Anda di halaman 1dari 12

FORMAT TELAAH JURNAL

Judul artikel : Nitric oxide donors rescue diabetic nephropathy through oxidative-
stress- and nitrosative-stressmediated Wnt signaling pathways
Penulis : Yung-Chien Hsu, dkk
Publikasi : J Diabetes Invest Vol. 6 No. 1 January 2015
Penelaah :Eristamiani
Tanggal telaah : 30 Oktober 2018
Metode pencarian literatur :
a. Database yang digunakan : NCBI
b. Kata kunci pencarian di google scholar/google/database journal : Diabetes , Nefropati
c. Jumlah literatur yang didapatkan relevan dengan yang dicari : 19
I. Deskripsi singkat artikel/abstrak :
a. Tujuan penelitian : Tujuan dari penelitian ini adalah untuk menyelidiki apakah donor
NO dapat menipiskan fibrosis ginjal diabetik dan apoptosis melalui modulasi
oksidatif-dan stres-nitrosative, dan pensinyalan Wnt menggunakan model diabetes in
vigor.
b. Hasil penelitian : Tidak ada pengobatan donor yang secara signifikan mengurangi
rasio berat ginjal terhadap berat badan dan proteinuria. Perawatan ini juga secara
signifikan dipulihkan efek penekan diabetes pada NO kemih + NO tingkat.
Immunohistochemistry menunjukkan bahwa NO pengobatan donor secara signifikan
mengurangi transformasi growth factor (TGF) -β1, fibronektin, membelah caspase-3
dan trifosfatbiotin nick akhir-label ekspresi di glomeruli tikus diabetes. Kami
menemukan bahwa diabetesmempromosikan 8-hydroxy-2′-deoxyguanosine, dan
ekspresi peroxynitrite bertepatan dengan ekspresi NO sintase endotel yang berkurang
pada glomeruli. Menariknya, pengobatan tanpa donor sepenuhnya menghilangkan
stres oksidatif dan stres nitrosatif, dan mengembalikan ekspresi NO sintase endotel
pada glomerulus ginjal diabetes. Hasil imunohistomorfometri menunjukkan bahwa
terapi donor NO secara signifikan memulihkan ekspresi Wnt5a yang ditekan dan
imunoreaktivasi β-catenin pada glomeruli. Berdasarkan laser-ditangkap
microdissection untuk reaksi transkripsi polimerase rantai balik kuantitatif, diabetes
secara signifikan meningkatkan TGF-β1, dan ekspresi fibronektin bertepatan dengan
ekspresi Wnt5a yang tertekan. Tidak ada pengobatan donor yang mengurangi TGF-β1,
aktivasi fibronektin, dan efek menekan diabetes pada ekspresi Wnt5a dan β-catenin
pada glomeruli ginjal.
c. Kesimpulan penelitian : Tidak ada pengobatan donor yang meredakan akumulasi
matriks ekstraseluler dan apoptosis pada nefropati diabetik in vivo dengan tidak hanya
mencegah stres oksidatif dan nitrostasi yang diperantarai diabetes, tetapi juga
memulihkan regulasi penurunan ekspresi NO sintase endotel dan pensinyalan Wnt / β-
catenin. Temuan ini menunjukkan bahwa modulasi NO merupakan strategi alternatif
yang layak untuk menyelamatkan cedera ginjal diabetes.
II. Telaah artikel
a. Fokus utama penelitian : menyelidiki apakah donor NO dapat menipiskan fibrosis
ginjal diabetik dan apoptosis melalui modulasi oksidatif-dan stres-nitrosative, dan
pensinyalan Wnt menggunakan model diabetes in vigor.
