CAFFRA)
RESIDUOS PARA LA PRODUCCIÓN DE FERMENTACIÓN DE VINAGRE
SUPERFICIAL Y SUMERGIDA.
Significado:
La fruta de Marula tiene una gran importancia económica para Sudáfrica, en
particular para la Provincia de Limpopo.
Los desechos de Marula pueden ser una fuente de compuestos bioactivos,
aunque se informa relativamente poco sobre el potencial aprovechamiento de
los residuos para producir vinagre.
El autodesarrollo de las comunidades a través de productos viables y fáciles
de producir a partir de la marula necesita ser implementado y priorizado en la
provincia de Limpopo.
INTRODUCCIÓN
Aparte de la producción comercial de frutas comunes como
manzanas, melocotones, peras y naranjas, hay una creciente tendencia a
domesticar árboles frutales indígenas en África, como la marula (Sclerocarya
birrea. subsp. caffra) y la manzana kei (Dovyalis caffra)1 para la producción de
fruta. Marula es particularmente conocida por su fruto 2, que se abren antes de
madurar mientras aún están verdes y luego maduran rápidamente en 8 días 3.
Posteriormente, el color del fruto cambia de verde a amarillo, el aroma se
desarrolla y la carne se suaviza.3 El árbol es muy apreciado por comunidades
rurales por su fruto; la carne comestible de la fruta se come cruda o se utiliza para
preparar jugos, mermeladas, conservas, rollos de fruta seca y bebidas
alcohólicas.4 Los granos de la fruta se consumen crudos o asados, y / o se utilizan
para extraer aceite utilizando métodos de prensado en frío. El aceite se utiliza para
cocinar y es conocido por su aplicación cosmética.5, 6 Por lo tanto, la marula es
considerada un árbol de usos múltiples en las comunidades rurales.
MATERIALES Y MÉTODOS
Se recibieron tres lotes de subproductos de residuos de marula de la
Compañía Marula (Phalaborwa, Provincia de Limpopo). El desperdicio de fruta fue
transportado congelado en cubos de 20 litros a la Universidad de Tecnología de
Tshwane (Tshwane, Sudáfrica). Al recibo, los residuos de fruta fueron
descongelados en un refrigerador y muestras de trabajo de 500 g fueron
transferidas a plástico bolsas Ziploc®, etiquetadas MRPS1 y MRPS2 para la
temporada 1 y la temporada 2, respectivamente, y almacenados en un congelador
(Snijderg, United Scientific, Goodwood, Sudáfrica) a - 80 ° C hasta su uso
posterior.
Medio de fermentación
El medio de fermentación se utilizó para ambos métodos (sumergido y
métodos de cultivo en superficie). Levadura seca activa instantánea
(Saccharomyces cerevisiae) (0.05 g) se añadió a 250 mL de agua tibia (30 ± 2 ° C)
y fue por 10 min. Una décima parte de la levadura fue inoculada a un esterilizado
extracto de levadura peptona caldo de dextrosa (1000 ml) y se incuba a 28 ° C
bajo aireación durante 24 h antes de la fermentación. El procesamiento del vinagre
el medio consistía en 30% (p / v) de sustrato de marula (MRPS1 o MRPS2),
glucosa anhidra (en concentraciones de 8%, 16% y 32% (p / v)), y extracto de
levadura (5 ml de 2% p / v). El volumen entero de cada mezcla fue preparado
hasta 250 ml con agua destilada estéril y mezclado por agitación. Formulaciones
de medios de fermentación que producen mayores concentraciones del ácido
acético fue considerado para otros análisis fisicoquímicos.
Fermentación de cultivo sumergido.
