Parámetros de Calidad Seminal

según la Organización Mundial

de la Salud (OMS)

El espermiograma es actualmente una herramienta

básica que nos proporciona la mejor información para evaluar la fertilidad del varón y es
muy útil a la hora de indicar tratamientos personalizados para la pareja.

La Organización Mundial de la Salud (OMS) ha publicado sucesivas ediciones del “Manual

para el Examen del Semen Humano y la Interacción Moco Semen” siendo la última en el año
2010. Estos manuales sirven de guía en los laboratorios de Andrología a la hora de evaluar la
calidad seminal. Además en los últimos años La Sociedad Europea de Reproducción Humana
y Embriología (ESHRE) en colaboración con la OMS ha desarrollado un programa para
disminuir las diferencias entre centros en cuanto al diagnóstico y valoración de las muestras
seminales y así unificar los criterios en los distintos laboratorios.

Son muchos los parámetros a tener en cuenta en un espermiograma siendo los analizados
con más frecuencia los que se detallan a continuación:

 Licuefacción: Tras la eyaculación el semen presenta un estado coagulado y necesita

licuarse para proceder a su estudio. En condiciones normales el semen queda licuado
totalmente a los 60 minutos tras la eyaculación.

 Viscosidad: Si la muestra es muy viscosa puede deberse a una disfunción prostática.

 Volumen: El volumen normal de un eyaculado transcurridos de 3 a 5 días de

abstinencia es de 1.5 ml aproximadamente. Un volumen inferior se denomina
hipospermia.
 Color: El color habitual del semen es blanco opalescente, ligeramente amarillento. En
casos en donde el color se vea alterado es conveniente estudiar las posibles causas.

 pH: El valor debe encontrarse por encima de 7.1. Valores inferiores podrían indicar
azoospermia (ausencia de espermatozoides) o procesos inflamatorios crónicos.

 Concentración de espermatozoides: El valor normal es de 15 millones por cada ml

de eyaculado o 39 millones en la totalidad de la muestra. Si no se alcanzan esos
valores hablamos de Oligozoospermia.

 Motilidad: Se valora el porcentaje de espermatozoides móviles y el de progresivos

(móviles que se desplazan). Los móviles progresivos deben superar el 32%, de lo
contrario se denomina Astenozoospermia.

 Vitalidad: El porcentaje de espermatozoides vivos debe superar el 58%. Si fuera

inferior hablaríamos de Necrozoospermia.

 Morfología: En un espermiograma normal debe haber igual o más del 4% de

espermatozoides normales. Si se encuentra por debajo de este valor se denomina
Teratozoospermia.

 Leucocitos: Si la concentración de leucocitos es superior a 1 millón por ml de muestra

puede indicar una infección (leucocitosis).

 Anticuerpos antiespermatozoides o Mar test: refleja la cantidad de

espermatozoides unidos a otras células o partículas. Si más del 50% de
espermatozoides se encuentran unidos puede reflejar un problema inmunitario.
 En el último manual de la OMS se estableció además el concepto de “límite de referencia
inferior” (LRI). Los valores que se encuentren por encima del límite no garantizan una
fecundación exitosa y un posterior embarazo, pero amplían sus posibilidades. El LRI ha ido
disminuyendo con el paso de los años debido a las costumbres de la sociedad y a los nuevos
hábitos de vida tales como la alimentación, tabaco, tóxicos ambientales, etc. A continuación se
representan en una tabla los valores de referencia establecidos en la 4ª edición del manual de
la OMS comparados con los de la 5ª y última edición.

4ª edición (1999) 5ª edición* (2010)

Licuefacción Total a los 60min Total a los 60min
Volumen 2ml 1.5ml
Color Blanco opalescente Blanco opalescente
pH 7.2-7.8 >7.1
Concentración (ml) 20 millones 15 millones
Móviles progresivos 50% 32%
Vitalidad 75% 58%
Morfología 15% 4%
Leucocitos (ml) < 1millón < 1 millón
Mar test <50% esp. Unidos a partículas <50% esp. Unidos a partículas
* Valores del límite de referencia inferior (LRI) utilizados en la actualidad en los centros
especializados en Fertilidad

 Volumen: 2.0 ml o más.

 Concentración de espermatozoides: 20 millones espermatozoides/ml o
más.
 Número total de espermatozoides: 40 millones espermatozoides por
eyaculado o más.
 Movilidad: 50% o más espermatozoides motiles rápidos y lentos (tipo A +
B).
 Morfología (apariencia normal): Mayor al 4%.
 Vitalidad (espermatozoides vivos): 50% o más vivos.
El espermograma es el primer paso para conocer cómo se encuentra tu salud
reproductiva de cara a la paternidad. Si requieres más información sobre este
tema, comunícate con nosotros en nuestras líneas de atención.
Espermograma y su utilidad clínica

Clinical utility of espermogram

Fernando Vásquez R1, Daniel Vásquez Echeverri2

Resumen

El espermograma es el examen de diagnóstico más importante y

sencillo para iniciar el estudio de la fertilidad masculina. En él se
evaluán los aspectos físicos del semen, como el volumen, pH, mucólisis,
viscosidad, color y olor y los aspectos celulares que estudia el
espermatozoide en relación con el número, movilidad, morfología y
vitalidad. También ofrece información valiosa sobre la presencia de
otras células como macrófagos, linfocitos, leucocitos, bacterias y
hongos.

El líquido seminal que es producido por las glándulas sexuales anexas

puede ser evaluado además desde el punto de vista bioquímico e
inmunológico.

Palabras claves: Espermograma, infertilidad masculina, parámetros

seminales.

Abstract

The spermogram is the simplest and the most important diagnostic to

iniciate studies of male fertility. We are able to assess physical aspects
such as volume, pH, mucus, viscosity, colour, and odour as well as
cellular aspects related to the spermatozoids such as their number,
mobility, morphology, and vitality. In addition, it provide us with
valuable information as to the presence and characteristics of other cells
such as macrophages, lymphocytes, leucocytes, bacteria, and fungi. The
seminal fluid produced by the accessory sexual glands may also be
evaluated by biochemical and immunological means. Key
words: Spermogram, infertility male, sperm parameters.

INTRODUCCIÓN

El espermograma es el examen paraclínico que brinda la visión más

amplia de la capacidad reproductiva del varón. Es un examen de bajo
costo que permite realizar una primera impresión diagnóstica y evaluar
los logros de los tratamientos médicos y quirúrgicos que se llevan a
cabo durante el tratamiento.

Para que un espermograma pueda ser interpretado correctamente por el

médico es necesario suministrar al paciente una información clara y
completa de la forma como se debe tomar la muestra seminal; también
es fundamental que la muestra sea analizada por un laboratorio que
garantice el correcto procesamiento de la misma, por lo cual se
recomienda derivar estos exámenes a los centros de reproducción que
dispongan de un laboratorio de andrología.

1. INSTRUCIONES DE RECOLECCIÓN

Siguiendo las recomendaciones de la Organización Mundial de la Salud

(OMS) y la Sociedad Europea de Embriología y Reproducción Humana
(1,2) en su manual de laboratorio, la muestra seminal debe ser tomada
con un período de abstinencia sexual de 2 a 7 días, debe ser depositada
en un recipiente estéril o limpio, de boca ancha, que permita que todo el
líquido seminal se deposite en el recipiente; en caso de pérdida de
alguna gota de semen, la muestra no debe ser llevada al laboratorio y
se debe repetir el procedimiento con los mismos días de abstinencia.
Infórmele al paciente que la primera gota de semen contiene cerca del
50% del total de espermatozoides.

