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Artículo Original

Efecto antiinflamatorio de la
Ephedra americana HYB sobre la
encía de cobayos en procedimiento
quirúrgico
Arriola-Guillén L, Sacsaquispe-Contreras SJ. Efecto antiinflamatorio de la Ephedra americana
HYB sobre la encía de cobayos en procedimiento quirúrgico. Rev Estomatol Herediana. 2010;
20(4):185-190.

RESUMEN
1
Objetivo: Evaluar el efecto antiinflamatorio de la Ephedra americana HyB en cirugía gingival
Luis Arriola Guillén en cobayos. Materiales y Métodos: Estudio experimental en 32 cobayos: 16 cobayos a los que
Sonia Sacsaquispe-Contreras1 se les aplicó el extracto etanólico de la planta (grupo experimental) y 16 el grupo control. Se les
realizó incisión tipo media luna en la encía inferior, con desprendimiento del colgajo y se suturó;
1
Docente del Departamento Académico de Medicina
luego se obtuvieron biopsias excisionales a las 48 horas y a los 7 días para evaluación
y Cirugía Buco Maxilofacial. Facultad de histopatológica del proceso inflamatorio. El análisis estadístico incluyó pruebas de U de Mann
Estomatología. Universidad Peruana Cayetano Withney y suma de rangos asignados de Wilcoxon. Resultados: Al comparar el proceso inflama-
Heredia. torio en ambos grupos a las 48 horas hubo diferencia significativa, siendo menos intenso en el
grupo experimental. A los 7 días de evaluación, la inflamación fue menor en el grupo experimen-
tal y en algunos casos hubo reparación final. La evolución del proceso inflamatorio para ambos
grupos, mostró diferencia estadísticamente significativa (p<0,05); sin embargo, fue mejor en el
grupo experimental. Conclusión: La aplicación de Ephedra americana HyB en la encía de
Correspondencia cobayos expuesta al procedimiento quirúrgico, reduce el grado de inflamación y permite que la
reparación sea más rápida.
Luis Arriola Guillén
Alfa Centauro 0-1 La calera de Monterrico - Lima
33, Perú Palabras clave: EPHEDRA / ENCÍA / INFLAMACIÓN / COBAYAS.
e-mail: luis.arriola@upch.pe
Antiinflammatory effect of the Ephedra americana HyB on the gingival tissue of
guinea pigs exposed to the surgical procedure
ABSTRACT
Objective: To evaluate the antiinflammatory effect of the Ephedra americana HyB in gingival
surgery in guinea pigs. Material and methods: Experimental study in 32 guinea pigs: 16 guinea
Recibido : 9 de noviembre de 2010 pigs to which we applied the ethanol extract of the plant (experimental group) and 16 of the
control group. A crescent type incision was performed in the lower gum, a flap was detached and
Aceptado : 15 de diciembre de 2010 it was sutured; then excisional biopsies were obtained at 48 hours and 7 days for histopathological
evaluation of the inflammatory process. Statistical analysis included Mann Whitney tests and
Wilcoxon rank test. Results: When the inflammatory process in both groups were compared at
48 hours, there was no significant difference, being less intense in the experimental group. After
7 days of evaluation, the inflammation was lower in the experimental group and in some cases
there was final reparation. The evolution of the inflammatory process in both groups showed
statistically significant difference (p<0.05) but was better in the experimental group. Conclusion:
The application of Ephedra americana HyB on the gingival tissue of guinea pigs exposed to the
surgical procedure, reduces the degree of inflammation and allows faster repairs.
Key words: EPHEDRA / GINGIVA / INFLAMMATION / GUINEA PIGS.

