Un enfoque de química analítica verde para la

extracción de lípidos: métodos de cálculo en la

selección de solventes verdes como alternativa al
hexano.
Reflejos
•

Los disolventes verdes como clave sostenible para la preparación de

muestras en química analítica.
•

Gas licuado como solventes alternativos para la extracción de productos

naturales.
•

Los disolventes de base biológica como alternativa a los disolventes

derivados del petróleo.
Un procedimiento analítico comprende dos pasos: preparación de la muestra
principalmente extracción (Soxhlet, Dean-Stark, Likens-Nickerson, Blye & Dyer,
Folch, lixiviación , maceración, percolación) y análisis (espectrofotometría, cromatografía ,
espectrometría). Mientras que el análisis químico se termina después de unos minutos, la
extracción toma por lo menos varias horas y requiere un gran solventeVolúmenes que
consumen energía para concentrarse por evaporación para recuperar el extracto final. En
esta opinión actual, proporcionamos una imagen instantánea del conocimiento actual
sobre solventes ecológicos y alternativos utilizados en laboratorios analíticos para la
preparación de muestras y extracción de productos naturales en términos de innovación,
procedimientos originales y productos seguros. Discutimos cómo los disolventes de base
biológica, el agua en diferentes formas, los disolventes eutécticos profundos, el gas
licuado ya se han convertido en un tema importante en la preparación de muestras
en química analítica de productos naturales que reemplazan el petróleo y los disolventes
peligrosos.

Introducción
El solvente ideal para la preparación de muestras en química analíticaes sin duda "sin
solvente". El problema es que la mayoría de los métodos de análisis químico requieren la
introducción de muestras en forma líquida. La preparación de muestras siempre ha sido
considerada como el principal cuello de botella y el mayor paso de tiempo en el laboratorio
analítico cuando se realizan análisis, pero en general se acepta que también es la clave para
un análisis preciso. Preparación de la muestra en no solo la disolución de compuestos
objetivo en un solvente, que se utilizará directamente para el análisis. Incluye varios pasos
como muestreo, homogeneización, extracción, limpieza y concentración. El objetivo es
proporcionar una muestra homogénea y representativa para producir resultados
analíticamente precisos.
La extracción de solventes es una operación de unidad importante para la preparación de
muestras y obviamente es una preocupación principal debido a la toxicidad, volatilidad e
inflamabilidad de los solventes y representa una fuente principal de desechos químicos de
laboratorio . Los disolventes actualmente empleados en la extracción a menudo se
clasifican como COV (compuestos orgánicos volátiles) y tienen un impacto negativo en
HSE (Salud, Seguridad y Medio Ambiente)[1] . Debido a las renovadas normas
de toxicología y la continua ampliación de las listas de compuestos orgánicos volátiles
(COV) y compuestos CMR (carcinógeno mutagénico reprotóxico en la Unión Europea), la
sustitución del petróleo y los solventes peligrosos es una preocupación principal para los
químicos analíticos.
El objetivo de la preparación de esta opinión actual es proporcionar una imagen
instantánea del conocimiento actual sobre solventes ecológicos y alternativos
utilizados en los laboratorios analíticos para la preparación de muestras y la
extracción de productos naturales en términos de innovación, procedimientos
originales y productos seguros ( Fig. 1 ).

El agua como disolvente con geometría variable.

Las ventajas de usar agua como solvente alternativo para la extracción incluyen un costo
económico reducido, impacto ambiental, uso de equipos simples, sin riesgos, un inicio más
rápido y simplificación de los pasos del proceso ( Tabla 1 ).
Tabla 1 . El agua como disolvente verde para la extracción.
Analitos Materiales Tecnicas Condiciones Referencia

Polifenoles Chokeberry Seco Maceración 170 pm, TA, 50% de [2]

convencional EtOH, relación 1:20, 90
min

Licopeno Cáscaras De Extracción de Pancreatina 10 mg ml- 1 , [3]

