1. Lakukan uji diruang terpisah yang dirancang khusus untuk pengujian pirogen dan kondisi lingkungan disesuai kan dengan ruang pemeliharaan. Ruangan pengujian bebas dari gangguan apapun. 2. Hewan uji (kelinci) tidak diberi makan selama pengujian. 3. Kelinci diletakkan dalam penyekap yang dapat menahan kelinci dengan leher yang longgar. 4. Penetapan suhu control dari tiap kelinci tidak lebih dari 30 menit sebelum penyuntikan. 5. Suntikkan 10 ml larutan uji per kg berat badan kedalam vena telinga setiap tiga kelinci. 6. Dilakukan penyuntikan dalam waktu 10 menit. 7. Rekam suhu secara berturut-turut antara jam ke-1 sampai ke-3 setelah penyuntikan sengan selang waktu 30 menit.
Interpretasi hasil
1. Setiap penurunan suhu dianggap nol.
2. Sediaan yang memenuhi syarat apabila tidak ada satupun kelinci yang menunjukkan kenaikan suhu 0,5 atau lebih. 3. Apabila kenaikan suhu hingga lebih 0,5 maka dilanjutkan dengan uji 5 ekor kelinci. 4. Sediaan dinyatakan bebas pirogen apabila 3 dari 8 kelinci tidak menunjukkan kenaikan suhu 0,5 atau lebih. 5. Dari 8 ekor kelinci kenaikan suhu tidak melebihi 3,3◦