Introducción res del medio (2). continua con presencia de


La inflamación, como respuesta El efecto antiinflamatorio es ca- macrófagos, linfocitos y
específica del organismo ante una racterizado por la disminución del plasmocitos. De acuerdo a la inten-
determinada injuria, puede ser inicia- edema, recuperación de la estruc- sidad del proceso inflamatorio se
da por diferentes medios; ésta res- tura y funciones normales del tejido, puede medir en: proceso inflamato-
puesta tiene características comu- después de la eliminación del agen- rio ausente, agudo leve, agudo mo-
nes cualquiera sea el origen de la te extraño que la provoca. En infla- derado, agudo severo, simplemente
inflamación. Así, el tejido oral está mación aguda hay acumulación del crónico, crónico con tejido de granu-
expuesto a ella debido a múltiples líquido, componentes del plasma, lación o reparación final (3-7).
causas, como un procedimiento qui- estimulación intravascular de La Ephedra americana HyB,
rúrgico (1,2). La Ephedra ameri- plaquetas y leucocitos polimorfo- comúnmente llamada Pinco-pinco,
cana HyB es una planta típica del nucleares. En la reacción es un arbusto muy ramificado, que
Perú, usada desde épocas muy an- inflamatoria crónica, la lesión per- pertenece a la familia de las
tiguas de manera tradicional para siste, se suceden alteraciones Efedráceas, esta planta se encuen-
diversas patologías y está asociada vasculares y exudativas que repre- tra en la sierra y en algunas lomas
de manera tradicional al efecto sentan la etapa de reparación celu- cerca del mar del Perú, dentro de
antiinflamatorio por ciertos poblado- lar, existe una respuesta vascular sus principios activos destacan los

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Efecto antiinflamatorio de la Ephedra americana HYB...

alcaloides, efedrina, pseudo- to placebo que conformaron el gru- agua que estuvo sobre un calenta-
efedrina, N-metil efedrina, taninos, po control. Criterios de selección: dor eléctrico y seguidamente se co-
y flavonoides (2). Los principios ac- cobayos de raza Perú, aparente- nectó al equipo de reflujo. De ésta
tivos de una planta, son los respon- mente sanos según el criterio del Ve- manera se completo el sistema de
sables de generar estas propiedades terinario, machos, con peso de en- reflujo y se dejo en éste sistema al
terapéuticas y sus diferentes accio- tre 400 gramos a 600 gramos y de preparado por dos horas a 50°C.
nes para el control de la salud (3). uno a dos meses de edad. Luego, se filtró el preparado a
Dentro de la composición de esta Las variables estudiadas fueron: otro envase de vidrio y se llevó el
planta, destacan los taninos y grado de inflamación, de acuerdo a extracto al evaporador rotatorio
flavonoides que proporcionan a las la escala empleada para medir el eléctrico o rota vapor (Büchi, mo-
plantas medicinales diferentes pro- grado de inflamación. Tratamiento delo R-114, Suiza), por 40 minutos.
piedades entre ellas la asignado, en dos grupos, grupo ex- Finalmente el extracto fue colocado
antiinflamatoria (3,8,9). perimental aplicando Ephedra ame- en un depósito sobre un envase de
Existen estudios (10-13) de di- ricana HyB, y grupo control con vidrio que contenía agua y fue ca-
versas plantas con propiedad placebo (agua destilada). Tiempo, lentado a fuego lento por tres horas,
antiinflamatoria determinada, a las covariable, a las 48 horas y a los siete obteniéndose así 10mg de extracto
