ACTUALIZACIÓN DEL
SEMINOGRAMA
SEGÚN CRITERIOS OMS-2010
Maria Gemma Serrano Olmedo
José Manuel Moreno Cebeira
Programa de
Formación Continuada
a Distancia
2014
ACTUALIZACIÓN DEL SEMINOGRAMA SEGÚN CRITERIOS OMS-2010
Maria Gemma Serrano Olmedo y José Manuel Moreno Cebeira
médicos especialistas en análisis clínicos
laboratorio de reproducción asistida del Hospital universitario fundación alcorcón
OBJETIVOS ESPECÍFICOS:
Al finalizar la Unidad Didáctica los alumnos deben ser capaces de:
1.- Conocer las diferencias que presenta la edición actual del manual de la OMS (WHO laboratory
manual for the examination and processing of human semen. Fifth edition (2010).)
2.- Conocer las distintas actuaciones del profesional del laboratorio clínico en el estudio diagnós-
tico del varón infértil.
3.- Conocer los estudios hormonales, genéticos y microbiológicos que se realizan en el estudio del
varón infértil, a pesar de que estos no quedan reflejados en el último manual OMS.
1. INTRODUCCIÓN
la modificación del estilo de vida en nuestro medio, la exposición a tóxicos ambientales y/o labo-
rales (disruptores endocrinos), así como el uso de tóxicos (alcohol, tabaco, drogas de abuso,
anabolizantes, etc.), ha supuesto un problema de salud pública a nivel reproductivo. actualmente
se estima que afecta alrededor de 80 millones de parejas en todo el mundo.
la organización mundial de la salud (oms) define, desde el 2002, la esterilidad como enfer-
medad, e insta a los estados a destinar recursos públicos para su tratamiento.
actualmente, no hay datos fiables acerca de la prevalencia de la esterilidad debido a que no son
estériles todas las mujeres no gestantes y a que no todas las parejas estériles acuden al médico.
lo que sí se sabe es que en un 40% de las parejas con problemas de fertilidad la causa es de
origen masculino.
en la población general se estima que el 15% de las parejas son estériles y que en las que consi-
guen embarazo se producen un 15% de abortos.
al contrario de lo que pasa con las mujeres, en los hombres los problemas hormonales son
menos frecuentes y si existen suelen indicar una anomalía en la producción de espermatozoides.
es por ello que el primer examen que se realiza al varón es el análisis del semen
Hace más de 30 años que la oms, con su monografía “The WHO laboratory manual for the
examination of human semen and sperm–cervical mucus interaction (1980)”, promueve el uso de
métodos estandarizados para el análisis seminal que permitan:
• realizar un correcto análisis del semen en cualquier laboratorio de análisis clínicos con los
recursos humanos e instrumentales de que disponga.
• la estandarización de técnicas que haga posible la transferibilidad de resultados entre laborato-
rios. esto permitiría que, independientemente de quién y dónde se realice un seminograma, se
haga siempre del mismo modo consiguiéndose así la comparabilidad de resultados entre centros
y profesionales.
2. OBJETIVOS
el objetivo de este documento es indicar cuáles han sido los cambios que se han producido en
la quinta edición del manual de la oms con respecto a la anterior y dar a conocer las distintas
actuaciones del profesional del laboratorio clínico en el estudio diagnóstico del varón infértil.
también se hará una breve referencia al estudio hormonal, genético y microbiológico que se realiza
en el varón infértil a pesar de que estos tres estudios no quedan reflejados en el último manual oms.
3. EL VARÓN INFÉRTIL
el estudio del varón infértil comienza con la anamnesis y exploración física para descartar causas
orgánicas de infertilidad y/o esterilidad susceptibles de ser tratadas. a continuación, se realiza la
valoración de la calidad seminal, siendo el laboratorio clínico clave en este proceso.
Incapacidad de la pareja para concebir tras 12 meses de coito sin protección (ESHRE,
SEF) o 24 meses (OMS)
Esterilidad
Primaria: nunca ha habido gestación, ni aborto.
