TUGAS BAKTERIOLOGI

CARA PEMBUATAN MEDIA

OLEH :

WINA MARTHALIA
(P27834013046)

DOSEN PEMBIMBING :

1. Suliati, S.Pd, S.Si, M.Kes

2. Hj. Pestariati, S.Pd, M.Kes
3. Dwi Krihariyani, S.Si, M.Kes

D3 ANALIS KESEHATAN
POLITEKNIK KESEHATAN KEMENKES SURABAYA
TAHUN AJARAN 2013-2014
 MEDIA PERTUMBUHAN BAKTERI

Media adalah suatu campuran yang terdiri atas nutrisi yang dipergunakan untuk
menumbuhkan, mengembangbiakkan, memperbanyak, menghambat, mengetahui morfologi,
identifikasi, karakteristik dan sensitivitas suatu obat antibiotik serta lain-lain pada
mikroorganisme

Mikroorganisme memanfaatkan nutrisi yang disediakan dari media berupa molekul

molekul yang seharusnya dirakit untuk menyusun komponen sel dan memperbanyak diri
sehingga sel-sel tersebut dapat dimanfaatkan. Dengan adanya media pertumbuhan dapat
dilakukan isolasi mikroorganisme menjadi kultur tunggal dan juga memanipulasi
mikroorganisme yang didapatkan untuk kepentingan tertentu. Berdasar jenisnyaterdapat
media padat, cair, dan setengah padat.

Macam-macam media :

 Media Transport
 Media Pemupuk
 Media Diferensial
 Media Selektif
 Media Biokimia

Cara Pembuatan Media

 Media Pemupuk
1. Media NaCl Broth
 Menyiapkan alat dan bahan yang dibutuhkan
 Menghitung kebutuhan media NaCl Broth yang akan ditimbang
 Menimbang semua bahan media NaCl Broth sesuai kebutuhan dengan
komposisi :
1) Air daging / Beef extract 100 mL
2) Peptone 10 g / L
3) Sodium chlorida 10 g / L
4) Aquadest 1000 mL
  Melarutkan semua bahan media NaCl Broth ke dalam erlenmeyer dengan
bilasan aquadest sedikit demi sedikit hingga tidak ada media yang tersisa pada
wadah timbang (petridis)
 Memanaskan media yang telah dilarutkan, diatas api spiritus (sesekali
erlenmeyer digoyang-goyangkan) hingga media menjadi jernih
 Menyaring media ( setelah media menjadi dingin )
 Menyesuaikan pH media dengan kertas indikator ( pH NaCl Broth : 7,4 )
 Mensterilisasi media NaCl Broth dengan autoklaf pada suhu stabil 1210C
selama 15 menit
 Media siap digunakan sebagai media pemupuk atau bisa menyimpan media
dalam kulkas

2. Media Selenite Broth

 Menyiapkan alat dan bahan yang dibutuhkan
 Mensterilkan semua alat dan bahan (aquadest) yang akan digunakan dengan
autoclaf pada suhu konstan 1210C selama 15 menit.
 Menghitung kebutuhan media Selenite Broth yang akan ditimbang
 Menimbang semua bahan media Selenite Both sesuai kebutuhan dengan
komposisi :
1) Sodium hydrogen selenite 0,4 %
2) Sodium phospate 1,0 %
3) Peptone 0,5 %
4) Lactose 0,4 %
 Melarutkan semua bahan media Selenite Broth ke dalam erlenmeyer dengan
bilasan aquadest sedikit demi sedikit hingga tidak ada media yang tersisa pada
wadah timbang (petridis)
 Memanaskan media yang telah dilarutkan, diatas api spiritus (sesekali
erlenmeyer digoyang-goyangkan) hingga media menjadi jernih
 Menyaring media
 Menyesuaikan pH media dengan kertas indikator ( pH Selenite Broth: 7,1  0,2)
 Media siap digunakan sebagai media pemupuk atau bisa menyimpan media
dalam kulkas pada suhu 40 C.
 3. Media Bouillon
 Menyiapkan alat dan bahan yang dibutuhkan
 Menghitung kebutuhan media Bouillon yang akan ditimbang
 Menimbang semua bahan media Bouillon sesuai kebutuhan dengan komposisi :
1) Air daging / Beef extract 1000 mL
2) Peptone 10 g / L
3) Sodium chlorida 5g/L
4) Aquadest 1000 mL
 Melarutkan semua bahan media Bouillon ke dalam erlenmeyer dengan bilasan
aquadest sedikit demi sedikit hingga tidak ada media yang tersisa pada wadah
timbang (petridis)
 Memanaskan media yang telah dilarutkan, diatas api spiritus (sesekali
erlenmeyer digoyang-goyangkan) hingga media menjadi jernih
 Menyaring media ( setelah media menjadi dingin )
 Menyesuaikan pH media dengan kertas indikator ( pH Bouillon : 7,2 – 7,4)
 Mensterilisasi media Bouillon dengan autoklaf pada suhu stabil 1210C selama
15 menit
 Media siap digunakan sebagai media pemupuk atau bisa menyimpan media
dalam kulkas

