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GUÍA 3

4º MEDIO Plan Común

NOMBRE: NOTA (ACUMULATIVA):


CURSO: PUNTAJE: FECHA:

LA REPLICACIÓN DEL ADN

El ADN tiene toda la información de los caracteres específicos de una especie o


individuo (lo que involucra funcionamiento) y, por ello, es imprescindible que pueda ser
copiada con fidelidad para ser repartida entre la progenie.
Con el modelo de la doble hélice de Watson y Crick se desarrolló la idea de
que las hebras originales debían servir de patrón para hacer la copia, aunque en
principio había tres posibles modelos de replicación (figura 1):

1. Modelo conservativo: Proponía


Modelo
semiconservativo que tras la replicación se mantenía la
molécula original de DNA intacta,
obteniéndose una molécula idéntica de
Figura 1
DNA completamente nueva, es decir,
con las dos hebras nuevas.
Modelo
conservativo
2. Modelo dispersivo: El resultado
final son dos moléculas nuevas
formadas por hebras en las que se
Modelo
mezclan fragmentos originales con
dispersivo fragmentos nuevos. Todo ello mezclado
al azar, es decir, no se conservan
hebras originales ni se fabrican hebras
nuevas, sino que aparecen ambas mezcladas.

Meselson y Stahl

3. Modelo semiconservativo o
conservador (Figura 2): Esta
teoría fue propuesta por Watson y
Crick, pero fueron Meselson y
Stahl en 1958 quienes le dieron
Figura 2 confirmación experimental,
incubando durante mucho tiempo

1
células de la bacteria Escherichia coli en un medio que contenía como fuente de
nitrógeno el 15N (isótopo).
Al cabo de un tiempo todo el ADN microbiano era “pesado” (las bases púricas y
pirimídicas estaban constituidas exclusivamente por 15N). A continuación, algunas de
estas células “pesadas” se pasaron a un medio que contenía nitrógeno ligero ( 14N)
hasta que se duplicara la cantidad de células presentes (media hora
aproximadamente). En este caso se pudo ver que todo el ADN formaba una única
banda, intermedia entre la posición que hubiera ocupado el ADN “pesado” (integrado
exclusivamente por 15N) y el ADN “ligero” (integrado exclusivamente por 14N). El
experimento demostró que la replicación es semiconservadora, dando dos dobles
hélices hijas que contienen, cada una de ellas, una hebra pesada y una hebra liviana
(Figura 2).

Figura 3

La hipótesis de la replicación semiconservadora recibió aún más apoyo en la segunda


parte del experimento: si se permitía que nuevamente se duplicara la población celular
en el mismo medio de nitrógeno “ligero” (con 14N) se producían dos bandas, una
correspondiente al ADN “híbrido” (con una cadena de 14N y otra de 15N) y otra de ADN
exclusivamente “ligero” (producto de la replicación de las cadenas ligeras en un medio
que contenía exclusivamente 14N).

La síntesis de ADN transcurre siempre en dirección 5’3’ y es semidiscontinua


Una cadena nueva de ADN siempre se sintetiza en la dirección 5’3’ Debido a
que las dos cadenas de ADN son antiparalelas, la enzima que forma la nueva hebra
(ADN polimerasa) “lee” la cadena que actúa de molde desde el extremo 3’ al 5’. Si
la síntesis transcurre siempre en la dirección 5’ 3’, ¿cómo se pueden sintetizar
simultáneamente las dos cadenas, si las dos hebras que constituyen el ADN están

Movimiento de la
horquilla de replicación
2
dispuestas en sentido antiparalelo (opuesto)? La respuesta la dio Reiji Okazaki
en los años ´60, al encontrar que una de las dos cadenas se sintetiza en piezas
cortas denominadas desde entonces fragmentos de Okazaki. Ello condujo a la
conclusión de que una cadena se sintetiza continuamente y la otra
discontinuamente. La cadena continua o cadena conductora es aquella en la que
la síntesis 5’ 3’ transcurre en la misma dirección que el movimiento de la horquilla
de replicación.
La cadena discontinua o cadena rezagada es aquélla en la que la síntesis 5’ 3’
transcurre en la dirección opuesta a la del movimiento de la horquilla. Los
fragmentos de Okazaki tienen una longitud entre unos pocos centenares y unos
pocos millares de nucleótidos, según el tipo de célula.
Como la síntesis es bidireccional (transcurre hacia ambos lados del punto de
replicación), la síntesis en una cadena es continua hacia un lado y discontinua
hacia el otro.
El ADN es sintetizado por polimerasas, de las cuales existen distintos tipos. La
síntesis del ADN la podemos resumir en tres etapas

1ª Etapa: Desenrrollamiento y apertura de la doble hélice en el punto de inicio


Intervienen un grupo de enzimas y proteínas, a cuyo conjunto se denomina replisoma
 Primero: intervienen las enzimas helicasas que facilitan en desenrrollamiento
 Segundo: actúan las enzimas girasas y topoisomerasas que eliminan la
tensión generada por la torsión en el desenrrollamiento.
 Tercero: Actúan las proteínas SSBP (Single strand-binding proteins) que se
unen a las hebras molde para que no vuelva a enrollarse.
2ª etapa. Síntesis de dos nuevas hebras de ADN.