El recipiente debe ser tapado en forma hermética, marcado con el

nombre del paciente, transportado a temperatura corporal (30°C-36°C)
y entregado en el laboratorio hasta una hora después de tomada la
muestra. El lugar de toma puede ser su propia casa o el laboratorio,
según la distancia donde viva el paciente. Recuerde que para el hombre
realizarse un espermograma implica un sentimiento de intimidad sexual
como es el de experimentar el orgasmo, por lo que el lugar de toma de
muestra debe respetar esta intimidad.

Se recomienda el método del autoestímulo o masturbación para recoger

la muestra. El coito interrumpido tiene como desventaja que puede
producir pérdida de parte de la muestra y contaminación del líquido
seminal con las secreciones normales de la vagina. En algunas
ocasiones, especialmente cuando el hombre rechaza el autoestímulo, es
útil utilizar preservativos (condones) especiales que no contienen
espermaticidas para tomar la muestra por relación coital. No se debe
lavar, el día de la toma de muestra, los órganos genitales con jabones
quirúrgicos o sustancias que puedan alterar el semen.

2. INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS

Elsemenesunlíquido quesirveparatransmitir la vida o también para

transmitir infecciones que pueden producir enfermedades y aun la
muerte. Está formado por secreciones de las glándulas sexuales
accesorias y por células, como son los espermatozoides, macrófagos,
linfocitos, leucocitos, células epiteliales y por bacterias, hongos, virus
cuando el semen se infecta.

El espermograma, por lo tanto, suministra información de los aspectos

físicos, que están relacionados con las glándulas, e información de las
células, que están relacionadas con el testículo y otras células.

3. ASPECTOS FÍSICOS DEL SEMEN

3.1 VOLUMEN DE SEMEN

El líquido seminal se forma de la secreción de las vesículas seminales

(60%), la próstata (30%), del epidídimo y las glándulas bul-bouretrales
(Cowper y Littre) (10%) (3).

3.1.1 Vesículas seminales

Las vesículas seminales juegan un rol importante en la fertilidad, pues

varios de sus productos de secreción estimulan de manera directa la
movilidad de los espermatozoides (4,5,6). Las vesículas seminales
también participan en la textura del plasma seminal dándole cierto
grado de viscosidad que posee y favorece como sustancia alcalina el pH
de 7.2 - 8.0 del semen.
Estas también contienen una variedad de compuestos químicos, aunque
el rol fisiológico de muchos de estos compuestos es aún desconocido.
Potasio, bicarbonato, fosfatos, magnesio, prolactina, insulina ácido
ascórbico, fructuosa y prostaglandinas son algunas de estas sustancias
(29, 35, 36).

El ácido ascórbico y la fructuosa tienen como función el rol de agente

reductor que se encuentra presente en las vesículas seminales. La
fuente de fructosa en las vesículas seminales parece proceder de la
glucosa a partir de la aldosa a sorbitol, luego de la cual ocurre una
reducción cetósica para producir fructosa (3,7).

Durante mucho tiempo se ha creído que la fructosa es la fuente de

energía de los espermatozoides, sin embargo, estudios han demostrado
que los espermatozoides utilizan preferencialmente la glucosa (8),
azúcar que se encuentra en altas concentraciones en el tracto
reproductivo femenino. De manera adicional, se ha encontrado que el
moco cervical, producido en el cuello uterino, contiene altas
concentraciones de glucosa y muy bajas concentraciones de fructosa. En
el útero utiliza la glucosa como fuente de energía.

La falsa creencia de que la fructosa era la fuente de energía del

espermatozoide se basa en el hecho de que en los análisis de laboratorio
el espermatozoide que requiere de energía para su movimiento utiliza el
sustrato energético que encuentra a disposición, y en este caso es la
fructosa.

3.1.2 Próstata

La glándula prostática es un sistema complejo de ductos alineados con

células exocrinas basales, células del lúmen y células epiteliales
neuroendocrinas (19).

La próstata se encuentra en todos los mamíferos; sin embargo, hay

diferencias entre especies en cuanto a la anatomía, bioquímica y
patología (20). Las células epiteliales contribuyen con la secreción del
fluido que se deposita a través de los ductos a la uretra y que forma
parte del semen.

El peso prepuberal de la próstata humana es de 1.6 gramos, y al final

de la tercera década es de alrededor 20 gramos (21).
Las actividades proliferativas y secretorias de la próstata son
estrictamente dependientes de andrógenos (9,10). La testosterona para
actuar debe ser transformada intrace-lularmente en dihidrotestoterona.

La próstata secreta enzimas, lípidos, aminas e iones esenciales para la

función del espermatozoide (11, 34). En la próstata humana también se
observan enzimas que metabolizan esteroides; así, se ha demostrado la
presencia de la enzima específica para estrógenos, la 17 beta
hidroxiesteroide oxido-reductasa.

La próstata participa en diferentes funciones del espermatozoide y del

plasma seminal. Sus secreciones son necesarias para el proceso de
licuefacción o mucolisis. Es conocido que la secreción de la próstata
facilita la liquefacción del líquido seminal coagulado por la acción de las
secreciones de las vesículas seminales.

El zinc secretado por la próstata es el responsable de la estabilidad de la

cromatina espermática. El zinc favorece la estructura cuaternaria de la
cromatina. La cromatina se compacta durante el proceso de
espermiogenesis y durante el paso del espermatozoide por el epididimo.
El propósito de la mayor estabilidad de cromatina es proteger el DNA del
espermatozoide de cualquier noxa externa (22, 23, 24, 25, 26).

Se ha demostrado que la hiperestabilidad de la cromatina se asocia a

una hipofunción de las vesículas seminales (12).

Tal como se ha demostrado para el conducto deferente, el tejido

prostático humano se contrae en respuesta al estímulo noradrenérgico.
Se ha demostrado en la próstata la presencia de receptores alfa 1B
(13). La función prostática puede ser evaluada por diferentes
marcadores, como el ácido cítrico, el antígeno específico prostático
(PSA), zinc, fosfatasa ácida, beta-microseminoproteina, y la zinc-alfa 2
glicoproteina (14, 15).

El semen humano contiene grandes cantidades de prostaglandinas

(PGs). El nombre de prostaglandina se acuñó en la creencia de que ellas
se originaban de la próstata; sin embargo, se ha demostrado que se
producen mayormente en las vesículas seminales (16, 27). Los
mecanismos por los cuales afectan la movilidad de los espermatozoides
son aún desconocidos, aunque hay cierta evidencia que sugiere que las
PGs pueden mejorar la movilidad de los espermatozoides al incrementar
el contenido de ATP en los espermatozoides (17).

3.1.3 Interpretación del volumen seminal

La eyaculación ocurre de manera secuencial y sincronizada y la fracción
prostática predomina en las primeras gotas y la secreción de vesículas
seminales en las restantes. Ambas glándulas accesorias son
dependientes en su función de la acción de los andrógenos tanto en su
diferenciación como en su crecimiento, desarrollo y mantenimiento. Las
glándulas seminales y la próstata son dos órganos importantes que
complementan la espermatogenesis al aportar el vehículo de transporte
y manutención del espermatozoide que como célula flagelar requiere de
una sustancia líquida para su desplazamiento.

El volumen normal para un mínimo de dos días de abstinencia es 2 cc.

