Síntese de Proteínas

Síntese de Proteínas – o paradigma central

Transcrição - no núcleo

Tradução - na citoplasma
Síntese de proteínas occore em dois compartimentos celulares

Transcrição
- no núcleo

Tradução
- na citoplasma
Transcrição - 3 etapas

- Iniciação

- Elongação

- Terminação
A região promotor.
Uma sequência de DNA reconhecida pela RNA polimerase

- A sequencia define a posição da ligação de RNApol

- Sempre localizada na 5´ da região do DNA a ser transcrita

Iniciação de transcrição – formação do complexo de transcrição.

(A) A proteína TBP (TATA Binding

Protein) em complexo com TFIID
(transcription factor IID) reconece a
sequência TATA, e o complexo liga ao
DNA.

(B) O complexo DNA/TBP/TFIID é

reconecido pelos fatores de transcrição
TFIIA e TFIIB. O complexo de
transcrição é montado em etapas –
cada evento durante iniciação
depende do sucesso da etapa anterior.
 Iniciação de transcrição

(C) DNA/TBP/TFIIA/TFIIB/TFIID é
recognecido pelos fatores de transcrição
TFIIE e TFIIH, e o RNA polimerase (em
associação com TFIIF e outras proteínas).

(D) O complexo de transcrição é completo.

(E) Na presença de nucleotídeos, transcrição

é iniciada no primeiro base da região de
DNA a ser transcrito.
Elongação - A RNA
polimerase durante
transcrição.

- Transcrição de uma fita

de DNA – a fita molde.
- Síntese de RNA na
direção 5´ á 3´.
Terminação – 1. sinal da estrutura de RNA

RNA pode formar estruturas secundárias

– sequências poliC no 3´ do RNA
paream com sequências poliG para
formar um grampo estável.

O grampo estável é o sinal para a

dissociação da RNA polimerase do
DNA e a terminação de transcrição.
Terminação – 2. Induzida pela proteína rho

A proteína rho é um complexo na

forma de anel, que liga á RNA
nascente, e transloca junto com o
RNA polimerase

Quando a RNA polimerase faz uma pausa na transcrição,

o rho encosta na enzima.

O encontro de rho com a RNA polimerase resulta na

dissociação da enzima do DNA, e a liberação do RNA e a
proteína rho. Este processo depende na hidrólise de ATP.
Alguns detalhes .....

Procariontes: somente uma RNA polimerase

RNA sintetizado não sofre modificações

Eucariontes : 4 isoformas de RNA polimerase

I: transcrição de RNAr
II: transcrição de RNAm e RNAsn
III: transcrição de RNAr (5S) e RNAt entre outros
IV: transcrição de RNAsi em plantas
RNA pode sofrer modificação pós-transcricional
- Eliminação de introns
- “Alternative splicing”
Tradução - 5 Etapas .

1) Ativação de aminoácidos

2) Iniciação de tradução

3) Elongação

4) Terminação e liberação do polipeptídeo

sintetizado.

5) Enovelamento da proteína e
processamento pós-tradução (outra aula ....)
 Aminoacilação de tRNA por aminoacil tRNA sintase

1) Síntese de aminoacil-AMP.
2) Transferência do aa ao 3´ do RNAt

3) Enzimas de classe I
transfere o aminoácido ao
hidroxil 2´ do ribose.
4) Enzimas de classe II
transfere o aminoácido ao
hidroxil 3´ do ribose.

5) Transesterificação
transfere TODOS os
aminoácido ao hidroxil 3´.
aminoacil tRNA sintase – classe I

Aminoácidos:
arginine, cysteine,
glutamic acid, glutamine,
isoleucine, leucine,
methionine, tyrosine,
tryptophan and valine

aminoacil tRNA sintase – classe II

Aminoácidos:
alanine, asparagine,
aspartic acid, glycine,
histidine, lysine,
phenylalanine, proline,
serine, and threonine
Estrutura do Ribosomo

Duas subunidades (grande e pequena)

3 sítos:
A – ligação do aminoacil tRNA
P – Formação do peptidyl tRNA
E – Sitio de saída (“exit site”)
2) Iniciação de tradução
1) Separação das subunidades do ribosomo pela
ação de IF1 e IF3 (Initiation factors 1 e 3).

2) Associação do RNAm á subunidade pequena,

associação do formilmetionina-RNAt (não envolve
interação codon-anticodon – mediada por IF2)

3) Associação da subunidade grande do ribosomo, e

dissociação dos fatores de iniciação.
3) Elongação
Formação da ligação peptidica.

A reação é catalizada pelo RNAr

4) Terminação e liberação do
polipeptídeo sintetizado.

1) O ribosomo encontra um codon de terminação

no RNA m, uma vez que não tem RNAt para
estes codons, RF1 e RF3 (Release factors 1 e
3) entram no sítio-A do ribosomo.

2) Na ausência de um grupo aminoacil, uma

água hidroliza a aminoacil-RNAt, gerando um
grupo carboxil, e liberando o polipeptídeo do
ribosomo.

3) A dissociação do polipeptídeo é o sinal para a

dissociação do RNAm, RF1, RF3 e o ultimo RNAt
do ribosomo. Nota que as duas subunidades do
ribosomo permanecem associadas.