cuáles se les realizaron análisis de días. etanólico de Ephedra americana
sus composiciones; encontrándose Procedimientos y técnicas: a HyB que fue envasado en un frasco
dentro de ellas, principios activos cada animal se le asigno de vidrio y se colocó en refrigera-
como los flavonoides, taninos y aleatoriamente uno de los dos tipos ción hasta el día siguiente para su
alcaloides. Van Velzen et al. encon- de tratamientos. Para su identifica- uso. Todo el procedimiento se vol-
traron que la Pluchea carolinensis ción, a cada animal se le asigno un vió a repetir hasta obtener la canti-
Jacq (Salvia de playa) que presenta código numérico, y se registró en una dad necesaria del extracto, que fue
propiedad antiinflamatoria, tiene ficha. Los grupos experimental y de 144mg. Dicho preparado tuvo
como principios activos taninos y control estuvieron conformados como tiempo aproximado de un mes
flavonoides. En 1996 Ortega et al. cada uno por 16 cobayos. La asig- para su utilización.
(14) manifestaron que existen plan- nación a los grupos y el tiempo de Procedimiento quirúrgico: se tra-
tas medicinales como la Bonafousia observación fue al azar. bajó en el Laboratorio de Técnica
sp (Sanango), Croton menthodorum, Obtención del extracto etanólico: Operatoria y Cirugía Experimental
entre otras, que son usadas como se consiguió la planta en la ciudad de la Facultad de Medicina de la
antiinflamatorios, y que al ser eva- del Cusco (Perú); se hizo secar a misma universidad. Los procedi-
luadas con cromatografía presenta- temperatura ambiente por espacio mientos quirúrgicos se realizaron en
ron taninos y flavonoides. de siete días, sin exposición a los dos etapas: la primera se llevó a cabo
El propósito del presente trabajo rayos solares. Luego se procedió a con 16 cobayos (ocho cobayos de
fue evaluar el efecto antiinflamatorio triturarla con ayuda de un molino ma- cada grupo) para su evaluación a las
de la Ephedra americana HyB so- nual y se almacenó en envases de 48 horas; y los otros para evaluarlos
bre la encía de cobayos, expuesta al vidrio (capacidad de 500mg cada a los siete días. Después, se proce-
procedimiento quirúrgico. uno). dió a pesarlos y colocarlos en la mesa
Los envases fueron trasladados de trabajo. Para el procedimiento
Material y métodos al Laboratorio de Química de la Fa- quirúrgico se les aplicó anestesia ge-
El presente estudio fue de tipo cultad de Ciencias y Filosofía de la neral por vía intraperitoneal, con
experimental, un ensayo de labora- Universidad Peruana Cayetano tiopental sódico (0,5ml/500gr de
torio; cuyo método fue la observa- Heredia. Aquí, se colocó 150mg de peso), registrándose la fecha y hora
ción estructurada. El grupo de estu- la planta molida en un balón de vi- de inicio. Luego de anestesiado, se
dio estuvo constituido por 32 drio de 500mg de peso, para segui- procedió a colocar al animal en po-
cobayos basados en estudios previos damente verter 200ml de etanol ab- sición decúbito dorsal y se inició
(1,9,15,16). Del total, 16 cobayos soluto (puro) y se procedió a su abriéndoles la boca, al retraer el la-
fueron asignados al tratamiento ex- mezcla. El balón de vidrio fue fijado bio inferior por ambos lados. Luego
perimental con Ephedra america- a un retenedor metálico, situado por con una hoja de bisturí Nº11 coloca-
na HyB y 16 cobayos al tratamien- encima de un envase de vidrio con do en un mango Nº3, se realizó una

