See discussions, stats, and author profiles for this publication at: https://www.researchgate.

net/publication/257748665

PENGAMATAN TRANSFORMASI HIDRAT AMOKSISILINA TRIHIDRAT DENGAN

FTIR

Conference Paper · January 2011

CITATIONS READS

0 612

2 authors:

Ilma Nugrahani Okky Dwichandra Putra

Bandung Institute of Technology AstraZeneca
36 PUBLICATIONS   43 CITATIONS    34 PUBLICATIONS   78 CITATIONS   

SEE PROFILE SEE PROFILE

Some of the authors of this publication are also working on these related projects:

Improving physicochemical properties of drug compounds View project

All content following this page was uploaded by Ilma Nugrahani on 27 November 2018.

The user has requested enhancement of the downloaded file.

 Jurnal Matematika & Sains, April 2013, Vol. 18 Nomor 1

Studi Transformasi Hidrat Sefadroksil Monohidrat dan Sefaleksin Monohidrat

dengan FTIR

Ilma Nugrahani, Slamet Ibrahim, Rachmat Mauludin, dan Pusparani Krisnamurthi

Sekolah Farmasi, Institut Teknologi Bandung, Bandung
e-mail : ilma_nugrahani@fa.itb.ac.id

Diterima 19 Juni 2012, disetujui untuk dipublikasikan 19 Juli 2012

Abstrak
Analisis Fourier Transform Infra Red (FTIR) biasanya digunakan untuk mendeteksi keberadaan hidrat dalam
padatan kristal secara kualitatif. Tujuan penelitian ini adalah mengembangkan metode FTIR untuk menganalisis
keberadaan dan perubahan jumlah/transformasi hidrat sefaleksin monohidrat dan sefadroksil monohidrat baik
secara kualitatif maupun kuantitatif. Hasil analisis FTIR dikonfirmasi dengan DSC (Differential Scanning
Calorimeter) dan PXRD (Powder Xray Diffractometer) sebagai metode standard analisis padatan. Hasil penelitian
menunjukkan bahwa puncak hidrat dari sefaleksin terlihat pada bilangan gelombang 3386-3586 cm-1, sedangkan
puncak hidrat dari sefadroksil terlihat pada bilangan gelombang 3471-3650 cm-1. Pendekatan kuantitatif dilakukan
dengan mengukur Area Under Curve (AUC) dari derivat puncak hidrat pada spektra FTIR; kemudian membuat
kurva kalibrasi antara AUC dengan kadar padatan dalam pelat KBr. Kurva kalibrasi menghasilkan nilai R=0,9996,
sedangkan sefadroksil monohidrat R=0,9995. Selanjutnya transformasi hidrat dari kedua antibiotika dilakukan
dengan pengambilan sampel terhadap padatan yang digerus selama 180 menit dan dicuplik setiap 30 menit. Hasil
percobaan menunjukkan bahwa sefadroksil monohidrat mengalami kehilangan spektra hidrat pada menit ke-180
sedangkan sefaleksin monohidrat pada menit ke-150. Padatan antibiotika hasil penggerusan tersebut kemudian
dipaparkan terhadap lembab di dalam desikator dengan kelembaban RH 71% dan RH 99%, pada suhu 25°C. Hasil
analisis FTIR dikonfirmasi dengan DSC dan PXRD menunjukkan bahwa hidrat tidak kembali pada jumlah dan
bentuk semula. Keseluruhan data membuktikan bahwa FTIR dapat menganalisis transformasi hidrat sefadroksil
monohidrat dan sefaleksin monohidrat dengan ketelitian yang baik. Dengan demikian, FTIR layak menjadi metode
alternatif maupun pelengkap untuk menganalisis hidrat dan transformasinya.
Kata kunci : Sefaleksin monohidrat, Sefadroksil monohidrat, Transformasi hidrat, FTIR.

Study of Hydrate Transformation of Cepadroxil Monohydrate and Cepalexin

Monohydrate Using FTIR
Abstract
Fourier Transform Infra Red (FTIR) generally is used as a qualitative method to detect hydrate in a crystal solid
form. The purpose of this research was to develop FTIR method to analyze hydrate and its transformation in
cephalexin monohydrate and cefadroxil monohydrate qualitative and quantitatively. Data of FTIR analysis were
confirmed with DSC (Differential Scanning Calorimeter) and PXRD (Powder Xray Diffractometer) which have
known as standard methods of solid analysis. The results of this experiment showed that hydrate of cephadroxil
spectra was founded at 3386-3586 cm-1 wavenumber, while cephalexin monohydrate at 3471-3650 cm-1.
Quantification approach of FTIR’s was performed by measure the AUC (Area under Curve) of the derivative of
hydrate spectra and made the calibration curve between AUC versus sample concentration in the KBr plate. The
calibration curves showed cephalexin monohydrate linearity value : R=0.9996, while cefadroxil monohydrate had
R=0.9995. Hydrate transformation were observed by grinding of APIs for 180 minutes and sample is taken for every
30 minutes for evaluate its hydrate transformation with FTIR. Cefadroxil monohydrate lost its hydrate after 180
minutes and cephalexin monohydrate after 150 minutes of grinding. After that, the grinding samples were exposed
to humidity in desicators with RH: 71 and 99%, at the temperature 25C. FTIR spectra confirmed by DSC and
PXRD showed that both samples cannot rehydrate back to its original amount and form. All of data proved that
FTIR can be used as an adequate methods to analyze hydrate transformation of cephadroxil and cephalexin.
Finally, FTIR considered as a proper alternative or complementary analysis instrument for solid state analysis,
especially the hydrate and its transformation.
Keywords : Cefadroxil monohydrate, Cephalexin monohydrate, Hydrate transformation, FTIR.
1. Pendahuluan dan/atau beberapa bentuk hidrat/solvat (solvatomorf).
Hidrat/solvat adalah kristal dengan sejumlah molekul
Padatan senyawa organik dan anorganik bisa
air/pelarut organik yang terinkorporasi pada kisi-kisi
memiliki beberapa bentuk kristal atau polimorf

