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METODOLOGÍA PARA LA ESTIMACIÓN DE LA VIDA ÚTIL DE LOS ALIMENTOS. II.


MÉTODOS DE ESTIMACIÓN

Article  in  Ciência e Tecnologia de Alimentos · January 2018

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Margarita Nuñez de Villavicencio René Hernández Alvarez


Instituto de Investigaciones para la Industria Alimenticia, La Habana, Cuba Research Institute for Food Industry
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Ivania Rodríguez José Luis Rodríguez Sánchez


Research Institute for Food Industry Instituto Investigaciones para la Industria Alimentaria
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Ciencia y T ecnología de Alimentos
Tecnología
Mayo -agosto ISSN 1816-7721, pp. 75-82
Mayo-agosto

METODOLOGÍA PARA LA ESTIMACIÓN DE LA VIDA ÚTIL DE LOS


ALIMENTOS. II. MÉTODOS DE ESTIMACIÓN

Margarita Nuñez de Villavicencio*, René Hernández-Álvarez, Ivania Rodríguez-Álvarez,


José L. Rodríguez y Yailén Torres-López
Instituto de Investigaciones para la Industria Alimenticia. Carr. al Guatao km 3 ½, La Habana, Cuba, CP 19200.
E-mail: margarita@iiia.edu.cu

RESUMEN ABSTRACT
La metodología para la estimación de la vida útil de los Methodology to estimate the shell-life of foods.
alimentos propone el empleo de uno de los dos métodos II. Methods of estimation
de estimación más utilizados dependiendo de la naturaleza
y tiempo de vida útil esperado del producto en particular: The methodology for estimating shelf life of food proposes
el análisis de Weibull o técnicas de riesgo y el método de the use of one of the two most widely used estimation
almacenamiento acelerado por abuso de temperatura. En methods depending on the nature and expected shelf life of
este trabajo se exponen los pasos para aplicar ambos mé- the particular product: Weibull analysis or hazard techniques
todos de estimación y se desarrollan ejemplos. and accelerated shelf life tests for temperature abuse. In
Palabras clave: vida útil, durabilidad, estimación, análisis this paper the steps to apply both estimation methods and
de Weibull, técnicas de riesgo, pruebas de almacenamien- examples are presented.
to acelerado. Keywords: shelf life, estimation, Weibull analysis, hazard
techniques, accelerated shelf life test.

INTRODUCCIÓN

El procedimiento general de la metodología para la esti-


mación de la vida útil de los alimentos consta de tres
pasos fundamentales: análisis preliminar del sistema pro-
ducto-envase-ambiente, ensayos de almacenamiento y
caracterización y aplicación de la técnica de estimación
adecuada (1).

Como parte de la etapa de análisis preliminar del siste-


ma producto-envase-ambiente se debe haber decidido
qué método de estimación se utilizará, el directo, cono-
cido como análisis de Weibull, técnicas de riesgo o aná-
lisis de supervivencia, aplicable a alimentos almacena-
dos a temperatura ambiente, refrigerados y congelados
que pertenecen a las categorías de vida útil corta o me-
dia, o el indirecto mediante el empleo de pruebas de
Margarita Nuñez de V
*Margarita illavicencio F
Villavicencio er
Fer rer
errer
rer: Licenciada almacenamiento acelerado por abuso de temperatura,
en Matemática (UH, 1984) y Master en Ciencias Matemáti- útil para productos estables o de larga duración para los
cas (UH, 2000). Sus líneas de trabajo fundamentales son la cuales sea válido suponer que el aumento de la tempe-
aplicación de técnicas de probabilidades y estadística matemá- ratura de almacenamiento incrementa la velocidad de
tica a la investigación de alimentos. deterioro (2-10).