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Arriola-Guillén L, Sacsaquispe-Contreras SJ.

incisión semilunar en la encía inser- Las biopsias, previamente codi- lizando la prueba de suma de ran-
tada, en el sector antero inferior del ficadas de acuerdo al número del ani- gos asignados de Wilcoxon, para
lado derecho del animal a 2mm por mal y al grupo que pertenecen, se comparar el grado de inflamación de
debajo de la zona del incisivo dere- fijaron en formol al 10% durante 24 la encía expuesta entre ambos gru-
cho. Después con ayuda de una horas como mínimo a temperatura pos se usó la prueba de U de Mann-
legra se realizó el desprendimiento ambiente. Withney, a las 48 horas y a los siete
del colgajo hacia el fondo de surco, Técnica histológica: las muestras días respectivamente. Finalmente
posteriormente se devolvió el colgajo obtenidas de cada animal fueron para comparar la evolución del gra-
a su posición normal y se suturó, procesadas en el Laboratorio de do de inflamación de la encía ex-
realizando un punto de sutura con Patología Oral de la Clínica Dental puesta a las 48 horas con el de siete
aguja y seda 5/0. de la Facultad de Estomatología, de días, en ambos grupos se usó la prue-
En el grupo experimental, se ad- la Universidad Peruana Cayetano ba de suma de rangos asignados de
ministró el extracto etanólico en for- Heredia. El procesamiento fue el Wilcoxon. El estadista desconocía a
ma tópica, aplicándolo por encima convencional de tejidos para el es- que grupo pertenecían los resulta-
del área afectada con una espátula tudio histopatológico. Todas las dos (cegamiento).
metálica, buscando cubrir toda el muestras se incluyeron de acuerdo
área de la herida. En seguida, se a los criterios establecidos por el in- Resultados
posicionó el labio inferior con am- vestigador y después fueron proce- Al evaluar el grado de inflama-
bas manos del operador buscando sadas por el técnico para luego ser ción de la encía expuesta y no ex-
modelar el preparado aplicado, de- colocadas en parafina. Posterior- puesta al procedimiento quirúrgico,
bido a la consistencia pegajosa y mente se realizaron cortes seriados en cobayos del grupo control a las
semisólida, y se revisó la aplicación de 3um de espesor, en sentido 48 horas, hubo diferencia estadísti-
final. Se volvió a aplicar el extracto longitudinal. Finalmente las seccio- camente significativa (suma de ran-
en la zona afectada del cobayo 2 nes fueron teñidas con hematoxilina- gos asignados de Wilcoxon,
veces al día durante el periodo de eosina (H-E) para su observación. p=0,019). En el grupo experimental,
observación. En el grupo control se Observaciones histológicas: los al comparar el grado de inflamación
aplicó solamente agua destilada por cortes histológicos fueron evaluados de la encía expuesta y no expuesta
medio de una gasa humedecida, ce- mediante microscopio de luz a 40X se encontraron procesos inflamato-
rrándose la herida con el mismo pro- y 400X. La evaluación histológica rios diferentes. Al comparar el gra-
cedimiento que para el grupo expe- fue realizada por una patóloga oral, do de inflamación de la encía ex-
rimental. quien desconoció el tratamiento asig- puesta entre el grupo control y ex-
Luego de finalizar el procedi- nado a cada espécimen (ciego) y perimental a las 48 horas, se encon-
miento quirúrgico, se sacrificaron a evaluó todos los especímenes una tró diferencia significativa (prueba
los ocho primeros cobayos (cuatro vez finalizados todos los procedi- U de Mann-Withney p=0,038), lo
de cada grupo), a las 48 horas del mientos, registrándose en la Ficha que demuestra que los cobayos a los
procedimiento; posteriormente fue- de recolección de datos. que se les aplicó el factor experi-
ron sacrificados los otros ocho Consideraciones éticas: la ejecu- mental (Ephedra americana HyB)
cobayos (cuatro de cada grupo) a ción de este trabajo contó con la tuvieron menos actividad inflamato-
los siete días del procedimiento. Fue- aprobación del Comité Institucional ria que a los que no se les aplicó
ron sacrificados por inhalación con de Ética sobre el uso de animales (Tabla 1).
sobredosis de cloroformo en una de experimentación de la Universi- A los siete días en ambos gru-
campana, registrando su fecha y dad Peruana Cayetano Heredia, te- pos, al comparar el grado de infla-
hora de sacrificio, seguidamente se niendo en cuenta el reglamento para mación entre la encía expuesta y no
obtuvieron biopsias excisionales de el trabajo con animales de laborato- expuesta se encontró diferencia sig-
la zona en que se realizó la cirugía, rio. nificativa (suma de rangos asigna-
con ayuda de una hoja de bisturí Análisis estadístico: se realizó el dos de Wilcoxon, p=0,011). Y al com-
Nº11 colocada en un mango para bis- análisis bivariado para comparar el parar el grado de inflamación de la
turí Nº3, con 10mm de margen de grado de inflamación de la encía encía expuesta de los grupos con-
seguridad en todas las direcciones expuesta y no expuesta al procedi- trol y experimental, no se encontró
hasta hueso. miento quirúrgico en cada grupo uti- diferencia significativa (U de Mann-