TomateSolanum enzimas 1: 5 w / l, cáscaras /
agua, 37 C, pH 6.5, 20
min

Compuestos molino de oliva Extracción 10% de Triton X-100 a 90 [4]

fenólicos aguas residuales micelar ° C 30 min

Polifenoles Cultivares Vine Extracción 37,7 mg / ml de [5]

Shoot hidrotropo disolvente de β-
ciclodextrina acuoso, 48
h a 66,6 ° C

curcumina Curcuma longa Extracción de 10 bar, 140 ° C, tamaño [6]

agua subcrítica de partícula 0,71 mm,
(SWE) tiempo de retención 14
min, agua pura
La maceración es un método de extracción muy antiguo y simple, que consiste en remojar
la matriz vegetal en un disolvente como el agua. Se usa todos los días, desde una simple
taza de té hasta la producción industrial de varios compuestos bioactivos
como antocianinas , polifenoles ... La maceración de la matriz de la planta con agua se
puede realizar con diferentes procedimientos relacionados con la temperatura y las técnicas.
El agua es altamente polar y es un solvente débil para la mayoría de los compuestos
orgánicos en condiciones ambientales, pero elevar la temperatura significativamente por
encima de la temperatura ambiente, a una presión suficientemente alta para mantener el
agua en estado líquido , permite cambiar las propiedades físicas y químicas
considerablemente [7] . Este dominio se llama agua subcrítica; la temperatura y la presión
deben estar entre 100 y 374 ° C, y entre 1 y 221 bar, respectivamente. Entre las propiedades
variables del agua, la constante dieléctrica ε puede impactar fuertemente en el poder del
solvente del agua. A 250 ° C y 50 bar, el agua tiene una constante dieléctrica equivalente a
la del etanol (ε = 27), cerca del metanol.(ε = 33) a 25 ° C y 1 bar. En estas condiciones, el
agua es capaz de solubilizar más moléculas apolares. Por lo tanto, al ajustar la temperatura
del agua a alta presión, podemos adaptar su polaridad y las moléculas objetivo de interés
para la extracción.
Las enzimas se pueden usar como aditivos en los procesos de extracción de agua para
mejorar el proceso de ruptura de la pared celular [8] . Varias enzimas como las celulasas,
pectinasas y hemicelulasas se usan a menudo para romper la pared celular vegetal,
mejorando así la extracción de compuestos bioactivos de las plantas. Para utilizar
eficientemente las enzimas para aplicaciones de extracción, es importante comprender sus
propiedades, modo de acción y condiciones operativas específicas. La extracción
enzimática no es el único método que utiliza aditivos para agua para mejorar las
extracciones de productos naturales en agua. El método de extracción asistida por micelas
utiliza aditivos surfactantes . Esta técnica tiene como objetivo utilizar las propiedades de los
surfactantes para formar micelas., creando fases apolares dispersas en agua. Esto permite
aumentar la solubilidad de las moléculas hidrófobas en el agua [9] . Por encima
de la temperatura del punto de nube (CP), las micelas formadas por las moléculas de
surfactante se vuelven inestables y se descomponen. Se forman dos fases: una fase rica en
surfactante (a un volumen muy pequeño) y una fase de solución acuosa de mayor
volumen (en volumen) con una concentración de surfactante diluido, que se aproxima a su
concentración crítica de micelas (CMC). Los analitos hidrófobos de la solución se extraen
en el pequeño volumen de la fase rica en surfactante en una cantidad mayor.
Si bien la extracción micelar es similar a un método de extracción en fase de dos líquidos,