Secundaria: tras una gestación transcurren de 12 a 24 meses sin un nuevo embarazo
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Análisis básico
Examen macroscópico: licuefacción, viscosidad, aspecto, volumen, pH
Presencia de agregados y aglutinaciones de espermatozoides
Movilidad espermática
Vitalidad espermática
Concentración de espermatozoides y otras células
Morfología espermática
Detección de anticuerpos antiespermatozoide
Métodos opcionales
Indices de anomalías espermáticas
Tinción inmunoquímica para la detección de CD45+ de leucocitos
Interacción entre espermatozoide y moco cervical
Análisis bioquímico del plasma seminal
Análisis espermático automático mediante aplicaciones informáticas (CASA)
Pruebas de investigación
Especies reactivas de oxígeno
Pruebas de interacción espermatozoide-ovocito
Pruebas de unión a la zona pelúcida humana
Prueba de penetración en ovocitos de hamster
Evaluación de la reacción acrosómica
Evaluación de la cromatina espermática
Tabla 2. Clasificación de parámetros a incluir en un análisis de semen según el manual OMS 2010
VALORES DE REFERENCIA DE LOS PARÁMETROS MACROSCÓPICOS DEL SEMEN
PARÁMETRO VALOR
Licuefacción < 60´
Viscosidad ≤ 2 cm
Apariencia Homogéneo, gris opalescente
pH ≥ 7.2
Agregación Sin interés clínico
Aglutinación No concluyente
LÍMITES INFERIORES DE REFERENCIA DEL ESPERMIOGRAMA
PARÁMETRO VALOR IC 95%
Volumen (ml) 1.5 1.4 – 1.7
Concentración spz (10 /ml)
6
15 12 - 16
Espermatozoides totales (106/E) 39 33 - 46
Movilidad total (%) 40 38 - 42
Movilidad progresiva (%) 32 31 - 34
Vitalidad (%) 58 55 -63
Morfología normal (%) 4 3-4
Concentración leucocitos (106/ml) <1 -
Anticuerpos antiespermatozoide (%) < 50% -
Tabla 3. Valores de referencia según el manual OMS 2010 (E: eyaculado, spz: espermatozoides)
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Edición 1ª 2ª 3ª 4ª 5ª
Año publicación 1980 1987 1992 1999 2010
Nomenclatura VN VN VN VR LIR
Volumen (ml) 2 2 2 2 1,5
Espermatozoides/eyaculado (x106) 80 40 40 40 39
Concentración espermática (106/mL) 40 20 20 20 15
Vitalidad (% vivos) 50 50 75 75 58
Movilidad progresiva (PR, %) 50 50 50 50 32
Movilidad total (PR + NP, %) -- -- -- -- 40
Espermatozoides Normales (%) 50 50 30 15 4
Tabla 4. Evolución de los valores de referencia en las distintas ediciones de los manuales de la OMS
PARÁMETRO ANOMALÍA
ASTENOTERATOZOOSPERMIA,
Alteraciones mixtas OLIGOASTENOTERATOZOOSPERMIA
CRIPTOTERATOZOOSPERMIA, etc
2. el parámetro que menos ha cambiado ha sido el número total de espermatozoides por eyacu-
lado, es por ello que el manual oms-2010 indica que el número total de espermatozoides tiene
prioridad sobre la concentración.
3. el parámetro que más se ha modificado a través del tiempo ha sido el de la morfología esper-
mática. las primeras ediciones consideraban como el hallazgo del 50 % o más de espermato-
zoides de morfología normal; posteriormente se sugirió que utilizando los criterios "estrictos" de
normalidad, el límite debía ajustarse en un nivel inferior. en su última edición se sugiere como límite
normal el 4% utilizando los criterios estrictos descritos por Kruger.
la evolución de los valores a lo largo de los distintos manuales oms puede apreciarse en la tabla 4.
en función del parámetro seminal alterado las anomalías reciben distintas nominaciones,
pudiendo ser alteraciones únicas ó combinaciones de varias de ellas (tabla 5).
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5. OTROS ESTUDIOS EN EL VARÓN INFÉRTIL
según los resultados obtenidos mediante la anamnesis, exploración y seminograma realizados
al paciente pueden realizársele estudios complementarios.
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• Prueba de penetración cruzada in vitro: evalúa la calidad y la cantidad de espermatozoides que
han penetrado en diferentes mocos cervicales.es una prueba que se realiza en el periodo preovu-
latorio y para poder realizarla se necesita: moco cervical de la mujer, esperma de la pareja, moco
cervical control y esperma control. durante la prueba se pone en contacto el moco de la mujer con
el esperma de su pareja y con el esperma control y el esperma de la pareja con el moco cervical
control. se evalúa la calidad y cantidad de espermatozoides que han penetrado en los diferentes
mocos cervicales. Permite ver si se trata de un problema del moco cervical o un problema de
espermatozoides.