b. Elemen yang mempengaruhi tingkat keabsahan penelitian
Gaya penulisan
1) Sistematika penulisan :
- Abstrak (Aims/Introduction, Materials and Methods, Results, Conclusions,)
- Introduction
- Materials and Methods (Streptozotocin-Induced Diabetes, NO Donor (NOC-18)
TreatmentP,Measurement of NO,Immunohistochemistry, Terminal
Deoxynucleotidyl Rransferase-Mediated Deoxyuridine Triphosphate-Biotin Nick
End-Labeling,Kidney Tissue Preparation and Microdissection,Real-Time
PCR,Histomorphometry,Western Blotting,Statistical Analysis)
- Results(Exogenous NO Donors for 8 Weeks But Not 4 Weeks Alleviated Urinary
Total Proteinuria Secretion of Kidney in Diabetic Rats, NO Donors Restored
Urinary NO Levels in 4-Week and 8-Week Diabetic Rats, Exogenous NO Donors
Alleviated TGF-b1, Fibronectin and Triphosphate-Biotin Nick End-Labeling
Expression of the Kidney in Diabetic Rats, Exogenous NO Donors Alleviated
Oxidative Stress and Nitrosative Stress Expression of the Kidney in Diabetic Rats,
Exogenous NO Donors Restored Wnt Signaling Expression of Kidney in Diabetic
Rats, NO Donor Treatment Alleviated Extracellular Matrix Accumulation in
Renal Mesangial Cells)
- Discussion
2) Tata bahasa : bahasa inggris
Penulis
1) Kualifikasi penulis : Departments of 1 Nephrology and 2 Kidney and
Diabetic Complications Research Team (KDCRT), 3 Chronic Kidney
Disease Center, 4 Division of Endocrinology and Metabolism, Chang Gung
Memorial Hospital, Chiayi, and 5 School of Traditional Chinese Medicine,
Chang Gung University College of Medicine, Tao-Yuan, Taiwan
Judul
1) Kelebihan : singkat, jelas tujuannya menyelidiki apakah donor NO dapat
menipiskan fibrosis ginjal diabetik dan apoptosis melalui modulasi
oksidatif-dan stres-nitrosative, dan pensinyalan Wnt menggunakan model
diabetes in vigor.
2) Kekurangan : judul terlalu panjang dan isinya lebih banyak
informasinya.
Abstrak
1) Kelebihan : mampu menjelaskan secara ringkas isi artikel.
2) Kekurangan : badan artikel banyak informasi yang dapat ditampilkan di
result.
c. Elemen yang mempengaruhi kekuatan suatu penelitian
1. Tujuan/masalah penelitian :
Diabetic nephropathy is a leading cause of end-stage renal disease (ESRD),
accounting for 35–40% of all new ESRD cases that require dialysis therapy
worldwide1 . Although current medical care has been improved, the number of
diabetic patients with nephropathy progression to ESRD is still increasing. In
comparison with other types of chronic renal disease, diabetic nephropathy is
associated with rapid functional deterioration, and eventually progresses to renal
failure requiring hemodialysis1 . Diabetic nephropathy is distinguished
histologically by glomerular hypertrophy, thickening of the glomerular basement
membrane, expansion of the mesangial matrix and final glomerulosclerosis2,3.
Marked and progressive accumulation of the mesangial matrix, as a result of
increased synthesis and decreased degradation of mesangial extracellular matrix
proteins that include collagen IV and fibronectin4–6 , ultimately obliterates the
glomerular capillary loops and leads to renal failure.
The purposes of the present study were to investigate whether NO donors can
attenuate diabetic renal fibrosis and apoptosis through the modulation of
oxidative stress and nitrosative stress in diabetic glomerular injury, and whether
NO donors regulate Wnt signaling in the kidney microenvironment in
streptozotocin-induced diabetic rats.
Nefropati diabetik adalah penyebab utama penyakit ginjal stadium akhir
(ESRD), terhitung 35-40% dari semua kasus ESRD baru yang memerlukan
terapi dialisis di seluruh dunia . Meskipun perawatan medis saat ini telah
diperbaiki, jumlah pasien diabetes dengan perkembangan nefropati ke ESRD
masih meningkat. Dibandingkan dengan jenis penyakit ginjal kronis lainnya,
nefropati diabetik berhubungan dengan kerusakan fungsional yang cepat, dan
akhirnya berkembang menjadi gagal ginjal yang memerlukan hemodialisis .