 Media Diferensial
1. Media Mac-Conkey
 Menyiapkan alat dan bahan yang dibutuhkan
 Menghitung kebutuhan media Mac Conkey yang akan ditimbang
 Menimbang serbuk media Mac Conkey sesuai kebutuhan
 Melarutkan serbuk media Mac Conkey ke dalam erlenmeyer dengan bilasan
aquadest sedikit demi sedikit hingga tidak ada media yang tersisa pada wadah
timbang (petridis)
 Memanaskan media yang telah dilarutkan, diatas api spiritus (sesekali
erlenmeyer digoyang-goyangkan) hingga media menjadi jernih
 Menyesuaikan pH media dengan kertas indikator ( pH Mac Conkey : 7,4  0,2 )
 Mensterilisasi media Mac Conkey dengan autoklaf pada suhu stabil 1210C
selama 15 menit
  Mendistribusikan media Mac Conkey ke dalam petridis steril dengan tindakan
yang steril

2. Media BAP (Blood Agar Plate)

 Menyiapkan alat dan bahan yang dibutuhkan
 Menghitung kebutuhan Blood Agar Base yang akan ditimbang
 Menimbang serbuk media Blood Agar Base sesuai kebutuhan
 Melarutkan serbuk media Blood Agar Base ke dalam erlenmeyer dengan
bilasan aquadest sedikit demi sedikit hingga tidak ada media yang tersisa pada
wadah timbang (petridis)
 Memanaskan media yang telah dilarutkan, diatas api spiritus (sesekali
erlenmeyer digoyang-goyangkan) hingga media menjadi jernih
 Menyesuaikan pH media dengan kertas indikator ( pH media BAP: 7,3  0,2 )
 Mensterilisasi media Blood Agar Base dengan autoklaf pada suhu stabil 1210C
selama 15 menit
 Mendinginkan media hingga suhu 50 - 600C
 Menambahkan darah sebanyak 7 % dari jumlah media dan menghomogenkan
media
 Mendistribusikan media BAP ke dalam petridis steril dengan tindakan yang
steril

3. Media NA (Nutrient agar)

 Menyiapkan alat dan bahan yang dibutuhkan
 Menghitung kebutuhan media NA yang akan ditimbang
 Menimbang serbuk media NA sesuai kebutuhan
 Melarutkan serbuk media NA ke dalam erlenmeyer dengan bilasan aquadest
sedikit demi sedikit hingga tidak ada media yang tersisa pada wadah timbang
(petridis)
 Memanaskan media yang telah dilarutkan, diatas api spiritus (sesekali
erlenmeyer digoyang-goyangkan) hingga media menjadi jernih
 Menyesuaikan pH media dengan kertas indikator ( pH NAS :7,4  0,2 )
 Mensterilisasi media NA dengan autoklaf pada suhu stabil 1210C selama 15
menit
  Mendistribusikan media NA ke petridish steril dengan tindakan yang steril

4. Media EMB (Eosin Methylen Blue)

 Menyiapkan alat dan bahan yang dibutuhkan
 Menghitung kebutuhan media EMB yang akan ditimbang
 Menimbang serbuk media EMB sesuai kebutuhan
 Melarutkan serbuk media EMB ke dalam erlenmeyer dengan bilasan aquadest
sedikit demi sedikit hingga tidak ada media yang tersisa pada wadah timbang
(petridis)
 Memanaskan media yang telah dilarutkan, diatas api spiritus (sesekali
erlenmeyer digoyang-goyangkan) hingga media menjadi jernih
 Menyesuaikan pH media dengan kertas indikator ( pH EMB : 6,8  0,2 )
 Mensterilisasi media EMB dengan autoklaf pada suhu stabil 1210C selama 15
menit
 Mendistribusikan media EMB ke dalam petridis steril dengan tindakan yang
steril