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Concluidos los ensayos de almacenamiento y caracteri- Una vez estimados los parámetros de escala o vida ca-
zación, etapa central del estudio, se debe contar con la racterística (α) y de forma (β) de la función de distri-
información necesaria para la determinación de la vida bución de probabilidad de Weibull y sus intervalos de
útil o durabilidad del producto ya sean tiempos de vida confianza al 95 % será posible calcular la vida media o
de las unidades del producto o distribuciones tempora- tiempo medio hasta el fallo del producto y su desvia-
les de magnitudes físico-químicas, sensoriales, ción estándar y el tiempo de vida de las unidades expe-
microbiológicas u otras y puede procederse a la aplica-
ción del método de estimación seleccionado con el ob- 1
−1 ( ) = α − ln(1 − )
jetivo de obtener una estimación de la vida útil o
durabilidad del producto con la mayor precisión y exac-
titud posibles (1). rimentales para el percentil deseado (porcentaje de
unidades deterioradas admitidas en un lote de produc-
MÉTODOS DE ESTIMACIÓN
to), que se estima sustituyendo p, α y β en:
Análisis de Weibull
Estimación de los parámetros de la función de dis-
Para estimar la vida útil por el método directo, emplean- tribución de Weibull
do análisis de Weibull o técnicas de riesgo a partir de los
La estimación de los parámetros α y β puede realizarse
tiempos de vida de las unidades experimentales, deben
siguiendo los pasos propuestos (4) que se ejemplificarán
estimarse primero los parámetros de la función de dis-
con los datos mostrados en la Tabla 1 que correspon-
tribución de probabilidad asumida. La más común de
den a los resultados obtenidos en el estudio de
las distribuciones utilizadas para modelar el tiempo de
durabilidad o vida útil de un producto.
vida de los productos alimenticios y estimar su vida útil
es la distribución de Weibull que será la empleada en
esta metodología (4, 6, 11-14).

Tabla 1. Ejemplo de los pasos 1 al 5 para la estimación de los parámetros de la función de


distribución de Weibull

1 2 3 4 5 6 7
Riesgo
Tiempo Fallo Rango inverso Riesgo
No. Acumulado ln ( ) ln ( )
(días) (Si/No) = ( − + 1) ℎ( ) = 1⁄
( )
1 38 SI 12 0,08 0,08 3,64 -2,48
2 38 NO 11
3 38 NO 10
4 40 SI 9 0,11 0,19 3,69 -1,64
5 40 NO 8
6 40 SI 7 0,14 0,34 3,69 -1,09
7 42 SI 6 0,17 0,50 3,74 -0,69
8 42 SI 5 0,20 0,70 3,74 -0,35
9 42 SI 4 0,25 0,95 3,74 -0,05
10 43 SI 3 0,33 1,29
11 43 SI 2 0,50 1,79
12 43 SI 1 1,00 2,79