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Withney, p=0,105). Sin embargo, Tabla 1. Grado de inflamación de la encía de cobayos, del grupo control y
dentro del grupo a los que se aplicó experimental en las que se realizo procedimiento quirúrgico a las 48 horas.
el factor experimental (Ephedra Grado de inflamación Control Experimental Valor p*
americana HyB), tres muestras N 8 8 ---
presentaron mejores condiciones en Mediana 2,50 2,00 0,038
comparación a los que no lo recibie- Desviación cuartel 0,50 0,38 ---
ron, dos muestras presentaron repa- Valor mínimo 2 1 ---
ración final, y en las muestras res- Valor máximo 4 2 ---
* Prueba de U de Mann-Wit hney
tantes se observó similitud en cuan-
Tabla 2. Grado de inflamación de la encía de cobayos, del grupo control y
to a las características inflamatorias
experimental en las que se realizo procedimiento quirúrgico a los 7 días.
del grupo control (Tabla 2).
Grado de inflamación Control Experimental Valor p*
Al comparar la evolución del gra-
N 8 8 ---
do de inflamación de la encía ex-
Mediana 5 6 0,105
puesta del grupo control, entre las Desviación cuartil 0,50 0,75 ---
48 horas y siete días, se obtuvo di- Valor mínimo 3 5 ---
ferencia significativa (suma de ran- Valor máximo 6 7 ---
gos asignados de Wilcoxon, p=0,010) * Prueba de U de Mann-Wit hney
y en el grupo experimental también Tabla 3. Grado de inflamación de la encía expuesta al procedimiento
se encontró diferencia estadística- quirúrgico, en cobayos del grupo experimental a las 48 horas y a los 7 días.
mente significativa (suma de rangos Grado de inflamación 48 Horas 7 días Valor p*
asignados de Wilcoxon, p=0,008) N 8 8 ---
(Tabla 3). Mediana 2,00 6,00 0,008
Desviación cuartil 0,38 0,75 ---
Discusión Valor mínimo 1 5 ---
El grupo experimental de la pre- Valor máximo 2 7 ---
* Prueba de suma de rangos as ignados d e Wilcoxon
sente investigación, estuvo constitui-
do por 32 cobayos que cumplieron tación por un especialista. Además, demuestra el efecto antiinflamatorio
los criterios de selección, basado en se realza que el proceso de inter- de la Ephedra americana HyB, al
estudios semejantes (1,9,16) y tam- pretación de las muestras, llevado a comparar el grado de inflamación de
bién se determino mediante la prue- cabo por la patóloga y el análisis las encía expuestas de los grupos
ba piloto. La distribución en ambos estadístico, fueron ciegos en ambos control y experimental, evaluados a
grupos (control y experimental) y la casos (doble ciego). las 48 horas, en donde la encía de
distribución para los dos tiempos de En la evaluación de las muestras, cobayos del grupo experimental a
evaluación (48 horas y siete días) fue a las 48 horas, la encía no expuesta los que se les aplicó el extracto
realizada al azar. Se tuvo mucho al procedimiento quirúrgico (grupo etanólico tuvo menor intensidad y
cuidado con la metodología emplea- control) casi no presentó inflamación, actividad inflamatoria que los
da en éste estudio, que aún se en- en tanto la encía expuesta, si pre- cobayos del grupo control (Fig. 1 y
cuentra en la fase preclínica (ani- sento actividad inflamatoria, produc- 2).
males de experimentación) dentro to de la lesión provocada mediante Se sabe que los principios acti-
del orden secuencial de estudios, para el procedimiento quirúrgico. Pero en vos de una planta, son los responsa-
posteriormente ser aplicado en se- el grupo experimental, grupo control, bles de generar las propiedades te-
res humanos. La escala empleada la inflamación está presente, proba- rapéuticas para el control de la sa-
para medir la inflamación en éste blemente debido a microtrauma- lud (3), siendo los principios activos
trabajo de investigación, también fue tismos y que clínicamente no eran más importantes y relacionados con
usada en otros trabajos de investi- perceptibles, de igual manera la en- el efecto antiinflamatorio los
gación (7-10); sin embargo se pone cía expuesta mostró inflamación flavonoides, taninos y alcaloides, los
énfasis en que la escala usada sino pero en mayor intensidad y básica- cuales se encuentran en la Ephedra
mide la inflamación de acuerdo a su mente procesos agudos, producto americana HyB. Wei et al. (17) de-
evolución; de esta manera es impres- del procedimiento quirúrgico. mostraron la actividad antiinflama-
cindible hacer una correcta interpre- En la presente investigación se toria de los flavonoides aislándolos,

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Arriola-Guillén L, Sacsaquispe-Contreras SJ.

