Anda di halaman 1dari 16

Desulfurisasi bakteri Senyawa

Sulfur Organik Ada dalam Bahan Bakar Fosil

Abstrak

Polusi udara oleh sulfur oksida sebagai hasil pembakaran bahan bakar yang mengandung
senyawa belerang memainkan peran penting dalam meningkatkan laju beberapa penyakit dan
masalah di masing-masing ekosistem. Hidrodesulfurisasi (HDS) telah menjadi metode
desulfurisasi yang paling populer. Ketidakmampuan teknologi ini untuk menghapus
polyaromatic sulfur heterocyclies (PASHs) menyebabkan penemuan alternatif lain yang disebut
Biodesulfurization (BDS). Keuntungan yang paling penting dari proses ini adalah bahwa BDS
tidak memiliki efek pada nilai kalor bahan bakar fosil, karena proses ini mampu menghilangkan
atom sulfur dari senyawa belerang secara selektif. Dibenzothiophene (DBT) sebagai senyawa
sulfur yang paling melimpah dalam bahan bakar fosil telah lebih diperhitungkan dalam penelitian
BDS dan dua jalur utama telah ditetapkan untuk biodesulfurisasi DBT yaitu Kodama dan 4S.
Tujuan dari penelitian ini adalah untuk memahami metode desulfurisasi dan meninjau
karakteristik bakteri desulfurisasi dalam hal aktivitas biodesulfurisasi dan kondisi pertumbuhan
mereka. Karena jalur 4S merupakan jalur utama untuk mengeluarkan sulfur secara selektif dari
DBT oleh beberapa bakteri, bakteri yang mampu menghambat bakteri yang dapat mengikuti
jalur ini dianggap lebih dalam penelitian ini.

Isi

Saat ini bahan bakar fosil adalah sumber energi paling signifikan di dunia. Memang,
sekitar 85% energi kita berasal dari bahan bakar fosil, 8% dari tenaga nuklir, dan 7% dari sumber
energi lain (Gupta et al., 2005). Belerang, sebagai elemen penting dalam minyak bumi setelah
hidrogen dan karbon, memainkan peran penting dalam menghasilkan pencemaran di lingkungan.

Pembakaran senyawa sulfur dalam minyak mentah menyebabkan pelepasan sulfur oksida
(SOx) di atmosfer. Melepaskan SO2 dapat menjadi salah satu penyebab utama kanker paru,
masalah cardiopulmonary dan pernafasan seperti iritasi bronkus dan serangan asma pada
manusia yang rentan (Mohebali dan Ball, 2008). Selain itu, korosi dan erosi pipa kilang dan
perlengkapan logam, menciptakan hujan asam, penghancuran hutan dan ekosistem pertanian
melalui pengurangan pH, mencuci ion logam dari tanah, merusak ekosistem rantai alimentari,
menghancurkan bangunan dan konstruksi dan, mengurangi nilai minyak mentah adalah masalah
lain yang disebabkan oleh pelepasan oksida sulfur di atmosfer (Gou et al., 2005; Monticello,
1998).

Memang benar bahwa memiliki atmosfer bersih atau mengurangi polusi udara tidak dapat
dicapai tanpa menghilangkan sulfur dari bahan bakar fosil yang digunakan dalam sistem
transportasi, pabrik dan bahkan dalam penggunaan domestik. Memang, tidak ada strategi yang
pasti untuk mengurangi polusi udara yang dapat berhasil tanpa menghilangkan sulfur ke sekitar
level nol.

Senyawa Sulfur dalam Bahan Bakar Fosil

Belerang adalah unsur yang paling melimpah setelah karbon dan hidrogen dalam minyak
bumi. Unsur ini dapat ditemukan dalam tiga fase material, yaitu gas, padat dan cair. Jumlah
konsentrasi sulfur dalam minyak mentah bervariasi dan itu berbeda dari 0,03% menjadi 7,89%
berat (Mohebali, 2008). Namun, nilai konsentrasi sulfur 13,95% telah dilaporkan dalam beberapa
kasus (Grossman et al., 1999). Selain itu, jumlah sulfur dalam gas alam ada sebanyak 5% berat,
dalam bentuk H2S, tiol dan sulfida yang mudah menguap. Persentase belerang yang ada dalam
minyak ringan, minyak berat, dan minyak padat (aspal) masing-masing adalah sekitar 0,5%,
hingga 6% dan 6% (Borgne dan Ayala, 2010).