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1. Ordenar los tiempos en orden creciente (de menor análisis de varianza de la regresión como los parámetros
a mayor), independiente del lote al que correspondan estimados resultaron significativos (p ≤ 0,05); el coefi-
señalando si la muestra o unidad experimental anali- ciente de determinación R2 = 0,91 indica que el mode-
zada fue rechazada (falló) o no (columnas 1 y 2 de la lo explica el 91 % de las variaciones, lo que demuestra
Tabla 1). su buen ajuste. Los valores estimados de los
parámetros de la función de distribución de Weibull y
2. Asignar rangos inversos a los tiempos. Si se tienen tiem- sus intervalos de confianza al 95 % son los siguientes:
(α = 42,52 ± 0,02) y (β = 23,14 ± 0,03).
pos el rango inverso correspondiente al tiempo se calcula
por (columna 3 de la Tabla 1). La prueba de bondad de ajuste de Kolmogorov-Smirnov
modificada muestra que el valor calculado de Dn = 0,274
3. Calcular el valor del riesgo para cada tiempo de fallo es menor que el valor tabulado dn;0,05 = 0,339 y por
mediante la expresión (columna 4 de la tanto no se puede rechazar la hipótesis de que los datos
Tabla 1). sigan la distribución de Weibull con un nivel de con-
fianza del 95 %, por lo que los valores estimados de los
4. Calcular el valor de riesgo acumulado para parámetros pueden utilizarse para caracterizar y esti-
mar la vida útil del producto y se tiene que la vida me-
cada tiempo de fallo, el cual es la suma de su valor de
dia o tiempo medio hasta el fallo y la desviación estándar
riesgo y los valores de riesgo de todos los tiempos de
de la función de distribución de probabilidad de Weibull
fallo precedentes (columna 5 de la Tabla 1).
estimada son ̅ = 41,5 días y σt = 0,05 respectiva-
mente, además, el tiempo de vida de las unidades expe-
5. Calcular los logaritmos naturales de y (co- rimentales para el percentil deseado p (porcentaje de
lumnas 6 y 7 de la Tabla 1). unidades deterioradas admitidas en un lote de produc-
to) puede calcularse mediante la siguiente ecuación:
6. Ajustar los datos a la ecuación
1
−1 ( ) = 42,52 − ln(1 − ) 23,14
ln = ln + (1/ )ln ( )
La Tabla 2 presenta los tiempos de vida, sus intervalos
excluyendo aquellos cuyo riesgo acumulado sea mayor de confianza al 95 %, calculados para algunos valores
que uno ( > 1) (15), mediante análisis de regre- de percentil o porcentaje de unidades deterioradas ad-
sión lineal simple o mínimos cuadrados, para estimar misibles en un lote. La vida útil o durabilidad del pro-
los parámetros ln α (el intercepto) y 1/β (la pendiente) ducto se determina aproximando el valor entero infe-
y sus intervalos de confianza al 95 %. Al graficar esta rior al valor calculado para el percentil deseado, en este
relación debe obtenerse una línea recta. ejemplo, para el 0,05 percentil, es decir para 5 % de
unidades deterioradas, el tiempo de vida útil o durabilidad
7. Comprobar la bondad de ajuste de los datos a la distri- sería de 37 ± 2 días mientras que el 10 % de unidades
bución de Weibull estimada mediante la prueba de deterioradas se alcanza a los 38 ± 2 días y el 20 % a los
Kolmogorov-Smirnov modificada (16, 17). Si como re- 39 ± 2 días.
sultado de la prueba de bondad de ajuste resulta que no
se puede rechazar la hipótesis de que los datos proven- Estudios de almacenamiento acelerado por abuso
gan de la distribución de Weibull con un nivel de con- de temperatura
fianza al menos del 95 %, entonces pueden utilizarse los
valores estimados de los parámetros para realizar el resto Los métodos o pruebas de almacenamiento acelera-
de los cálculos, en caso contrario debe obtenerse más das (ASLT Accelerated Shelf-Life Testing) surgen de
información aumentando el número de observaciones. la necesidad de obtener, en un tiempo relativamente
corto, la información necesaria para determinar la vida
Del análisis de regresión realizado para ajustar los da- útil de los productos alimenticios fundamentalmente
tos de las columnas 6 y 7 de la Tabla 1 al modelo de de larga duración. Los resultados de toda prueba de
regresión indicado en el paso 6, se obtuvo que tanto el

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Tabla 2. Tiempos de vida e intervalos de confianza al 95% para algunos valores de percentil

Intervalo de Confianza al 95%


Percentil Tiempo de vida
Límite Inferior Límite Superior
0,01 34,86 32,60 37,27
0,05 37,40 34,98 39,99
0,1 38,58 36,09 41,25
0,2 39,85 37,28 42,61
0,5 41,86 39,15 44,75