Cuando hay menos de este valor se habla de hipospermia, y una causa
de la baja producción de líquido seminal está relacionada con niveles de
testosterona bajos. Cuando habiendo orgasmo no hay líquido seminal
externo se habla de aspermia, y esto ocurre generalmente en pacientes
diabéticos o en aquellos que tienen alguna lesión medular. Cuando esto
sucede, se debe solicitar al paciente una muestra de orina luego de la
relación sexual para observar bajo el microscopio si en la orina hay
espermatozoides, en cuyo caso estamos ante el caso de una eyaculación
retrógrada. Para ayudar a estos pacientes a tener su hijo se debe
alcalinizar la orina del paciente mediante la ingesta de bicarbonato de
sodio horas antes de la relación sexual, recoger la orina posterior a la
toma de muestra, realizar una separación de los espermatozoides de la
orina y capacitarlos para inseminarlos por vía intrauterina generalmente.

El volumen de semen depende de los días de abstinencia, de lo cómodo

o incómodo que se sienta el paciente al momento de tomar la muestra,
y la edad de éste, teniendo mayor cantidad la del joven que la del
adulto mayor. El deseo sexual es un condicionante importante, por lo
que generalmente los pacientes refieren tener mayor volumen de
eyaculado que el que presentan en un resultado de espermograma. Es
importante confirmar con el paciente si hubo pérdida de muestra
seminal y el número real de días de abstinencia.

3.2 pH SEMINAL

El pH seminal depende de las secreciones de las glándulas sexuales

accesorias, siendo la próstata acidificante y alcalinizante las vesículas
seminales. El valor de referencia en el adulto ha sido modificado por la
OMS durante la última década, siendo en la actualidad el normal mayor
o igual de 7.2 (1). A valores de pH ácido se produce mortalidad de los
espermatozoides (el pH ácido de la vagina actuá como espermaticida
biológico), siendo mayor ésta cuanto más bajo sea el valor de pH. El
espermatozoide tolera más fácilmente la alcalinización del semen.
Cuando existe un pH ácido y un volumen menor de 2 cc se debe
sospechar de una agenesia de vesículas seminales. Esta se puede
confirmar con una titulación de fructuosa en el semen, la cual debe de
reportar valores bajos o con una ecografía de órganos genitales internos
(28, 30).

Los valores de pH en ciertas regiones geográficas son generalmente

iguales o superiores a 8.0 comparados con valores de 7.2 a 8.0 de otras
regiones. Procesos inflamatorios e infecciones crónicas pueden estar
relacionadas (50).

3.3 MUCÓLISIS

Es conocido que la secreción de la próstata facilita la mucólisis o

licuefacción del líquido seminal coagulado por la acción de las
secreciones de las vesículas seminales. Al momento de la eyaculación, el
plasma seminal proveniente de la próstata es líquido, pero una vez
entra en contacto con las secreciones de las vesículas seminales se
coagula. Por lo tanto, la coagulación del plasma seminal es una de las
características de la función de las vesículas seminales (18). Después de
la coagulación ocurre un fenómeno de licuefacción, el cual se observa
entre 10 y 30 minutos después de la eyaculación. Este fenómeno es
dependiente de la actividad de la próstata. Por ello, ambos procesos, la
coagulación y la mucólisis, reflejan la función de las glándulas sexuales
accesorias (vesículas seminales y próstata). La alteración de la mucólisis
y el aumento de la viscosidad del líquido seminal se relacionan con
procesos inflamatorios de las glándulas y su presencia impide el libre
desplazamiento del espermatozoide, lo cual produce astenozoospermia
(33).

3.4 COLOR

Generalmente, el color se describe como blanco gris; cuando existe

prostatitis o vesiculitis crónica su color es amarillento; cuando hay una
infección aguda presenta un color blanco purulento. En algunos casos, el
color es marrón, lo cual indica la presencia de sangre en el semen
(hemospermia); su causa puede ser la ruptura ocasional de algún vaso
sanguíneo en la vía uretral o vejiga; cuando persiste debe descartarse la
presencia de neoplasias.

3.5 OLOR
Se describe como "sui generis" o característico. La espermina al parecer
es la sustancia que determina el olor, que algunas personas la
relacionan con el olor del hipoclorito de sodio.

4. ASPECTOS CELULARES DEL SEMEN

4.1 RECUENTO

DE ESPERMATOZOIDES

El recuento de espermatozoides se realiza mediante cámaras de

recuento específicas como la de Makler, o en cámara de recuento de
glóbulos blancos. El reporte se realiza por centímetro cúbico (mililitro) o
el total de espermatozoides, que es el producto de multiplicar el
volumen por el número de espermatozoides por centímetro cúbico.
Cuando la cantidad de espermatozoides es inferior a 20 millones /cc o
menor a 40 millones en recuento total se
denomina oligozoospermia; cuando no hay ningún espermatozoide se
denomina azoospermia. En estos casos, el problema puede
ser secretor, es decir, no hay o hay pocos espermatozoides por daño en
el testículo causado por inflamaciones, infecciones, varicocele y otras
causas, o excretor, es decir, se producen espermatozoides pero existe
una obstrucción de la vía de transporte de espermatozoides desde los
testículos a la uretra prostática.

Las oligozoospermias o azoospermias pueden ser de origen congénito o

adquirido. Es importante titular en plasma sanguíneo el valor de FSH, la
cual está relacionada con el número de espermatogonias. Cuando FSH
está alta, el daño de la espermatogeneis es importante y su pronóstico
es reservado; cuando FSH esta baja es posible estimular la
espermatogenesis y se espera un resultado favorable. Si FSH está en
valores normales y hay azoospermia, hay que sospechar de un proceso
obstructivo.

Cuando se realizan tratamientos y se espera que el número de

espermatozoides aumente es importante solicitar siempre los mismos
días de abstinencia para poder comparar los resultados. El número de
espermatozoides aumenta con el número de días de abstinencia, y la
movilidad mejora cuando hay menos días de abstinencia.

4.2 MOVILIDAD

El espermatozoide tiene una estructura flagelar que le permite su

desplazamiento en el líquido seminal, en la cavidad vaginal, útero y
trompas uterinas. En la evaluación de la capacidad reproductiva o fértil
del espermatozoide, la movilidad es un criterio determinante para su
normalidad.

La OMS clasifica la movilidad en cuatro categorías: Grado a: son móviles

rápidos y con movilidad rectilínea. Grado b: son lentos y con
desplazamientos no rectilíneos. Grado c: cuando no hay desplazamiento
del espermatozoide pero sí hay movilidad flagelar, y grado d: cuando el
espermatozoide esta inmóvil. Una muestra tiene movilidad normal si
tiene más de 50% de espermatozoide grado a + b, y si hay más de 25%
grado a. Si no se cumplen estos criterios, la muestra seminal se califica
con diagnóstico de astenozoospermia.

La movilidad está disminuida generalmente por infecciones de

transmisión sexual, por el varicocele testicular, el frío, muchos días de
abstinencia, afectaciones mitocondriales de origen congénito o
adquirido, sustancias adictivas como el cigarrillo y el alcohol. Es una
alteración frecuente en varones con infertilidad. Su tratamiento depende
de su causa. En caso de infecciones (especialmente por Chlamidia) se
utilizan antibióticos, cuando hay aumento de la viscosidad del semen se
utilizan los mucolíticos, y cuando hay sospechas de la deficiencia en la
cadena respiratoria mitocondrial se utilizan vitaminas, aminoácidos,
antioxidantes (42,43).