Nefropati diabetik dibedakan secara histologis oleh hipertrofi glomerulus,
penebalan membran basal glomerulus, perluasan matriks mesangial dan
glomerulosklerosis akhir . Ditandai dan akumulasi progresif dari matriks
mesangial, sebagai hasil dari peningkatan sintesis dan penurunan degradasi
protein matriks ekstraseluler mesangial yang meliputi kolagen IV dan
fibronektin , akhirnya melenyapkan glomerulus kapiler loop dan menyebabkan
gagal ginjal
Tujuan dari penelitian ini adalah untuk menyelidiki apakah donor NO dapat
melemahkan fibrosis ginjal dan apoptosis diabetes melalui modulasi stres
oksidatif dan stres nitrosatif pada cedera glomerulus diabetes, dan apakah
donor NO mengatur pensinyalan Wnt di lingkungan mikro ginjal pada tikus
diabetes yang diinduksi streptozotocin .
2. Hipotesis : Temuan ini menunjukkan bahwa modulasi NO merupakan
strategi alternatif yang layak untuk menyelamatkan cedera ginjal diabetes.
3. Sasaran :
Four-month-old male Wistar rats (National Experimental Animals
Production Center, Taipei, Taiwan) were caged in pairs, and maintained
on rodent chow and water ad libitum. Rats with diabetes were induced
according to previously described procedures
Tikus Wistar jantan berumur empat bulan (Pusat Produksi Hewan
Eksperimental Nasional, Taipei, Taiwan) dikurung berpasangan, dan
dipelihara pada hewan pengerat dan air ad libitum. Tikus dengan diabetes
diinduksi sesuai dengan prosedur yang dijelaskan sebelumnya.
4. Pertimbangan etik : telah dilakukan kaji etik
All studies were approved by the Institutional Animal Care and Use Committee of
Chang Gung Memorial Hospital, Taiwan

Semua penelitian disetujui oleh Komite Perawatan dan Penggunaan Hewan


Institusional Rumah Sakit Memorial Chang Gung, Taiwan
5. Definisi operasional
Briefly, diabetes was induced by a single intraperitoneal injection of
streptozotocin (100 mg/kg bodyweight; Sigma Chemical Inc., St Louis, MO,
USA). Streptozotocin was dissolved in 50 mmol/L citric acid and sterile filtered
through a 0.22-mm filter. One week after injection, blood sugar was measured by
tail bleeding. Rats with serum glucose >300 mg/dL were used for the following
experiments.

Secara singkat, diabetes diinduksi oleh injeksi intraperitoneal tunggal


streptozotocin (100 mg / kg berat badan; Sigma Chemical Inc., St Louis,
MO, USA). Streptozotocin dilarutkan dalam 50 mmol / L asam sitrat dan
steril disaring melalui filter 0,22-mm. Satu minggu setelah penyuntikan,
gula darah diukur dengan pendarahan ekor. Tikus dengan glukosa serum>
300 mg / dL digunakan untuk percobaan berikut.
6. Metode
a. Desain penelitian :
All values were expressed as the mean – standard error. The
Wilcoxon test was used to evaluate differences between the sample of
interest and its respective control. For analysis of concentration effect
and time course, a multiple range of anova and Bonferroni post-hoc
tests were used. P < 0.05 was considered significant.
b. Semua nilai dinyatakan sebagai mean ± standard error. Uji Wilcoxon
digunakan untuk mengevaluasi perbedaan antara sampel yang menarik
dan kontrol masing-masing. Untuk analisis efek konsentrasi dan waktu,
berbagai rentang anova dan tes pasca-hoc Bonferroni digunakan. P ˂
0,05 dianggap signifikan.
