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All content following this page was uploaded by John Jaiber González Murillo on 25 January 2015.
Contenido
Introducción...................................................................................................................................................................2
1.1. La neurona y las células de soporte del sistema nervioso ........................................................................ 3
1.2. Neurogénesis y Gliogénesis ......................................................................................................................... 4
1.3. Moléculas de adhesión celular y la matriz extracelular de las células neuronales [11] ........................ 5
2. Biomateriales usados en Ingeniería de Tejidos neuronales y nerviosos ................................................................. 6
2.1. Materiales poliméricos naturales ................................................................................................................. 7
2.2. Materiales poliméricos sintéticos................................................................................................................. 7
2.3. Métodos de fabricación ................................................................................................................................. 8
a. Autoensamblaje de nanofibras de péptidos ............................................................................................... 8
b. Electrohilado de nanofibras ......................................................................................................................... 9
c. Separación de fases...................................................................................................................................... 10
3. Caracterización, modulación y modificación de biomateriales para promover la regeneración neural y
nerviosa ........................................................................................................................................................................11
3.1. Deposición sobre la superficie ................................................................................................................... 12
3.2. Fusión o mezcla ........................................................................................................................................... 12
3.3. Fijación o unión electrostática .................................................................................................................... 13
3.4. Fijación o unión mediante enlaces covalentes.......................................................................................... 14
4. Conclusiones ................................................................................................................................................................15
5. Bibliografía ...................................................................................................................................................................16
Página 1
Ingeniería de Tejidos aplicada a la
Regeneración Neuronal y Nerviosa
Introducción
El sistema nervioso (SN) es el centro de control o centro de mando del cuerpo humano. Se
encarga principalmente de sentir, pensar y controlar nuestro cuerpo. Recoge las
informaciones sensitivas de todo el organismo y las transmite al cerebro, donde
posteriormente se procesarán. A su vez, el cerebro, en función de las señales recogidas,
genera una respuesta, que es de nuevo transmitida por el sistema nervioso hasta los
músculos y órganos internos [1].
El Sistema Nervioso Central (SNC) está compuesto por el encéfalo y la médula espinal
(Ver Figura 1). Es el sistema más importante de todo nuestro cuerpo. Se encuentra
protegido por envolturas óseas (cráneo y columna vertebral). Se encarga de recibir y
procesar las sensaciones recogidas por los diferentes sentidos y de transmitir las órdenes
de respuesta de forma precisa a los distintos efectores. Para tales acciones, el sistema
nervioso está compuesto de unas células especiales llamadas Neuronas cuya función es la
recepción de estímulos y la conducción de impulsos nerviosos entre las mismas o con
otros tipos de células, como por ejemplo las Fibras Musculares de la placa motora.
Está compuesto por los nervios y neuronas que se extienden fuera del sistema nervioso
central, hacia los miembros y órganos (Ver Figura 1). La diferencia con el sistema
nervioso central, es que este no se encuentra protegido por huesos o por barreras que
impiden el daño del mismo. Se subdivide en:
El Sistema Nervioso Somático, que está formado por las neuronas sensitivas que
llevan información desde los receptores sensoriales hacia el sistema nervioso central
y por los axones motores que conducen los impulsos a los músculos esqueléticos,
para permitir los movimientos. Se caracteriza por ser un sistema que actúa por la
voluntad.
Las lesiones al sistema nervioso periférico (SNP) y el sistema nervioso central (SNC)
pueden dar lugar a la pérdida funcional severa. La regeneración espontánea se limita a
pequeñas lesiones en el SNP y es muy lenta o a veces nula dentro del SNC [2]. La
ingeniería de tejidos del sistema nervioso es la ciencia del diseño, creación y realización
de sistemas donde las células neuronales están organizadas en una manera controlada,
para llevar a cabo un diagnóstico apropiado, para mitigar o suavizar los efectos negativos
de las lesiones del SNP y SNC y para realizar los tratamientos terapéuticos apropiadas en
el sistema nervioso y lograr su rehabilitación [3]. A continuación se va a ser una breve
introducción a las células más importantes que componen los tejidos del sistema nervioso
para luego mirar como la ingeniería de tejidos aplica las técnicas y tecnologías que
recrean y controlan el ambiente en donde pueden vivir y funcionar en condiciones
similares al organismo.