Respecto a la evolución del pro-


ceso inflamatorio, en ambos grupos
se evidenciaron características se-
mejantes, a las 48 horas y a los siete
días, observándose disminución de
la inflamación para llegar a la repa-
ración final; sin embargo se recalca
que la reparación final solo estuvo
presente en algunas muestras eva-
luadas del grupo experimental y no
en el grupo control. Finalmente la
aplicación de la Ephedra america-
na HyB sobre la encía de cobayos,
después de realizado el procedimien-
to quirúrgico, produce que el grado
de inflamación sea menor y que la
reparación sea más rápida.
La importancia de éste estudio
Fig. 1. Grupo Experimental: muestra a las 7 Fig. 2. Grupo Control: En la vista superior es de carácter teórica, además de
horas (vista superior) mostrando tejido se aprecia a las 7 horas, un denso infiltrado
conjuntivo fibroso con infiltrado inflamato- inflamatorio formando microabscesos (H-E, tener relevancia clínica al presentar
rio agudo constituido por PMN (H-E, 40X). 40X). Despues del procedimiento quirurgico una sustancia antiinflamatoria, alter-
En la vista inferior se aprecia el tejido des- a las 48 horas, se observa infiltrado nativa para el control de la inflama-
pués del procedimiento quirúrgico a las 48 inflamatório linfoplasmocitario moderado ción; también tiene relevancia social,
horas (H-E, 40X). difuso (H-E, 40X).
ya que al concluir con las fases de
encontrando que éstos actuaban so- similares debido a que no sufrió nin- investigación, podremos contar con
bre los mediadores específicos de la guna lesión, pero si presenta proce- una alternativa, probablemente más
inflamación. Datta et al. (18) des- sos inflamatorios más leves produc- económica.
cribieron que los flavonoides to de la actividad del propio animal.
glucósidos poseen de suave a mo- En el grupo experimental, la encía Agradecimiento
derado efecto antiinflamatorio. Cho expuesta presento tejido de granu- Agradecemos al Dr. Eduardo
et al. (19) vieron el efecto lación principalmente maduro y re- Bernabé Ortiz, por su apoyo en el
antiinflamatorio de los bioflavo- paración final, y la encía no expues- análisis estadístico de los resultados
noides, observando que inhiben la ta carente de lesiones casi no pre- del presente trabajo.
acción de las citoquinas e sento inflamación.
interleukinas IL-1, mediadores que Se debe tener en cuenta que a Referencias bibliográficas
participan en el proceso inflamato- los siete días de producida una le- 1. Jurupe H, Iparraguirre D, Perez
rio. Subarnas y Wagner (20) eva- sión que produjo inflamación, ésta ya E. Estudio de la actividad
luaron la actividad antiinflamatoria debe estar reparada o estar en vías antiinflamatoria de extractos de
de los taninos y concluyeron que su de reparación, salvo que el agente Bacharis Lanceolada en anima-
mecanismo de acción puede ser de- que la causó continúe y se manifieste les de laboratorio. Anales de la
bido a la inhibición de la biosíntesis mediante una proceso inflamatorio Facultad de Medicina UNMSM.
de la prostaglandina, debido a que simplemente crónico. En el presen- 1995; 56:10-2.
tienen un efecto inhibitorio en la vía te estudio se observó que la encía 2. Palacios Q. Plantas Medicinales
de la ciclooxigenasa. de cobayos a las que se les aplicó el del Perú. 1ra ed. Lima: Consejo
A los siete días en la encía ex- extracto etanólico presentó carac- Nacional de Ciencia y Tecnolo-
puesta al procedimiento quirúrgico terísticas más favorables llegando gía CONCYTEC; 1993.
del grupo control, se muestra la pre- incluso a la reparación final y no pre- 3. García L, Rojo D, García L,
sencia de tejido de granulación in- sentó procesos agudos a diferencia Hernández A. Plantas con Pro-
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