 Media Selektif
1. Media SSA (Salmonella Shigella Agar)
 Menyiapkan alat dan bahan yang dibutuhkan
 Menghitung kebutuhan media SSA yang akan ditimbang
 Menimbang serbuk media SSA sesuai kebutuhan
 Melarutkan serbuk media SSA ke dalam erlenmeyer dengan bilasan aquadest
sedikit demi sedikit hingga tidak ada media yang tersisa pada wadah timbang
(petridis)
 Memanaskan media yang telah dilarutkan, diatas api spiritus (sesekali
erlenmeyer digoyang-goyangkan) hingga media menjadi jernih
 Menyesuaikan pH media dengan kertas indikator ( pH SSA : 7,0  0,2)
 Mensterilisasi media SSA dengan autoklaf pada suhu stabil 1210C selama 15
menit
 Mendistribusikan media SSA ke dalam petridis steril dengan tindakan yang
steril
2. Media MSA (Mannitol Salt Agar)
 Menyiapkan alat dan bahan yang dibutuhkan
 Menghitung kebutuhan media MSA dan bacteriological peptone 1 % dari
volume total MSA yang akan ditimbang
 Menimbang serbuk media MSA sesuai kebutuhan dan bacteriological peptone
 Melarutkan serbuk media MSA ke dalam erlenmeyer dengan bilasan aquadest
sedikit demi sedikit hingga tidak ada media yang tersisa pada wadah timbang
(petridis)
 Melarutkan bacteriological peptone ke dalam erlenmeyer dengan bilasan
aquadest sedikit demi sedikit hingga tidak ada media yang tersisa pada wadah
timbang (petridis)
 Memanaskan media yang telah dilarutkan, diatas api spiritus (sesekali
erlenmeyer digoyang-goyangkan) hingga media menjadi jernih
 Menyesuaikan pH media dengan kertas indikator ( pH MSA : 7,5  0,2 )
 Mensterilisasi media MSA dengan autoklaf pada suhu stabil 1210C selama 15
menit
 Mendistribusikan media MSA ke dalam petridis steril dengan tindakan yang
steril
 Mendinginkan media MSA dan menyimpan media dalam kulkas

3. Media TSIA (Triple Sugar Iron agar)

 Menyiapkan alat dan bahan yang dibutuhkan
 Menghitung kebutuhan media TSIA yang akan ditimbang
 Menimbang serbuk media TSIA sesuai kebutuhan
 Melarutkan serbuk media TSIA ke dalam erlenmeyer dengan bilasan aquadest
sedikit demi sedikit hingga tidak ada media yang tersisa pada wadah timbang
(petridis)
 Memanaskan media yang telah dilarutkan, diatas api spiritus (sesekali
erlenmeyer digoyang-goyangkan) hingga media menjadi jernih
 Menyesuaikan pH media dengan kertas indikator ( pH media TSIA: 7,4  0,2 )
 Mensterilisasi media TSIA dengan autoklaf pada suhu stabil 1210C selama 15
menit
  Mendistribusikan media ke dalam tabung biokimia steril dengan tindakan yang
steril
 Memiringkan media TSIA hingga membentuk lereng dan dasar

 Media Biokimia reaksi

1. Media Gula-Gula
 Media Glukosa
 Menyiapkan alat dan bahan yang dibutuhkan
 Menghitung kebutuhan media Glukosa yang akan ditimbang
 Menimbang serbuk media Glukosa sesuai kebutuhan
 Membuat Air peptone :
1) Melarutkan Air peptone ( Bakteriological Pepton 10 g/L dan NaCl 5 10
g/L) dengan bilasan aquades
2) Memanaskan Air Peptone hingga jernih
3) Mengecek pH Air Pepton ( pH : 7,2 – 7,4 )
 Melarutkan media Glukosa dengan Air peptone sesuai volume yang ditentukan
 Memanaskan media Glukosa yang telah dilarutkan, diatas api spiritus (sesekali
erlenmeyer digoyang-goyangkan) hingga media menjadi jernih
 Menyesuaikan pH media dengan kertas indikator (pH media Glukosa:7,2– 7,4)
 Menambahkan indikator BTB 0,4 % sebanyak 0,5 mL
 Mendistribusikan media Glukosa ke dalam tabung biokimia dengan tindakan
yang steril masing-masing 4 mL
 Memasukkan tabung durham ke dalam tabung media Glukosa: tidak ada
gelembung
 Mensterilisasi media Glukosa dengan autoklaf pada suhu stabil 1210C selama
15 menit
 Mendiamkan media Glukosa hingga dingin dan menyimpan media ke dalam
kulkas
 Tutup tabung biokimia untuk media Glukosa adalah kapas berlemak berwarna
merah