1
2 Jurnal Matematika & Sains, April 2013, Vol. 18 Nomor 1
kristalnya. Pada proses pembuatan sediaan obat,
padatan zat aktif berkemungkinan mengalami
berbagai perlakuan termik atau mekanik selama,
seperti penggerusan, penggilingan, liofilisasi, spray-
drying, granulasi, pembuatan suspensi, tabletasi, dan
penyimpanan pada berbagai kondisi suhu dan
kelembaban. Akibatnya, bahan baku padat dapat
mengalami transformasi polimorfi maupun
transformasi hidrat/solvat. Transformasi tersebut
dapat berpengaruh terhadap solubilitas, kelarutan,
stabilitas dan kecepatan disolusi yang pada akhirnya
dapat berpengaruh pada ketersediaan hayati obat.
Oleh karena itu, karakterisasi padatan, termasuk studi
transformasi hidrat perlu dilakukan sebagai informasi
penting untuk pra-formulasi. Dengan adanya data
perubahan hidrat, diharapkan dapat dirancang proses
produksi sediaan dan penyimpanan yang optimal.
Sefadroksil dan sefaleksin adalah antibiotik
golongan beta laktam. Perubahan hidrat dan struktur
kisi kedua senyawa antibiotik tersebut dapat
menurunkan stabilitas kimianya karena air kristal
yang terlepas dapat menyerang gugus beta laktam.
Oleh karena itu, hasil penelitian ini diharapkan dapat
memberikan informasi penting sebagai dasar
perlakuan bahan baku kedua bahan aktif tersebut
terkait aktivitas hidratnya.
Sefadroksil merupakan antibiotik monohidrat
yang berupa serbuk kristalin putih kekuningan yang
agak sukar larut dalam air (1110 mg/L) dan sangat
sukar larut dalam etanol dengan struktur kristal
dilaporkan jenis ortorombik. Sefaleksin merupakan
antibiotik semisintetik monohidrat yang berupa
serbuk kristalin putih hingga putih pudar dan sedikit
larut dalam air (1789 mg/L), namun praktis tidak
larut dalam etanol dengan struktur kristal monoklinik.
 
Gambar 1. Struktur sefadroksil dan sefaleksin (USP
XXX, NF25).
Selama ini transformasi hidrat secara rinci
lebih banyak dipelajari dengan metode analisis termal
(DSC/TGA, DTA) dan difraktometri (PXRD),
sedangkan FTIR biasanya digunakan terbatas untuk
uji kualitatif keberadaan hidrat. Penelitian ini
berusaha mengembangkan metode kuantitatif. FTIR
merupakan metode analisis yang relatif cepat dan
lebih mudah digunakan bila dibandingkan metode
analisis padatan lain seperti PXRD dan DSC-TGA.
Penggunaan FTIR sebagai metode analisis hidrat
kristal masih belum banyak digunakan.
2. Percobaan
2.1 Bahan
Sefadroksil monohidrat pemberian PT. Kalbe
Farma, sefaleksin monohidrat dari PT Bernofarm
dengan nama Purilex Powder dengan Lot No.
3383253, KBr (Merck, Produk No.1049070500),
silika gel (Sakura) sebagai absorben desikator
penyimpanan, NaCl, dan KCl.
Alat
Botol vial kecil dengan tutup plastik, spatula,
3 buah desikator untuk penyimpanan kering dan
pengembalian hidrat pada RH 71% dan RH 99%,
timbangan analitik (Mettler Toledo AG104),
penggerus automatis (Retsch mortar grinder RM
100), spektroskopi FTIR (Jasco FTIR-4200), oven
pengering KBr, DSC-TGA (Netzsch STA 449 F3
Jupiter), PXRD (PW1710 diffractometer), dan DTA
(Mettler Toledo FP 90).
2.2 Karakterisasi awal bahan baku
Karakterisasi awal meliputi pembandingan
pemerian sampel dengan pustaka, identifikasi bahan
padatan sefadroksil monohidrat dan sefaleksin
monohidrat dengan FTIR dengan metode plat KBr,
DSC-TGA, dan PXRD.
Analisis FTIR dilakukan pada sampel
berbentuk serbuk yang dicampur KBr dengan
perbandingan bobot 1:100 dan digerus hingga
homogen. Kemudian dimasukkan ke dalam cakram
cetakan, lalu dikompresi pada tekanan 20 Psi
menggunakan hydraulic press. Cakram dipasang
pada holder lalu spektrum diukur pada bilangan
gelombang 4000-400 cm-1 menggunakan
spektroskopi FTIR Jasco-4200 dan software Spectra
Manager II.
Analisis menggunakan DSC-TGA/DTA
dilakukan dengan penimbangan 3-7 mg sampel
selanjutnya dimasukkan ke dalam cawan alumunium
khusus untuk analisis DSC-TGA/DTA. Sampel
dipanaskan dengan kecepatan pemanasan 10°/menit
di bawah aliran gas nitrogen (untuk DSC).
Pengukuran aliran panas dilakukan pada suhu 30-
350°C.
Analisis menggunakan PXRD dilakukan pada
kondisi sebagai berikut: anoda Cu, tegangan 40 kV,
arus 30mA, lebar slit 0,2 inci. Data dikumpulkan
dengan mode scanning 0,2°-0,5°per menit dengan
jarak scanning 2θ :5° - 40 °.
2.3 Pendekatan kuantitatif penetapan puncak hidrat
kristal pada FTIR
Kuantifikasi puncak hidrat dari sampel
dilakukan dengan metode penetapan kadar
Nugrahani dkk., Studi Transformasi Hidrat Sefadroksil Monohidrat dan Sefaleksin Monohidrat dengan FTIR 3