4.3 MORFOLOGÍA

Para realizar el reporte de la morfología se requiere hacer una tinción de

los espermatozoides. La OMS clasifica las alteraciones según la región
donde están localizadas: cabeza, cuello, flagelo y combinadas. Hace una
década se aceptaba como normal espermogramas con más del 50% de
formas normales; hoy, según los criterios se acepta como normal una
morfología con 30% OMS (1) o 14 % Kruger (37). Dicho en forma
sencilla, el varón tiene el 70% o más de sus espermatozoides con
alteraciones morfológicas, lo cual es una de las variables que explican el
porcentaje alto de infertilidad que hoy existe; otras especies con mejor
tasa de fertilidad como el conejo tienen el 90 % o más de formas
normales (38).
Cuando no se cumple con el porcentaje de formas normales se
denomina teratozoospermia. Las infecciones de transmisión sexual, el
estrés, las altas temperaturas, el varicocele, los tóxicos ambientales, las
drogas de adicción (marihuana, ácidos, cocaína etc.), el alcohol, el
cigarrillo, antibióticos, agropesticidas, radiaciones han sido asociadas
con la teratozoospermia (39, 40, 41,). También existen factores
genéticos, como son los casos de la agenesia del acrosoma y la ausencia
de brazos de dineina en el flagelo (Síndrome del Cilio Inmóvil), donde
hay inmovilidad de los espermatozoides (44, 45).

Según los resultados de investigadores (46,47), durante la adolescencia

ya existe tera-tozoospermia, es decir, el varón nunca tiene un alto
porcentaje de formas normales, sino que desde el inicio de su
espermatogénesis lo frecuente es tener valores cercanos al 30%. La
explicación teórica de esta situación podría ser que las alteraciones
morfológicas son heredadas genéticamente o que alguna forma aún no
conocida durante ese período de inactividad biológica en la infancia se
afectara el futuro proceso de la espermatogenesis.

Estas alteraciones morfologías son una forma citológica de describirlas

pero no tienen en sí un significado funcional. Mutaciones, delecciones,
alteraciones enzimáticas, mitocondriales, de receptores, escapan al
diagnóstico de este análisis morfométrico. Con el uso de las técnicas de
reproducción asistida como el ICSI, donde se han utilizado
espermatozoides que no son morfológicamente normales, se han
obtenido niños totalmente normales como también fracasos en la
fecundación de los ovocitos (48, 51). Es de esperar que la especie
humana tenga mecanismos regulatorios mucho más complejos y
exactos que la sola descripción externa del espermatozoide que asegure
que los niños que nacen sean genéticamente sanos y saludables.
4.4 VITALIDAD

Los espermatozoides inmóviles pueden estar vivos o muertos. Para

determinar cuáles están vivos se realiza el test de eosina, el cual
consiste en mezclar en un portaobjeto una gota de eosina y una de
semen. Cuando las células mueren pierden su capacidad de
permeabilidad de membrana y permiten el paso libre de los fluidos, por
lo cual los espermatozoides muertos se observarán al microscopio como
teñidos de rosado y los vivos estarán sin teñir. Este examen es de gran
valor en los casos de astenozoospermia.

4.5 OTRAS CÉLULAS

El líquido seminal puede ser el vehículo de trasporte no sólo de los

espermatozoides, sino de otras células importantes como los linfocitos,
virus (HIV, hepatitis B), bacterias (neisseria gonorrhoeae, chlamydia,
treponema pallidum e-coli, etc.) y hongos. Todas las células citadas
están relacionadas con las infecciones de transmisión sexual y tienen al
semen como la forma de transmitirla a la mujer o a otro hombre.

Se conoce también que el líquido seminal tiene fructosa, mañosa,

aminoácidos, hormonas sexuales, y diversas proteínas, desechos
metabólicos, entre otros. Es decir, el líquido seminal no solamente tiene
como función transportar los espermatozoides sino que es una forma de
excreción del cuerpo del hombre.

5. PRUEBAS BIOQUÍMICAS

5.1 BIOQUIMICA DEL PLASMA SEMINAL: Evalúa algunas funciones de

las glándulas sexuales accesorias. La determinación de ácido cítrico para
la evaluación de la próstata, la de fructosa para la evaluación de las
vesículas seminales y la de L-carnitina para el epidídimo son las más
utilizadas (28, 31, 32, 49).

5.2 PRESENCIADE LEUCOCITOS: La prueba de la peroxidasa se utiliza

para identificar los leucocitos en el semen. Los leucocitos son peroxidasa
positivo, mientras que las otras células redondas como las germinales
inmaduras y del tracto genital masculino son peroxidasa negativo. Se
considera leuco-citospermia a más de un millón de leucocitos por
mililitro, lo cual indica una probable infección.
5.3 ESTUDIOS MICROBIOLÓGICOS: Estudia la presencia de bacterias
como neisseria gonorrhoeae, e-coli. Su diagnóstico se realiza mediante
tinciones y cultivos de la muestra seminal o mediante pruebas
inmunológicas, como es el caso de la chlamydia, donde se toma la
muestra del meato uretral del pene. En caso de constatarse la infección
se realiza antibióticoterapia a la pareja. Para realizar un cultivo
microbiológico del semen es necesario utilizar un recolector estéril.

CONCLUSIÓN

En resumen, el espermograma es el examen paraclínico con el cual se

debe iniciar los estudios de laboratorio de la fertilidad masculina. Es un
examen de bajo costo que permite realizar una primera impresión
diagnóstica y además evaluar los logros de los tratamientos médicos y
quirúrgicos que se lleven a cabo durante el proceso. Suministra
principalmente información sobre el número, movilidad y morfología de
los espermatozoides (función del testículo), así como el volumen, pH,
viscosidad, mucolisis, color y olor (función de las vesículas seminales y
la próstata).

Agradecimientos

Se le agradece a Zenem Carmona, estudiante de Maestría en

Biomédicas, por su contribución en este trabajo.

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Notas

1
Director Programa de Investigaciones en Salud Sexual y Reproductiva.
Programa de Medicina, División Ciencias de la Salud, Universidad del
Norte, Barranquilla (Colombia). fvasquez@uninorte,edu.co Correspondencia:
Universidad del Norte, Km 5 vía a Puerto Colombia, A.A. 1569,
Barranquilla (Colombia).

2
Estudiante del Programa de Medicina, Universidad del Norte,
Barranquilla (Colombia).
 Services on Demand

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Revista Colombiana de Ciencias Pecuarias

Print version ISSN 0120-0690

Rev Colom Cienc Pecua vol.19 no.4 Medellín Oct./Dec. 2006

El espermatozoide, desde la eyaculación hasta la fertilización

Martha Olivera1,2, MV, Dr Sci Agr; Tatiana Ruiz1,2, MV, Ms, PhD; Ariel
Tarazona1,2,Z,Ms; Carlos Giraldo1,2,MV, Ms.
1
Fisiología y Biotecnología de la Reproducción, 2Facultad de Ciencias Agrarias,
Universidad de Antioquia, A.A 1226, Medellín, Colombia.
molivera@catios.udea.edu.co
(Recibido: 23 de junio, 2006; aceptado: 14 de septiembre, 2006)

Resumen

En los últimos años se ha hecho un inmenso progreso en el entendimiento de

los mecanismos moleculares involucrados en la maduración del gameto
masculino y su tránsito desde la gónada hasta la fertilización del oocito. A lo
largo de este trayecto el espermatozoide modifica su morfología y sus
componentes moleculares especialmente, y además ocurren procesos que
conducen a la activación para la entrada al oocito, para activar a su vez los
mecanismos que conducen a la formación del zigoto. Este artículo presenta, a
partir de la interpretación de la literatura actual un modelo de los eventos
que se suceden a partir de la eyaculación hasta la fertilización, con énfasis en
los mecanismos celulares y moleculares conocidos, y señala algunos vacíos de
información aún existentes.

