Cuestionario 3.- NUTRICIÓN MICROBIANA 1.

- Describe que tipo de nutrimento requieren las células

microbianas para vivir (macro y microelementos.

macronutrientes (C, H, O, N, P, S, K, Mg)

Micronutrientes (c.a. 200 mg/L): Fósforo, Potasio, Azufre, Magnesio Vitaminas y hormonas

- Describe como se clasifican los microorganismos en base a sus diferentes fuentes de energía y
carbono

Con respecto a la fuente de carbono, se clasifican como:  Autótrofos, microorganismos que usan
CO2 y carbonatos.  Heterótrofos, aquellos que utilizan compuestos orgánicos.

3.- ¿Qué factores de crecimiento requieren los microorganismos y como se clasifican en base a
estos?

Con relación a la fuente de energía los microorganismos se clasifican en dos grupos:  Fotótrofos,
estos utilizan la energía electromagnética (luz) para su desarrollo.  Quimiótrofos, que obtienen su
energía a partir de la oxidación de compuestos químicos, y que a su vez se subdividen en: o
Quimiolitótrofos (oxidación de compuestos inorgánicos) o Quimiorganótrofos (oxidación de
compuestos orgánicos) Con respecto a la fuente de carbono, se clasifican como:  Autótrofos,
microorganismos que usan CO2 y carbonatos.  Heterótrofos, aquellos que utilizan compuestos
orgánicos.

4.-Tipos nutricionales de los microorganismos.

Los nutrientes que requiere una célula para su crecimiento se pueden clasificar
en los siguientes grupos:

1.- Macronutrientes: carbono, hidrógeno, oxígeno y nitrógeno.

2.- Micronutrientes: fósforo, potasio, azufre, magnesio.
3.- Vitaminas y hormonas
4.- Elementos traza: zinc, cobre, manganeso, molibdeno, cobalto.

1.- MACRONUTRIENTES

Carbono. Todos los organismos necesitan carbono en alguna de sus formas. El

carbono forma el esqueleto de los tres más importantes nutrientes (carbohidratos,
lípidos y proteínas) que se utilizan para la obtención de energía así como material
celular. Los microorganismos que utilizan compuestos orgánicos como fuente de
carbono se llaman heterotrofos y aquellos que utilizan el CO2 como fuente de
carbono se llaman autotrofos.

Hidrógeno y Oxígeno. El hidrógeno y oxígeno forman parte de muchos

compuestos orgánicos. Se encuentran en el H2O, como componentes de
nutrientes y en la atmósfera. Además el O2 se utiliza en la respiración aeróbica
como aceptor terminal de electrones.

Nitrógeno. Todos los organismos requieren nitrógeno. El nitrógeno es

metabolizado y entra a formar parte de las proteínas, ácidos nucleicos y
polímeros de la pared celular. Las fuentes de nitrógeno que pueden ser utilizadas
por diferentes organismos incluyen el N2 atmosférico en algunos procariotas,
otros utilizan compuestos inorgánicos como nitratos, nitritos o sales de amonio,
mientras que otros requieren compuestos nitrogenados orgánicos como son los
aminoácidos o péptidos.

2.- MICRONUTRIENTES (c.a. 0,2 g / l)

Fósforo. El fósforo es esencial para la síntesis de ácidos nucleicos y ATP;

también forma parte de los fosfolípidos y polímeros de la pared celular. El
fósforo se suministra normalmente como fosfato inorgánico; alternativamente se
puede utilizar fosfato orgánico como son los glicerofosfatos y fosfolípidos.

Potasio. El ión potasio actúa como coenzima y probablemente como catión en la

estructura de RNA y otras estructuras aniónicas celulares.

Azufre. El azufre es necesario para la biosíntesis de los aminoácidos cisteina,

cistina y metionina. También forma parte de coenzimas como biotina, coenzima
A y ferredoxina. El azufre se suministra en forma inorgánica como sulfato u
orgánica como cistina, cisteina y metionina.

Magnesio. Se utiliza como cofactor de reacciones enzimáticas donde actúa el

ATP.