menggunakan preparasi sampel yang sama dengan 365,41 gram/mol. (European Pharmacopeia 6,2007;
identifikasi awal yakni dengan metode plat KBr. USP XXX, NF25, 2007).
Berat KBr dibuat tetap yakni 100 mg, sedangkan
sampel dibuat pada berbagai variasi kadar yakni pada
0,2; 0,4; 0,6; 0,8; 1; 1,2; 1,4; 1, 6;1, 8, dan 2 mg. Lalu
dibandingkan spektrumnya dan puncak derivat
transmitan dari hidrat yang terbentuk. Setiap kadar
sampel diukur sebanyak 3 kali untuk sekaligus
mengukur presisi dari alat. Pengukuran AUC dan
tinggi puncak hidrat derivat spektrum FTIR sampel
menggunakan software Spectra manager II. Lalu
ditentukan nilai dari parameter linearitas, batas
deteksi, batas kuantisasi, dan presisinya. Gambar 2. Pemerian serbuk sefadroksil monohidrat
2.4 Penggerusan (kiri) dan sefaleksin monohidrat (kanan).
Penggerusan sampel selama 180 menit Serbuk sefadroksil monohidrat dan sefaleksin
menggunakan Retsch Mortar Grinder RM 100 monohidrat memiliki ciri-ciri ukuran serbuk
dengan pengaturan tekanan pada mode 1, yaitu sefadroksil lebih besar dari sefaleksin. Sefadroksil
tekanan sebesar (1×108 N/m2). Sampling dilakukan berwarna putih bersih sedangkan sefaleksin berwarna
pada menit ke-0, 30, 60, 90, 120, 150, dan 180 menit agak kekuning-kuningan. Serbuk sefaleksin
lalu dikarakterisasi dengan FTIR. cenderung menggumpal, tetapi sefadroksil tidak.
(Gambar 2).
2.5 Evaluasi sampel hasil penggerusan Kemudian sampel dikarakterisasi dengan
Evaluasi sampel pada menit ke-180 FTIR untuk melihat spektrum IR dan dibandingkan
menggunakan FTIR dengan metode plat KBr, DSC- dengan spektrum pada pustaka (UV and IR Spectra of
TGA/DTA, dan PXRD sama dengan metode Pharmaceutical Substances and IR Spectra of
karakterisasi awal bahan baku. Pharmaceutical and Cosmetic Excipients, 2002 )
yang menunjukkan hasil sebagai berikut
2.6 Penyimpanan sampel hasil penggerusan dalam
kelembaban tinggi
Sampel hasil penggerusan selama 180 menit
disimpan dalam dua desikator, masing-masing berisi
larutan NaCl jenuh pada RH 71% dan larutan KCl
jenuh pada RH 99%. Sampling dilakukan pada
penyimpanan jam ke-0,8,24,48,72 jam.
2.7 Evaluasi sampel hasil penyimpanan dalam
kelembaban tinggi
Evaluasi sampel pada penyimpanan jam ke-0, (a)
8, 24, 48, dan 72 jam menggunakan FTIR dengan
metode plat KBr, dan hasil jam ke-72 dengan PXRD.
3. Hasil dan Pembahasan
3.1 Karakterisasi awal
Karakterisasi awal sampel merujuk pada
organoleptik dan pemerian sampel yang tertera pada
pustaka (USP XXX, NF25, 2007; European
Pharmacopeia 6, 2007). Sefadroksil merupakan
antibiotik monohidrat yang berupa serbuk kristalin
putih kekuningan yang agak sukar larut dalam air (b)
(1110 mg/L) dan sangat sukar larut dalam etanol.
Sefadroksil monohidrat memiliki rumus kimia Gambar 3. Spektrum IR sefadroksil monohidrat (a);
C16H17N3O5S.H20 dan berat molekul 381,40 sefaleksin monohidrat (b).
gram/mol. Senyawa ini memiliki titik leleh 197°C.
Sefaleksin merupakan antibiotik monohidrat yang
berupa serbuk kristalin putih, putih pudar dan sedikit
larut dalam air (1789 mg/L), namun praktis tidak
larut dalam alkohol. Sefaleksin monohidrat memiliki
rumus kimia C16H17N3O4S.H20 dan berat molekul
4 Jurnal Matematika & Sains, April 2013, Vol. 18 Nomor 1
(a)
(b)
Gambar 4. Spektrum IR (a) dan derivat spektrum (b)
sefadroksil monohidrat percobaan.
(a)
(b)
Gambar 5. Spektrum IR (a) dan derivat spektrum (b)
sefaleksin monohidrat percobaan.
Hasil karakterisasi awal dari puncak hidrat
menggunakan FTIR menunjukkan puncak hidrat
sefaleksin monohidrat terlihat pada bilangan
gelombang 3386-3586 cm-1 dan sefadroksil
monohidrat terlihat pada bilangan gelombang 3471-
3650 cm-1. Daerah-daerah tersebut menunjukkan
puncak khas di daerah regangan OH air kristal yakni
pada daerah 3100-3600 cm-1 (Kogermann, 2008).
Derivat puncak hidrat sefaleksin monohidrat
terlihat seperti dua puncak berhimpit, sedangkan
sefadroksil monohidrat terlihat hanya satu puncak
lebar saja. Intensitas spektrum pada daerah
fingerprint sefadroksil dan sefaleksin tidak sebesar
intensitas yang ada pada pustaka, namun
menunjukkan posisi pada bilangan gelombang yang
sama (Gambar 3,4,5).
Karakterisasi menggunakan DSC-TGA
menghasilkan termogram seperti teramati pada
berikut ini (Gambar 6).
(b)
(a)
Gambar 6. Termogram DSC (a) – TGA (b)
sefadroksil monohidrat.
Termogram DSC (Gambar 6 a) menunjukkan
kurva endotermik pada daerah 100°C yang
mengindikasikan suhu anhidratasi dari hidrat
sefadroksil. Hal ini dipertegas kurva TGA (Gambar 6
b) yang menurun setelah suhu 100°C karena lepasnya
hidrat. Tiga puncak kurva DSC pada suhu 196°C,
204°C, dan 216°C menunjukkan tahap-tahap
perubahan fasa, yaitu rekristalisasi; peleburan;
rekristalisasi; peleburan lagi untuk selanjutnya
terurai. Titik peleburan pada 196°C membuktikan
kemurnian sefadroksil yang memiliki titik lebur pada
197°C. Perbedaan suhu titik leleh masih dibawah
rentang keberterimaan ±2°C.
(b)
(a)
Gambar 7. Termogram DSC (a) – TGA (b)
sefaleksin monohidrat.
Termogram DSC pada Gambar 7 terlihat
adanya peristiwa endoterm pada suhu 100°C. Hal ini
Nugrahani dkk., Studi Transformasi Hidrat Sefadroksil Monohidrat dan Sefaleksin Monohidrat dengan FTIR 5