la extracción hidrotrópica solo involucra una fase líquida continua . Este método
utiliza moléculas orgánicas llamadas hidrótropos. Son moléculas orgánicas cortas con una
estructura comparable a los surfactantes: tienen una parte lipófila e hidrófila. Sin embargo,
a diferencia de los surfactantes, no pueden formar micelas. La hidrotropía se describe como
un aumento de la solubilidad de las moléculas hidrófobas en agua mediante la adición de
moléculas orgánicas solubles en agua. Los hidrótropos pueden no formar micelas, pero
pueden, sin embargo, agregarse según sus áreas de afinidad [10] . Asistida por
hidrótropo solubilizaciónSe realiza mediante la agregación de hidrótropos alrededor de
moléculas hidrófobas. La extracción hidrotrópica se basa principalmente en la adición de
suficientes hidrótropos en la solución.
Disolventes de base biológica: de residuos a disolventes.
Los disolventes de base biológica se pueden clasificar en tres clases, según el sector
agrario: cereal / azúcar, aceite-proteagino y madera. Los disolventes de base biológica
derivados del sector de cereales / azúcar se obtienen principalmente de la fermentación
natural de los jugos dulces contenidos en plantas como la remolacha azucarera , la caña de
azúcar, el trigo, el maíz, etc. El etanol derivado de vegetales, llamado bioetanol, se produce
aproximadamente el 60% de Caña de azúcar y 40% de otros cultivos [11] . Además,
la fermentación de la glucosaofrece muchas posibilidades para producir algunas moléculas,
que podrían usarse como disolventes de base biológica como el sorbitol,
los ésteres del ácido láctico (lactato de etilo), los derivados deácido succínico , etc. [12] . Al
menos, los residuos de lignocelulosa derivados de la producción de cereales, especialmente
de paja, y los desechos de madera pueden explotarse para la producción de furfural , que
recientemente se ha destacado como uno de los productos químicos de mayor valor
agregado, derivado de la biomasa . La hidrogenación deFurfural puede llevar a la
formación de disolventes como el 2-metiltetrahidrofurano, que aparece como una buena
alternativa potencial para la sustitución del hexano en la extracción de aceite vegetal [13] y
aromas[1] .
La oleo-química, que incluye todo el sector oleo-proteagineous, permite producir solventes
a partir de semillas ricas en aceites vegetales, como la colza, el girasol y la soja. Las
principales moléculas bio-basadas obtenidas son ésteres de ácidos grasos y derivados
de glicerol .
Los disolventes de base biológica obtenidos del sector de la madera se producen
principalmente a partir de coníferas como pinos o cáscaras de frutas. Los principales
solventes nativos de este sector son los hidrocarburos terpenos , los tipos C 10 H 16 , el
terpeno monocíclico ( D -limoneno) y el terpeno bicíclico (α- y β-pinene). El limoneno se
obtiene con mayor frecuencia mediante la destilación a vapor de subproductos,
principalmente cáscaras generadas por la industria del jugo de naranja. El α-pineno y el β-
pineno se producen por destilación al vapor de oleorresinas contenidas en pinos o se pueden
extraer de la goma de trementina, una clase de aceite esencial destilado de la goma de pino
o licor negro de las fábricas de papel ( Tabla 2 )[20] .
Tabla 2 . Agrosolventes procedentes de diferentes sectores agro para extracción.
Sector Agrosolventes Materiales Tecnicas Analitos Referencia