Senyawa sulfur organik yang merupakan molekul hidrokarbon mengandung atom sulfur
dianggap lebih dalam biodesulfurisasi. Disulfida, polysulfides, sulfon, merkaptan, thiols,
thioethers, thiophenes, dan senyawa lain yang lebih kompleks adalah contoh senyawa sulfur
organik dalam minyak bumi (Kayser et al., 1993). Thiophenes (C4H4S) dan isomer alkil
tersubstitusi yang mencakup cincin aromatik yang berbeda, dengan struktur heterosiklik, (yaitu
PASH seperti tiofena, benzotiofena, dibenzothiophene, dan Benzonaphthothiophene), adalah
senyawa karsinogenik (Khadem Haghighat et al., 2003; Ansari, 2008 ), dan di antara jenis
senyawa sulfur organik lainnya telah dipertimbangkan untuk desulfurisasi dari bahan bakar fosil.
Senyawa sulfur anorganik seperti pyrite (FeS2) selain unsur sulfur dan hidrogen sulfida juga
dapat hadir dalam bahan bakar fosil (Marcelis, 2002).

Karena fakta bahwa hampir 60% dari senyawa belerang yang ada dalam produk minyak
bumi adalah DBT dan turunan alkil (Monticello, 1998) dan juga bertahan dari senyawa ini di
lingkungan selama lebih dari tiga tahun (Xu et al., 2006) , senyawa sulfur yang paling penting
dalam minyak bumi dalam hal desulfurisasi, bahan bakar bersih dan penelitian lingkungan
adalah DBT. Selain itu, ketersediaan dan kelimpahan DBT murni dalam fraksi kaya sulfur telah
menyebabkan penggunaan senyawa ini dalam penelitian biodesulfurisasi secara luas.

Metode Desulfurisasi

Menyadari SOx efek samping yang berbahaya pada kesehatan manusia dan ekosistem
telah menyebabkan penetapan beberapa peraturan dan hukum di dunia untuk mengurangi tingkat
senyawa belerang yang ada dalam bahan bakar fosil, sejak awal 1990-an (Borgne dan Ayala,
2010). Tujuan utama dari peraturan ini adalah mengendalikan jumlah SOx yang dirilis di
atmosfer. Hidrodesulfurisasi dan biodesulfurisasi adalah metode utama untuk menghilangkan
senyawa sulfur dalam bahan bakar fosil (Soleimani et al., 2007). Hidrodesulfurisasi bisa efektif
dalam pra-pembakaran desulfurisasi di kilang, tetapi kekurangan metode ini untuk
menghilangkan beberapa senyawa belerang seperti DBT dan turunan teralkilasi, yang merupakan
70% dari senyawa belerang yang ada dalam bahan bakar (Borgne dan Ayala, 2010; Kertesz dan
Wietek , 2001), memaksa peneliti untuk menggunakan metode gratis lainnya.

 Hidrodesulfurisasi

Metode tradisional untuk desulfurisasi senyawa minyak seperti minyak tanah dan bensin
adalah hidrodesulfurisasi, yaitu reaksi katalitik antara hidrogen dan sulfur organik untuk
menghilangkannya pada tekanan antara 5 hingga 10 MPa dan dalam kisaran 300 hingga 350oC
suhu, tergantung pada tingkat desulfurisasi yang diperlukan (Shafi dan Hutchings, 2000).
Memang, ini adalah metode fisiko-kimia untuk menghilangkan ikatan sulfur dalam senyawa
sulfur (Marcelis, 2002).
Efisiensi hidrodesulfurisasi terkait dengan berbagai kimia hidrokarbon. Mercaptan,
thioethers, dan disulfida antara senyawa sulfur lainnya mudah dihilangkan dengan
hidrodesulfurisasi karena ketidakstabilan mereka. Tetapi hidrodesulfurisasi tidak mampu
menghilangkan dan menghilangkan desulfurisasi minyak yang mengandung beberapa molekul
lain khususnya sulfur polyaromatik.

heterosiklies (PASHs) yang hadir dalam fraksi berat (Guerinik dan Al-Mutawah, 2003).
Selain itu, biaya tinggi operasi dan bangunan, efek sekunder yang tidak diinginkan, keterbatasan
kimia yang melekat terkait dengan hidrodesulfurisasi, pemakaian jumlah CO2 yang tinggi di
lingkungan sebagai hasil dari melakukan hidrodesulfurisasi di bawah suhu tinggi dan kondisi
tekanan dan pengurangan jumlah oktan signifikan bahan bakar yang dipimpin untuk menyelidiki
dan menggunakan metode biologis pelengkap untuk menghilangkan sulfur dari minyak dan
minyak bumi (Ishii et al., 2005; Khadem Haghighat et al., 2003; Li et al., 2005; Ansari, 2008).