 Media Laktosa
 Menyiapkan alat dan bahan yang dibutuhkan
 Menghitung kebutuhan media Lactosa yang akan ditimbang
  Menimbang serbuk media Lactosa sesuai kebutuhan
 Membuat Air peptone :
1) Melarutkan Air peptone ( Bakteriological Pepton 10 g/L dan NaCl 5 10
g/L) dengan bilasan aquades
2) Memanaskan Air Peptone hingga jernih
3) Mengecek pH Air Pepton ( pH : 7,2 – 7,4 )
 Melarutkan media Lactosa dengan Air peptone sesuai volume yang ditentukan
 Memanaskan media Lactosa yang telah dilarutkan, diatas api spiritus (sesekali
erlenmeyer digoyang-goyangkan) hingga media menjadi jernih
 Menyesuaikan pH media dengan kertas indikator (pH media Lactosa:7,2 – 7,4)
 Menambahkan indikator BTB 0,4 % sebanyak 0,5 mL
 Mendistribusikan media Lactosa ke dalam tabung biokimia dengan tindakan
yang steril masing-masing 4 mL
 Memasukkan tabung durham ke dalam tabung media Lactosa: tidak ada
gelembung
 Mensterilisasi media Lactosa dengan autoklaf pada suhu stabil 1210C selama
15 menit
 Mendiamkan media Lactosa hingga dingin dan menyimpan media ke dalam
kulkas
 Tutup tabung biokimia untuk media Lactosa adalah kapas berlemak berwarna
kuning

 Media Sukrosa
 Menyiapkan alat dan bahan yang dibutuhkan
 Menghitung kebutuhan media Sukrosa yang akan ditimbang
 Menimbang serbuk media Sukrosa sesuai kebutuhan
 Membuat Air peptone :
1) Melarutkan Air peptone ( Bakteriological Pepton 10 g/L dan NaCl 5 10
g/L) dengan bilasan aquades
2) Memanaskan Air Peptone hingga jernih
3) Mengecek pH Air Pepton ( pH : 7,2 – 7,4 )
 Melarutkan media Sukrosa dengan Air peptone sesuai volume yang ditentukan
 Memanaskan media Sukrosa yang telah dilarutkan, diatas api spiritus (sesekali
erlenmeyer digoyang-goyangkan) hingga media menjadi jernih
  Menyesuaikan pH media dengan kertas indikator (pH media Sukrosa:7,2– 7,4)
 Menambahkan indikator BTB 0,4 % sebanyak 0,5 mL
 Mendistribusikan media Sukrosa ke dalam tabung biokimia dengan tindakan
yang steril masing-masing 4 mL
 Memasukkan tabung durham ke dalam tabung media Sukrosa: tidak ada
gelembung
 Mensterilisasi media Sukrosa dengan autoklaf pada suhu stabil 1210C selama
15 menit
 Mendiamkan media Sukrosa hingga dingin dan menyimpan media ke dalam
kulkas
 Tutup tabung biokimia untuk media Sukrosa adalah kapas berlemak berwarna
biru