Palabras clave: activación, adhesión, capacitación, fusión, reacción acrosomal.

Generalidades sobre la producción y anatomía espermática en mamíferos

La célula germinal masculina se produce en la gónada (testículo) mediante un proceso

permanente de división de las células germinales o espermatogonias. El proceso de
división meiótica denominado espermatogénesis está controlado hormonalmente por el
eje hipófisis-hipotálamo-gónada. A partir de cada espermatogonia se producen cuatro
espermatocitos haploides que permanecen unidos entre sí por puentes citoplasmáticos
y a la vez están en comunicación con la célula nutricia o de Sertolli; estas últimas, a
partir de moléculas señalizadoras, inducen el proceso denominado espermiogénesis o
metamorfosis que convierte las espermátides en espermatozoides. Se reconocen
cuatro fases características en esta transformación: la fase de Golgi, la de capuchón, la
acrosomal y la de maduración.

En la fase de Golgi, la organela del mismo nombre se acerca al núcleo, desprende

vesículas que se le sobreponen y poco a poco se unen para convertirse en la vesícula
acrosomal que se localiza en la parte apical del núcleo (véase Figura 1). Los centríolos
situados en forma de T, muy cercanos al aparato de Golgi, van migrando hacia lo que
será la base del núcleo. El centríolo proximal se sitúa en la parte basal del núcleo y, a
partir del centríolo distal crece el axonema (véase Figura 1) conformado por dos
microtúbulos centrales y 9 pares de microtúbulos periféricos. En la fase de capuchón,
la vesícula acrosomal se aplana formando una verdadera capucha sobre el núcleo. El
núcleo se compacta mucho más al cambiar las histonas por protaminas, de tal forma
que no puede haber ni replicación ni transcripción (Fase G0 del ciclo celular). La
inactividad transcripcional del núcleo hace que el espermatozoide sea dependiente de
modificaciones postranscripcionales como la fosforilación de proteínas necesarias para
adaptar su función de acuerdo a las necesidades. Las fosforilaciones ocurren desde las
células germinales, casi siempre en los residuos de tirosina, distinto a otras células
eucarióticas en las que la mayoría de las fosforilaciones ocurren en residuos de serina
y treonina.

Figura 1. Morfología del espermatozoide y metabolismo energético que realiza esta

célula a partir de glucosa en la pieza principal y en la pieza media.

En la fase acrosomal la espermátide gira de tal forma que el acrosoma queda en

dirección de la membrana basal; se depositan gránulos en el acrosoma, el citoplasma
se desplaza hacia la base de la cabeza y se localiza por debajo de la unión núcleo
axonema; las mitocondrias se agrupan alrededor de este último en su parte cercana al
núcleo, formando la pieza media. En esta fase el espermatozoide adquiere su
morfología definitiva. Finalmente se sucede la fase de maduración, donde se
observan las características finales de los espermatozoides: forma de la cabeza
característica de cada especie (oval y plana), cubierta en sus dos terceras partes por el
acrosoma; y la cola compuesta por las piezas media, principal y terminal (véase Figura
1); en la pieza media se encuentran las mitocondrias en forma de hélice. En esta fase
se elimina gran parte del citoplasma por desplazamiento del mismo hacia la pieza
terminal de la cola originando la llamada gota citoplasmática. El proceso de
maduración termina con la espermiación, o liberación de los espermatozoides a la luz
del túbulo seminífero. Mediante movimientos peristálticos los espermas son
transportados de la rete testis a los ductos eferentes y de allí al epidídimo en cuya cola
se almacenan.

Durante la eyaculación los espermatozoides junto con el plasma seminal pasan por la
uretra y a través de movimientos peristálticos se liberan en el tracto genital femenino.
La eyaculación es el reflejo de expulsión de los espermatozoides y el plasma seminal
fuera del tracto reproductivo. El reflejo eyaculatorio es el resultado de la estimulación
sensorial especialmente en el glande, lo que causa contracciones musculares
coordinadas. Una vez se introduce el pene en la vagina se inicia el reflejo por impulsos
que se transmiten del glande a través del nervio púdico hasta la región lumbosacra de
la médula espinal. Así el semen es forzado a pasar a la uretra lo que induce la
contracción de los músculos uretrales, isquicavernosos y bulboespongiosos. El
eyaculado contiene, además, las secreciones de las glándulas anexas (vesículas
seminales, próstata, glándulas bulbouretrales).

Movimiento del flagelo

El espermatozoide adquiere la capacidad de mover el flagelo en su tránsito por el

epidídimo, pero el movimiento empieza después de la eyaculación. Este proceso es
conocido como la activación del esperma. El movimiento del flagelo es característico
y consiste en un bateo simétrico de la cola que hace que el espermatozoide se
desplace en forma progresiva. El esperma pasa rápidamente a través del cuello y el
útero de la hembra; a 10 minutos de la deposición del semen en el tracto femenino se
encuentran espermatozoides en la unión útero-tubal (véase Figura 2). De aquí los
espermatozoides pasan a lo que se conoce como el reservorio del oviducto (istmo)
caracterizado por cilios luminales epiteliales y plegamientos de la mucosa que forman
criptas (véase Figura 2). Los espermatozoides son retenidos en las criptas oviductales
y allí pierden los factores decapacitantes como mucopolisacáridos y proteínas que
habían aportado las glándulas anexas; éste es el comienzo del proceso conocido
como capacitación (véanse Figuras 2 y 4), nombre que indica el potencial que
adquiere el espermatozoide para hiperactivarse y para lograr la reacción acrosomal.
Este proceso se lleva a cabo en las criptas del istmo donde se adosan los espermas, y
termina con la liberación del mismo hacia el ámpula (véase Figura 2); aquí al
encontrar el oocito ocurre el reconocimiento y la adherencia para que el
espermatozoide empiece a atravesar la zona pelúcida.
Figura 2. Secuencia de los procesos que sufre el espermatozoide en el tracto
reproductivo de la hembra: 1) Activación, 2) Capacitación, 3) Hiperactivación, 4)
Reconocimiento entre gametos, 5) Reacción acrosomal, 6) Adhesión y 7) Fusión.

Figura 3. Modelo de los eventos moleculares que inducen la activación y la

hiperactivación del flagelo.
Figura 4. Modelo de eventos moleculares que se suceden durante la capacitación, el
reconocimiento entre los gametos y la reacción acrosomal.

Figura 5. Fertilización: adhesión y fusión.

La reacción acrosomal es un proceso de fusión de la membrana citoplasmática externa,

con la membrana acrosomal externa en la zona apical de la cabeza; de aquí se liberan
enzimas que estaban almacenadas dentro de esta vesícula exocítica, esto es
fundamental para el paso a través de la zona pelúcida.

Cuando el espermatozoide alcanza el istmo del oviducto inicia un movimiento

asimétrico, amplio y acelerado del flagelo (característico de la hiperactivación), lo
que lo lleva a moverse en círculos y lo ayuda a liberarse de las criptas oviductales para
avanzar a través del lumen y alcanzar el ámpula, atravesar el cúmulus ooforus (células
de la granulosa que rodean el oocito) y aponerse a la zona pelúcida donde es
reconocido (reconocimiento entre gametos) (véanse Figuras 2 y 4). Una vez que el
espermatozoide alcanza el espacio perivitelino, se produce la adherencia (véase
Figura 5) entre la membrana plasmática de la zona ecuatorial espermática y las
microvellosidades de la membrana citoplásmica del oocito; luego se fusionan las dos
membranas (véase Figura 5); y de esta manera el núcleo y demás organelas de la
célula espermática ingresan al ooplasma del oocito.