Selain itu, hidrodesulfurisasi yang dalam dapat menyebabkan beberapa masalah lain yang
membuat ketidaknyamanan proses ini; 1) mengurangi nilai kalori minyak yang diolah dalam
suhu tinggi selama hidrodesulfurisasi, 2) memproduksi kokas karbon pada katalis oleh kondisi
ekstrim yang diterapkan dalam hidrodesulfurisasi, 3) dihasilkan H2S selama hidrodesulfurisasi
adalah racun untuk katalis dan memotong kehidupan fungsional mereka ( Mohebali and Ball,
2008).

 Biodesulfurisasi

ZoBell pada tahun 1953 menggunakan bakteri pereduksi anaerobik sulfat untuk pertama
kalinya untuk menghilangkan senyawa sulfur organik dalam minyak bumi dengan memproduksi
H2S sebagai metabolit akhir (dikutip dalam Borgne dan Ayala, 2010). Strain bakteri pertama
dengan kemampuan mengeluarkan sulfur dari DBT tanpa mempengaruhi struktur hidrokarbon
diidentifikasi pada akhir 1980-an (Kilbane, 1990). Setelah itu, minyak mentah Kuwait
didesulfurisasi oleh D. desulfuricans M6 oleh produksi H2S sebagai metabolit akhir (Kim et al.,
1990). Armstrong dkk. (1995) dan McFarland (1999) melaporkan bahwa spesies Desulfovibrio,
Desulfotomaculum dan Desulfomicrobium dapat menggunakan DBT sebagai sumber tunggal
belerang dan mengubahnya menjadi H2S dan biophenyl.
Keuntungan utama dari biodesulfurisasi dibandingkan dengan hidrodesulfurisasi adalah
bahwa proses ini tidak memerlukan kondisi reaksi tinggi seperti suhu dan tekanan tinggi dan
dapat terjadi pada kondisi tekanan dan suhu normal. Selain itu, biodesulfurisasi dibandingkan
dengan hidrodesulfurisasi memiliki beberapa manfaat lain seperti penghematan biaya modal dan
operasi, kemampuan dan fleksibilitas untuk mengobati berbagai macam aliran minyak bumi,
teknik yang lebih cepat dan waktu konstruksi, proses yang lebih efisien energi, kondisi yang
lebih aman dan lebih ringan dan sulfur secara selektif. penghapusan (Kargi dan Robinson, 1982;
Xiaojuan et al., 2008).

Aerobik Biodesulfurisasi

Biodesulfurizing mikroorganisme mampu menggunakan dan menghilangkan senyawa


sulfur menjadi tiga cara, yaitu pembelahan C-S oksidatif, pembelahan C-C oksidatif, dan
pembelahan C-S reduktif (Gupta et al., 2005). Biodesulfurisasi dapat terjadi dalam kondisi
aerobik dan anaerobik. Mekanisme aerobik dan anaerob dapat memecah ikatan karbon-sulfur
dalam senyawa heterosiklik sulfur seperti tiofena, benzothiophene dan dibenzothiophene
(Bressler et al., 1998). Tingkat biodesulfurisasi di bawah kondisi anaerobik terlalu lambat dari
pada biomasulfurisasi aerobik dan reaksi laju rendah dari biodesulfurisasi anaerobik telah
terbukti (Ohshiro et al., 1999).

Desulfurisasi DBT dapat dilakukan dalam dua jalur oleh bakteri aerobik, yang disebut
Kodama dan jalur 4S. Mekanisme degradasi DBT dan desulfurisasi melalui jalur Kodama dan 4S
ditunjukkan pada gambar 1 dan 2.

 Kodama Pathway (Pembelahan C-C oksidatif)

Jalur aerobik pertama yang dilaporkan dari biodesulfurisasi DBT adalah jalur Kodama
(McFarland et al., 1999; Gupta et al., 2005). Jalur ini, yang merupakan pembelahan C-C
oksidatif, melibatkan pembelahan cincin dari satu cincin aromatik dalam senyawa belerang
karena reaksi oksidasi awal. Seperti yang ditunjukkan dengan jelas pada gambar 1, jalur Kodama
dilakukan menjadi tiga langkah utama; i) hidroksilasi, ii) belahan cincin dan iii) hidrolisis.
Bahkan, jalur Kodama adalah cincin tidak lengkap yang merusak DBT tanpa menghilangkan
belerang. Pseudomonas jijani dan P. abikonesis dilaporkan oleh Kodama pada tahun 1970
(dikutip dalam Gupta et al., 2005) yang mampu mengikuti jalur Kodama untuk menurunkan
DBT.