GLÁNDULA SECRECIÓN
Glándulas Bulbouretrales de Cowper y uretrales Mucoproteínas
Ácido cítrico
Fosfatasas ácidas
Enzimas proteolítica
Próstata (secreción ácida) Inositol
Espermina
Iones: calcio, magnesio y zinc
PSA
Glicerilfosforilcolina (GPC)
Lípidos y fosfolípidos
Fosfatasas ácidas
Carnitina
Epidídimo, deferentes y ampolla Ácido Siálico
Proteínas
Esteroides
Ácido láctico
Inositol
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Figura 4. FISH de espermatozoides
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Para realizar la capacitación espermática en el laboratorio se procesa la muestra eliminando el
plasma seminal y seleccionando los espermatozoides de mejor movilidad.
6.2. ICSI
la microinyección intracitoplasmática (IcsI) es el tratamiento utilizado en casos de esterilidad
masculina por oligozoospermia severa y fallos previos de fIv. consiste en inyectar un espermato-
zoide directamente dentro del citoplasma del ovocito (figura 6) . Problema: elección del mejor
espermatozoide.
6.3. TESA
la aspiración de tejido testicular (tesa) tiene como objetivo identificar y congelar si fuera nece-
sario espermatozoides móviles para ser usados posteriormente en las tra.
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6.4. IMSI
la microinyección intracitoplasmática de esperma seleccionado morfológicamente (ImsI) es el
resultado de introducir modificaciones en el procedimiento de IcsI pero con una microscopía mas
potente (5 veces magnificada: 6000 aumentos) para seleccionar el espermatozoide. esta metodo-
logía permite detectar alteraciones menores así como orgánulos intracelulares como vacuolas que
desestabilizan la cromatina. (figura 7)
Para elegir el espermatozoide más adecuado se siguen las recomendaciones de la oms.
6.5. MACS
el método magnetic activated cell sorting (macs) utiliza campos magnéticos en la selección de
espermatozoides para la fertilización. el uso de esta tecnología en andrología se basa en la
propiedad que tienen los espermatozoides que han iniciado la apoptosis de expresar antígenos en
su superficie, concretamente fosfatidilserina. utiliza micropartículas magnéticas unidas a una
proteína (anexina v) que se une a su vez a la fosfatidilserina de los espermatozoides programados
hacia la muerte celular (figura 8). a continuación, se aplica un campo magnético, reteniendo los
espermatozoides defectuosos y dejando pasar a los óptimos.
Puede realizarse previamente a la IcsI/ImsI.
6.6. PICSI
el IcsI fisiológico o PIcsI es un método que pretende obtener una selección del espermatozoide
menos subjetiva utilizando una molécula similar a la que envuelve el ovocito de forma natural.
se utiliza una placa impregnada en hialuronato que mide la capacidad de unión a ella de los
espermatozoides funcionalmente competentes (los espermatozoides más aptos tienen receptores
del ácido hialurónico en su membrana y son capaces de unirse a la base de la placa) (figura 9).
una vez seleccionado el espermatozoide se aspira con una pipeta de microinyección y se realiza
una IcsI (figura 6).
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Figura 9. A. Espermatozoides uniéndose al ácido hialurónico de la base de la placa
B. Captura de espermatozoides con una pipeta de ICSI
7. CONCLUSIONES
• el diagnóstico exacto de la causa de infertilidad es un proceso pluridisciplinar, pudiendo recurrir
a numerosos exámenes complementarios.
• el seminograma convencional presenta alta variabilidad intraindividual y bajo valor predictivo (los
lIr no son valores de normalidad y su alteración no implica conceptos de fertilidad ni de esterilidad).
• la variabilidad observada en los principales parámetros del seminograma se debe a la combina-
ción del error analítico (imprecisión, inexactitud) y a la variabilidad biológica. los estudios disponi-
bles indican que la variabilidad intraindividual (cv) es del 27 al 48% para la concentración esper-
mática y del 20 al 30% para la morfología.
8. ABREVIATURAS
aae: anticuerpos antiespermatozoides.
esHre: sociedad europea de reproducción Humana y embriología.
fIsH: técnica citogenética de hibridación de sondas fluorescentes.
fIv: fecundación in vitro convencional.
fsH: Hormona folículo estimulante.
gPc: glicerilfosforilcolina.
Ia: Inseminación artificial.
IcsI: microinyección Intracitoplasmática de espermatozoides.