Síntesis continua
 Actúan las ADN polimerasas para sintetizar las nuevas hebras en sentido 5´-3
´, ya que la lectura se hace en el sentido 3´-5´.
 Intervienen las ADN polimerasas I y III, que se encargan de la replicación y
corrección de errores. La que lleva la mayor parte del trabajo es la ADN
polimerasa III
 La ADN polimerasa III es incapaz de iniciar la síntesis por sí sola, para esto
necesita un cebador o primer (ARN) que es sintetizado por una ARN
polimerasa (=primasa). Este cebador es eliminado posteriormente.
 La cadena 3´-5´(cadena conductora o continua) ya esta lista para ser leída
por la ADN polimerasa III
Síntesis discontinua
 En la cadena 5´-3´ no puede ser leída directamente, esto se soluciona
leyendo pequeños fragmentos de ella. Los siguientes puntos resumen el
proceso:
o La primasa sintetiza varios cebadores
o La ADN pol III alarga los fragmentos de cebador incorporando
nucleótidos de 5` a 3` estos fragmentos tienen una longitud
aproximada de 1000 a 2000 nucleótidos y se denominan fragmentos
de Okazaki.
o Posteriormente actúa la ADN polimerasa I que gracias a sus función
exonucleasa, retira los segmentos de ARN o primer, y luego, gracias
a su función polimerasa, rellena los huecos con ADN.
o Finalmente la ADN ligasa sella las uniones entre los fragmentos
independientes

3
3ª etapa: Corrección de errores.
 La ADN polimerasa I y III, es quien corrige todos los errores cometidos en la
replicación o duplicación, gracias a su actividad exonucleasa. Al proceso se le
denomina corrección de pruebas de la exonucleasa y sirve para incrementar la
fidelidad de la síntesis.

Resumen de la
replicación

La replicación en las células eucariotas es más compleja


Las moléculas de ADN de las células eucarióticas son considerablemente mayores
que las de las bacterias y están además organizadas en estructuras
nucleoproteicas complejas (ADN asociado a histonas), pero los rasgos esenciales
de la replicación son los mismos que en las células procarióticas.
La replicación en eucariotes tiene múltiples orígenes o burbujas de replicación
(también reciben el nombre de ojos de replicación) a diferencia de los procariotas.
INSTRUCCIONES:
1. Forma un grupo de 4 personas, cada integrante deberá asumir un rol.
ROL Nombre
Jefe de Grupo
Secretario registrador
Vocero
Expositor

***recuerda el reglamento de trabajo, tu grupo será supervisado para que sean


cumplidas las indicaciones
2. Lee la guía en forma individual (15 min.) y realiza las actividades en forma grupal.

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Actividad 1: Crea un mapa conceptual al reverso de la página seleccionando 10
conceptos de la guía como mínimo que permitan resumir la replicación del ADN (15
min.)

Actividad 2: Nombre y explique los 3 modelos de replicación del ADN, señale el


correcto (5 min.)
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_____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________
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Actividad 3: El siguiente esquema representa el experimento de Meselson-Stahl,


respecto a el responda las actividades propuestas (8 min.)

a. Describa la función del N15 en el


experimento?

_____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________
_______

b. En el experimento de Meselson-Stahl que modelo puede descartarse tras un ciclo


(generación 1) de replicación?

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_____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________
_______
c. ¿Por qué el experimento de Meselson-Stahl permite descartar el modelo de
replicación conservativo?
Explique
_____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________
_______
_____________________________________________________________________
__________________________________________________________d. ¿Por qué
Meselson-Stahl utilizan N pesado y no otro elemento químico en su experimento?
_____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________

Actividad 4: Para que ocurra la replicación que estructuras moleculares se necesitan


(5 min.)
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_____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________

Actividad 5: ¿Por qué se espera que la síntesis de ADN sea más compleja en
eucariontes que en procariontes?
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_____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________

Actividad 6: Defina la importancia de: a. los fragmentos de Okasaki, b. La ADN


ligasa, c. Primer (5 min.)
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_____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________
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Actividad 7: El siguiente esquema representa la replicación del ADN, respecto a él


responde las siguientes preguntas: (8 min.)

Movimiento de la horquilla de replicación

a. ¿Cuál es la cadena rezagada? ¿Cuál es la continua?


_____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________

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b. ¿Cuáles son la moléculas que actúan antes de la ADN polimerasa? ¿Qué
función cumplen?
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_____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________

c. ¿Qué se necesita para realizar la síntesis de una hebra de ADN a partir de la


cadena rezagada?
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_____________________________________________________________________

Actividad 8: Completa la siguiente tabla (5 min.)


CADENA DONDE ACTÚA PROTEÍNA (ENZIMA) FUNCIÓN

PRIMASA
POLIMERASA I

POLIMERASA III

LIGASA
Proteínas que se unen a la
hebra molde para que no
se vuelva a enrollar
HELICASA
GIRASA Y
TOPOISOMERASA

Actividad 9: Evaluación del trabajo en equipo.


Marque con una x el nivel logrado.
Muy Bueno

Bueno

Suficiente

Insuficiente

Ausente

Aspecto a Evaluar

1.- Hubo un ambiente de motivación e interés por el


tema.
2.- La discusión se desarrollo en forma seria.
3.- Existió un ambiente de respeto mutuo.
Cuantitativamente creo que nuestro trabajo
merece un (del 1 al 7)

La participación del líder:

7
Muy Bueno

Bueno

Suficiente

Insuficiente

Ausente
Aspecto a Evaluar

1.- Dirigió la discusión dando la palabra en forma justa


y adecuada.
2.- Logró motivar la discusión y participación.
3.- Mantiene el orden y la disciplina.
4.- Guió en forma adecuada el desarrollo de las
actividades para adecuarse al tema propuesto.
Cuantitativamente creo que mi trabajo
merece un (del 1 al 7)

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