Pembelahan cincin hidrokarbon dan perusakan adalah hasil dari biodesulfurisasi aerobik
melalui jalur Kodama. Selain itu, formil benzothiophene tetap setelah menyelesaikan
biodesulfurisasi melalui jalur ini, dan pelepasan khusus belerang tidak dilakukan pada akhir jalur
ini.

Bahkan, jalur Kodama tidak cukup dan mekanisme yang sesuai dari biodesulfurisasi karena
memproduksi senyawa sulfur yang larut dalam air, yang tidak dapat dibakar, pada akhir proses
ini (Mohebali et al., 2007). Oleh karena itu, karena menghasilkan senyawa belerang larut dalam
air ini dalam bahan bakar setelah biodesulfurisasi melalui jalur Kodama, nilai kalori dan unit
termal minyak bumi berkurang dan hasilnya tidak dapat diterima dan ekonomis.

 4S Pathway (Pembelahan C-S Oksidatif)

Pada tahun 1990, jalur 4S disarankan pertama oleh Kilbane, di mana mikroorganisme mampu
mengoksidasi atom sulfur di DBT tanpa ada kerusakan ikatan C-C (Bressler et al., 1998). Dalam
metode ini, atom sulfur dilepaskan dari DBT dan bagian hidrokarbon DBT dilindungi.

Jalur 4S adalah desulfurisasi DBT sulfur spesifik. Jalur ini disebut 4S karena melibatkan
empat senyawa sulfur menengah seperti yang ditunjukkan pada gambar 2. Jalur desulfurisasi ini
lebih besar dalam biodesulfurisasi dibandingkan dengan jalur Kodama karena pengaruh netral
dari jenis ini menghilangkan belerang pada struktur hidrokarbon dan nilai kalori. bahan bakar.

Jalur 4S adalah jalur desulfurisasi sulfur DBT spesifik yang mengandung oksidasi sulfur
DBT secara berurutan dengan memecah ikatan S-C yang mengarah ke 2-hidroksibifenil (2-HBP)
dan pembentukan sulfat dan meninggalkan kerangka hidrokarbon tidak berubah (Labana et al.,
2005). Jalur ini terlibat dalam empat langkah reaksi enzimatik. Enzim ini menyerang bagian
belerang DBT secara selektif dan melepaskan sulfur dari bagian hidrokarbon.

Reaksi lengkap desulfurisasi DBT melalui jalur 4S, dapat dibagi menjadi tiga tahap dari
sudut pandang reaksi kimia, yaitu: (i) aktivasi cincin tiofena untuk pembelahan yang disebabkan
oleh oksidasi bagian sulfur; (ii) formasi sulfinat aromatik karena pembelahan cincin tiofena; (iii)
penghapusan kelompok sulfinat. HBP dan sulfat adalah produk akhir dari jalur 4S desulfurisasi
DBT (McFarland, 1999; Gray et al., 2003).

Menurut gambar 2, untuk melakukan biodesulfurisasi melalui jalur 4S, dua monooxygenase
sitoplasma didukung oleh reduktase flavin dan desulfinase yang terlibat. Dua reaksi
monooksigenasi berurutan pertama yang mengarah pada konversi DBT menjadi DBT sulfoksida
(DBTO; dibenzothiophene 5-oksida) dan kemudian ke DBT sulfone (DBTO2; dibenzothiophene
5,5-dioksida) dikatalisis oleh mono-oksigenase, enzim DszC.

Setelah itu, reaksi monooxygenation ketiga yaitu transformasi DBT sulfone menjadi HBP
sulfinate (HBPS; 2- [2'-hydroxyphenyl benzene sulfinate]) dikatalisis oleh enzim DszA
monooxygenase. Pada tahap terakhir, enzim desulfinaze lain, yaitu DszB, mengkatalisis
melepaskan atom sulfur dari HBP sulfinat menghasilkan 2-HBP dan sulfat bebas. Dengan kata
lain, DszB yang merupakan hidrolase asam sulfinat aromatik, membentuk 2-HBP dengan
mempengaruhi serangan nukleofilik molekul air aktif-basa pada belerang sulfat.

