Inokulasi Mikroorganisme Dengan Teknik Kuadran

A. Tujuan
1. Memahami cara menuang media dengan baik dan benar
2. Memahami cara menginokulasi/ menanam mikroorganisme menggunakan
teknik kuadran pada media agar
3. Mengamati keberadaan mikroorganisme yang tumbuh pada media agar

B. Teori Dasar

Dalam teknik biakan murni tidak saja diperlukan bagaimana memperoleh suatu biakan yang
murni, tetapi juga bagaimana memelihara serta mencegah pencemaran dari luar. Inokulasi
dimaksudkan untuk menumbuhkan, meremajakan mikroba dan mendapatkan populasi mikroba
yang murni.

Inokulasi adalah pekerjaan memindahkan bakteri dari medium yang lama ke medium yang baru
dengan tingkat ketelitian yang sangat tinggi. Media untuk membiakkan bakteri haruslah steril
sebelum digunakan. Pencemaran terutama berasal dari udara yang mengandung banyak
mikroorganisme. Pemindahan biakan mikroba yang dibiakkan harus sangat hati-hati dan
mematuhi prosedur laboratorium agar tidak terjadi kontaminasi. Oleh karena itu, diperlukan
teknik-teknik dalam pembiakan mikroorganisme yang disebut dengan teknik inokulasi biakan.

Teknik penanaman bakteri dengan goresan (streak) bertujuan untuk mengisolasi

mikroorganisme dari campurannya atau meremajakan kultur ke dalam medium baru. Pada
praktikum ini teknik yang digunakan adalah teknik kuadran dengan penjelasan sebagai berikut :

1. Lempengan dibagi menjadi 4 bagian pada luar cawan petri

2. Inokulasikan daerah 1 sebanyak mungkin dengan gerakan sinambung.
3. Panaskan mata jarum ose dan biarkan dingin kembali.
4. Ulangi penggoresan pada daerah 2 dengan cara menarik goresan dari goresan pada
daerah 1.
5. Ulangi prosedur diatas untuk melakukan penggoresan untuk daerah 3 dan 4.

PENUNTUN PRAKTIKUM ANALISIS MIKROBIOLOGI

C. Alat dan Bahan

Alat yang digunakan :

Neraca analitik Cawan petri Loop Ose Erlenmeyer 250 mL

Gelas Kimia 100 mL Oven Kompor lisrik Gelas Ukur 100 mL

Autoklaf Laminar Air Flow Bunsen Inkubator

Bahan yang digunakan :

Air suling Nutrient Agar (NA) Alkohol 70%

Sampel Biakan Mikroorganisme Kapas Alumunium Foil
Tissu

D. Langkah kerja

1. Sterilkan diri dan area kerja

2. Siapkanlah alat dan bahan yang akan digunakan.
3. Cucilah peralatan yang akan digunakan, kemudian sterilisasikan di oven selama 1
jam pada suhu 170-180oC.
4. Buatlah media NA di atas kompor listrik kemudian sterilisasikan di autoklaf selama
15 menit, kemudian letakkan media tersebut di laminar air flow.
5. Bukalah sumbat erlenmeyer yang berisi media, sterilkan mulut erlenmeyer pada api
bunsen dan tuang media tersebut ke dalam cawan petri yang sudah steril lebih
kurang 12-15 mL, sterilkan kembali cawan petri yang berisi media dengan cara
melewatkan di nyala api bunsen. Tunggu hingga media mengeras.
6. Sterilkan loop ose dengan cara mencelupkan kedalam alkohol 70% lalu membakar
ose pada nyala api bunsen sampai pijar sebanyak 3x
7. Ambillah sampel biakan mikroorganisme dengan ose steril kemudian inokulasikan/
tanamkan mikroorganisme dengan cara goresan teknik kuadran di atas media pada
cawan petri. Pastikan setiap kali akan memulai penggoresan, cawan petri disterilkan
dengan cara melewatkannya di nyala api bunsen.
8. Tutup cawan petri.
9. Inkubasikan selama 24 jam kedalam inkubator.
10. Amatilah koloni yang terbentuk.

PENUNTUN PRAKTIKUM ANALISIS MIKROBIOLOGI

 INGAT !!!!!
 Patuhi selalu tata tertib laboratorium.
 gunakan selalu APD kalian selama praktikum
di Lab.
 Jagalah kebersihan laboratorium.

Daaaaan...
 Berdoalah sebelum memulai pekerjaan
apapun.

FORMAT LAPORAN

JUDUL PRAKTIKUM

1. TUJUAN
Tuliskan tujuan praktikum yang akan dikerjakan secara jelas dan singkat (sebutkan
senyawa yang akan diuji)

2. PRINSIP
Tuliskan prinsip dasar dari proses yang akan dikerjakan

3. REAKSI
Tuliskan reaksi yang terjadi pada praktikum (tuliskan semua kemungkinan yang
mungkin terjadi bila ada banyak sampel)

4. PROSEDUR
Tuliskan dalam bentuk diagram alir

5. PENGAMATAN, PERHITUNGAN DAN PEMBAHASAN

a. Hasil Pengamatan
(tuliskan hasil pengamatan berdasarkan percobaan yang telah dilakukan, sertakan
gambar)
b. Perhitungan
(tuliskan hasil perhitungan berdasarkan evaluasi data percobaan)
c. Pembahasan

PENUNTUN PRAKTIKUM ANALISIS MIKROBIOLOGI

 (tuliskan pembahasan mengenai percobaan gravimetri dengan pengendapan)

6. KESIMPULAN
Tuliskan kesimpulan dari percobaan (sesuaikan dengan tujuan)

PENUNTUN PRAKTIKUM ANALISIS MIKROBIOLOGI