menunjukkan adanya anhidratasi yang didukung
kelandaian pada kurva TGA pada suhu yang sama.
Pada suhu 196,6°C terjadi puncak eksotermik yang
menunjukkan proses rekristalisasi diikuti dengan
oksidasi menyebabkan dekomposisi sefaleksin yang
didukung dengan data TGA yang menunjukkan
penurunan massa akibat penguraian massa pada suhu
yang sama.
Sefaleksin monohidrat dan sefadroksil
monohidrat memiliki hidrat kanal (Kennedy, 2003).
Kurva anhidratasi terlihat lebar karena seperti hidrat
kanal pada umumnya, molekul air dilepaskan pada
suhu sekitar 100°C secara mudah.
Karakterisasi awal menggunakan PXRD
memperlihatkan kristalinitas keduanya yang
menghasilkan puncak-puncak difraksi sebagai berikut
(Gambar 8 dan 9):
3.2 Pendekatan kuantitatif puncak derivat spektrum
FTIR dari hidrat kristal
Derivatisasi spektrum FTIR ini dilakukan
dengan menggunakan algoritma Savitzky-Golay pada
software Spectra manager II. Algoritma ini
merupakan filter yang digunakan untuk membuat
regresi polinomial pada suatu seri data untuk
menentukan nilai yang smooth dari tiap data serta
mengurangi noise. Keuntungan utama dari
pendekatan algoritma ini adalah dapat
mempertahankan distribusi data seperti tinggi,
pendek, dan lebar spektrum. Efek smoothing dari
algoritma ini tidak bersifat agresif, yakni tidak
mengubah rata-rata dan menghilangkan atau
mendistorsi informasi penting dari data (Savitzky,
1964; Maddams, 1981).
Dipilih pengukuran kalibrasi Area Under
Curve (AUC) ketimbang tinggi puncak disebabkan
hasil linieritasnya lebih baik. Dari 3 data hasil
pengukuran setiap bobot dihitung nilai rata-ratanya
sebagai nilai AUC dan tinggi puncak. Sebagai contoh
gambar kurva hasil pengukuran AUC adalah sebagai
berikut (Gambar 10)

Gambar 8. Difraktogram PXRD sefadroksil

monohidrat.
Sefadroksil monohidrat memberikan intensitas
yang tinggi pada nilai 2θ: 10;12,.3; 14,54; 16,64;
17,82; 21,66; 23,4; 25,76; 31,38; 32,54; dan 34,68.
Hal ini menunjukkan sefadroksil monohidrat
memiliki kristalinitas yang cukup tinggi. Gambar 10. Kalibrasi puncak derivat spektrum FTIR
sefadroksil monohidrat.
Tabel 1. Pengukuran Presisi Spektrum FTIR
Sefadroksil Monohidrat. (a)
Pengukuran ke AUC
1 9,215
2 9,078
3 8,947
4 8,984
5 8,992
6 9,152