c. Populasi dan sampel :
Four-month-old male Wistar rats (National Experimental Animals
Production Center, Taipei, Taiwan) were caged in pairs, and maintained
on rodent chow and water ad libitum. Rats with diabetes were induced
according to previously described procedures

 Populasi : Pusat Produksi Hewan Eksperimental Nasional, Taipei,


Taiwan
 Sampel : Tikus Wistar jantan berumur empat bulan dikurung
berpasangan, dan dipelihara pada hewan pengerat dan air adlibitum
 Teknik : Secara singkat, diabetes diinduksi oleh injeksi
intraperitoneal tunggal streptozotocin (100 mg / kg berat badan;
Sigma Chemical Inc., St Louis, MO, USA). Streptozotocin
dilarutkan dalam 50 mmol / L asam sitrat dan steril disaring melalui
filter 0,22-mm. Satu minggu setelah penyuntikan, gula darah diukur
dengan pendarahan ekor. Tikus dengan glukosa serum> 300 mg / dL
digunakan untuk percobaan berikut
 Penentuan besar sampel : sampel yg tinggi diwilayah tsb >= 5 tahun
d. Variabel penelitian : Independen : Streptozotocin-Induced Diabetes,
Pengobatan Tanpa Donor (NOC-18), Pengukuran NO, Imunohistokimia,
Terminal Deoxynucleotidyl Rransferase-Mediated Deoxyuridine
Triphosphate-Biotin Nick Akhir-Pelabelan, Persiapan Jaringan Ginjal
dan Microdissection, PCR Waktu Nyata, Histomorphometry, Western
Blotting dijelaskan definisi operasionalnya.
Dependen :Prevalensi ESRD.
e. Instrumen yang digunakan : spektrofotometri menggunakan kit
komersial dan sesuai dengan protokol produsen.
7. Analisis data
a. Analisis statistik yang digunakan :
All values were expressed as the mean – standard error. The Wilcoxon test
was used to evaluate differences between the sample of interest and its
respective control. For analysis of concentration effect and time course, a
multiple range of anova and Bonferroni post-hoc tests were used. P < 0.05
was considered significant.
Semua nilai dinyatakan sebagai mean ± standard error. Uji Wilcoxon
digunakan untuk mengevaluasi perbedaan antara sampel yang menarik
dan kontrol masing-masing. Untuk analisis efek konsentrasi dan waktu,
berbagai rentang anova dan tes pasca-hoc Bonferroni digunakan. P˂
0,05 dianggap signifikan.
b. Hasil penelitian (yang relevan dengan yang ingin dicari) :
Exogenous NO Donors for 8 Weeks But Not 4 Weeks Alleviated Urinary
Total Proteinuria Secretion of Kidney in Diabetic Rats
We examined whether in vivo donation of NO could alter diabetes induction
of glomerulopathy. Diabetic rats were given NOC-18 for 28 and 56 days.
There was no significant difference in blood glucose, HbA1c, ratio of kidney
weight-to-bodyweight, and total urinary excretion in 4 weeks and 8 weeks
(Supporting Information). In comparison with the normal group, diabetes
significantly increased blood glucose, HbA1c, ratio of kidney weight-to-
bodyweight, and total urinary excretion in 4 and 8 weeks. NOC-18 treatment
for 4 and 8 weeks did not evidently alter blood glucose and HbA1c
throughout the study period. Interestingly, both 4- and 8-week NO donor
treatment significantly reduced the ratio of kidney weight-tobodyweight
compared with that of the diabetic group. As for total urinary protein to
creatinine ratio (mg/mg), NOC-18 treatment for 4 weeks marginally, but not
significantly, reduced the promoting effect of diabetes on urinary protein
secretion, whereas NOC-18 treatment significantly reduced the promoting
effect of diabetes on urinary protein secretion (Table 1).
NO Donors Restored Urinary NO Levels in 4-Week and 8-Week Diabetic
Rats
In comparison with the normal control group, diabetes significantly decreased
urinary NO2 + NO3 levels and coincided with enlarged diabetic kidneys.
Exogenous NOC-18 (1 U/kg/day) treatments significantly restored the
suppressive effect of diabetes on urinary NO2 + NO3 levels and
downregulated enlarged diabetic kidneys (Figure 1).
Exogenous NO Donors Alleviated TGF-b1, Fibronectin and
Triphosphate-Biotin Nick End-Labeling Expression of the Kidney in
Diabetic Rats
In the absence of primary antibodies, there was no immunostaining of either
TGF-b1 or fibronectin. Mesangial cells in glomeruli showing positive for
immuno-expression exhibited a brown color in cell periphery and cytoplasm.
In the control group, cells located at the glomeruli in the renal cortex
expressed weak fibronectin and TGF-b1 expression. In the diabetes group, in
contrast, mesangial cells showed strong fibronectin and TGF-b1 expression.