almacenamiento acelerado deben ser cuidadosamente La selección de las temperaturas depende del producto
validados una vez que el producto esté en el mercado y debe realizarse con cuidado para evitar la ocurrencia
(2, 5-9, 12, 18-21). de cambios diferentes a los que deben ocurrir a la tem-
peratura de almacenamiento normal tales como cam-
Las ASLT son aplicables a cualquier proceso de dete- bios o separación de fases, pérdidas de humedad y
rioro que tenga un modelo cinético válido, puede ser desnaturalización de las proteínas, entre otros (6, 9, 10,
químico, físico, bioquímico, microbiológico e incluso 23).
sensorial. Existen varias aproximaciones a las ASLT pero
el método más común es la aproximación por el mode- Para cada temperatura de almacenamiento se debe
lo cinético, más específicamente el modelo de Arrhenius, proceder a establecer un diseño experimental, en
que relaciona la velocidad de la reacción de deterioro a el que deben quedar claramente establecidos: la du-
los cambios de temperatura y cuya popularidad lo ha ración del estudio, los tiempos de muestreo, las
hecho sinónimo de las ASLT (6-10). muestras representativas y el número de muestras
necesarias garantizando la representatividad de cada
El proceso básico para la realización de una prueba de lote.
almacenamiento acelerado por abuso de temperatura
involucra: 1) la selección de las temperaturas de alma- Durante la ejecución del estudio cinético deben que-
cenamiento para la aceleración del proceso de deterio- dar registrados los valores de las magnitudes físico-
ro, 2) el diseño experimental del estudio cinético para químicas, sensoriales, microbiológicas u otras, con las
cada temperatura de almacenamiento seleccionada, 3) que se realizará la evaluación de los parámetros
la ejecución del estudio cinético del proceso de deterio- cinéticos y la estimación a las condiciones normales
ro a cada una de las temperaturas seleccionadas o ensa- de almacenamiento.
yos de almacenamiento y caracterización, 4) la
modelación cinética o evaluación de los parámetros del Modelación cinética o evaluación de los parámetros
modelo cinético para cada temperatura, 5) la determi- del modelo cinético para cada temperatura
nación del efecto de la temperatura mediante el ajuste
de la ecuación de Arrhenius, 6) la determinación de la Los principios y procedimientos de la modelación
vida útil para cada temperatura, 7) la determinación de cinética han sido ampliamente tratados en la lite-
la relación entre la vida útil y la temperatura, Q10 y 8) la ratura. Estos métodos se basan en establecer que,
estimación de la vida útil a la temperatura de almacena- bajo condiciones ambientales constantes, la degra-
miento normal (6, 8, 9, 22). dación y pérdida de la calidad y por tanto de la
vida útil de los alimentos, puede ser representada
La precisión de la estimación se incrementa con el nú- por la disminución o aumento de uno o varios ín-
mero de temperaturas ensayadas que no deben ser me- dices de calidad. La mayoría de las reacciones de
nos de tres, Taoukis y col. (8) comentan que cinco o deterioro en alimentos han sido caracterizadas como
seis temperaturas es el óptimo práctico para obtener la de orden aparente cero o primer orden (6-10, 20,
mayor exactitud con el menor costo posible. 21, 23).

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La función de calidad para reacciones de orden cero y demostrando la dependencia lineal del contenido de edul-
primer orden, bajo condiciones ambientales constan- corante con el tiempo de almacenamiento en cada tem-
tes, pueden escribirse como: peratura. Las constantes de velocidad estimadas y sus
límites de confianza al 95 % son: 1,89 ± 0,3; 0,40 ± 0,08
Orden cero: − 0 =− = 0 − y 0,17 ± 0,02 para 30, 20 y 10 °C, respectivamente.

