Anda di halaman 1dari 3

Disimpan pada 2°- 8℃

Penetes 10 ml
Dibuat di UK

Anti-A, Anti-B, Anti-AB


RINGKASAN pada tahun 1900, Landsteiner menemukan serum beberapa orang akan menggumpalkan sel darah merah lainnya. 4 macam fenotip
yang sah diakui: O, A, B, AB. Bagian dari A dan B yang telah diidentifikasi.
Kel. depan Kel. Terbalik Fenotip ABO Kaukasia
A B AB A1 A2 B O %
+ 0 + 0 0 + 0 A 42
0 + + + + 0 0 B 10
0 0 0 + + + 0 O 44
+ + + 0 0 0 0 AB
PRINSIP reagen akan langsung menyebabkan aglutinasi (penggumpalan) dari uji sel darah merah yang membawa kecocokan ABO antigen. Tidak
adanya aglutinasi menunjukkan bahwa ABO antigen tidak sesuai (lihat Keterbatasan).
REAGEN monoklonal IgM golongan darah reagen ABO mengandung antibodi monoklonal diencerkan dalam buffer fosfat yang mengandung klorida
sodium, EDTA setiap reagen disuplai pada pengenceran optimal untuk digunakam dalam semua teknik yang dianjurkan dibawah tanpa perlu
pengenceran lanjut/penambahan. Untuk banyak nomor referensi dan tanggal kadaluarsa lihat Label Botol.
Produk Sel/Clone Warna Pewarna yang Dipakai
Anti-A 9113D10 Biru Patent Blue
Anti-B 9621A8 Kuning Tetrazine
Anti-A,B 15D12+9113D10 Tidak berwarna Tidak Ada
PENYIMPANAN jangan dibekukan. Botol regen harus disimpan pada 2-8oC setelah penerimaan. Penyimpanan berkepanjangan pada suhu diatas rata-
rata dapat membuat hilangnya reaktivitas reagen dengan cepat.
PENGUMPULAN SAMPEL DAN PERSIAPANSampel darah diambil dengan atau tanpa antikoagulan dapat digunakan untuk pengelompokan
antigen. Jika pengujian tertunda spesimen pada 2-8ºC. EDTAdan sampel sitrat harus dalam waktu 48 jam. Sampeldikumpulkan ke ACD, CPD atau
CPDA-1 dapat diuji hingga 35 haridari tanggal penarikan. Semua sampel darah harus dicuci setidaknya dua kali dengan PBS sebelum diuji. Sampel
darah yang lisis dapat memberikan hasil yang tidak benar.
PENCEGAHAN
1. Reagen dimaksudkan untuk digunakan diagnostik in vitro saja.
2. Jika botol reagen rusak atau bocor, segera pindahkan isinya.
3. Jangan menggunakan reagen melewati tanggal kedaluwarsa (lihat Label botol).
4. Jangan menggunakan reagen jika ada endapan.
5. Pakaian pelindung harus dipakai saat menangani reagen, seperti sarung tangan sekali pakai dan jas laboratorium.
6. Reagen telah disaring melalui 0,2 m kapsul untuk mengurangi bio-beban. Setelah botol dibuka isi harus tetap layak sampai tanggal kadaluwarsa
selama tidak ada kekeruhan, yang dapat menunjukkan reagen rusakan atau kontaminasi.
7. Reagen mengandung <0,1% natrium azida. Sodium azide mungkin beracun jika tertelan dan dapat bereaksi dengan timbal dan tembaga pipa
untuk membentuk azides logam peledak. Siram pembuangan dengan volume air yang besar.
8. Tidak ada tes yang dikenal dapat menjamin bahwa produk-produk yang berasal dari sumber daya manusia atau hewan bebas dari agen
infeksi. Perawatan saat pembuangan tiap botol dan isinya harus tetap dijaga.
PELEPASAN REAGEN DAN MENANGANI TUMPAHAN untuk informasi tentang pembuangan reagen dan dekontaminasi dari tumpahan lihat Material
Safety Data Sheets, tersedia di permintaan.
PENCEGAHAN ANALITIS
1. Disarankan kontrol positif dan kontrol negatif diuji secara paralel dengan setiap bagian tes. Tes harus dianggap tidak sah jika kontrol tidak
menunjukkan hasil yang diharapkan.
2. Ketika akan mengelompokkan sel darah merah dari seorang pasien penting bahwa reagen kontrol negatif disertakan sejak makromolekul yang
potensiator di reagen dapat menyebabkan reaksi positif palsu dengan sel IgG dilapisi.
3. Spesimen darah yang lemah A atau B subkelompok (misalnya Ax) dapat memberikan naik ke reaksi negatif atau lemah palsu saat diuji
menggunakan slide, piring microtitre atau kartu gel. Dianjurkan untuk tes ulang subkelompok lemah menggunakan teknik tabung.
4. Individu yang lebih tua dari enam bulan harus memiliki darah ABO mereka. Hasil pengelompokan dikonfirmasi dengan menguji serum atau
plasmaterhadap kelompok yang dikenal A1 dan B sel sebelum darah ABO mereka dapat dikonfirmasi.
5. Direkomendasikan tekniksatuvolumesekitar 45 uL ketika menggunakan pipet botol yang disediakan.
6. Penggunaan reagen dan interpretasi hasil harusdilakukan oleh tenaga terlatih dan berkualitas sesuai dengan persyaratan dari negara
manareagen yang digunakan.
7. Pengguna harus menentukan kesesuaian reagen untukdigunakan dalam teknik lainnya.
REAGENTS DAN BAHAN DIBUTUHKAN
 Aplikator tongkat = pembaca plat otomatis.
 Kaca mikroskop slide = Tabung kaca (10 x 75 atau 12 x 75 mm)
 Lempeng centrifuge = Piring pengocok
 Fosfat Buffered Saline (PBS)= NaCl 0,9%, pH 7,0 ± 0,2 pada suhu 22 derajat celcius ± 1ºC. Positif (idealnya kelompok A2B) dan negatif
(kelompok O) mengontrol sel merah
 Uji tabung centrifuge = Divalidasi "U" dengan baik microplates
 Centrifuge volumetrik
TEKNIK YANG DISARANKAN
A. Teknik Tabung
1. Siapkan suspensi 2-3% dari uji sel darah merah dicuci di PBS.
2. Tempatkan dalam tabung reaksi berlabel: 1 volume Anti-ABO reagendan 1 volume suspensi tes sel darah merah.
3. Aduk rata dan teteskan pada suhu kamar selama 1menit.
4. Centrifuge semua tabung selama 10 detik pada 1000 RCF atau waktu alternatif yang disesuaikan.