Azúcar Etil lactato Las flores ASE un Polifenoles [14]

Acetato de Algas Bligh y Dyer Lípidos [15]

etilo

Madera / Limoneno Microorganismos Plaza bursátil Lípidos [dieciséis]

frutas norteamericana

Aceite Girasol Zanahoria Ultrasonido Carotenoides [17]

vegetal
 Sector Agrosolventes Materiales Tecnicas Analitos Referencia

Química DMC b Levadura Maceración Lípidos [18]

verde
CPME c Mangostana Reflujo calentado Polifenoles [19]

una

ASE: Extracción Acelerada De Solventes.

segundo

DMC: carbonato de diMetilo.

do

CPME: CycloPentyl Methyl Ether.

Líquidos iónicos (IL) y disolventes eutécticos profundos (DES)

Las mezclas específicas de sustancias químicas sólidas pueden volverse líquidas en ciertas
condiciones: ese es el caso de los líquidos iónicos (IL) y los disolventes eutécticos
profundos. Los líquidos iónicos (IL) son sales orgánicas en estado líquido en condiciones
ambientales que consisten en un catión orgánico y un anión orgánico o inorgánico , con
bajos puntos de fusión , generalmente por debajo de 100 ° C. Las IL son capaces de
disolver una amplia gama de compuestos polares a no polares, tienen una baja presión de
vapor , muestran una alta estabilidad térmica y una baja combustibilidad , y algunos de
ellos son biodegradables [21]. Muchas IL son estables en amplios rangos de temperatura y
tienen una cantidad casi ilimitada de combinación catión-anión.
Los DES son mezclas de sólidos que tienen puntos de fusión muy por debajo de los puntos
de fusión de cada compuesto, por lo general también por debajo de 100 ° C. El DES se
puede obtener mezclando dos sólidos, por ejemplo una mezcla de cloruro de colina (punto
de fusión 302 ° C) con urea (punto de fusión 133 ° C) con una relación molar de 1: 2, lo
que da como resultado un DES con un punto de fusión de solo 12 ° C. El DES más común
se basa en cloruro de colina, ácidos carboxílicos , y otros de enlaces de hidrógeno donantes,
tales como urea, ácido cítrico, ácido succínicoy glicerol [22]. Los disolventes naturales
eutécticos profundos (NADES) son compuestos de sustancias naturales, en
particularmetabolitosprimarios , comoÁcidos orgánicos , aminoácidos y azúcares. Poseen
mejores propiedades para la extracción que el DES: estado líquido por debajo de 0 ° C,
viscosidad ajustable, sostenibilidad y muestran unacapacidad desolubilizaciónmuy altade
compuestos polares y no polares. NADES se ha vuelto cada vez más popular para la
extracción de compuestos naturales de plantas, alimentos y otras matrices naturales[23]
Gases licuados: desde la extracción de fluidos supercríticos a subcríticos.
Gas licuado tal como CO 2 ya es una alternativa prometedora a los
convencionales disolventes tales como hexano o diclorometano . En las últimas décadas,
han ganado cada vez más atención de los químicos porque ofrecen varias ventajas
operacionales sobre las técnicas tradicionales. Un fluido supercrítico se define como un
fluido por encima de su presión y temperatura críticas . En estas condiciones, las fases
líquida y gaseosa de un compuesto puro son indistinguibles entre sí. Las principales
características de los SCFs.Son la posibilidad de modificar la densidad del fluido,
directamente relacionada con la solubilidad, cambiando su presión y / o su temperatura,
 permitiendo la extracción selectiva. De hecho, la potencia del disolvente del fluido puede
modificarse cambiando la presión de extracción [5]. El fluido supercrítico más utilizado es
eldióxido de carbono(CO2) debido a su temperatura crítica moderada (31.3 ° C) y presión
(72.9 atm). Además, tiene ventajas significativas como GRAS (generalmente reconocido
como seguro), inerte, no inflamable, ambientalmente sostenible, fácilmente disponible y
solvente de bajo costo[24]. El supercrítico-CO2se ha utilizado como disolvente para la
extracción de aceites esenciales,aceites vegetalesy grasas animales de diversas fuentes. Se
ha utilizado también para laextracción de lípidos algales .
Otros gases licuados también se pueden usar como solventes para la extracción de
productos naturales. Los gases comprimidos o licuados pueden disolver sustancias
naturales a temperaturas relativamente bajas como los disolventes orgánicos normales . La
volatilidad de los solventes comprimidos ofrece dos ventajas sobre los solventes orgánicos
más convencionales: solvente residual bajo y menos deterioro de los componentes
térmicamente lábiles en el extracto. Muchos estudios han reportado el uso de gases licuados
como solvente, como propano [25] , dimetil éter [26] y n-butano [27] . Recientemente,
Celsius Sarl (Villette de Vienne, Francia) ha diseñado un nuevo proceso para los gases
licuados ( Fig. 2). La especificidad de este equipo es la ausencia de bomba y compresor que
reducen el consumo de energía. La viabilidad de este proceso se ha demostrado utilizando
n-butano como disolvente alternativo al n-hexano para la extracción de compuestos
lipófilos [28] . Soares et al. [29] han demostrado que el gas de petróleo licuado
comprimido es más prometedor que el CO 2 supercrítico para la extracción de aceite de
salvado de arroz.