Ifd: índice de fragmentación de dna.
lIr: límite inferior de referencia.
maI: Indice de anomalías múltiples.
oms: organización mundial de la salud.
Pg: Prostraglandinas.
Prl: Prolactina.
Psa: antígeno prostático específico.
rem: recuperación de espermatozoides móviles.
ros: especies oxígeno reactivas.
sdI: Indice de deformidad del esperma.
sef: sociedad española de fertilidad.
sHbg: globulina fijadora de hormonas sexuales.
tra: técnicas de reproducción asistida.
tzI: Indice de teratozoospermia.
vn: valor normal.
vr: valor de referencia. 13
BIBLIOGRAFÍA
1. WHo laboratory manual for the examination and processing of human semen. fifth edition
(2010).
2. ley 14/2006, de 26 de mayo, sobre técnicas de reproducción humana asistida.
3. real decreto 42/2010, de 15 de enero, por el que se regula la comisión nacional de
reproducción Humana asistida.
4. orden 2541/1997, de 22 de diciembre por la que se establece la autorización-homologación de
los centros y servicios sanitarios relacionados con las técnicas de reproducción humana asis-
tida en la comunidad de madrid.
5. comisión de seminología y técnicas de reproducción asistida seQc: sánchez I, mar c,
castilla ja, marcos m, martín I, galán a, jiménez mI, moreno jm, serrano mg, garcía-
cobaleda I, aulesa c, sánchez c, de montserrat j. técnicas para la preparación de semen en
reproducción asistida. sociedad española de bioquímica clínica y Patología molecular.
documentos de la seQc (2009), 23-26.
6. eau guidelines on male infertility. dohle, gr, diemer t, giwercman a, jungwirth a, Kopa z,
Krausz c. 2010 update.
7. WHo referente values for human semen characteristics. cooper tg, noonan e, von
eckardstein s, auger j, baker HW, behre Hm, et al. Hum reprod update. 2010; 16: 231-45.
8. biological variation in seminal parameters in healthy subjects. Álvarez c, castilla ja, molina r,
ramírez jP, vergara f, Yoldi a, gaforio jj. Hum reprod. 2003; 18:2083-8.
9. Within-and between subject variation in semen parameters in fertile men and normal semen
donors. Keel ba. fertil steril. 2006;85:128-34.
ENLACES DE INTERÉS
• ley 14/2006, de 26 de mayo, sobre técnicas de reproducción humana
asistida.<http://www.boe.es/aeboe/consultas/bases_datos/act.php?id=boe-a-2006-
9292>[consulta:15/06/2012]
• real decreto 42/2010, de 15 de enero, por el que se regula la comisión nacional de
reproducción Humana asistida.
http://www.boe.es/aeboe/consultas/bases_datos/act.php?id=boe-a-2010-
1705>[consulta:15/06/2012]
• real decreto 412/1996, de 1 de marzo, por el que se establecen los Protocolos de estudio
donantes de gametos y usuarios de técnicas de reproducción asistida.
<http://www.boe.es/boe/dias/1996/03/23/pdfs/a11253-11256.pdf>[consulta:15/06/2012]
• real decreto 413/1996, de 1 de marzo, por el que se establecen los requisitos para la
Homologación de centros y servicios relacionados con las técnicas de reproducción asistida.
<http://www.boe.es/boe/dias/1996/03/23/pdfs/a11256-11260.pdf> [consulta:15/06/2012]
•real decreto 1277/2003, de 10 de octubre, por el que se establecen las bases generales sobre
autorización de centros, servicios y establecimientos sanitarios.
<http://www.boe.es/boe/dias/2003/11/21/pdfs/a41231-41231.pdf> [consulta:15/06/2012]
• manual de análisis de semen de la oms 5ª ed.
<www.who.int/reproductivehealth/publications/infertility/9789241547789/en/>
[consulta:15/06/2012]
• european society of Human reproduction and embriology
<http://www.eshre.eu/01/default.aspx?pageid=3> [consulta:15/06/2012]
• asociación para el estudio de la biología de la reproducción <http://www.asebir.com/>
[consulta:15/06/2012]
• sociedad española de fertilidad <http://nuevo.sefertilidad.com/index.php> [consulta:15/06/2012]
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EVALUACIÓN
CASO CLíNICO 1
A nuestro laboratorio acude un paciente, remitido por el urólogo, en solicitud de una segunda
opinión.