y Primer orden: =− = 0 − Determinación del efecto de la temperatura. Ecua-


0 ción de Arrhenius
donde: 0es el valor inicial del índice de calidad; es el
valor del índice de calidad en el tiempo t y k es la cons- El efecto de la temperatura sobre la velocidad de la
tante de velocidad (t-1). reacción de deterioro puede expresarse mediante la ecua-
ción de Arrhenius, que relaciona la constante de veloci-
Para determinar el orden aparente de la reacción de de- dad de la reacción a la temperatura absoluta mediante
terioro y estimar el valor de la constante de velocidad, la siguiente expresión (6-10, 21):
los datos obtenidos para cada temperatura, deben
graficarse mediante diagramas de dispersión de vs. t = 0 −
y ( ⁄ ) vs. t. El orden aparente será aquel para
el que se obtenga el modelo de mejor ajuste utilizando donde: k es la constante de velocidad de la reacción de
algún criterio estadístico de bondad de ajuste como el deterioro; Ea es una constante conocida como factor
coeficiente de determinación (R2). Una vez determina- pre exponencial; R es la energía de activación (J/mol);
do el orden aparente de la reacción, se estima el valor es la constante de los gases (8,3143 J/K mol) y T es la
de las constantes de velocidad, k, para cada temperatu- temperatura absoluta (K = °C + 373,15).
ra, que no es más que la pendiente del modelo de regre-
sión ajustado mediante mínimos cuadrados, determinán- El ajuste, mediante el método de mínimos cuadrados,
dose también sus intervalos de confianza al 95 %. permite obtener una estimación de la constante de ve-
locidad de la reacción y la energía de activación a la
Para ejemplificar se tomaron los datos publicados de temperatura absoluta.
un estudio para evaluar la vida útil de un producto al
que se le añadieron 200 mg/L de un edulcorante, se Los resultados del ajuste por mínimos cuadrados a la
consideró como límite de calidad una degradación del ecuación de Arrhenius, para las constantes de veloci-
50 % del edulcorante (8). dad estimadas en el ejemplo, muestran que tanto el aná-
lisis de varianza de la regresión como la prueba t de
En los gráficos del comportamiento durante el almace- significación de los coeficientes, resultaron significati-
namiento del edulcorante, correspondientes a los mo- vas (p ≤ 0,05) y el valor del coeficiente de determina-
delos cinéticos de orden cero (Fig. 1) y primer orden ción (R2) indica que el modelo explica el 95 % de las
(Fig. 2), se pueden apreciar las marcadas diferencias variaciones, lo que demuestra el buen ajuste del mode-
entre las pendientes indicando dependencia de la tem- lo estimado. Los valores estimados y los límites de con-
peratura en ambos modelos cinéticos, a mayor tempe- fianza al 95 % de los parámetros fueron:
ratura mayor velocidad de degradación. De los valores
de los coeficientes de determinación (R2), puede deter- 0 = 34,56 ± 7.36
minarse que el orden de reacción o modelo cinético de
mejor ajuste es el de orden cero debido a que estos = 10326,2 ± 2164,1
valores son mayores que los calculados para el modelo
De estos se obtienen las estimaciones de la constante
de primer orden y además, son capaces de explicar más
de velocidad de la reacción a la temperatura absoluta,
del 90 % de las variaciones del comportamiento obser-
k0 y la energía de activación:
vado.
= 1,02 × 1015 ± 1,62 × 103 ℎ−1
El análisis de varianza de la regresión y la prueba t
de significación de la pendiente para el modelo cinético = 86032 ± 18030 ⁄
de orden cero resultaron significativas (p ≤ 0,05)

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Figura 1 Diagrama de dispersión del comportamiento durante el almacenamiento del edulcorante,
cinética de orden cero.

Figura 2 Diagrama de dispersión del comportamiento durante el almacenamiento del edulcorante,


cinética de primer orden.

Determinación de la vida útil o durabilidad para donde: es la vida útil o durabilidad, es el valor inicial
cada temperatura del índice de calidad, Cf es el valor límite del índice de
calidad y k es la constante de velocidad.
Para cada temperatura, se conoce que la vida útil o
durabilidad es inversamente proporcional a la constante Como se comentó en el enunciado del ejemplo, el lími-
de velocidad, por lo que puede calcularse estableciendo te de calidad será cuando se obtenga una degradación
un valor límite de calidad para la característica analizada del 50 % del edulcorante, correspondiente a un valor
Cf, empleando los valores estimados de los parámetros final Cf = 100 mg/mL; la Tabla 3 muestra la vida útil,
del modelo cinético de orden cero o primer orden ajusta- que puede calcularse sustituyendo los valores en la ecua-
do, mediante las ecuaciones (6-10, 20, 21, 23): ción correspondiente a la reacción de orden cero y sus
intervalos de confianza al 95 % para cada temperatura
Orden cero: Primer orden: de almacenamiento. La diferencia de la durabilidad es-
0⁄
− timada entre las temperaturas es apreciable, obsérvese
0
= = que si se expresara en días serían aproximadamente: 2,
10 y 24 días almacenado a 30, 20 y 10 °C, respectiva-
mente.