Los medios de fermentación preparados MRPS1 y MRPS2 fueron
inoculados con 5 ml del cultivo de levadura natural en una densidad óptica de 0,5
e incubados anaeróbicamente a 25 ° C durante 6 días para iniciar la etapa de
fermentación alcohólica. Posteriormente, cada matraz fue incubado a 30 ° C
durante 12 días y agitado a 80 rpm para airear el medio con aire atmosférico, que
permite el crecimiento de bacterias de ácido acético (AAB) que se producen de
forma natural para la etapa de fermentación del ácido acético. La fermentación se
detuvo mediante pasteurización de la siguiente manera: el resultado del vinagre se
transfirió asépticamente a un fondo redondo estéril de 500 ml en el matraz
instalado en un Rotavapor (BÜCHI Labotechnik-AG, Flawil, Suiza) y se unió a un
baño de agua y giró a 80 rpm a 70 ° C durante 30 min. El sistema fue cerrado para
evitar la pérdida de compuestos volátiles, y la rotación aseguró la distribución
uniforme del calor. Posteriormente se enfrió el vinagre a temperatura ambiente y
se transfirió a una centrífuga Falcon de 50 ml tubos (Eppendorf, Johannesburgo,
Sudáfrica) y se centrifugaron en 15 810 rcf (15 ° C durante 10 min) (Centrífuga
Sorvall RC 6, Johannesburgo, Sudáfrica). Se recogió el sobrenadante de vinagre y
los gránulos descartado. El vinagre se clarificó por filtración (filtro de jeringa de 4
µm), Embotellado y almacenado hasta posteriores análisis. Los análisis realizados
durante el proceso de fermentación y el producto final incluyen: pH medido en los
días 6, 9 y 12 del período de fermentación, concentración de alcohol medido el día
6 usando un alcoholímetro de vidrio y ácido acético concentración cuantificada
utilizando cromatografía líquida de alto rendimiento (HPLC) al final de la
fermentación (día 12).
Fermentación inoculada
Los métodos de fermentación antes mencionados fueron mediados
principalmente por microflora natural, es decir, levadura y AAB. En este
experimento, la fermentación acética (bioconversión de etanol a ácido acético) fue
logrado por inoculación con un Acetobacter aceti puro (ATCC 15973) cultura
iniciadora (ANATECH Cultures, Johannesburgo, Sudáfrica). Brevemente,
Acetobacter aceti liofilizado (± 0.5 g) se volvió a crecer en glucosa estéril caldo de
extracto de levadura (250 ml) que consiste en 1% (p / v) de glucosa, 1% (p / v)
polvo de extracto de levadura, etanol al 6% (v / v), MgSO4 al 0,05% y 0,05%
KH2PO4, e incubado en una incubadora rotativa a 30 ° C hasta que una célula
óptica se obtuvo una densidad de masa de 0,5. En el día 6, el medio de
fermentación obtenida en ambos métodos de fermentación (cultivo sumergido y
métodos de cultivo) se inoculó con 10 ml de caldo de cultivo. Alcohol, la
concentración de ácido acético y el pH se determinaron como se indicó
anteriormente.
Actividad anti-radical
La actividad antirradical se determinó como DPPH · (2,2-difenil-1-
picrilhidrazilo libre) capacidad de eliminación de radicales según lo descrito por
Ozturk et al.18, y el porcentaje de actividad anti-radical (% ARA) determinado por:
𝐴𝐶 − 𝐴𝑆
% 𝐴𝑅𝐴 = ∗ 100
𝐴𝐶
Evaluación sensorial
Se basó la descripción sensorial de los diferentes vinagres de marula
en una escala hedónica de 9 puntos (1 = menos me gusta y 9 = fuertemente me
gusta) como descrito por Ubeda et al.19. El panel no entrenado consistió de 23
hombres y alumnas de ciencias del consumo del Departamento de Hospitalidad
Gestión (Universidad de Tecnología de Tshwane, Pretoria, Sur África) entre las
edades de 20 y 23 años. Uva blanca y roja muestras comerciales de vinagre
(Wellington®, Heinz Foods Pty Ltd, Cape Ciudad, Sudáfrica) se incluyeron con
fines comparativos.
Análisis estadístico
Cada análisis se realizó por triplicado y por medio estándar las
desviaciones se calcularon utilizando Microsoft Excel (Microsoft Corporation USA).
La significación estadística (p≤0.05) de los conjuntos de datos fue evaluado
utilizando el software de análisis de datos y estadísticas Geostatos®.
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Figura 2: pH del vinagre de marula durante un período de 12 días, utilizando técnicas de fermentación
naturales e inoculadas, el método de cultivo sumergido (a, natural y b, inoculado) y el método de cultivo de
superficie (c, natural y d, inoculado). Los valores medios son para las estaciones 1 y 2 combinadas (n = 6).