Los depósitos de Ca++ almacenados entre la teca perinuclear y el núcleo del

espermatozoide son liberados al ooplasma, junto con la “oscilina” (factor espermático),
que es una proteína espermática muy parecida a la enzima bacterial isomerasa
glucosalina 6 fosfato (GNPI) o a la deaminasa (GNPDA). A este factor se le atribuye la
acción de inducir las oscilaciones de calcio que conducen a la activación del oocito. Esta
activación comprende: oscilaciones intracelulares de Ca++, la expulsión del segundo
cuerpo polar, la formación del pronúcleo femenino, el reemplazo de las protaminas por
histonas en el núcleo espermático, la formación del pronúcleo masculino y la ubicación
del centríolo espermático para formar el aster masculino que es necesario para la
migración de su pronúcleo. Las oscilaciones de Ca++ inducen también la exocitosis del
contenido enzimático de los gránulos corticales almacenados en la periferia citosólica
del oocito, modificando tanto la zona pelúcida como la membrana del oocito, para
prevenir la poliespermia.

Activación e hiperactivación

La movilidad del esperma se desencadena por cambios en el medio iónico extracelular,

por interacción con ligandos específicos y por glucosa, presentes en el líquido seminal
y en el tracto reproductivo femenino; estos cambios inducen señales citosólicas
flagelares, a través de la fosforilación de proteínas, de canales de Ca++ y de vías
dependientes de nucleótidos cíclicos (GMPc y AMPc) (véase Figura 3).

Los ligandos específicos más conocidos son: la progesterona y el esteroide sulfatado

SAAF (Sperm Activating and Attracting Factor) que inducen la entrada de Ca++; el
péptido activador de espermatozoide (PAS) y el péptido atrial natriurético (PAN) que
actúan, ya sea por medio de un receptor de membrana, o por activación directa de la
guanilil ciclasa ligada a membrana (GCm).

Otros ligandos específicos son los factores de tipo olfatorio y odorante (hOR17-4)
producidos por el oocito para inducir la quimiotaxis del espermatozoide.
Los cationes y los aniones también juegan un papel importante en la modulación de la
movilidad espermática, el efecto mayor se atribuye a cationes tales como Ca++, Na+,
K+ y H+. El tránsito de estos cationes inducido por diferencias de concentración extra e
intracelular, lleva a cambios en la composición iónica intracelular y subsecuentemente
a cambios en el potencial funcional y de movilidad del espermatozoide. Los cambios
que produce la glucosa se describirán más adelante.
La activación se desencadena cuando las señales extracelulares de las que hablamos
anteriormente activan las ciclasas, lo que produce un aumento transitorio de GMPc, de
AMPc y la activación de la guanilil ciclasa transmembranal (GCm) o soluble (GCs). La
GCm se activa por la unión del péptido PAS a su receptor, o por el aumento en la
concentración de GMPc; a la GCs la activa el óxido nítrico (ON) producido por acción de
la óxido nítrico sintasa. Consecutivamente se abren los canales de K+ dependientes de
GMPc, lo que provoca la salida de K+ con la consecuente hiperpolarización de la
membrana espermática dependiente de AMPc.

La hiperpolarización activa el intercambiador de voltaje dependiente Na+/H+ con la

consecuente salida de H+lo que induce la alcalinización del citosol y activa las dineínas
(véase Figura 1).

El aumento de AMPc se debe a la activación de la adenilil ciclasa de dominio

transmembranal (ACm), y a la activación de la fosfodiesterasa (PDE), reguladas, a su
vez, por la subunidad alfa de la proteína G y por Ca++/CaM (calmodulina)
respectivamente. La forma soluble de la adenilil ciclasa (ACs) también produce AMPc, y
en mayores cantidades que la ACm debido a que es independiente de proteína G. Esta
ACs es dependiente de bicarbonato (HCO3-), que ingresa por mediación del
cotransportador Na+/HCO3-. El Ca++ también ingresa a través del CatSper (canales
catiónicos específicos del esperma). El siguiente paso en la activación de la movilidad
flagelar es la fosforilación y la defosforilación de tirosinas, mediadas por la proteína
quinasa dependiente de AMPc (PKA) (véase Figura 3). La subunidad catalítica de la
PKA, posee una estructura única y específica en el espermatozoide y parece que se
encuentra anclada a los microtúbulos. La PKA está ubicada muy cerca al brazo de
dineína externo y esto podría explicar la rápida fosforilación que sufren los polipéptidos
de la cadena liviana de este brazo (Tctex-2) en el momento de la activación de la
movilidad. Estas PKA se fijan en dominios de algunas de las proteínas relacionadas con
la activación y candidatas a ser fosforiladas; ellas son 1) las hexoquinasas, 2) las AKAP
(AKAP 82, AKAP 220, AKAP 110, AKAP 3, AKAP 4, AKAP 97). Las AKAP están presentes
en los radios y los pares de microtúbulos externos del axonema; la AKAP 82 se ha
encontrado en abundancia en la capa fibrosa del flagelo (pieza principal) (véase Figura
1), 3) una proteína no caracterizada de 15 kDa en la base de flagelo y 4) la glicógeno
sintasa-quinasa.

La defosforilación de las proteínas está a cargo de fosfatasas entre otras la tipo B2

dependiente de Ca++, que fue encontrada unida al axonema y relacionada con la
regulación de la fosforilación de la dineína.

El espermatozoide, activado y capturado por las microvellosidades del istmo del

oviducto (véase Figura 2), se capacita, y esto desencadena señales intracelulares que
inducen la hiperactivación (véanse Figuras 2 y 3). La activación y la hiperactivación
utilizan mecanismos moleculares similares para generar el movimiento del flagelo cuyo
eje funcional es el axonema y cuya proteína motora principal es la dineína (véase
Figura 1). El axonema, además, está compuesto por microtúbulos, moléculas
chaperonas, proteínas fijadoras de calcio y proteínas quinasas/fosfatasas. Es una
estructura de 9x2 pares de microtúbulos que corre a lo largo del flagelo rodeado, en la
pieza media, por mitocondrias y capas de fibra densa; en la pieza principal está
rodeado por una capa fibrosa, y en la final está en contacto directo con la membrana
plasmática (véase Figura 1).

El movimiento del flagelo se da por la activación de los complejos de ensamble y de

regulación de dineína; el ATP provee la fuerza que se requiere para el deslizamiento
entre los brazos y los microtúbulos, y la hidrólisis del mismo, junto con la ruptura de la
unión entre el microtúbulo B. La dineína garantiza que el movimiento continúe como
reacción en cadena de los nueve pares de microtúbulos externos generando el
movimiento en forma de bateo.

Simultáneamente se dan fenómenos de fosforilación y defosforilación asociados a la

unión del brazo externo del microtúbulo A, al microtúbulo B del brazo adyacente. El
par de microtúbulos centrales con dominio AKAP, dirigen el plano de inclinación
flagelar, enviando señales a los radios que regulan el brazo interno de dineína por
medio de fosforilación/defosforilación de proteínas. Los radios están compuestos por
22 polipéptidos con una proteína de 97 kDa con un dominio AKAP en su base. El par de
microtúbulos centrales al dirigir el plano de inclinación, determinan la asimetría de la
onda de movimiento flagelar,característica y diferencial de la hiperactivación.