(b)

Gambar 9. Difraktogram PXRD sefaleksin

monohidrat.
Gambar 11. Grafik perbandingan kalibrasi FTIR
Sefaleksin monohidrat memberikan intensitas
sefadroksil monohidrat pada berbagai bobot dengan
yang tinggi pada nilai 2θ: 7,14; 10,88; 14,42; 16,24;
metode perhitungan AUC (a); tinggi puncak (b).
17,74; 19,38; dan 21,98.
6 Jurnal Matematika & Sains, April 2013, Vol. 18 Nomor 1
Hasil kalibrasi menunjukkan bahwa nilai R
untuk AUC puncak derivat spektrum (Gambar 11 a)
sefadroksil monohidrat adalah 0,9996 sedangkan
untuk tinggi puncak (Gambar 11 b) adalah 0,9850
sehingga AUC spektra dianggap lebih akurat untuk
digunakan dalam perhitungan. Nilai R-AUC:
0,999596 lebih besar dari 0,999, sehingga memenuhi
syarat linieritas dalam validasi penetapan kadar
FTIR. Dari hasil perhitungan didapatkan nilai
simpangan baku residu dari regresi liner (Sy/x)
sebesar 0,181 dan koefisien variansi regresi (Vx0)
sebesar 1,659 yang mendekati 2, serta perhitungan
batas deteksi didapatkan 0,060 mg dan batas
kuantisasi 0,183 mg. Presisi alat ditentukan dengan
menetapkan nilai simpangan baku relatif (%RSD),
yakni 1,167 yang nilainya harus kurang dari 2.
Dengan demikian, hasil pengukuran kadar sefadroksil
monohidrat dengan FTIR dianggap memenuhi
parameter linieritas, presisi, rentang, dan spesivisitas.
Tabel 2. Pengukuran Presisi Spektrum FTIR
Sefaleksin Monohidrat.
Pengukuran ke AUC
1 5,369
2 5,353
3 5,352
4 5,427
5 5,245
6 5,123
(a)
(b)
Gambar 12. Grafik perbandingan kalibrasi FTIR
sefaleksin monohidrat pada berbagai bobot dengan
metode perhitungan AUC (a); tinggi puncak (b).
Selanjutnya dilakukan pengukuran kuantitatif
hidrat sefaleksin monohidrat dengan FTIR, kurva
kalibrasi menunjukkan nilai R untuk AUC puncak
derivat spektrum (Gambar 12 a) adalah 0,9996
sedangkan untuk tinggi puncak (Gambar 12 b) adalah
0,9912 sehingga kurva kalibrasi AUC dianggap lebih
memadai untuk digunakan sebagai pengukuran. Nilai
R-AUC: 0,9996 lebih besar dari 0,999 sehingga
memenuhi syarat linieritas dalam validasi penetapan
kadar FTIR. Dari hasil perhitungan didapatkan nilai
simpangan baku residu dari regresi liner (Sy/x)
sebesar 0,091 dan koefisien variansi regresi (Vx0)
sebesar 1,594 yang mendekati 2, serta perhitungan
batas deteksi didapatkan 0,058 mg dan batas
kuantisasi 0,175 mg. Presisi alat ditentukan dengan
menetapkan nilai simpangan baku relatif (%RSD)
yakni 1,884 yang nilainya harus kurang dari 2.
Dengan demikian, hasil pengujian FTIR kadar
sefaleksin monohidrat dianggap memenuhi parameter
validasi linieritas, presisi, rentang, dan spesifisitas.
Pengukuran AUC derivat spektrum hidrat
pada berbagai kadar sampel dengan FTIR
menghasilkan kurva kalibrasi yang linier, dengan
nilai R yang lebih dari 0,999 baik pada sefadroksil
monohidrat maupun sefaleksin monohidrat.
Evaluasi Hasil Penggerusan
Penggerusan sampel dilakukan dengan
tekanan 108 N/m2. Hasil sampling penggerusan setiap
30 menit menggunakan FTIR menghasilkan data
AUC menghasilkan kurva pada Gambar 13.
Gambar 13. Grafik AUC derivat FTIR sefadroksil
terhadap waktu penggerusan.
Hasil penggerusan sefadroksil menunjukkan
penurunan puncak derivat hidrat seiring lama
penggerusan. Dari grafik (Gambar 13) terlihat
hubungan yang linear antara lamanya waktu
penggerusan dengan penurunan AUC spektra hidrat
sefadroksil mengalami perubahan signifikan setelah
penggerusan selama 180 menit dengan menyisakan
sedikit puncak pada bilangan gelombang 3498 cm-1
(Gambar 13). Selanjutnya perubahan hidrat kristal
dikonfirmasi dengan hasil PXRD dan DSC-TGA
sefadroksil sebagai berikut:
 Nugrahani dkk., Studi Transformasi Hidrat Sefadroksil Monohidrat dan Sefaleksin Monohidrat dengan FTIR
Gambar 14. Difraktogram hasil penggerusan
sefadroksil selama 180 menit (b) dibandingkan
dengan sebelum penggerusan (a).
Difraktogram menunjukkan bahwa sefadroksil
hasil penggerusan menjadi lebih amorf dan terlihat
penurunan intensitas puncak pada posisi θ yang sama
dengan sefadroksil monohidrat bahan baku yang
belum digerus. Puncak-puncak terlihat masih ada dan