Aporta informe clínico del especialista en el que refiere que el paciente acude por no conse-
guir descendencia tras dos años de relaciones sexuales sin protección. La anamnesis refiere
relaciones normales y ocasionalmente dolorosas en la eyaculación, con una exploración
urológica normal, a excepción de varicocele de grado III/IV en el testículo derecho.
También aporta informe de seminograma realizado en otro laboratorio, en el que destaca:
Fecha de realización 10 días antes de la fecha en que nos consultan
Lugar y hora de recogida: El domicilio a las 08:10
Hora de entrega en laboratorio: 11:15
Aspecto: Nacarado homogéneo
Olor: Normal
Licuefacción: No valorable por retraso en la entrega.
Viscosidad: 1,6 cm LIR < 2,1
pH: 7,7 LIR > 7,1
Volumen: 1,3 ml LIR > 1,5
Concentración de espermatozoides: 11,0 mill/ml LIR > 15
Espermatozoides totales: 14,3 mill LIR > 39
Movilidad total: 26 % LIR > 40
Movilidad progresiva 21 % LIR > 32
Vitalidad: 45 % LIR > 58
Morfología normal: 3% LIR > 3
Morfología anormal: 42 % def. de cabeza, 48 % de pieza intermedia, 45 % de cola.
Índice de anomalías múltiples: 2,6
Concentración de leucocitos: 3,0 mill/ml (95 % PMN) LIR < 1
Anticuerpos antiespermatozoides (Mar-test): 13% de espermatozoides móviles con
esferas adheridas (IgG adsorbidas) LIR < 50%
NOTA. Seminograma según OMS 2010
1 - ¿debemos solicitar nueva muestra al paciente para analizarla? diga cual de las siguientes
afirmaciones es cierta.
a) dados los malos resultados no creemos necesaria una segunda muestra pues de ellos se
deduce directamente su esterilidad.
b) deberíamos repetir el análisis en un intervalo no superior a las dos semanas para garantizar
su validez.
c) sí, para realizar la bioquímica seminal, pues son parámetros básicos y no los tiene estudiados.
d) sí, dejando un intervalo de 15 a 30 días respecto al anterior.
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4- ¿Podemos decir que existe necrozoospermia?
a) sí, porque el porcentaje de formas vivas es inferior al 58 %.
b) no, porque el pH de la muestra está por encima del lIr.
c) sí, porque la movilidad total es inferior al 40 %.
d) no, porque presenta menos del 50 % de espermatozoides con anticuerpos adheridos a la
superficie celular (recubiertas con Igg) siendo negativo el mar-test (anticuerpos
antiespermatozoide).
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CASO CLíNICO 2
7 - ¿estaría justificado completar el estudio mediante técnicas microbiológicas? diga cual de las
siguientes afirmaciones es correcta.
a) sí, deberíamos completar con un sedimento urinario y un urocultivo.
b) no, no hay datos que hagan sospechar infección seminal.
c) no porque la detección de anticuerpos antiespermatozoide (mar-test) es negativa (< 50%)
d) sí, solicitaríamos cultivo seminal por leucospermia o cultivo de orina tras masaje prostático.
8 - en el informe ponemos como conclusión final una de las siguientes categorizaciones. ¿cual
de ellas es completamente cierta?
a) azoospermia secretora.
b) necroteratozoospermia.
c) oligoastenoteratozoospermia.
d) criptoteratozoospermia.
9 - con los datos clínicos que conocemos del paciente (ver caso clínico 1) ¿cuál de las siguientes
pruebas complementarias indicarías (opcionales o de investigación) para mejorar o completar
el estudio:
a) cariotipo y estudio de meiosis.
b) determinación de testosterona y fsH para descartar un hipogonadismo hipogonadotropo.
c) tinción Inmunocitoquímica de leucocitos (cd45) y fragmentación del dna espermático.
d) análisis informático mediante aplicaciones informáticas (casa) y macs (magnetics
activated cell sorting).
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10 - ¿de los resultados combinados de los dos espermiogramas podemos afirmar que el paciente
es estéril?
a) sí, presenta teratozoospermia (% de espermatozoides normales inferior al lIr del 4%).
b) sí, presenta leucoespermia, que hace inviable la fecundación, incluso por técnicas de repro-
ducción asistida.
c) Presenta necrozoospermia y la presencia de espermatozoides muertos aumenta el nivel de
ros (especies reactivas de oxígeno) hasta niveles que hacen inviable la fecundación.
d) los resultados del seminograma no informan de la capacidad fecundante.
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NOTAS
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