Mesangial cells expressed slight TGF-b1 and fibronectin in the diabetic renal
cortex after NO donor treatment. In the diabetes group, mesangial cells in the
glomeruli showed strong DNA fragmentation, as demonstrated by positive
triphosphate-biotin nick end-labeling (TUNEL) staining. In contrast, few cells
in the glomeruli of diabetic rats with NO donor treatment showed weak
TUNEL staining (Figure 2a). Immunohistomorphometry results showed that
diabetes significantly increased TGF-b1, fibronectin, cleaved Caspase-3 and
TUNEL expression of glomerular mesangial cells compared with those in the
control group. Exogenous NO donor treatment significantly reduced TGF-b1,
fibronectin, cleaved caspase-3 and TUNEL expression in the renal glomeruli
of the diabetic rats (Figure 2b). In summary, exogenous NO donor treatment
significantly downregulated apoptosis, and coincided with reduced
extracellular matrix accumulation in the renal glomeruli of diabetic rats.
Exogenous NO Donors Alleviated Oxidative Stress and Nitrosative Stress
Expression of the Kidney in Diabetic Rats
Superoxide easily reacts with nucleotides resulting in DNA damage to form
8-hydroxy-20 -deoxyguanosine (a marker of DNA oxidative damage).
Furthermore, the reaction of superoxide with NO produces peroxynitrite,
which is a marker of nitrosative stress. We found that diabetes promoted 8-
hydroxy20 -deoxyguanosine and peroxynitrite expression in kidney tissue,
whereas NO donor treatment alleviated the diabetes promotion of 8-hydroxy-
20 -deoxyguanosine and peroxynitrite expression. Furthermore, in the
diabetes group, cells located at glomeruli in the renal cortex expressed weak
eNOS expression when compared with those of the normal group. NO donor
administration evidently restored diabetes attenuation of eNOS expression
(Figure 3a). Immunohistomorphometry results showed that diabetes
significantly increased 8-hydroxy-20 -deoxyguanosine and peroxynitrite
expression of glomerular mesangial cells compared with those in the control
group. Exogenous NO donor treatment significantly upregulated eNOS, and
coincided with reduced oxidative and nitrosative stress in the renal glomeruli
of diabetic rats (Figure 3b). We carried out western blot analysis to determine
eNOS protein expression in diabetic kideny. Diabetic kidney resulted in a
significant downregulation of eNOS protein expression. Exogenous NO
donor treatment significantly restored eNOS expression in the diabetic
treatment group (Figure 3c).
Exogenous NO Donors Restored Wnt Signaling Expression of Kidney in
Diabetic Rats
We investigated whether NO donor treatment could alter Wnt5a, and b-
catenin expression in diabetic kidneys. In the diabetes group, cells located at
the glomeruli in the renal cortex expressed weak Wnt5a and b-catenin
expression when compared with the normal group. NO donor administration
evidently restored diabetes attenuation of Wnt5a and b-catenin expression
(Figure 4a). Immunohistomorphometry results showed that exogenous NO
donor treatment significantly suppressed mesangial cell apoptosis, and
coincided with restored Wnt5a expression and b-catenin immunoreactivities
in the renal glomeruli of diabetic rats (Figure 4b). Immunoblotting showed
that diabetes reduced dephosphorylated b-catenin expression. NO donor
significantly restored dephosphorylated b-catenin accumulation in diabetic
rats (Figure 4c).
NO Donor Treatment Alleviated Extracellular Matrix Accumulation in
Renal Mesangial Cells
Glomerular mesangium in the renal tissue were harvested by laser-captured
microdissection to extract the total RNA and quantitative RT–PCR (Figure 5).
Diabetes significantly increased TGF-b1 and fibronectin expression of
glomerular mesangium. NO donor treatment significantly alleviated diabetes-
induced promotion of TGF-b1 and fibronectin expression of glomerular
mesangium. Real-time PCR showed that diabetes reduced Wnt5a and b-
catenin messenger RNA expression. NO donor treatment reduced the
suppressing effect of diabetes on Wnt5a and b-catenin messenger RNA
expression in the diabetic glomeruli (Figure 5).