La neurona es una de las células del sistema nervioso. Mide en término medio entre 4µm
y 125µm. Son células muy excitables, especializadas para la recepción de estímulos y la
conducción del impulso nervioso. Su tamaño y forma varían considerablemente. Cada
una posee un cuerpo celular desde cuya superficie se proyectan una o más
prolongaciones denominadas neuritas (ver Figura 2 izq). Las neuritas responsables de
recibir información y conducirla hacia el cuerpo celular se denominan dendritas. La
neurita larga única que conduce impulsos desde el cuerpo celular hacia la periferia se
denomina axón [4].
Las neuronas son consideradas la unidad fundamental del SN, pero además de las
neuronas, hay otro tipo de células que son la base para el desarrollo y mantenimiento
neuronal. Las células de sostén del SNC se agrupan bajo el nombre de neuroglia o células
gliales. Son 5 a 10 veces más abundantes que las propias neuronas. Las células de la
Neuroglia son fundamentales en el desarrollo normal de la neurona, ya que se ha visto
que un cultivo de células nerviosas no crece en ausencia de células gliales. Existen tres
tipos principales de células gliales (dos de ellas se pueden ver en la Figura 2 izq): los
astrocitos, los oligodendrocitos y la microglia, dentro de la cual se encuentran las células
ependimarias, las células satélites y las células de Schwan. Algunas funciones de la
Neuroglia son [4]:
Las nuevas neuronas no surgen de modo espontáneo en cualquier parte del cerebro
adulto de un mamífero. Se forman sólo en los ventrículos del prosencéfalo y en el
hipocampo (ver Figura 2 izq). En varias especies, durante la etapa posnatal y a lo largo de
toda la vida, se ha demostrado que nuevas neuronas continúan generándose en el bulbo
olfatorio, en el giro dentado, posiblemente en algunas áreas corticales y en la sustancia
negra.
Una vez se han proliferado las células del sistema nervioso, es necesario un ambiente que
las permita mantenerse con vida, realizar sus respectivas funciones, agruparse y formar
el tejido nervioso y continuar con su ciclo biológico. Las moléculas de adhesión celular
(CAM) son proteínas transmembrana situados en la superficie celular se unen a la matriz
extracelular (ECM), así como otras células, conectando de esta manera las células con su
entorno. Como participantes importantes en las interacciones célula-célula y las célula-
1 http://goo.gl/bWCBrh
Figura 3. Funciones de las diferentes CAM en las células del SN. Tomada de [11]
Los biomateriales que más cumplen con estas condiciones en la ingeniería de tejidos
neuronal y nerviosa son los polímeros.
Aunque el material es una parte importante, el proceso de fabricación del mismo es otra
de las claves para que cumpla la función para la cual se va a diseñar. Los métodos de
fabricación permiten manipular las variables físicas y químicas que son necesarias para
que el biomaterial sea lo más cercano al entorno extracelular en donde las células
neuronales subsisten. Las matrices o scaffolds imitan algunas de las características
estructurales de la matriz extracelular, pero además de ello, la dimensión de su
fabricación en tamaño nanométrico permite la presentación de alta una densidad en tres
dimensiones de péptidos y factores de crecimiento importantes para la reparación
neuronal [13]. Los métodos más comunes para fabricación de biomateriales para
ingeniería de tejidos neuronales que requieren construcción de fibras con diámetros del
rango de los 10nm a los 100nm son las siguientes:
ejemplo aplicativo de este tipo de técnica es el péptido anfifilo (PA) derivado del péptido
laminina, conformado por los aminoácidos IKVAV (Ile-Lys-Val-Ala-Val), que puede
procesarse de manera espontánea después de la introducción de tampón fisiológico que
conduce a la formación de nanofibras con un diámetro comprendido entre 6nm y 8nm
[13]. El auto montaje de péptidos se puede inyectar, potencialmente con células de
reemplazo, en el lugar de la lesión en un procedimiento mínimamente invasivo. Los
hidrogeles de péptidos auto-ensamblados son particularmente útiles para llenar las
cavidades de forma irregular, especialmente en el caso de lesiones cerebrales y de la
médula espinal. El RADA-16 conformado por los aminoácidos (Arg - Ala - Asp – Ala) es
uno de los biomateriales usados para ello [2].