3.- VITAMINAS Y HORMONAS

Las vitaminas se clasifican en dos grupos, hidrosolubles y liposolubles. Dentro

de éstas últimas la vitamina A, D y E no son necesarias para el crecimiento de las
bacterias. Todas las vitaminas hidrosolubles, excepto el ácido ascórbico, son
necesarias para el crecimiento de bacterias. La mayor parte de las vitaminas
hidrosolubles son componentes de coenzimas. En los medios indefinidos se
utiliza como fuente de vitaminas el extracto de levaduras.
 4.- ELEMENTOS TRAZA (c.a. 25 mg / l)

En general los requerimientos de elementos traza se conocen sólo

cualitativamente ya que es difícil demostrar su requerimiento debido a que las
cantidades necesarias se suelen encontrar a menudo como contaminantes en otros
constituyentes del medio. Son necesarios para activar algunos enzimas; por
ejemplo, el Mo6+ se necesita en la nitrogenasa que es el enzima que cataliza la
conversión del nitrógeno atmosférico en amoníaco en la fijación biológica de
nitrógeno.

5.- Describe Transporte activo, Transporte pasivo, Difusión simple, Translocación de grupo, Sistema
ABC

TRANSPORTE ACTIVO

La mayor parte de los nutrientes son transportados mediante este mecanismo.

Este proceso permite concentrar altos niveles de nutrientes necesarios para las
actividades metabólicas dentro de la célula. Hay consumo de energía. El ATP
distorsiona el sitio de unión de la proteína transportadora dificultando a la
molécula salir de la célula.
El transporte pasivo es un movimiento de sustancias bioquímicas, atómicas o
moleculares a través de membranas de la célula sin necesidad de sobrecarga de energía.
A diferencia del transporte activo, no requiere una entrada de energía celular, porque es
un cambio conducido por el crecimiento de la entropía del sistema.

La difusión simple es el proceso físico mediante el cual las sustancias se

mueven desde una región donde están muy concentradas hacia zonas
donde la concentración de esa sustancia es menor. La difusión simple es un
proceso espontáneo que no requiere energía, sino que está promovido por
un gradiente de concentración.

El mecanismo de traslocación de grupo, es un mecanismo de transporte de

membrana activo exclusivo de las células procariotas, que se caracteriza por que, durante el
transporte, la sustancia experimenta una modificación química. 12
Esta modificación química consigue dos cosas: por un lado la adición de nuevos grupos
funcionales dificulta que la sustancia modificada se escape de la célula, y por otro lado
mantiene extremadamente bajas las concentraciones intracelulares de la sustancia sin
modificar, lo que mantiene un gradiente de concentración unidireccional entre el exterior y el
interior de la célula que favorece el ingreso de la sustancia.
transporte ABC: este mecanismo utiliza ATP en forma directa para transportar solutos al
interior de la célula. En las bacterias gramnegativos, el transporte de muchas
nutrimentos se facilita por la acción de proteínas de unión específicas que se localizan
en el espacio periplasmatico; en la célula las Gram positivas las proteínas de uniones
están adheridas a la superficie externa de la membrana celular. Estas proteínas tiene
como función la transferencia del sustrato captado hacia un complejo proteínico unido a
la membrana.

6.-Explica en qué consiste la respiración aerobia, la anaerobia y Fermentación. Elabora una tabla
indicando sus diferencias

Respiración aerobia. Concepto: Es un tipo de metabolismo energético en el que los

seres vivos extraen energía de moléculas orgánicas, como la glucosa, por un proceso
complejo en el que el carbono es oxidado y en el que el oxígeno procedente del aire es el
oxidante empleado.

La respiración anaeróbica (o anaerobia) es un proceso biológico

de oxidorreducción de monosacáridos y otros compuestos en el que el aceptor terminal de
electrones es una molécula inorgánica distinta del oxígeno,1 y más raramente una molécula
orgánica, a través de una cadena transportadora de electrones análoga a la de
la mitocondria en la respiración aeróbica.2 No debe confundirse con la fermentación, que es un
proceso también anaeróbico, pero en el que no participa nada parecido a una cadena
transportadora de electrones y el aceptor final de electrones es siempre una molécula
orgánica como el piruvato. La respiración anaerobia es un tipo de proceso
metabólico exclusivo de ciertos microorganismos procarióticos.

La fermentación es un proceso catabólico de oxidación incompleta, que no requiere

oxígeno, y cuyo producto final es un compuesto orgánico. Según los productos finales,
existen diversos tipos de fermentación.

El proceso de fermentación es anaeróbico, es decir, se produce en ausencia de oxígeno; ello

significa que el aceptor final de los electrones del NADHproducido en la glucólisis no es el
oxígeno, sino un compuesto orgánico que se reducirá para poder reoxidar el NADH a NAD+. El
compuesto orgánico que se reduce (acetaldehído, piruvato, ...) es un derivado del sustrato que
se ha oxidado anteriormente.
7.- ¿Qué son los medios de cultivo.