NO donor eksogen untuk 8 minggu tetapi tidak 4 minggu mengurangi
sekresi Proteinuria total urin dari Ginjal di Tikus Diabetes
Kami memeriksa apakah in vivodonasi NO bisa mengubah induksi diabetes
glomerulopati. Tikus diabetes diberi NOC-18 selama 28 dan 56 hari. Tidak ada
perbedaan signifikan dalam glukosa darah, HbA1c, rasio berat badan ginjal-ke-
berat badan, dan ekskresi urin total dalam 4 minggu dan 8 minggu (Informasi
Pendukung). Dibandingkan dengan kelompok normal, diabetes secara signifikan
meningkatkan glukosa darah, HbA1c, rasio berat badan ginjal-ke-berat badan,
dan ekskresi urin total dalam 4 dan 8 minggu. Perawatan NOC-18 selama 4 dan
8 minggu tidak jelas mengubah glukosa darah dan HbA1c selama periode
penelitian. Menariknya, baik pengobatan donor NO 4 dan 8 minggu secara
signifikan mengurangi rasio berat badan-ke-berat ginjal dibandingkan dengan
kelompok diabetes. Adapun total protein urin untuk rasio kreatinin (mg / mg),
pengobatan NOC-18 selama 4 minggu secara marjinal, tetapi tidak signifikan,1
).
TIDAK ADA Para Donor Mengembalikan Tingkat Kencing NO dalam 4-
Minggu dan 8-Minggu Tikus Diabetes
Dibandingkan dengan kelompok kontrol normal, diabetes menurun secara
signifikan NO kemih + NO tingkat dan bertepatan dengan ginjal diabetes
diperbesar. Eksogen NOC-18 (1 U / kg / hari) perawatan secara signifikan
dipulihkan efek penekan diabetes pada NO kemih + NO tingkat dan
menurunkan regulasi ginjal diabetes membesar (Gambar 1 ).
Exogenous NO Donors Meringankan TGF-β1, Fibronectin dan
Triphosphate-Biotin Nick EndPelabelan Ekspresi dari Ginjal pada Tikus
Diabetic
Dengan tidak adanya antibodi primer, tidak ada immunostaining baik TGF-β1
atau fibronektin. Sel mesangial di glomeruli menunjukkan positif untuk ekspresi
kekebalan menunjukkan warna coklat di pinggiran sel dan sitoplasma. Dalam
kelompok kontrol, sel-sel yang terletak di glomeruli di korteks ginjal
menunjukkan ekspresi fibronektin dan TGF-β1 yang lemah. Pada kelompok
diabetes, sebaliknya, sel mesangial menunjukkan ekspresi fibronektin dan TGF-
β1 yang kuat. Sel mesangial menunjukkan sedikit TGF-β1 dan fibronektin di
korteks ginjal diabetik setelah pengobatan tanpa donor. Pada kelompok
diabetes, sel mesangial di glomeruli menunjukkan fragmentasi DNA yang kuat,
seperti yang ditunjukkan oleh pewarnaan tilam-triotin nick-label positif
(TUNEL) positif. Sebaliknya, beberapa sel di glomeruli tikus diabetes dengan
terapi donor NO menunjukkan pewarnaan TUNEL yang lemah (Gambar2 a).
Hasil imunohistomorfometri menunjukkan bahwa diabetes secara signifikan
meningkatkan TGF-β1, fibronektin, membelah Caspase-3 dan TUNEL ekspresi
sel mesangial glomerular dibandingkan dengan mereka pada kelompok kontrol.
Eksogen NO pengobatan donor secara signifikan mengurangi TGF-β1,
fibronektin, dibelah caspase-3 dan ekspresi TUNEL dalam glomeruli ginjal dari
tikus diabetes (Gambar2 b). Singkatnya, pengobatan NO donor eksogen secara
signifikan menurunkan regulasi apoptosis, dan bertepatan dengan pengurangan
akumulasi matriks ekstraseluler pada glomeruli ginjal tikus diabetes.