hanya berkurang intensitasnya. Ini menunjukkan
bahwa penggerusan dengan tekanan 108 N/m2 belum
terlalu merusak kisi kristal sefadroksil.
(b)
(a)
Gambar 15. Termogram DSC (a) – TGA (b)
sefadroksil hasil penggerusan 180 menit.
Hasil DSC-TGA juga menunjukkan
kehilangan hidrat pada sefadroksil hasil penggerusan
selama 180 menit. Kurva DSC (Gambar 15 a) tidak
menunjukkan adanya lengkungan endotermik pada
suhu 100°C yang menunjukkan adanya anhidratasi
dari sefadroksil hasil penggerusan, hanya terlihat
terjadinya pelelehan pada suhu 215°C. Kurva TGA
(Gambar 15 b) juga tidak menunjukkan penurunan
berat yang signifikan pada daerah 100°C. Air hidrat
yang tersisa berada dalam jumlah sedikit sehingga
tidak menunjukkan perubahan endotermik yang jelas
pada termogram. Suhu dekomposisi antara
sefadroksil bahan baku (216°C) dan hasil
penggerusan (215°C) tidak jauh berbeda.
Setelah penggerusan, dapat terlihat bahwa
sefadroksil masih memiliki sifat-sifat yang sama
dengan sefadroksil awal sebelum penggerusan yakni
titik leleh, puncak-puncak dengan intensitas yang
masih cukup tinggi pada posisi θ kristalinitasnya,
serta masih memiliki puncak derivat hidrat.
Kestabilan ini ditunjang dari inspeksi interaksi kristal
sefadroksil monohidrat yang menunjukkan bahwa
7
sefadroksil monohidrat memiliki derajat fleksibilitas
konformasi yang rendah dalam kristal (Hickey,
2006).
Gambar 16. Grafik AUC derivat FTIR sefaleksin
terhadap waktu penggerusan.
Hasil penggerusan sefaleksin juga
menunjukkan penurunan puncak derivat hidrat
seiring lama penggerusan sehingga hidrat kristal
mengalami perubahan yang signifikan setelah
penggerusan selama 150 menit yang digambarkan
pada kurva pada Gambar 16. Pada kurva tersebut
terlihat hubungan linear antara lama penggerusan
dengan penurunan AUC. Penurunan hidrat dari
sefaleksin lebih cepat daripada sefadroksil. Sefaleksin
monohidrat memberikan dua puncak pada daerah
bilangan gelombang 3550 cm-1 dan 3650 cm-1.
Setelah penggerusan puncak pada bilangan
gelombang 3550 cm-1 hilang. Puncak pada 3650 cm-1
yang masih terlihat menunjukkan adanya air
permukaan yang terinkorporasi akibat sifat
higroskopis dari sefaleksin.
Perubahan hidrat kristal sefaleksin
dikonfirmasi dengan hasil PXRD dan DTA sefaleksin
berikut ini :
(a)
(b)
Gambar 17. Difraktogram hasil penggerusan
sefaleksin selama 180 menit (b) dibandingkan dengan
sebelum penggerusan (a).
Difraktogram (Gambar 17 b) menunjukkan
bahwa sefaleksin hasil penggerusan menjadi lebih
amorf dibandingkan sebelum penggerusan (Gambar
17 a) ditunjukkan dengan penurunan intensitas
puncak-puncaknya akibat penggerusan. Hal ini
menunjukkan bahwa penggerusan dengan tekanan
108 N/m2 dapat merusak kisi kristal sefaleksin.
8 Jurnal Matematika & Sains, April 2013, Vol. 18 Nomor 1
Gambar 18. Termogram DTA sefaleksin hasil
penggerusan selama 180 menit.
Hasil DTA pada Gambar 18 menunjukkan
terdapatnya air pada permukaan sefaleksin yang
terlihat dari profil termogram suhu 30°C-120°C.
Setelah digerus titik peleburan mengalami pergeseran
dari 196°C menjadi 166°C yang artinya bergeser
sebanyak 30°. Hal ni menunjukkan sefaleksin hasil
penggerusan menjadi mudah terdekomposisi dan
terdehidrasi akibat perubahan kristalinitasnya. Hasil
penelitian ini menunjukkan fenomena yang sama
dengan yang dilakukan oleh Kaneniwa yang
melaporkan bahwa perubahan titik dekomposisi dan
dehidrasi dari sefaleksin akibat pengempaan dengan
tekanan 2×108 N/m2 (Kaneniwa, 1984).
Hasil analisis secara lengkap menunjukkan
bahwa padatan sefadroksil monohidrat memiliki
stabilitas fisikokimia yang lebih tinggi dari sefaleksin
monohidrat terlihat dari termogram Gambar 15.
3.3 Evaluasi hasil penyimpanan dalam kelembaban
tinggi
Penyimpanan sampel dalam kelembaban yang
dilakukan untuk mengamati kembalinya hidrat kristal
menunjukkan hasil sebagai berikut :
Penyimpanan pada RH 71% tidak menunjukkan
kembalinya hidrat setelah penggerusan. Hal ini
ditunjukkan pada Gambar 22 puncak hidrat awal
(daerah bilangan gelombang 3550 cm-1) yang hilang