 Media Maltosa
 Menyiapkan alat dan bahan yang dibutuhkan
 Menghitung kebutuhan media Maltosa yang akan ditimbang
 Menimbang serbuk media Maltosa sesuai kebutuhan
 Membuat Air peptone :
1) Melarutkan Air peptone ( Bakteriological Pepton 10 g/L dan NaCl 5 10
g/L) dengan bilasan aquades
2) Memanaskan Air Peptone hingga jernih
3) Mengecek pH Air Pepton ( pH : 7,2 – 7,4 )
 Melarutkan media Maltosa dengan Air peptone sesuai volume yang ditentukan
 Memanaskan media Maltosa yang telah dilarutkan, diatas api spiritus (sesekali
erlenmeyer digoyang-goyangkan) hingga media menjadi jernih
 Menyesuaikan pH media dengan kertas indikator (pH media Maltosa:7,2– 7,4)
 Menambahkan indikator BTB 0,4 % sebanyak 0,5 mL
 Mendistribusikan media Maltosa ke dalam tabung biokimia dengan tindakan
yang steril masing-masing 4 mL
 Memasukkan tabung durham ke dalam tabung media Maltosa: tidak ada
gelembung
 Mensterilisasi media Maltosa dengan autoklaf pada suhu stabil 1210C selama
15 menit
  Mendiamkan media Maltosa hingga dingin dan menyimpan media ke dalam
kulkas
 Tutup tabung biokimia untuk media Maltosa adalah kapas berlemak berwarna
hijau

 Media Mannosa
 Menyiapkan alat dan bahan yang dibutuhkan
 Menghitung kebutuhan media Manosa yang akan ditimbang
 Menimbang serbuk media Manosa sesuai kebutuhan
 Membuat Air peptone :
1) Melarutkan Air peptone ( Bakteriological Pepton 10 g/L dan NaCl 5 10
g/L) dengan bilasan aquades
2) Memanaskan Air Peptone hingga jernih
3) Mengecek pH Air Pepton ( pH : 7,2 – 7,4 )
 Melarutkan media Manosa dengan Air peptone sesuai volume yang ditentukan
 Memanaskan media Manosa yang telah dilarutkan, diatas api spiritus (sesekali
erlenmeyer digoyang-goyangkan) hingga media menjadi jernih
 Menyesuaikan pH media dengan kertas indikator (pH media Manosa:7,2 – 7,4)
 Menambahkan indikator BTB 0,4 % sebanyak 0,5 mL
 Mendistribusikan media Manosa ke dalam tabung biokimia dengan tindakan
yang steril masing-masing 4 mL
 Memasukkan tabung durham ke dalam tabung media Manosa: tidak ada
gelembung
 Mensterilisasi media Manosa dengan autoklaf pada suhu stabil 1210C selama
15 menit
 Mendiamkan media Manosa hingga dingin dan menyimpan media ke dalam
kulkas
 Tutup tabung biokimia untuk media Manosa adalah kapas berlemak berwarna
putih

2. Media MR/VP
 Menyiapkan alat dan bahan yang dibutuhkan
 Menghitung kebutuhan media MR-VP yang akan ditimbang
 Menimbang media MR-VP sesuai kebutuhan dengan komposisi :
 1) Pepton 7,0 g/L
2) Glukosa 5,0 g/L
3) K2PO4 5,0 g/L
4) Aquadest 1000 mL
 Melarutkan semua bahan media MR-VP ke dalam erlenmeyer dengan bilasan
aquadest sedikit demi sedikit hingga tidak ada media yang tersisa pada wadah
timbang (petridis)
 Memanaskan media yang telah dilarutkan, diatas api spiritus (sesekali erlenmeyer
digoyang-goyangkan) hingga media menjadi jernih
 Menyesuaikan pH media dengan kertas indikator ( pH media MR-VP: 6,9  0,2 )
 Mendistribusikan media MR-VP ke dalam tabung biokimia dengan tindakan yang
steril
 Mensterilisasi media MR-VP dengan autoklaf pada suhu stabil 1210C selama 15
menit
 Mendiamkan media MR-VP hingga dingin dan menyimpan media ke dalam
kulkas

3. Media Indole
 Menyiapkan alat dan bahan yang dibutuhkan
 Menghitung kebutuhan media Indol yang akan ditimbang
 Menimbang bahan media Indol sesuai kebutuhan dengan komposisi :
1) Bacteriological pepton 10 g/L
2) NaCl 5 g/L
3) Aquadest 1000 mL
 Melarutkan semua bahan Indol ke dalam erlenmeyer dengan bilasan aquadest
sedikit demi sedikit hingga tidak ada media yang tersisa pada wadah timbang
(petridis)
 Memanaskan media yang telah dilarutkan, diatas api spiritus (sesekali erlenmeyer
digoyang-goyangkan) hingga media menjadi jernih
 Menyesuaikan pH media dengan kertas indikator ( pH media Indol: 7,2 – 7,4)
 Mendistribusikan media Indol ke dalam tabung biokimia dengan tindakan yang
steril
  Mensterilisasi media Indol dengan autoklaf pada suhu stabil 1210C selama 15
menit
 Mendiamkan media Indol hingga dingin dan menyimpan media ke dalam kulkas