La capa fibrosa de la pieza principal (véase Figura 1), está compuesta por al menos 18
polipéptidos y parece servir como andamio de algunas enzimas en el metabolismo
energético, y como molécula de señal para desencadenar la movilidad espermática.
Esta capa está compuesta por varias proteínas, entre ellas la hexoquinasa y las AKAP
3, AKAP 4, AKAP 80; relacionadas con la fosforilación de tirosina de otros componentes
de la capa fibrosa.

El metabolismo energético a partir de glucosa (véase Figura 1) es requerido para la

activación del axonema e incluye la producción y regeneración de ATP y de
intermediarios como el NADPH, necesarios para las vías de señalización interna, que
conducen a la fosforilación de las proteínas flagelares al movimiento. El ingreso de
glucosa al citosol se da a través de transportadores como el GLUT3 en la pieza
intermedia o el GLUT8 en la región acrosomal, o por reservas endógenas en forma de
glicógeno. La glucosa es transformada en glucosa-6- fosfato por la enzima
hexoquinasa, para generar ATP o NADPH, por una de tres vías, dependiendo del
dominio del flagelo: la glicolítica, la vía pentosa fosfato y la vía mitocondrial de la
fosforilación oxidativa; ésta última fuente principal de ATP (véase Figura 1).

El NADPH está involucrado en reacciones de oxido-reducción y es requerido para

enzimas como la oxidasa que genera superóxido y la oxido nítrico sintasa que genera
óxido nítrico.

La hiperactivación del flagelo se debe al Ca++ que se fija a sus proteínas fijadoras en el
brazo externo de la dineína, lo que induce el movimiento asimétrico. Este Ca+
+
proviene de varias fuentes: de las reservas intracelulares de Ca++ (RIC) mediada por
los receptores de inositol 1,4,5 trifosfato (IP3), del Ca++proveniente de la mitocondria o
de la teca perinuclear (véase Figura 3) o del Ca++ que ingresa gracias a sistemas
antiporte Na+/H+ y Na+/Ca+++. Además del calcio, la hiperactivación requiere de
AMPc, cuya producción parece estar modulada por las especies reactivas de oxígeno
(ROS), entre las que se encuentran el superóxido (SO) y el óxido nítrico ON (véase
Figura 3). El superóxido se origina en el transporte de electrones en la mitocondria y
es trasformado a peróxido de hidrógeno por la enzima superóxido dismutasa (SOD).
Este peróxido activa la adenililciclasa de membrana, que actúa corriente arriba en la
ruta de PKA, para que ésta fosforile algunas proteínas flagelares. (véase Figura 3).

La capacitación

El espermatozoide, en la cola del epidídimo y en el vas deferens, sufre cambios en los

dominios de los esteroles de membrana, en la cabeza y en la cola, confiriéndo una
distribución heterogénea de los mismos a los largo de toda la membrana. Estos
dominios llamados complejos de esterol-caveolina, sirven como andamio en la
membrana para acoplar proteínas que inducirán diferentes rutas de señalización. En la
cabeza hay dos subdominios de membrana plasmática, la acrosomal y la
subacrosomal. La primera cubre la región del mismo nombre y se caracteriza por
presentar islas de composición ordenada de colesterol y esfingolípidos anclados a
caveolinas, inmersas en una membrana de composición “desordenada”. La segunda, o
región subacrosomal, es rica en fosfolípidos. Las islas juegan un papel importante en la
compartamentalización de las vías de señalización en regiones específicas de la célula;
son diseños prefabricados durante la espermatocitogénesis ya que, como se mencionó
anteriormente, el espermatozoide, una vez en el lumen testicular, no puede transcribir
ni traducir. La capacitación, se caracteriza por la salida de colesterol de la membrana y
el ingreso de Ca++ y HCO3- al citosol (véase Figura 4).

El fluido oviductal es rico en albúminas y HDL, capaces de retirar el colesterol de la

membrana del esperma, lo que la hace más fluida al producir la ruptura de la unión de
las caveolinas con las proteínas de fusión; estas últimas al quedar libres forman
complejos de señalización de fusión de membranas (reacción acrosomal); el aumento
de la fluidez también permite que proteínas integrales puedan interactuar con las
proteínas ancladas a membrana. La pérdida de colesterol favorece además la
translocación de algunas proteínas a la zona ecuatorial, donde son necesarias para que
el espermatozoide posteriormente pueda adherirse al oocito.

La salida de colesterol durante la capacitación también induce la activación de los

canales de Ca++dependientes de voltaje y de los canales de HCO3-. El ingreso de éste
último al citosol, activa la adenililciclasa dependiente de HCO3- (ACs) que aumenta las
concentraciones de AMP cíclico, activando, a su vez, la proteína quinasa A1 (PKA1);
esta última fosforila algunas proteínas en los residuos de serina desencadenando la
fosforilación de las tirosinas de otras proteínas citosólicas. La PKA1 también activaría
en la membrana acrosomal externa un canal de Ca++, con el consecuente aumento de
las concentraciones citosólicas de este catión, las cuales gradualmente activan la
fosfolipasa Cγ acoplada al receptor del factor de crecimiento epidermal.

Interacción espermatozoide zona pelúcida y reacción acrosomal

La zona pelúcida expone glicoproteínas de reconocimiento (véase Figura 4) que

interactúan con la membrana del espermatozoide de varias formas: proteína –
proteína, donde se reconoce el receptor de 95KDa del esperma (receptor tirosina
quinasa, TK); y proteína–carbohidrato para el reconocimiento de la Galtasa como
receptor acoplado a proteína G, que se une a la N acetil glucosamina de la ZP3. Una
vez que acoplan estas moléculas se activa la fosfolipasa C β1 (PLCβ1) por una parte y,
por la otra, posiblemente se activa la adenilil ciclasa, con el subsecuente aumento los
niveles de AMP cíclico que activarían la proteína quinasa A (PKA), y permiten la
apertura de un canal de Ca++, voltaje dependiente, en la membrana acrosomal
externa. Este pequeño incremento de Ca++ intracitoplasmático activa la fosfolipasa Cγ
que se une al receptor de tirosina quinasa para inducir una ruta de señalización vía
PIP2.

Cuando se da la interacción proteína-carbohidratos, el receptor unido a proteína G,

activa la fosfolipasa Cβ1, lo que induce la hidrólisis del fosfatidil inositol difosfato
(PIP2) con generación de diacil glicerol (DAG) e inositol trifosfato (IP3). El DAG activa
la proteina quinasa C, lo que lleva a la apertura de un canal dependiente voltaje en la
membrana plasmática y permite el ingreso de altas cantidades de Ca++. El IP3 y la PKA
abren un canal en la membrana acrosomal externa, lo que lleva a la deplesión del Ca+
+
en el espacio intraacrosomal, y esto activa el canal de Ca++ “capacitante” en la
membrana citoplasmática (véase Figura 4).