setelah penggerusan tidak kembali lagi setelah
penyimpanan 0, 8, 24, 48, dan 72 jam. Penyimpanan
dalam kelembaban RH 71% tidak mengembalikan
puncak hidrat pada bilangan gelombang 3550 cm-1.
Sebaliknya spektrum FTIR dari gerusan yang
disimpan dalam RH 99% (Gambar 23) menunjukkan
puncak lebar pada daerah 3500-3700 cm-1 pada setiap
sampling penyimpanan. Ini menunjukkan bahwa
hidrat dari sefadroksil dapat kembali setelah disimpan
pada RH 99%.
Untuk meyakinkan hasil analisis, dilakukan uji
data lain PXRD dengan hasil sebagai berikut
Gambar 19. Difraktogram sefadroksil pada
penyimpanan RH 71% selama 72 jam (c)
dibandingkan dengan bahan baku (a) dan hasil
penggerusan (b).
Difraktogram sefadroksil mengkonfirmasi
data dari FTIR bahwa penyimpanan pada RH 71%
selama 72 jam (Gambar 19) belum dapat
mengembalikan hidrat karena pola kristalinitas yang
terbentuk setelah penyimpanan dan hasil penggerusan
masih sama. Pada penyimpanan RH 99% (Gambar
20) menunjukkan peningkatan kristalinitas yang
cukup signifikan dari sefadroksil hasil penggerusan.
Penggerusan yang menyebabkan penurunan
kristalinitas dan pelepasan hidrat.
Gambar 20. Difraktogram sefadroksil pada
penyimpanan RH 99% selama 72 jam (c)
dibandingkan dengan bahan baku (a) dan hasil
penggerusan (b).
Penyimpanan pada kondisi lembab dapat
mengembalikan sebagian air hidrat dan memperbaiki
kristalinitas hasil penggerusan. Perubahan hidrat ini
didukung data penelitian tentang pengaruh
penggerusan terhadap ampisilin trihidrat suatu beta
laktam yang meningkatkan efek stabilisasi dalam
kelembaban tinggi, karena dalam kelembaban tinggi
kemampuan molekul air untuk bergerak dalam kristal
menurun (Takahashi, 1984).
Selanjutnya spektrum FTIR hasil
penyimpanan sefaleksin ditunjukkan sebagai berikut :
Nugrahani dkk., Studi Transformasi Hidrat Sefadroksil Monohidrat dan Sefaleksin Monohidrat dengan FTIR
Gambar 21. Puncak derivat spektrum sefaleksin
pada penyimpanan RH 71%.
Gambar 22. Puncak derivat spektrum sefaleksin
pada penyimpanan RH 99%.
Hasil FTIR menunjukkan bahwa berpengaruh
terhadap penyimpanan dalam kelembaban RH 71%
(Gambar 21) dan RH 99% (Gambar 22) tidak
berpengaruh terhadap pengembalian hidrat dari
sefaleksin. Hal ini terlihat dari kehilangan puncak
hidrat pada daerah 3500 cm-1 pada hasil penggerusan
yang tidak kembali lagi. Profil puncak hidrat yang
terjadi pada proses penyimpanan kelembaban pada
RH 71% dan RH 99% mirip dengan profil pada hasil
penggerusan. Intensitas spektra FTIR setelah
penyimpanan sefaleksin juga tidak bertambah hanya
melebar saja. Hal ini memberi gambaran bahwa
penyimpanan dalam kelembaban tidak dapat
mengembalikan hidrat.
Higroskopisitas sefaleksin bertambah seiring
lamanya penggerusan hal ini menyebabkan
pengikatan air pada permukaan setelah penggerusan.
Selanjutnya, untuk mengamati kemungkinan
kembalinya hidrat setelah penyimpanan.
Difraktogram memperkuat data FTIR bahwa
penyimpanan dalam kelembaban baik dalam
kelembaban RH 71% (Gambar 23) dan RH 99%
(Gambar 24) tidak merubah kristalinitas maupun
pengembalian hidrat sefaleksin hasil penggerusan.
9
Gambar 23. Difraktogram sefaleksin pada
penyimpanan RH 71% selama 72 jam (c)
dibandingkan dengan bahan baku (a) dan hasil
penggerusan (b).
Gambar 24. Difraktogram sefaleksin pada
penyimpanan RH 99% selama 72 jam (c)
dibandingkan dengan bahan baku (a) dan hasil
penggerusan (b).
Hasil PXRD dari sefadroksil dan sefaleksin
setelah penyimpanan dalam kelembaban menambah
keyakinan bahwa stabilitas fisik padatan sefadroksil
lebih tinggi dibandingkan sefaleksin. Sefadroksil
hasil penggerusan masih dapat dikembalikan
sebagian hidratnya setelah penyimpanan dalam
kelembaban RH 99%, namun sefaleksin tidak.
Penggerusan dengan tekanan 108 N/m2 belum benar-
benar merusak kisi kristal sefadroksil. Setelah
penyimpanan pada kondisi kelembaban, sefadroksil
masih dapat mengembalikan sebagian hidratnya
karena pada tekanan penggerusan tersebut masih
banyak kisi kristal yang utuh sehingga air permukaan
