Anda di halaman 1dari 3

Data dari suatu penelitian tentang enzim amilase diperoleh data berikut:

No Konsentrasi Laju reaksi 1/[S] 1/V


Perc substrat (mmol/L.Det)
(mmol/L)
1 0,01 0,005 100 200
2 0,02 0,010 50 100
3 0,04 0,020 25 50
4 0,06 0,022 16,7 45,45
5 0,08 0,022 12,5 45,45

 Buatlah rancangan eksperimen (reka ulanglah) dimana enzim amilase diperoleh dari air
ludah, substratnya pati.
 Tentukanlah parameter kinetika reaksi berupa Vm dan Km, menurut persamaan Michaelis-
Menten dan persamaan Lineweaver-Burk.

Tujuan dari percobaan ini adalah untuk mengatahui nilai kecepatan reaksi maksimum
(Vmaks) dan konstanta Michaelis-Menten (Km) enzim amilase pada substrat pati. Sehingga
berdasarkan nilai Km akan diketahui pada konsentrasi berapa substrat pati menghasilkan
kecepatan reaksi sebesar ½ dari kecepatan maksimum. Penentuan Vm dan Km dilakukan
dengan menggunakan kurva Lineweaver-Burk dengan membuat grafik hubungan antara (1/v)
sebagai sumbu Y dan (1/[S] sebagai sumbu X. Selanjutnya data-data yang diperoleh dibuat
regresi liniernya dan diperoleh persamaan garis.
250

y = 1.8333x + 13.309
200 R² = 0.9883

150
1/V

Series1
100
Linear (Series1)

50

0
0 20 40 60 80 100 120
1/[S]

Dari data pengalihan persamaan yaitu dengan menggunakan nilai 1/s dan 1/v, diperoleh
persamaan grafik y = a + bx yaitu y = 1,833x + 13,3 untuk mendapatkan nilai Km dan Vm
dari proses reaksi enzimatis amilase terhadap substrat pati. dimana nilai a = 1,883 dan nilai b
= 13,3. Dari pengalihan persamaan Michelis-Menten (1/Vo = Km/Vmaks[S] + 1/Vmaks)
dapat diketahui bahwa nilai a = 1/Vmaks dan nilai b = Km/Vmaks. sehingga dari persamaan
tersebut dapat diperoleh:

Nilai intersep = 13,3 (b)

nilai slope = 1,833 (a)

1/Vmax = 13,3

Vmax = 1/13,3 = 0,075 mmol/Det

a = Km/Vmaks

Km = 1,833 x 0,075 = 0,137

Dari perhitungan di atas maka didapatkan nilai Vmaks = 0,075 mmol/L.Det dan nilai
Km = 0,137. Dari nilai Km dapat disimpulkan bahwa reaksi hidrolisis pati yang dikatalisis
oleh enzim amilase optimalnya terjadi pada konsentrasi pati sebesar 0,137 mmol dengan
kecepatan maksimun sebesar 0,075 mmol/L.Det, artinya apabila kecepatan melebihi
kecepatan maksimum yang ditandai dengan semakin banyaknya substrat yang masuk, maka
kecepatan reaksi akan menurun hingga enzim amilase akan jenuh terhadap pati sehingga
kecepatan reaksi cenderung tidak akan meningkat. Setiap enzim memiliki nilai Km yang
spesifik.

Anda mungkin juga menyukai