b. Electrohilado de nanofibras
c. Separación de fases
3. Caracterización, modulación y
modificación de biomateriales para
promover la regeneración neural y
nerviosa
Además del tipo de material y la forma en la que se fabrica, son necesarios otros
procedimientos para mejorar la integración del biomaterial con el tejido neuronal u otros
tejidos. Para mejorar la integración de tejidos, los biomateriales pueden ser modificados
con motivos de reconocimiento cortos que imitan el ECM para promover la unión celular
(por ejemplo, proteínas, péptidos). Por tanto, la incorporación de CAM se ha convertido
en uno de los métodos estándar para aumentar la integración de los tejidos neuronales de
los biomateriales. Complementando la definición de la sección 1.3, las moléculas de
adhesión celular (CAM) representan una clase de biomoléculas que promueven la
regeneración del sistema nervioso central. Estas moléculas atadas proporcionan señales
para la regeneración de las neuronas que simulan el ambiente natural de las células
neurales [16]. A consecuencia de ello, mejoran el potencial adhesivo celular de
biomateriales que no permiten la integración celular pero que tienen parámetros que
cumplen con los requerimientos de la Figura 4.
Es uno de los métodos más sencillos para modificar biomateriales que van a ser usados
en ITN y otras aplicaciones. Los enlaces entre las CAM y el biomaterial son iguales que
los presentados en el método de fabricación de Autoensamblaje de nanofibras de
péptidos que se muestra en la Figura 5: enlaces débiles, no covalentes, como fuerzas de
van der Waals, enlaces de hidrógeno, enlaces iónicos, e interacciones hidrofóbicas. Este
método ha sido utilizado para aplicar la laminina y polilisina a las películas de PLGA;
laminina, polilisina y el colágeno, a superficies de hidrogel de ácido polisiálicos; y
laminina a las películas de PLGA tratadas con plasma, películas de quitosano y
nanofibras de PLA [16]. El resultado de este procedimiento, es que se pueden añadir o
enlazar polímeros naturales con los polímeros sintéticos para que haya una mayor
adhesión celular.
La mezcla de polímeros ofrece uno de los métodos más exitosos para desarrollar un
scaffold adecuado con todas las propiedades preferidas para aplicaciones específicas de
ingeniería de tejidos. Mediante la combinación de dos o más polímeros, las ventajas de
los diferentes polímeros se pueden combinar, dando lugar a propiedades globales
optimizados como se puede apreciar en la Figura 9. Por ejemplo, una mezcla polimérica
de PLGA y un polímero blando y elástico como el poliuretano o el PEG, presenta una
elasticidad mucho mayor que la propia del PLGA [12]. Adicionalmente, algunos CAM,
como factores de crecimiento neuronal y nervioso pueden añadirse dentro del proceso.
Un ejemplo es la incorporación de CAMs a hidrogeles, lo cual aumenta la adhesión
celular neural, mientras que preserva una matriz con propiedades similares a las
encontradas in vivo.
Mediante la técnica LBL se demostró que las películas compuestas de ácido hialurónico
(HA) y colágeno promueven la adhesión de la neurona cortical sobre el vidrio, que es
normalmente un sustrato que no permite esta interacción [16]. Una de los posibles usos
de este tipo de vidrios caracterizados es su uso para aplicaciones de biosensores.