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Figura 2 . Instalación de extracción de gas licuado.
Futuras tendencias
En el siglo XX, la elección de qué solvente se debe usar para realizar la extracción de
un metabolito deseado de una planta específica tiene que ser el resultado de un compromiso
entre la eficiencia y la reproducibilidad de la extracción, la facilidad del procedimiento y
las consideraciones de costo. , tiempo, seguridad y grado de automatización. Hoy en día, la
elección del solvente también está relacionada con el origen del solvente, el petróleo o la
base biológica, el impacto ambiental y el efecto toxicológico. En esta revisión, hemos
discutido cómo los disolventes de base biológica, el agua en diferentes formas, los
disolventes eutécticos profundos, el gas licuado ya se han convertido en un tema importante
en la preparación de muestras en química analítica de productos naturales.
Una de las grandes historias de éxito de los solventes verdes en la preparación de muestras
para química analítica ha sido la evolución de los sistemas sin solventes que traducen
directamente el conocimiento en tecnología y productos comerciales. El problema es que
no hay un proceso de extracción universal con solvente universal; La polaridad y
complejidad de las moléculas diana necesitan una variedad de disolventes. Si pudiéramos
reemplazar solo algunos solventes como el hexano , que es uno de los solventes principales
para la extracción de Soxhlet, o el tolueno usado para el método Dean-Stark, o el metanol y
el cloroformo para el procedimiento de Blye & Dyer, reduciríamos los costos del
tratamiento con solvente y Así evitamos efectos adversos sobre los humanos y el medio
ambiente

Resumen
Existe un gran interés en encontrar alternativas y solventes verdes en los procesos de
extracción para reemplazar los solventes a base de petróleo. Para investigar estas
posibilidades, se utilizaron métodos computacionales, como los parámetros de solubilidad de
Hansen (HSP) y el modelo de detección tipo conductor para solvente real (COSMO-RS), para
predecir el poder de solvatación de una serie de solventes en salmón. lípidos Además, se
utilizaron estudios experimentales para evaluar el rendimiento en la extracción de lípidos
utilizando 2-metiltetrahidrofurano, ciclopentil metil éter, carbonato de dimetilo, isopropanol,
etanol, acetato de etilo, p-cimeno y d-limoneno en comparación con hexano. Las clases de
lípidos de los extractos se obtuvieron mediante cromatografía de capa fina de alto rendimiento
(HPTLC), mientras que la cromatografía de gases con un detector de ionización de llama (GC
/ FID) se empleó para obtener perfiles de ácidos grasos. Se observaron algunas diferencias
entre los resultados teóricos y experimentales, especialmente con respecto al comportamiento
del p-cimeno y el d-limoneno, que se separan de la capacidad predicha. Los resultados
obtenidos de HPTLC indicaron que los triglicéridos (TAG) y diglicéridos (DAG) de p-cimeno y
d-limoneno a niveles de 73 y 19%, respectivamente, mientras que los otros extractos
estudiados contienen entre 75 y 76% de TAG y entre 16 y 16%. 17% de los DAG. Los perfiles
de ácidos grasos, obtenidos mediante el uso de GC-FID, indicaron que los ácidos grasos
saturados (SFA) entre el 19,5 y el 19,9% del aceite extraído, los ácidos grasos
monoinsaturados (MUFA) se encuentran en el rango entre el 43,5 y el 44,9%, y los PUFA
entre el 31,2 y el 34,6%. fueron extraídos. Los extractos de p-cimeno y limoneno contenían
porcentajes más bajos que los otros solventes estudiados de algunos PUFA, probablemente
debido al hecho de que estos ácidos grasos insaturados son más susceptibles a la
degradación oxidativa que los MUFA. Se ha encontrado que el acetato de etilo es el mejor
disolvente alternativo al hexano para la extracción de lípidos de aceite de salmón. Resumen
gráfico ᅟ