Biodesulfurisasi Anaerob

Desulfurisasi anaerobik dapat dilakukan dengan adanya hidrogen atau gas nitrogen oleh
bakteri anaerob. Gas H2S dan produksi senyawa organik sulfur disertai dengan biodesulfurisasi
anaerobik (Kim et al., 1995). Zobell melaporkan biasesulfurisasi minyak anaerobik pertama pada
tahun 1953 dengan rekrutmen D.desulfuricans (Sohrabi, 2008). Salah satu keuntungan dari
biodesulfurisasi anaerobik adalah bahwa ia lebih kompatibel dengan metode desulfurisasi
tradisional seperti hidrodesulfurisasi (Sohrabi, 2008). Mengurangi setara membutuhkan untuk
terjadi desulfurisasi reduktif, reduktif C-S pembelahan, untuk mengurangi DBT ke biphenyl dan
H2S untuk melepaskan belerang dari DBT (Kim et al., 1995). Saat ini, tidak ada proses
biodesulfurisasi anaerobik yang signifikan dalam skala besar dan industri karena kelemahan dan
kesulitannya seperti biaya hidrogen yang dibutuhkan dan kesulitan dalam menyediakan dan
mempertahankan kondisi anaerobik (Gupta et al, 2005).

Desulfurizing Genes dan Enzymes terlibat dalam 4S Pathway


Nama pertama yang dirancang untuk gen desulfurisasi adalah sox (oksidasi sulfur).
Namun, karena gen-gen yang tidak terkait lainnya diberi label oleh sox, penunjukan dsz
(desulfurisasi) telah diterima secara umum untuk menghindari kebingungan (Gupta et al., 2005).
Empat dszA, B, C, D gen di R. erythropolis IGTS8 mengkodekan empat enzim yang
mengkatalisis pembentukan 2-HBP dari DBT dalam empat tahap. R. erythropolis IGTS8 mampu
memisahkan belerang dari DBT dan mengubahnya menjadi 2-HBP (Denome et al., 1993 dan
1994; Piddington et al., 1995). gen dszABCD kode DszA (monooxygenases), DszB
(desulfinase), DszC (monooxygenase), DszD (flavin reduktase) enzim untuk mengkatalisasi
desulfurisasi DBT selama jalur 4S. Reaksi enzimatik dari biodesulfurisasi DBT oleh R.
erythropolis IGTS8 digambarkan dalam gambar 2.

NADH dibutuhkan sebagai kofaktor dan pengaruhnya terhadap laju aktivitas


desulfurisasi strain R. erythropolis D-1 telah dilaporkan dan diselidiki oleh para peneliti (Izumi
et al., 1994; Ohshiro et al., 1994; Ohshiro dan Izumi, 1999) . Enzim DszD, yang dikodekan oleh
gen dszD (Xi et al., 1997; Gray et al., 1996), adalah enzim oksidoreduktase dan memiliki
NADH: FMN flavin oxidoreductase activity. Memang, kontribusi FMNH2 yang terlibat dalam
reaksi monooxygenase dijamin oleh enzim DszD (Caro, 2008).

Enzim DszD menyediakan NADH yang diperlukan, mengurangi FMN (FMNH2) untuk
enzim DszC dan DszA, dan meningkatkan laju dan efisiensi aktivitas desulfurisasi dengan
metode ini (Gray et al., 1996; Matsubara et al., 2001; Ohshiro et al., 1994 ). DszA dan DszC
tidak menggunakan NADH secara langsung tetapi menggunakan FMNH2 dari NADH: FMN
oxidoreductase (DszD). Oleh karena itu, DszD digabungkan dengan oksidasi NADH dan
oksigenasi substrat oleh DszA dan DszC.

Bakteri Desulfurisasi

Mikroorganisme mampu menurunkan dan menghilangkan senyawa sulfur dalam minyak


dan bahan bakar fosil yang menghasilkan peningkatan kualitas bahan bakar tanpa mengubah
nilai kalori dari mereka. Bakteri lebih terlihat di antara semua mikroorganisme karena
karakteristik unik mereka seperti ukuran dan kemampuan mereka dalam tumbuh di bawah
kondisi tertentu yang ada di hadapan bahan bakar fosil. Misalnya, banyak tangki minyak dan
kolam mengandung tingkat NaCl yang tinggi yang dapat ditoleransi oleh beberapa bakteri (Van
Hamme et al., 2003).

Berbagai macam strain bakteri yang mampu menghilangkan senyawa sulfur organik yang
ada dalam minyak bumi telah diisolasi (Mohebali dan Ball, 2008). Namun, laju aktivitas
desulfurisasi mereka tidak cukup untuk menggunakannya secara komersial dan untuk senyawa
sulfur yang berbeda (Yang dan Marison, 2005). Untuk meningkatkan aktivitas desulfurisasi dan
menggunakan kemampuan bakteri dalam skala besar, laju biodesulfurisasi harus ditingkatkan
sekitar 500 kali lipat dari bakteri yang digunakan saat ini (Kilbane, 2006).