Mediante otras técnicas de modificación de superficie se pueden adherir películas de
metales como cobre y oro, que son muy buenos conductores para hacer electrodos.
Por otro lado, mediante los métodos electroquímicos se han realizado mucho más
experimentos, entre ellos dopar polipirrol con CDPGYIGSR (una secuencia de péptido
extendido de laminina), para caracterizar unos microelectrodos de oro y de Silicio que se
usan como sensores neurales. In vitro, estos materiales mostraron aumento de la
adhesión celular de neuroblastoma en comparación con películas de control. In vivo, los
revestimientos demostraron ser estables durante al menos 1 semana, en la cual
promovieron la adhesión neuronal [16].
Tabla 2. Comparación entre las técnicas de fijación o unión electrostática. Tomada de [16]
Figura 10. Fijación o unión electrostática. Capa por capa a la izquierda y electroquímica a la derecha. Tomadas
de http://goo.gl/XBmzQZ
Figura 11. Ejemplos de caracterización por medio de enlaces covalentes. Tomadas de http://goo.gl/EkOPJB y
http://goo.gl/yVW57x
4. Conclusiones
En el capítulo 2 se mostraron algunos de los materiales utilizados para la ITN, así como
los métodos más comunes para su fabricación. En el capítulo 3 se hizo una breve
introducción a los métodos para caracterizar, modular o modificar los biomateriales para
que cumplieran con los propósitos de la ITN. Como resumen, la Tabla 3 muestra un
análisis bibliográfico realizado en el artículo de Subramanian et al [12] en el que se
muestran muchos más materiales, métodos de fabricación y caracterización de
biomateriales empleados en la ITN, mostrando su respectiva mejora a las propiedades.
Para concluir y a manera de comentario personal, aún falta mucho camino por recorrer
para crear un órgano artificial completamente funcional como los de aquella película,
pero así como los viajes al espacio y las comunicaciones inalámbricas fueron una vez
ciencia ficción que se volvió realidad, nos estamos acercando cada vez más a aquella
película del hombre bicentenario, en la cual un robot se convirtió en un ser humano.
5. Bibliografía
[1] Aránzazu Uranga del Monte, Desarrollo de un estimulador eléctrico integrado implantable para el control
de la micción en lesionados medulares, Barcelona: Memoria para optar al grado de Doctora en Ingeniería
Electrónica - Universitat Autònoma de Barcelona. Departament d'Enginyeria Electrònica, 2001.
[2] Kun Zhou, David Nisbet, George Thouas, Claude Bernard and John Forsythe, «Chapter 23: Bio-
nanotechnology Approaches to Neural Tissue Engineering,» de Tissue Engineering, Daniel Eberli (Ed.),
ISBN: 978-953-307-079-7, InTech, Available from: http://www.intechopen.com/books/tissue-
engineering/bio-nanotechnology-approaches-to-neural-tissue-engineering, 2010, pp. 459-484.
[3] Ravi Bellamkonda and Patrick Aebischer, «Review: Tissue Engineering in the Nervous System,»
Biotechnology and Bioengineering, vol. 43, nº CCC 0006-3592/94/070543-12 - 0 1994 John Wiley & Sons, Inc.,
pp. 543-554, 1994.
[4] Clase Dr. Matamala, «Neurohistología,» Universidad de la Frontera, Temuco, Chile.
[5] Flora de Pablo Dávila, «Capítulo 4: Células madre neurales, neurogénesis y neuroprotección,» de
Monografía XXVII: Células Madre y Terapia regenerativa, Farmacia 11 28004 Madrid. Spain, Real Academia
Nacional de Farmacia - Disponible en: http://www.analesranf.com/index.php/mono/issue/view/360, pp.
101-130.
[6] Melissa Szalkoswski, «Regeneración cerebral,» Inestigación y Ciencia, pp. 15-21, Noviembre, 2003.