Medios de cultivo. Son una mezcla de nutrientes que, en

concentraciones adecuadas y en condiciones físicas óptimas, permiten
el crecimiento de los microorganismos. Son esenciales en el Laboratorio
de Microbiología por lo que un control en su fabricación, preparación,
conservación y uso, asegura la exactitud, confiabilidad y
reproducibilidad de los resultados obtenidos.

8.-¿Cómo se diseña un medio de cultivo?

I.- DISEÑO DE LOS MEDIOS DE CULTIVO

A la hora de diseñar un medio de cultivo no sólo hay que tener en cuenta los
nutrientes sino también las condiciones físicas que permitan el crecimiento de los
microorganismos.

1.- Aporte de nutrientes

La cantidad y naturaleza de los nutrientes en un medio de cultivo viene

determinada por el rendimiento de un producto en especial además de los
requerimientos nutricionales del microorganismo.

2.- pH

Un microorganismo puede alterar el pH del medio de cultivo como resultado de

las sustancias producidas por el propio microorganismo; por ejemplo:
Utilización de carbohidratos ----> Producción de ácidos orgánicos ---->
Acidificación

Catabolismo de proteínas ----> Producción de materiales nitrogenados ---->

Alcalinización

Estos cambios pueden llegar a ser tan grandes que inhiban el crecimiento del
microorganismo. Estos cambios se pueden prevenir controlando el pH mediante
sistemas tampón. Uno de los más utilizados en microbiología es la combinación
de KH2PO4 y K2HPO4 tamponando el medio a un pH de aproximadamente 6,8.

3.- Necesidades de gases

Los gases principales que afectan al desarrollo microbiano son el oxígeno y el

dióxido de carbono. Las bacterias presentan una respuesta amplia y variable al
oxígeno libre clasificándose en cuatro grupos:

i.- Aerobias: bacterias que se desarrollan en presencia de oxígeno libre.

ii.- Anaerobias: bacterias que se desarrollan en ausencia de oxígeno libre.
iii.- Anaerobias facultativas: bacterias que se desarrollan tanto en
presencia como en ausencia de oxígeno libre.

iv.- Microaerófilas: bacterias que crecen en presencia de pequeñas

cantidades de oxígeno libre.

Para desarrollar bacterias aerobias se incuban los medios de cultivo en agitación

constante o introduciendo aire estéril en el medio.

Los anaerobios estrictos son muy sensibles al O2 por lo que se debe evitar la
exposición de estos microorganismos al O2. Se puede obtener un ambiente de
anaerobiosis por los siguientes métodos:

A.- Agregando al medio de cultivo un compuesto reductor, como es el

tioglicolato sódico, para disminuir el contenido de O2.
B.- Quitando el O2 por procedimientos mecánicos y reemplazándolo por N2 o
CO2.
C.- Mediante reacciones químicas dentro del recipiente que contiene el medio de
cultivo inoculado para combinar el oxígeno libre con otro compuesto. Por
ejemplo: al encender una vela se transforma el oxígeno en dióxido de carbono.

4.- Suministro de luz

Los organismos fotosintéticos deberán ser expuestos a una fuente de iluminación
ya que la luz es su fuente de energía. Esta fuente de iluminación no debe plantear
problemas de variación de temperatura, por lo que suelen usarse lámparas
fluorescentes con un desprendimiento mínimo de calor.

5.- Control de la temperatura

El desarrollo de las bacterias depende de reacciones químicas, y la velocidad con

que se efectúan estas reacciones está influída por la temperatura, por lo que la
temperatura puede en parte determinar la velocidad de crecimiento de los
microorganismos. Cada especie microbiana posee una temperatura óptima de
crecimiento clasificándose según esto en los siguientes grupos:
i.- Psicrófilas: capaces de desarrollarse a 0° C o menos. Su temperatura
óptima es alrededor de los 15° C.
ii.- Mesófilas: crecen mejor entre 25 y 40° C.

iii.- Termófilas: crecen mejor entre 45 y 60° C.

6.- Otros requerimientos

Halófilas: bacterias que para su crecimiento requieren altas concentraciones de

sal (10 - 15%). Son aquellas bacterias aisladas del mar y ciertos alimentos.

Otras bacterias, como las aisladas en las fosas marinas, requieren presiones
superiores a las normales.

Método Fundamento Condiciones del equipo Tipo de material que es Precauciones

esterilizado

Esterilización en
autoclave

Esterilización en horno

Incineración

Esterilización por
filtración

Radiación UV

Radiación Gama