HPLC y compuestos bioactivos.
Compuestos activos como fenoles y flavonoides en forma natural de
vinagres fermentados han atraído mucho interés del consumidor debido a sus
beneficios que confieren a la salud, que incluyen la supresión del apetito y
estabilización de radicales libres. La sidra de manzana y los vinagres balsámicos
son de lejos, el más famoso por estas características. Naturalmente, fermentados
los vinagres son de naturaleza heterogénea, con una variedad de ácidos
orgánicos incluyendo ácido acético, succínico, butírico y láctico. 11 Este fenómeno
es atribuido a diversas vías utilizadas por los microorganismos de fermentación
secretando distintos subproductos y productos intermedios de fermentación, tales
como acetil aldehído.13
Los valores con los mismos superíndices en la misma fila no tuvieron diferencias significativas (p≤0.05). Los
valores medios son para las estaciones 1 y 2 combinadas (n = 6).
TPC, contenido fenólico total; TFC, contenido total de flavonoides; ARA, actividad antirradical; GAE,
equivalente de ácido gálico; CAE, equivalente de ácido de catequina
Los valores con el mismo superíndice (a-b) en la misma fila no fueron significativamente diferencias (p≤0.05).
Los valores medios son para las estaciones 1 y 2 combinadas (n = 6).
Color
Productos alimenticios agrícolas, especialmente frutas y hortalizas,
contienen varios compuestos de color, incluido el caroteno (amarillo a rojizo),
clorofila (verde), flavonoides (blanco) y antocianinas (azul a púrpura) .26,27 Sin
embargo, un cambio de pH adverso, la temperatura (calor en particular),
moretones físicos incluyendo corte y procesamiento, todos influyen en el color final
del producto destinado.27 Se sabe que contienen clorofila y carotenos.3 Sin
embargo, el color de los vinagres de marula era de ámbar pálido a ámbar
profundo. La transición de la luz a la oscuridad es el resultado de la oxidación de
los compuestos fenólicos catalizados por la polifenol oxidasa. La tabla 3 resume
los valores de color de cada uno se produce vinagre de marula. Es importante
notar que la fermentación de los métodos utilizados no cambiaron
significativamente la croma de los dos vinagres sin embargo, el vinagre de marula
es más ligero que el vinagre de manzana con un valor L * de 58. La presencia de
verde despreciable (clorofila) los compuestos de color están indicados por un bajo
valor a * negativo y un valor positivo b *. Estos valores están de acuerdo con los
descritos por Ozturk. et al.18 para vinagres caseros turcos.
Figura 3: Evaluación sensorial de la marula y vinagre de uva roja y blanca utilizando la escala hedónica. Las
barras con el mismo superíndice no fueron significativamente diferentes (p≤0.05).
Cuando se le preguntó sobre el uso potencial de los vinagres de
marula, la mayoría los panelistas recomendaron que se usara vinagre de marula
para la elaboración de aderezos para ensaladas o incluso mayonesa. Basado en
la evaluación del consumidor, los vinagres a base de marula obtuvieron la misma
calificación de compra de los consumidores como los vinagres comerciales.
CONCLUSIÓN
Hemos demostrado que los productos derivados del procesamiento de
la fruta de marula pueden servir como sustrato adecuado para la producción de
ácido acético. Esta aplicación será agregar valor a tales productos (pieles, pepitas
y residuos de pulpa) para ser utilizados en áreas de nicho adaptadas como la
fermentación, y como tal, agregar valor a la bioeconomía. Sin embargo, la
optimización del procesamiento (alimentación de nutrientes). Los parámetros de
estrategia, temperatura y aireación son necesarios para asegurar la elaboración
de vinagre de marula de alto título. El método de cultivo de superficie es más
adecuado que la fermentación de cultivo sumergido para la conservación de los
compuestos bioactivos en el vinagre. Finalmente, se recomienda que, con el
apoyo del Departamento de Ciencia y Tecnología, las comunidades exploren la
producción de tales productos.
EXPRESIONES DE GRATITUD
Reconocemos el apoyo financiero de la Universidad de Tshwane
Tecnología y la Fundación Nacional de Investigación de Sudáfrica.
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