Jalur pertama desulfurisasi yaitu jalur Kodama ditunjukkan oleh Monticello (1985) untuk
Psedomonas alcaligenes dan P.putida. Jalur Kodama belum dianggap sebagai jalur pemindahan
belerang karena menggunakannya dalam proses biodesulfurisasi karena efeknya pada nilai kalori
bahan bakar. Oleh karena itu, peneliti berusaha mengisolasi dan mengidentifikasi bakteri, yang
mampu menghilangkan senyawa belerang secara non-destruktif dan selektif.

Rhodococcus erythropolis IGTS8 strain diisolasi oleh Kilbane dalam teknologi institut
gas (Kilbane dan Jackowski 1992; Olson et al., 1993; Omori et al., 1992). Regangan aerobik ini
mampu melakukan desulfurisasi DBT melalui jalur 4S dan merupakan bakteri desulfurisasi
khusus sulfur pertama yang teridentifikasi dan teridentifikasi yang mampu membelah ikatan C-S
dalam DBT (Marcelis, 2002).

Beberapa bakteri telah disarankan untuk digunakan dalam proses biodesulfurisasi.


Namun, sebagian besar penelitian dan penelitian telah dilakukan pada masalah desulfurisasi
selektif senyawa sulfur organik oleh strain Rhodococcus terutama R. erythropolis IGTS8 dan
bakteri lain seperti Mycobacterium (Ishii et al., 2005). Persentase penghilangan senyawa
belerang yang dilakukan oleh strain ini dilaporkan sekitar 30-70%, 49-86% dan 24-33% untuk
distilat menengah, minyak solar yang diolah HDS dan minyak mentah, masing-masing (Ishii et
al., 2005) .

Kemampuan R. erythropolis strain IGTS8 dalam degradasi DBT tanpa mempengaruhi


dan menurunkan nilai kalor bahan bakar telah menyebabkan menggunakannya dalam industri
bioteknologi (Gray et al., 1996). Strain Rhodococcus IGTS8 di antara strain lain dari genus ini
mampu menggunakan berbagai macam senyawa sulfur, seperti tiofena, sulfida, disulfida,
merkaptan, sulfoksida dan sulfon (Kayser et al., 1993), sebagai sumber tunggal belerang.

Salah satu bakteri desulfurisasi terbaru yang diisolasi oleh Li et al. (2005) adalah
Mycobacterium goodii X7B. Kemampuan paling penting dari bakteri termofilik ini adalah
memperluas jalur 4S untuk menghasilkan 2-methoxybiphenyl (2-MBP) dari 2-hydroxybiphenyl
seperti yang ditunjukkan pada gambar 3. Dua bakteri lainnya yang mampu memperpanjang jalur
4S untuk menghasilkan sejumlah kecil 2-MBP adalah Microbacterium sp. ZD-M2 (Li et al.,
2005) dan Microbacterium sp. ZD-19 (Chen et al., 2009).

Karakteristik dari beberapa bakteri desulfurisasi DBT spesifik sulfur

Para peneliti telah menyelidiki pertumbuhan bakteri terisolasi pada konsentrasi DBT
yang berbeda dan senyawa sulfur lainnya. Misalnya Gou et al. (2002) melaporkan bahwa strain
Rhodococcus erythropolis LSSE8-1 tidak dapat tumbuh pada media kultur yang mengandung
lebih dari 10 mmol / l DBT. Selain itu, strain ini tidak dapat tumbuh dengan baik di media yang
mengandung kurang dari 0,01 mmol / l DBT. Dalam percobaan ini pertumbuhan terbaik terkait
dengan konsentrasi 1,00 mmol / l DBT diikuti oleh 0,5 mmol / l, 5 mmol / l, 0,1 mmol / l. Oleh
karena itu, konsentrasi tinggi DBT (lebih dari 10 mmol / l) efek pada strain ini dan menghasilkan
pencegahan biodesulfurisasi dan konsentrasi kurang dari 0,01 mmol / l dapat memberikan
persyaratan sulfur minimum untuk strain ini untuk melakukan desulfurisasi.