[7] Nicolas Bertrand, Diogo S. Castro and François Guillemot, «Proneural genes and the specification of Neural
Cell types,» Nature Reviews: Neuroscience, vol. 3, pp. 517-530, 202.
[8] Gerardo Ramírez-Rodriguez, Gloria Benítez-King, Gerd Kempermann, «Formación de Neuronas nuevas en
el hipocampo adulto: Neurogénesis,» Salud Mental, vol. 30, nº 3, pp. 12-19, 2007.
[9] O. Arias-Carrión, T. Olivares-Bañuelos, R. Drucker-Colín, «Neurogénesis en el cerebro adulto,» REVISTA
DE NEUROLOGÍA, vol. 44, nº 9, pp. 541-550, 2007.
[10] Shohreh Mashayekhan, Maryam Hajiabbas and Ali Fallah, «Chapter 26: Stem Cells in Tissue Engineering,»
de Pluripotent Stem Cells, Edited by Deepa Bhartiya and Nibedita Lenka, ISBN 978-953-51-1192-4, 638 pages,
Publisher: InTech - Available from: http://dx.doi.org/10.5772/54371, 2013, pp. 567-602.
[11] Shan Bian, «Chapter 12: Cell Adhesion Molecules in Neural Stem Cell and Stem Cell-Based Therapy for
Neural Disorders,» de Neural Stem Cells - New Perspectives, INTECH Online http://dx.doi.org/10.5772/55136
- ISBN 978-953-51-1069-9, 2013, pp. 349-381.
[12] Anuradha Subramanian, Uma Maheswari Krishnan and, «Development of biomaterial scaffold for nerve
tissue engineering: Biomaterial mediated neural regeneration,» Journal of Biomedical Science, vol. 16, nº 108 -
doi:10.1186/1423-0127-16-108 - http://www.jbiomedsci.com/content/16/1/108, pp. 1-11, 2009.
[13] Mingyong Gao, Jiasong Guo, Gilberto K. K. Leung and Wutian Wu, «Chapter 8: Use of Self-Assembly
Nanofibre Biomaterials for Neural Repair After Injury,» de Advances in Nanofibers, INTECH Online
http://dx.doi.org/10.5772/57098, 2013, pp. 185-198.
[14] Jafar Ai, Anahita Kiasat-Dolatabadi, Somayeh Ebrahimi-Barough, Armin Ai, Nasrin, et al., «Polymeric
Scaffolds in Neural Tissue Engineering: A Review,» Archives of Neuroscience, vol. 1, nº 1, pp. 15-20, 2013.
[15] Jianming Li, Sean Connell and Riyi Shi, «Chapter 24: Biomimetic Architectures for Tissue Engineering,» de
Biomimetics Learning from Nature, Amitava Mukherjee (Ed.), ISBN: 978-953-307-025-4, InTech, Available
from: http://www.intechopen.com/books/biomimetics-learning-from-nature, 2010, pp. 487-506.
[16] Shreyas S. Rao and Jessica O. Winter, «Adhesion molecule-modified biomaterials for neural tissue
engineering,» Frontiers in Neuroengineering - www.frontiersin.org, vol. 2, nº doi: 10.3389/neuro.16.006.2009,
pp. 1-14, 2009.
[17] Michael W. Varney, Dean M. Aslam, Abed Janoudi, Ho-Yin Chan and Donna H. Wang, «Polycrystalline-
Diamond MEMS Biosensors Including Neural Microelectrode-Arrays,» Biosensors, vol. 1, nº
doi:10.3390/bios1030118 - ISSN 2079-6374, pp. 118-133, 2011.
[18] Christos D. Dimitrakopoulos and Patrick R. L. Malenfant, «Organic Thin Film Transistors for Large Area
Electronics,» Advanced Materials, vol. 14, nº 2 - 0935-9648/02/0201-0099 $ 17.50+.50/0 - Ó WILEY-VCH Verlag
GmbH, D-69469 Weinheim, pp. 99-117, 2002.