubación (1 hora).

Medida del potencial osmótico

Extraer el fluido celular de un trozo de patata previamente congelado en un eppendorf. Con

ayuda de un pistilo homogeneizar el tejido y centrifugarlo a 8000 rpm durante 1 minuto. Se
extraerá una alícuota de 50 µl, que se analizará con el osmómetro (OSMOMAT 030, Gonotec,
Alemania) para conocer su osmolalidad. Esta se determina por la comparación de los puntos
de congelación del agua pura y el de la solución. Así, mientras que el agua pura se congela a
0 °C, una solución con una concentración de 1 osmol/kg tiene un punto de congelación de -
1.858 °C.

Resultados

1.-Construye una tabla donde se indique el incremento de peso relativo (peso final-peso
inicial/peso inicial) en gramos obtenido para cada solución de sacarosa y en cada grupo.
Indica el valor medio y la desviación estándar.
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2.-Representa el incremento de peso relativo medio obtenido respecto al potencial hídrico de

cada solución de sacarosa y haz un ajuste lineal de los datos. Indica el valor de potencial
hídrico obtenido para el tubérculo de patata en MPa.

3.-Calcular el valor del potencial osmótico (R= 0.0083 MPa L/°K mol) e indica el valor medio
obtenido.

4.-¿Cuál sería el valor del componente de presión en este tejido?

Nota.- Para hacer los cálculos considera una temperatura ambiente de 20 °C.

Discusión

Comentar los resultados obtenidos

DETERMINACIÓN DEL POTENCIAL HÍDRICO MEDIANTE LA PRENSA DE SCHOLANDER

La prensa de Scholander o cámara de presión es el método más utilizado para la medida del
potencial hídrico. En esta técnica, el órgano a analizar es separado de la planta e incubado en
una cámara parcialmente sellada de tal forma que un trozo de tallo o pecíolo quede expuesto
a la atmósfera. Antes de la escisión del órgano, la columna de agua del xilema estaba
sometida a tensión. Cuando la columna de agua se rompe tras la separación del órgano, la
tensión se libera y el agua se introduce en las células circundantes hasta que los potenciales
hídricos del xilema y de las células que lo rodean alcanzan el equilibrio. Para hacer la
medida, se presuriza la cámara con gas comprimido haciendo que el agua retorne al xilema y
salga por la superficie cortada. La presión necesaria para llevar el agua hasta su distribución
inicial se denomina presión de balance y es equivalente al potencial hídrico del órgano.

Bibliografía

Salisbury FB, Ross CW. “Plant Physiology”. Wadsworth Publishing Co. 1994

Taiz L, Zeiger E. “Plant Physiology”. Sinauer Associates, Inc., Publishers. Sunderland.

Massachusetts. 2010.