NO donor eksogen Mengurangi Stres Oksidatif dan Ekspresi Stres
Nitrosatif dari Ginjal pada Tikus Diabetes
Superoksida mudah bereaksi dengan nukleotida yang mengakibatkan kerusakan
DNA untuk membentuk 8-hidroksi-2′-deoxyguanosine (penanda kerusakan
oksidatif DNA). Selanjutnya, reaksi superoksida dengan NO menghasilkan
peroksinitrit, yang merupakan penanda stres nitrosatif. Kami menemukan
bahwa diabetes mempromosikan 8-hidroksi-2′-deoxyguanosine dan ekspresi
peroksinitrit pada jaringan ginjal, sedangkan terapi donor NO mengurangi
promosi diabetes 8-hidroksi-2′- deoxyguanosine dan ekspresi peroksinitrit.
Selanjutnya, pada kelompok diabetes, sel-sel yang terletak di glomeruli di
korteks ginjal mengekspresikan ekspresi eNOS yang lemah bila dibandingkan
dengan kelompok normal. NO administrasi donor jelas dipulihkan pelemahan
diabetes dari eNOS ekspresi (Gambar 3Sebuah). Hasil imunohistomorfometri
menunjukkan bahwa diabetes secara signifikan meningkatkan 8-hidroksi-2′-
deoxyguanosine dan ekspresi peroxynitrite dari sel mesangial glomerular
dibandingkan dengan mereka pada kelompok kontrol. Eksogen NO pengobatan
donor secara signifikan diregulasi eNOS, dan bertepatan dengan mengurangi
stres oksidatif dan nitrosative dalam glomeruli ginjal tikus diabetes (Gambar 3
b). Kami melakukan analisis western blot untuk menentukan ekspresi protein
eNOS pada penderita diabetes diabetes. Ginjal diabetes menghasilkan
downregulation signifikan dari ekspresi protein eNOS. Eksogen NO pengobatan
donor secara signifikan dipulihkan eNOS ekspresi pada kelompok perlakuan
diabetes (Gambar 3 c).
Donor NO Eksogen Dipulihkan Wnt Signaling Ekspresi Ginjal di Tikus
Diabetes
Kami menyelidiki apakah terapi donor NO dapat mengubah Wnt5a, dan
ekspresi β-catenin di ginjal diabetes. Pada kelompok diabetes, sel-sel yang
terletak di glomeruli di korteks ginjal menunjukkan ekspresi Wnt5a dan β-
catenin lemah bila dibandingkan dengan kelompok normal. NO administrasi
donor jelas dipulihkan pelemahan diabetes dari Wnt5a dan ekspresi β-catenin
(Gambar 4 a). Hasil Immunohistomorphometry menunjukkan bahwa perlakuan
donor eksogen NO secara signifikan menekan apoptosis sel mesangial, dan
bertepatan dengan dipulihkan Wnt5a ekspresi dan β-catenin immunoreactivities
dalam glomeruli ginjal tikus diabetes (Gambar 4b). Immunoblotting
menunjukkan bahwa diabetes mengurangi ekspresi β-catenin dephosphorylated.
NO donor secara signifikan dipulihkan akumulasi β-catenin dephosphorylated
pada tikus diabetes (Gambar 4 c).
TIDAK ADA Perawatan Donor yang Mengurangi Akumulasi Matriks
Ekstrasel pada Sel Mesialial Renalis
Mesangium glomerulus pada jaringan ginjal yang dipanen oleh microdissection
laser ditangkap untuk mengekstrak total RNA dan kuantitatif RT-PCR (Gambar
5 ). Diabetes secara signifikan meningkatkan TGF-β1 dan ekspresi fibronektin
dari glomerular mesangium. Tidak ada pengobatan donor yang secara signifikan
mengurangi diabetes yang memicu promosi ekspresi TGF-β1 dan fibronektin
dari glomerular mesangium. PCR real-time menunjukkan bahwa diabetes
mengurangi Wnt5a dan β-catenin messenger RNA expression. NO pengobatan
donor mengurangi efek menekan diabetes pada Wnt5a dan β-catenin ekspresi
messenger RNA dalam glomeruli diabetes (Gambar 5 ).
8. Literatur review / referensi : 28 referensi jurnal; tahun 1984 – 2012.