5. Suspensikan sel darah merah dengan hati-hati dan baca secara makroskopik untukaglutinasi.
6. Setiap tabung, yang menunjukkan hasil negatif atau hasil yangdipertanyakan,harus diinkubasi selama 15 menit pada suhu kamar.
7. Setelah inkubasi, ulangi langkah 4 dan 5.
B. Teknik lempeng, menggunakan sumur “U”
Siapkan 2-3% suspensi uji eritrosit,yang sudah dicuci di PBS.
1. Tempatkan pada tabung yg telah dilabeli: 1 Volume Plasmatec Anti-ABO reagen dan 1 tes Volume suspensi sel darah merah.
2. Campur secara menyeluruh, sebaiknya menggunakan lempeng pengocok, rawatlah untuk menghindari kontaminasi silang baik.
3. Inkubasi pada suhu kamar selama 15 menit (tergantung pada pengguna waktu)
4. Centrifuge micoplate selama 1 menit pada 140 RCF atau untuk waktu yang alternatif yang sesuai dan kekuatan
5. Suspensikan ulang sel menggunakan agitasi dikendalikan dengan hati-hati pada pengocok lempeng
6. Baca secara makroskopik atau dengan pembaca otomatis divalidasi
7. Reaksi lemah harus diulang dengan teknik tabung
C. Teknik geser
1. Siapkan suspensi 35-45% dari sel darah merah untuk uji serum, plasma atau pbs
2. Tempat pada slide kaca berlabel: 1 Volume Plasmatec Anti-ABO reagen Dan 1 tes Volume suspensi sel Darah Merah.
3. Menggunakan aplikator tongkat bersih, campuran reagen dan sel-sel di area seluas sekitar 20 x 40 mm
4. Perlahan miringkan slide bolak-balik selama 30 detik, dengan sesekali pencampuran lebih lanjut selama periode 2 menit, mempertahankan
slide pada suhu kamar.
5. Baca makroskopik setelah 2 menit selama cahaya menyebar dan jangan kesalahan helai fibrin sebagai aglutinasi
6. Reaksi yang lemah harus diulang dengan teknik tabung
INTERPRETASI HASIL UJI
1. Positif: aglutinasi dari sel-sel merah uji merupakan hasil tes positif dan dalam keterbatasan diterima dari prosedur tes, menunjukkan adanya
antigen telah sesuai ABO pada sel darah merah uji
2. Negatif: tidak ada aglutinasi dari sel-sel merah uji merupakan hasil negatif dan dalam keterbatasan diterima dari prosedur tes, menunjukkan
tidak adanya antigen telah sesuai ABO pada sel darah merah tes.
3. Perbedaan: jika hasil yang diperoleh dengan kelompok terbalik jangan berkorelasi dengan kelompok maju, penyelidikan lebih lanjut diperlukan
4. Hasil tes dari sel-sel yang agglutinated menggunakan reagen kontrol negatif harus dikeluarkan, sebagai aglutinasi yang paling mungkin
disebabkan oleh effectbof yang yang potensiator makromolekul di reagen pada sel-sel peka
STABILITAS REAKSI
1. Membaca semua tabung dan lempeng tes langsung setelah sentrifugasi.
2. Tes slie harus ditafsirkan dalam waktu dua menit untuk memastikan kekhususan dan untuk menghindari kemungkinan hasil negatif mungkin
salah diinterpretasikan sebagai posotive toreagent karena.
3. Harus hati-hati dalam menafsirkan hasil pengujian yang dilakukan pada suhu lain yang mereka dianjurkan.
KETERBATASAN
1. ABO antigen tidak sepenuhnya dikembangkan pada saat lahir dan reaksi sehingga lemah karena itu dapat terjadi dengan spesimen kabel atau
neonatal
2. bila menggunakan Plasmatec monoklonal Anti-A, B, soecimens darah lemah A atau B subkelompok (misalnya Ax) dapat menimbulkan reaksi
negatif atau lemah palsu saat diuji menggunakan slide, paltes microtiter atau kartu gel. disarankan untuk tes ulang subkelompok lemah
menggunakan teknik tabung.
3. Plasmatec monoklonal Anti-A atau anti-B tidak divalidasi untuk mendeteksi Ax dan A3 atau Bx sebuah B3 antigen resp dan dengan demikian
kami tidak mengklaim reaktivitas dari monoklonal Anti-A atau anti-B reagen hatinya tidak ini lemah A dan B sub -groups.
4. darah tersimpan dapat memberikan reaksi lebih lemah dari darah segar.
5. Hasil postive atau salah False negative dapat terjadi karena:
?? kontaminasi bahan uji
?? Penyimpanan yang tidak benar, cincentration sel, waktu inkubasi atau suhu
?? sentrifugasi yang tidak tepat atau berlebihan
?? penyimpangan dari teknik direkomendasikan
?? sampel kabel cintaminated dengan jeli Wharton
KARAKTERISTIK KINERJA TERTENTU
1. Reagen telah ditandai dengan semua prosedur yang disebutkan dalam Teknik Direkomendasikan.
2. Rilis tp sebelumnya, masing-masing banyak Plasmatec monoklonal Anti-A, Anti-B, dan annti-A, B diuji oleh Teknik Direkomendasikan hatinya
tidak panel antigen-cocok reaktivitas.
3. Kekhususan antibodi monoklonal sumber ditunjukkan menggunakan panel sel antigen-negatif.
4. Potensi reagen telah diuji terhadap resiko standar acuan potensi minimum berikut diperoleh frrom Nasional Instituteof Biologi Standar dan
Kontrol (NIBSC): ?? Anti-A referensi standar 88/724
5. Plasmatec Anti-B tidak bereaksi dengan "Acquired-B" sel darah merah.
6. Reagen 6.Plasmatec monoklonal ABO tidak mendeteksi antigen crypt seperti T, Tn atau Cad.
7. Quality Control reagen dilakukan dengan menggunakan sel darah merah yang telah dicuci dua kali dengan PBS sebelum digunakan.
8. Reagen sesuai dengan rekomendasi yang terdapat dalam edisi terbaru dari Guidlines Inggris Pelayanan Transfusi Darah.
SANGKALAN
1. Pengguna bertanggung jawab atas kinerja reagen dengan metode apapun selain yang disebutkan dalam Teknik Direkomendasikan.
2. Setiap devaiations dari Teknik Direkomendasikan harus divalidasi sebelum digunakan
BIBLIOGRAFI