El receptor de TK y la proteína G, pueden activar un intercambiador de Na+-H+ en la

membrana plasmática, lo que alcaliniza el pH citosólico. El incremento de Ca++ regula
su propia salida tanto en la membrana plasmática como en la acrosomal, mediante la
activación de canales de Ca++, dependiente de ATP, y con la activación de los
intercambiadores Na+- Ca++. La PKA fosforila los residuos de serina de las proteínas
(PSP); éstas, a su vez, fosforilan los residuos de tirosina de las proteínas citosólicas
que junto con el aumento del pH y de Ca++ citosólico, permiten la fusión de
membranas (citoplasmática y acrosomal externa) (véase Figura 4), y de esta manera
se produce la exocitosis del contenido enzimático del acrosoma. El esperma atraviesa
la zona pelúcida (ZP) y alcanza el espacio perivitelino, los mecanismos involucrados en
este paso aún se desconocen.

Para evitar la poliespermia se suceden dos mecanismos, uno inmediato que es el

cambio de potencial de membrana del oocito, que a su vez cambia la polaridad interna
de la ZP; y otro subsiguiente que es la remodelación de la ZP, que ocurre por
exocitosis del contenido enzimático de los gránulos corticales al espacio perivitelino;
esta exocitosis está regulada por PKC dependiente de factores lipídicos e independiente
de los iones de calcio. Se han identificado dos poblaciones de gránulos corticales que
son liberados a tiempos y en lugares diferentes: el primer grupo, se libera durante la
expulsión del primer cuerpo polar y el segundo muy cerca del sitio en donde comienza
la citoquinesis de la primera división celular.

El mecanismo propuesto para la remodelación de la zona pelúcida, es a partir de la

alteración de los residuos de galactosa alfa y beta de la misma, particularmente las
enzimas hidrolíticas y las glicoproteínas liberadas por los gránulos corticales. Los
residuos de GlcNAc de la ZP3 que contiene la zona pelúcida (receptores de la Galtasa
espermática) serían removidos por la N-acetilglucaminidasa, una de las enzimas que
contienen los gránulos corticales, lo que no permitiría que más espermatozoides se
adhirieran a la ZP3.

La adhesión del espermatozoide y la fusión de las membranas oocito-

esperma

Las vellosidades del oocito tienen integrinas α6 y β1 (véase Figura 5), a las que se
adhiere el espermatozoide mediante la exposición de proteínas como la fertilina α y β y
ciritestina, (proteínas de la familia ADAMS con dominios disintegrina y
metaloproteasa).

Recientemente se han candidatizado las proteínas de anclaje del oocito CD9 y

glicosilfosfatidil inositol (GPI) y la proteína epididimal DE, en el espermatozoide, como
las moléculas candidatas a ser las responsables de la fusión membranal entre el
esperma y el oocito. Sin embargo aún no se han podido analizar claramente las
interacciones proteína-proteína en esta fusión, por lo que el mecanismo molecular
permanece sin dilucidar.

La fusión de membranas continúa a través (véase Figura 5) de una proteína presente

en el oocito, de la familia de las tetraspaninas conocida como CD9. Esta proteína se
caracteriza por tener cuatro dominios transmembranales y dos bucles extracelulares;
en el mayor de estos bucles se fijan los complejos de fusión del esperma. Las
microvellosidades se encuentran por toda la superficie del oocito, exceptuando la zona
por donde se expulsará el segundo cuerpo polar. Al fusionarse las membranas del
oocito y del esperma se libera, del espermatozoide, una molécula de superficie que
parece ser una proteína de 30-100 kDA llamada “oscilina” o factor espermático, que
activa el oocito produciendo la liberación de Ca++ en forma de ondas (véase Figura 5).
Cada vez que se sucede una onda de Ca++, cambia su concentración
intracitoplasmática de 50 a 600-1000 nmol/litro.

Estas ondas se dan periódicamente cada 2 - 30 minutos dependiendo de la especie y

pueden durar varias horas. El inicio de las ondas de Ca++ induce la activación del oocito
que termina con la formación de los pronúcleos. En los cambios que ocurren en el
oocito para que se libere el Ca++ intracelular y se produzcan los eventos corriente
abajo, podrían estar involucradas las quinasas de la familia de las Src (Src-K); entre
éstas la c-Fyn, y la c-Yes que están distribuidas en la corteza del oocito (véase Figura
5).

La c-Fyn también se encuentra alrededor del huso mitótico; la activación de esta

quinasa resulta en la activación de la fosfolipasa C (PLC) que cataliza la hidrólisis del
PIP2 a DAG e IP3. IP3 actúa en el receptor de IP3 (IP3R) que se encuentra en el
retículo endoplásmico y hace liberar el calcio. El mismo calcio participa en su
autorregulación y junto con otros moduladores del receptor de IP3 induce las
oscilaciones intracelulares descritas, y que tienen como objetivo la activación del
oocito.

Sin embargo, cómo se activan las Src-K es una pregunta que se permanece sin
respuesta.

Glosario: abreviaturas usadas en las figuras

MP: membrana plasmática

MAE: membrana acrosomal externa
Ca++: ión calcio
PTP: Proteína tirosina fosfatada
PSP: proteína serina fosfatada
PKA1:Proteína quinasa A1
AMPc: adenosin monofosfato cíclico
ATP: adenosin trifosfato
ADP: adenosin difosfato
Pi: fósforo inorgánico
HCO3: ión bicarbonato
sAC: adenilato ciclasa activada por bicarbonato
Na+: ión Sodio
CO2-: ión dioxido de carbono
Cl-: ión cloro
EGF: factor de crecimiento epidermal
PLC γ: Fosfolipasa C gamma
PIP2: Fosfatidil inositol difosfato
DAG: Diacil glicerol
IP3: Inositol trifosfato
GALtasa:Galactosil transferasa
TK: tirosina quinasa
G1: proteína G
CCE: Calcio capacitante
CaM: calmodulina
CaMK: calmodulina quinasa
REnd: retículo endoplásmico
Ubiq: ubiquitina
MPF: factor promotor de la maduración
CD9: receptor familia citoquinas
DE: proteína epididimal
GPI: glicosil fosfatidil inositol, proteína de anclaje
AKAP: Proteínas de dominios de fijación de PKA
PAN: Péptido Atrial Natriurético.
PAS: Peptido Activador de Esperma.
ON: Óxido Nítrico.
ACm: Adenil Ciclasa de Membrana.
GCm: Guanil Ciclasa de membrana.
CaM: Calmodulina.
ACs: Adenil Ciclasa Soluble.
PKA: Proteína quinasa dependiente de AMPc
PTK: Proteina Tirosina Quinasa.
CCp: Canal de Calcio Putativo.
PLC Fosfolipasa C
IP3: Inositol Trifosfato.
RCaIC: Reserva de Calcio Intracitoplasmático
P4: progesterona
SAAF: Factor espermático de activación y atracción (sperm activating and attracting
factor)
PASA: péptido activador de espermas
GCm: Guanil Ciclasa ligada a membrana
hOR17-4: factores odorantes
GCs: guanil ciclasa soluble
ON: óxido nítrico
ACm: adenilciclasa de dominio transmembranal
ACs: adenil ciclasa soluble
CatSperm: canales catiónicos del esperma

Summary

The sperm cell: from eyaculation to fertilization During the last recent years
there has been a great increase of information regarding the
molecular mechanisms involved in the maturation of the male gamete as well
as its progression from the gonad up to fertilizing the oocyte. Along this way
the sperm completes its maturation adding some molecular components;
additionally along this trail take place all the processes leading to activation
of the sperm for the entrance into the oocyte to initiates molecular cascades
for the formation of a zygote. This article, based on updated literature
proposes a model that integrates known cellular and molecular interactions
and pinpoints some steps still requiring further research.

Key words: acrosome reaction, activation, adhesion, capacitation, fusion.

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