4. Media Simmon Citrate agar

 Menyiapkan alat dan bahan yang dibutuhkan
 Menghitung kebutuhan media Simmon Citrate Agar yang akan ditimbang
 Menimbang serbuk media Simmon Citrate Agar sesuai kebutuhan
 Melarutkan serbuk media Simmon Citrate Agar ke dalam erlenmeyer dengan
bilasan aquadest sedikit demi sedikit hingga tidak ada media yang tersisa pada
wadah timbang (petridis)
 Memanaskan media yang telah dilarutkan, diatas api spiritus (sesekali erlenmeyer
digoyang-goyangkan) hingga media menjadi jernih
 Menyesuaikan pH media dengan kertas indikator ( pH media Simmon Citrate
Agar: 7,0  0,2 )
 Mendistribusikan media Simmon Citrate Agar ke dalam tabung biokimia dengan
tindakan yang steril
 Mensterilisasi media Simmon Citrate Agar dengan autoklaf pada suhu stabil
1210C selama 15 menit
 Memiringkan media Simmon Citrate Agar hingga tidak terdapat dasar media
 Mendiamkan media Simmon Citrate Agar hingga dingin dan menyimpan media
ke dalam kulkas

5. Media Urea
 Menyiapkan alat dan bahan yang dibutuhkan
 Mensterilisasi semua alat dan auadest yang akan diguanakan dengan autoklaf
pada suhu stabil 1210C selama 15 menit
 Menghitung kebutuhan media Urea yang akan ditimbang
 Menimbang bahan media Urea sesuai kebutuhan dengan komposisi :
1) Urea Agar Base 2,4 g/L
2) Kristal Urea 20 g/L
3) Aquadest 1000 mL
  Melarutkan Urea Agar Base ke dalam erlenmeyer dengan bilasan aquadest
sedikit demi sedikit hingga tidak ada media yang tersisa pada wadah timbang
(petridis)
 Memanaskan media yang telah dilarutkan, diatas api spiritus (sesekali
erlenmeyer digoyang-goyangkan) hingga media menjadi jernih
 Menyesuaikan pH media Urea Agar Base ( pH:6,8 0,2)
 Mensterilisasi media Urea Agar Base dengan autoklaf pada suhu stabil 1210C
selama 15 menit
 Mendiamkan media Urea Agar Base hingga suhunya menjadi 50 %
 Melarutkan Urea Kristal yang sudah ditimbang ke dalam erlenmeyer dengan
aquades
 Mencampurkan Urea Agar Base dan Urea Kristal hingga homogen ( apabila
warna media menjadi pink, mendakan kalau media sudah tidak steril ) .
 Mendistribusikan media Urea yang steril ke dalam tabung biokimia steril
dengan tindakan yang steril
 Memiringkan media Urea hingga tidak terdapat dasar media
 Mendiamkan media Urea hingga dingin dan menyimpan media ke dalam
kulkas

6. Media Semi Solid

 Menyiapkan alat dan bahan yang dibutuhkan
 Menghitung kebutuhan media Semi Solid yang akan ditimbang
 Menimbang bahan media Semi Solid sesuai kebutuhan dengan komposisi :
1) Tryptose 5 g/L
2) Bacteriological agar 4 g/L
3) NaCl 5 g/L
4) Aquades 1000 mL
 Melarutkan semua bahan Semi Solid ke dalam erlenmeyer dengan bilasan
aquadest sedikit demi sedikit hingga tidak ada media yang tersisa pada wadah
timbang (petridis)
 Memanaskan media yang telah dilarutkan, diatas api spiritus (sesekali
erlenmeyer digoyang-goyangkan) hingga media menjadi jernih
 Menyesuaikan pH media dengan kertas indikator ( pH media Semi Solid: 7,4 
0,2 )
 Mendistribusikan media Semi Solid ke dalam tabung biokimia dengan tindakan
yang steril
 Mensterilisasi media Semi Solid dengan autoklaf pada suhu stabil 1210C selama
15 menit
 Mendiamkan media Semi Solid hingga dingin dan menyimpan media ke dalam
kulkas