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Tabla 3. Vida útil estimada para los modelos cinéticos de orden cero

Intervalo de Confianza al 95%


Temperatura (°C) Vida útil (h)
Límite Inferior Límite Superior
30 53 44 65
20 248 207 310
10 596 529 682

Determinación de la relación entre la vida útil y la donde: se estima por la pendiente del ajuste a la
temperatura ecuación de Arrhenius.

La relación entre la vida útil y la temperatura ha sido Si la diferencia entre las temperaturas ensayadas es
expresada tradicionalmente como Q10, la proporción o distinta de 10°C, entonces, similarmente a Q10, pue-
razón de la velocidad de reacción a temperaturas que de utilizarse el término QΔ. Puede demostrarse que si
difieren en 10 °C o el cambio de la vida útil cuando el Δ = T1 - T2, entonces:
alimento es almacenado a una temperatura diferente en
∆/10
10 °C, además es útil para comprobar que no hubo ∆ = 10
cambios en el mecanismo de la reacción entre las tem-
peraturas estudiadas. Q10 depende de la temperatura y y
∆/10 1
de la energía de activación por lo que debe especificarse 10 =
2
el rango de temperaturas sobre el que fue determinado
y está definido por la siguiente expresión (6-10, 20, 21,
donde: i
es la vida útil a la temperatura
23):
+10
10 = La Tabla 4 muestra los valores de Q10 calculados por la
aproximación al modelo cinético y sus intervalos de con-
fianza al 95 %.
donde: kT es la constante de velocidad a la temperatura
T °C y kT + 10 es la constante de velocidad a la tempera-
Estimación de la vida útil a la temperatura de al-
tura T+10 °C.
macenamiento normal
Puede demostrarse que 10 =
+10° La aproximación más utilizada para determinar la veloci-
dad de deterioro y la vida útil a la temperatura normal de
donde: es la vida útil a la temperatura T °C y es la
almacenamiento es el uso de Q10 o QΔ (6-10, 20, 21, 23).
vida útil a la temperatura T+10 °C.
Si se supone que la temperatura normal de almacena-
Cuando los datos tienen un buen ajuste a la ecuación
miento del producto es 5 °C, la durabilidad o vida útil
de Arrhenius lo más recomendado es calcular el coefi-
puede calcularse con el valor de Q10 para 10 °C, despe-
ciente utilizando la aproximación al modelo cinético:
jando en las ecuaciones correspondientes se tiene que:
10 5/10
10 = =
( + 10) 5℃ 10 10℃

Tabla 4. Valores de Q10 calculados para cada temperatura e intervalos de confianza al 95%

Temperatura Intervalo de Confianza al 95%


10
°C Límite Inferior Límite Superior
30 2,97 2,36 3,73
20 3,20 2,51 4,08
10 3,47 2,67 4,50

81 Ciencia y Tecnología de Alimentos Vol. 27, No. 2, 2017


Dado que Q10 y la vida útil a 10 °C es 10℃ = 596 h en-
tonces: = 1110 h
5℃

De la misma forma puede calcularse el intervalo de con-


fianza al 95 % para 5℃ sustituyendo por los valores
límites inferiores y superiores.

La vida útil o durabilidad del producto almacenado a


5 °C será aproximadamente de 1 110 h entre 864 y
1 448 h con un 95 % de confianza o 46 días entre 36 y
60 días.

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