PATOLOGI KLINIK

A. SESI 1

A.1. HEMOGLOBIN (metode Cyanmethemoglobin)

Prinsip
Seluruh darah akan ditambahkan ke Cyanmethemoglobin (HiCN) reagen. Kalium ferricyanide di
reagen mengubah besi hemoglobin dari besi ferro (Fe++) ke besi ferri (Fe+++) untuk membentuk
methemoglobin (Hi) yang kemudian menggabungkan dengan potasium sianida untuk membentuk
pigmen yang stabil, Cyanmethemoglobin (HiCN). (Hi = hemoglobin = hemoglobin yang setrika sudah
teroksidasi ke keadaan besi. HiCN = hemoglobin sianida = hi yang telah banded terhadap ion
sianida). Kehadiran deterjen nonionik di reagen meningkatkan lisis dari sel-sel darah merah dan
menurunkan jumlah kekeruhan yang dihasilkan dari protein abnormal, seperti lipoprotein. Intensitas
warna campuran ini diukur dalam spektrofotometer pada panjang gelombang 540 nm. Kepadatan optik
dari solusi sebanding dengan konsentrasi hemoglobin. Semua bentuk hemoglobin diukur dengan
metode ini kecuali sulfhemoglobin.

Spesimen
Seluruh darah, menggunakan EDTA sebagai antikoagulan tersebut. Darah kapiler juga dapat
digunakan.

Reagen dan Peralatan

1. Cyanmethemoglobin (hemiglobincyanide) (HiCN) / reagen Drabkin berisi potasium sianida (50
mg), potasium ferricyanide (200 mg), potasium dihidrogen fosfat (KH2PO4) (140 mg), dan detergen
nonionik (1 mL) dalam 1 L air suling.
2. Tabung uji, 10 x 75 mm
3. Pipet, 0,02 mL.
4. Spektrofotometer (540 nm)

Prosedur
1. Tempatkan tepat 5.0 mL reagen HiCN ke dalam sebuah tabung tes dengan tepat berlabel. Tempat
5.0 mL reagen ke dalam tabung reaksi untuk digunakan sebagai blanko.