dapat memasuki kisi kristal tersebut dan mengisi
hidrat kanalnya.
Sefaleksin sendiri karena sifatnya yang
higroskopis menjadi lebih rentan terhadap perlakuan
mekanik. Penggerusan sefaleksin pada tekanan 108
N/m2 diperkirakan sudah merusak kisi kristalnya. Hal
ini berbeda dengan yang dikemukakan oleh
Kaneniwa bahwa modulus Young pengempaan
Sefaleksin adalah 4,75×108 N/m2 sehingga tekanan
penggerusan yang dilakukan pada kondisi percobaan
seharusnya masih berada di rentang deformasi elastis
sefaleksin (Kaneniwa, 1984).
 10 Jurnal Matematika & Sains, April 2013, Vol. 18 Nomor 1
Dari keseluruhan hasil penelitian ditunjukkan
bahwa kisi kristal yang kehilangan air hidratnya
memiliki tingkat ketidakaturan tinggi sehingga
berusaha mengembalikan air hidrat untuk
menstabilkan struktur kristalnya. Penggerusan
merusak kisi kristal dan menyebabkan kehilangan
hidrat yang permanen dari sefaleksin dan sefadroksil
monohidrat. Namun demikian, FTIR menunjukkan
kinerja yang memadai untuk mengamati transformasi
hidrat dari kedua antibiotik golongan sefalosporin
tersebut.
4. Kesimpulan
FTIR dapat menganalisis transformasi hidrat
sefadroksil monohidrat dan sefaleksin monohidrat
dengan ketelitian yang baik sehingga layak menjadi
metode alternatif maupun pelengkap instrumen
analisis padatan yang lain.
Penggerusan menyebabkan sefadroksil
monohidrat dan sefaleksin monohidrat kehilangan
hidratnya menjadi bentuk amorf anhidrat.
Penyimpanan pada RH tinggi tidak dapat
mengembalikan bentuk hidrat kristal pada bentuk
hidrat semula.
Pustaka
Brittain, H. G., ed., 1999, Polymorphism in
Pharmaceuticals Solids, 2nd ed., Marcel
Dekker Inc., New York, 95, 396.
European Directorate for the Quality Medicines,
2007, European Pharmacopoeia, 6th ed.
Hickey, M. B., M. L. Peterson, E. S. Manas, J.
Alvarez, F. Haeffner, and Ö. Almarsson,
2006, Hydrates and Solid-State Reactivity:
A Survey of β-Lactam Antibiotics. J.
Pharm. Sci., 96:5, 1090-1099.
Kaneniwa, N., K. Imagawa, and M. Otsuka, 1984,
Compression Properties of Cephalexin
Powder and Properties of the Tablet, Chem.
Pharm. Bull., 32:12, 4986-4993.
Kaneniwa, N. and M. Otsuka, 1984, The Interaction
between Water and Cephalexin in the
Crystalline and Noncrystalline States, Chem.
Pharm. Bull., 32:11, 4551-4559.
View publication stats
Kennedy, A. R., M. O. Okoth, D. B. Sheen, J. N.
Sherwood, S. J. Teat and R. M. Vrcelj, 2003,
Cephalexin a Channel Hydrate, Acta Cryst.,
C59, O650-0652.
Kogermann, K., 2008, Understanding Solid-State
Transformations during Dehydration: New
Insights Using Vibrational Spectroscopy and
Multivariate Modelling, dissertation, Faculty
of Pharmacy of the University of Helsinki.
Maddams, W. F. and W. L. Mead, 1982, The
Measurement of Derivative IR Spectra-I.
Background Studies, Spectrochemica Acta,
38A:4, 437-444.
Otsuka, M., Y. Fukui, K. Otsuka, H. J. Kim, and Y.
Ozaki, 2006, Determination of Cephalexin
Crystallinity and Investigation of Formation
of Its Amorphous Solid by
Chemoinformetrical Near Infrared
Spectroscopy, J.Near Infrared Spectrosc.,
14, 9-16.
Otsuka, M. and M. Kaneniwa, 1984, Effects of
Grinding on the Physical Properties of
Cephalexin Powder, Chem. Pharm. Bull.,
32:3, 1071-1079.
Savitzky, A., and M. J. E. Golay, 1964, Smoothing
and Differentiation of Data by Simplified
Least Squares Procedures, Analy. Chem., 36,
1627-1639.
Takahashi, Y., K. Nakashima, and H. Nakagawa,
1984, Effects of Grinding and Drying on the
Solid-State Stability of Ampicillin
Trihydrate, Chem. Pharm. Bull., 32:12,
4963-4970.
Teraoka, R., M. Otsuka, and Y. Matsuda, 2004,
Evaluation of Photostability of Solid-State
Nicardipine Hydrochloride Polymorphs by
Using Fourier-Transformed Reflection–
Absorption Infrared Spectroscopy – Effect
of Grinding on the Photostability of Crystal
Form, Int. J. Pharm., 286, 1–8.
The United States Pharmacopeia, 2007, The National
Formulary, USP 30, NF 25.
UV and IR Spectra of Pharmaceutical Substances and
IR Spectra of Pharmaceutical and Cosmetic
Excipients, 2002. Editio Cantor Verlag,
Aurlendorf.