Laporan Praktikum Biologi Oral 2

Pemeriksaan Radikal Bebas / Malondialdehyde (MDA)

Oleh:

Stefanus Ferry Setiawan

021111039

BIOLOGI ORAL II – DEPARTEMEN BIOLOGI ORAL

FAKULTAS KEDOKTERAN GIGI - UNAIR

Semester Genap – 2013 / 2014

1. Buat bagan prosedur pemeriksaan MDA!

2. Jelaskan fungsi PBS, TCA, dan TBA!

 PBS merupakan sebuah larutan penyangga yang biasa digunakan dalam
penelitian biologi. Buffer membantu untuk mempertahankan konstan pH.
Osmolaritas dan konsentrasi ion solusi yang sesuai dengan tubuh manusia
(isotonik) (Anonim 2, 2009). PBS sering digunakan dalam percobaan
biologi sel untuk mempertahankan osmolaritas sel. Garam mengandung ion,
yang menyeimbangkan jumlah ion garam di dalam sel. Jika sel yang
tenggelam ke dalam solusi yang memiliki terlalu banyak garam ion, air akan
bocor keluar dari sel, menyebabkan sel menyusut. Sebaliknya, jika sel
terbenam ke dalam solusi yang memiliki ion terlalu sedikit garam, air akan
masuk ke dalam sel, menyebabkan sel pecah. Oleh karena itu, sangat
penting saat melakukan percobaan biologi sel untuk menjaga sel-sel di
 osmolaritas tertentu. PBS adalah pada osmolaritas yang benar untuk
menjaga sel-sel dalam negara isotonik. PBS sering digunakan sebagai
larutan penyangga dalam berbagai eksperimen untuk mempertahankan pH
protein. Protein memerlukan kisaran pH tertentu untuk menjaga netralitas
pada asam amino tertentu, untuk mempertahankan struktur protein. Jika
tidak, struktur protein akan terdenaturasi
 Asam thiobarbituric (TBA) (Tarladgis et al.,1960) adalah salah satu yang
paling banyak digunakan untuk mengukur lipid Produk oksidasi dalam
produk daging dan daging karena itu sederhana dan cepat. Uji TBA
menentukan jumlah malondialdehid (MDA), produk sampingan sekunder
utama oksidasi lipid, dalam sampel. Penentuan MDA dalam produk daging
atau telah dipelajari luas (Hoyland dan Taylor,1991, dan korelasi signifikan
antara nilai TBA dan skor sensorik daging unggas telah dilaporkan (Salih et
al.,1987). Namun, Kosugi et al.(1989) melaporkan bahwa absorbansi
pigmen merah dalam metode TBA mungkin tidak khusus mengukur MDA
karena zat lainnya dapat juga bereaksi dengan TBA dan berkontribusi
terhadap absorbansi. Selain itu , pemanasan dan kondisi asam dapat
menyebabkan terlalu tinggi zat reaktif asam thiobarbituric (TBARS). Gray
dan Monahan ( 1992) melaporkan bahwa MDA berinteraksi dengan
berbagai unsur makanan seperti amino asam , protein , glikogen , dan bahan
makanan lainnya. Sehingga hasil interaksi MDA dan TBA kurang dianggap
benar sempurna.
 Senyawa ini banyak digunakan dalam bidang biokimia, untuk pengendapan
makromolekul seperti protein, DNA dan RNA. Garam natriumnya digunakan
sebagai pembasmi rumput liar. Larutan yang mengandung asam trikloroasetat
digunakan untuk penghapus tato dan pengobatan kutil, termasuk kutil kelamin
(aman digunakan selama kehamilan). Garam-garam dari asam trikloroasetat
disebut trikloroasetat. Reduksi sebagian dari asam trikloroasetat
menghasilkan asam dikloroasetat, merupakan suatu obat aktif yang berpotensi
dapat menyembuhkan penyakit kanker
3. Menghentikan jalannya reaksi hidrolisis dgn mendenaturasi enzim krn tca memberi
suasana asam Jelaskan prinsip kerja spektrofotometer!
 Prinsip kerja spektrofotometri berdasarkan hukum Lambert-Beer, bila
cahaya monokromatik (I0),melalui suatu media (larutan), maka sebagian
cahaya tersebut diserap (Ia), sebagian dipantulkan (Ir), dan sebagian lagi
dipancarkan (It). Transmitans adalah perbandingan intensitas cahaya yang
di transmisikan ketika melewati sampel (It) dengan intensitas cahaya mula-
mula sebelum melewati sampel (Io). Persyaratan hukum Lambert-Beer
antara lain : Radiasi yang digunakan harus monokromatik, rnergi radiasi
yang di absorpsi oleh sampel tidak menimbulkan reaksi kimia, sampel
(larutan) yang mengabsorpsi harus homogeny, tidak terjadi flouresensi atau
phosphoresensi, dan indeks refraksi tidak berpengaruh terhadap
konsentrasi, jadi larutan harus pekat (tidak encer).