Strain Gordona CYKS1 ditandai oleh Rhee et al. (1998) dalam hal DBT dan desulfurisasi
senyawa sulfur organik lainnya. Dilaporkan bahwa di bawah 0,3 mM DBT strain ini memiliki
tingkat pertumbuhan maksimum pada 100 jam kultivasi. Selain itu, penurunan aktivitas
desulfurisasi dan pertumbuhan sebesar 23% terlihat karena penurunan pH 7,4-5,9. Selain itu,
95% DBT dikonversi menjadi 2-HBP oleh strain ini dan desulfurisasi DBT terus tepat di bawah
70 jam dan setelah itu meskipun pertumbuhan bakteri terus berlanjut, konsentrasi DBT tetap
konstan. Rhee et al. (1998) telah membuktikan tindakan menekan sulfat pada desulfurisasi DBT.
Dalam kasus menggunakan 2-HBP sebagai sumber karbon, ditemukan bahwa metabolit ini tidak
digunakan hingga konsentrasi 0,25 mM dan pada konsentrasi ini waktu generasi bakteri ini
meningkat sebesar 50%. Namun, bakteri ini dapat tumbuh dengan adanya 0,3 mM 2-HBP
dengan waktu generasi yang lebih lama.
Desulfurisasi khusus sulfur DBT lainnya dilakukan oleh Paenibacillus sp. regangan A11-
2 pada 50oC (Konishi et al., 1997). Pengaruh suhu pada desulfurisasi DBT dan tingkat
pertumbuhan oleh Paenibacillus diuji dalam kisaran 30 hingga 60oC dan hasilnya menunjukkan
bahwa pertumbuhan bakteri ini tergantung pada suhu dan mencapai pada puncaknya pada 58oC.
Selain itu, mereka menemukan bahwa tingkat pertumbuhan Paenibacillus yang terendah adalah
di 54oC dan mereka tidak mengamati pertumbuhan bakteri ini pada 63oC. Selain itu, mereka
mengamati bahwa peningkatan suhu kultur meningkatkan laju 2-HBP yang dihasilkan oleh
Paenibacillus dan aktivitas desulfurisasi yang paling spesifik terlihat pada 54oC.

Dalam percobaan lain, Furuya dkk. (2001) meneliti pengaruh suhu dalam kisaran 20
sampai 50oC pada Mycobacterium phlei WU-F1 untuk desulfurisasi DBT dan menemukan
bahwa sel istirahat dari strain ini memiliki aktivitas degradasi DBT paling banyak dan produksi
2-HBP pada 50oC dan 45oC masing-masing. Selain itu, bakteri ini dibandingkan dengan
Mesophilic Rhodococcus sp. IGTS8, Paenibacillus sp thermophilic sp. A11-2 dan Bacillus
subtilis WU-S2B menunjukkan aktivitas desulfurisasi tertinggi pada suhu 40 hingga 50oC.

Ohshiro dkk. (2005) membandingkan sifat-sifat enzim desulfurisasi yang dimurnikan dari
moderat thermopilic dan mesophilic B. subtilis WU-S2B, R. erythropolis D-1 dan KA2-5-1 dan
Paenibacillus sp. A11-2. Mereka melaporkan bahwa Paenibacillus memiliki stabilitas termal dan
suhu optimum tertinggi. Selain itu, termofil moderat memiliki stabilitas termal yang lebih tinggi
dan suhu optimum dibandingkan dengan yang ada di Rhodococcus erythropolis.

Pantoea agglomerans D23W3 menunjukkan kemampuan DBT desulfurizing melalui jalur


4S dalam Bhatia dan Sharma (2010) percobaan. Strain ini dapat menghilangkan hampir 93%
DBT pada konsentrasi awal 0,54 mM setelah 24 jam dan degradasi lengkap DBT diamati setelah
96 jam. Karakteristik yang menarik dari strain ini adalah bahwa akumulasi 2-HBP diamati
setelah 120 jam kultivasi dan itu dapat menjadi keuntungan dari bakteri ini yang membuatnya
berharga dibandingkan dengan bakteri desulfurisasi lain yang menghasilkan 2-HBP setelah 48
jam budidaya. Oleh karena itu, karakteristik ini menyebabkan penundaan peran penghambatan 2-
HBP pada degradasi DBT. Strain ini juga mampu menghilangkan beberapa sulfur organik
lainnya seperti 4,6-DM-DBT dan BT sepenuhnya.
Bakteri lain yang telah diisolasi oleh Davoodi Dehghani dkk. (2010) adalah R.
Erythropolis SHT87 dan itu dibandingkan dengan R. Erythropolis IGTS8. Bakteri ini
melanjutkan pertumbuhannya sampai 120 jam di hadapan 0,25 mM DBT dan menunjukkan
kemampuan DBT desulfurizing melalui jalur 4S. Selain itu, produksi 2-HBP, sebagai metabolit
akhir jalur 4S, kurang dari konsumsi DBT. Berbagai senyawa sulfur yang dapat dimanfaatkan
oleh strain ini sebagai sumber sulfur mirip dengan yang dilaporkan untuk IGTS8 dan strain R.
Erythropolis lainnya.