1. Kholer G, Milstein C. Continous culture of fused cells secreting antibody of predifined specificity. Nature 1975; Bagian 2.
2. Messeter L et al. Mouse monoclonal antibodies with Anti-A, Anti-B and Anti-A,B specificities , some superior to human polyclonal ABO
reagents. Vox Sang 1984;
3. Race RR, Sanger R. Blood Groups in Man, 6 th Edition. Blackwell Scientific, Oxford 1975; Bagian 2.
4. Mollison PL. Blood Transfusion in Clinical Medicine, 8 th Edition, Blackwell Scientific, Oxford 1987; Bagian 7.
5. Issitt PD. Applied Blood Group Serology, 3 rd Edition. Montgomery Scientific, Miami 1985; Bagian 6.
6. BSCH Blood Transfusion Task Force. Guidelines fot microplate techniques in liquid-phase Blood grouping and antibody screening, Clinical
Laboratory Hematology 1990; 460.
7. Guidelines for the Blood Transfusion Service in the United Kingdom. H.M.S.O. Current Edition.
8. British Committee for Standards in Haematology, Blood Transfusion Task Force. Recommendation for evaluation, validation and
implementation of new techniques For blood grouping,antibody screening and cross matching. Transfusion Medicine,1995,5, 145-150

Anda mungkin juga menyukai