Yu et al. (2006) membandingkan tingkat biodesulfurisasi dari Rhodococcus erythropolis


XP, Rhodococcus sp. saring SDUZAWQ dan Mycobacterium goodii X7B dan temukan laju
desulfurisasi (untuk sampel minyak mentah kontrol dianalisis) dari 100%, 64% dan 87% untuk
strain ini masing-masing.

Percobaan lain dilakukan oleh Li et al. (2007) yang menuntun untuk mengetahui bahwa
M. goodii X7B dapat tumbuh lebih baik dalam medium mengandung DBT pada konsentrasi
kurang dari 0,5 mM. Namun, hasil sel terkecil dari bakteri ini dicapai pada konsentrasi DBT 0,05
mM karena jumlah sumber belerang yang tidak memadai. Li et al. (2007) dapat mengamati hasil
tertinggi dari sel dengan membiakan bakteri ini pada konsentrasi DBT 0,2 mM dan mereka
memilih konsentrasi ini untuk percobaan masa depan mereka. Selain itu, dilaporkan bahwa
bakteri ini mampu menurunkan 90% dan 75% dari 0,5 dan 1 mM konsentrasi awal DBT dalam
48 jam masing-masing. M. goodii X7B tidak dapat tumbuh pada konsentrasi 5 mM DBT karena
efek toksisitas DBT pada pertumbuhan bakteri ini. Penelitian yang dilakukan untuk penyelidikan
efek konsentrasi 2-HBP pada desulfurisasi DBT dan pertumbuhan sel menunjukkan bahwa
aktivitas desulfurisasi dan laju pertumbuhan bakteri ini menurun dengan meningkatkan
konsentrasi 2-HBP. Selain itu, bakteri ini mampu mengurangi kandungan sulfur minyak mentah
sebesar 59% dari 3600 ppm menjadi 1478 ppm setelah tiga hari (Li et al. 2007).

Rhodococcus erythropolis XP diisolasi oleh Yu et al. (2006) dan ditumbuhkan pada DBT,
4-Methyl-DBT (4-M-DBT), 4,6-dimethyl-DBT (4,6-DM-DBT), benzonaphthothiophene (BNT),
dan 3-M-BT secara terpisah sebagai sumber tunggal belerang (konsentrasi masing-masing
senyawa model belerang adalah 0,5 mM) dan hasil berikut ini dicapai. Kehadiran gugus hidroksil
aromatik dibuktikan dengan uji Gibbs dan oleh karena itu bakteri ini mampu mengikuti jalur 4S
untuk desulfurisasi DBT. Dilaporkan bahwa bakteri ini mampu desulfurisasi DBT dan DBTs
alkil tersubtitusi dalam minyak solar hydrodesulfurized oleh pengurangan 94,5% dari total
sulfur. Selain itu, α-hydroxy-β-phenyl-naphthalene dan 2-hydroxybiphenyl (2-HBP) dideteksi
sebagai produk akhir metabolisme BNT dan DBT, masing-masing. 2-hydroxy-3¹-methyl-
biphenyl dan 2-hydroxy-3-methyl-biphenyl terdeteksi sebagai metabolit 4-M-DBT. Produk akhir
dari metabolisme 3-M-BT terdeteksi sebagai sulfon 3-M-BT dan 2-isopropenylphenol dan dalam
kasus metabolisme 4,6-DMDBT 2-hidroksi-3, 3-dimethyl-biphenyl ditemukan sebagai metabolit
akhir .

Karakteristik dari beberapa senyawa sulfur organik desulfurizing bakteri

Gou et al. (2002) meneliti Rhodococcus erythropolis LSSE8-1biodesulfurization 0,2


mmol / l thianaphthene dan phenyl sulphide. Hasilnya menunjukkan bahwa strain mampu
menghilangkan 100% dan 80% sulfur dari fenil sulfida dan thianaphthene, masing-masing.
Selain itu, 5 mmol / l 4,6-DMDBT digunakan sebagai alkil dibenzothiophenes untuk
mempelajari desulfurisasi oleh strain LSSE8-1. Itu menunjukkan bahwa strain ini mampu
menghilangkan sulfur dari senyawa ini dan menurunkan konsentrasi 4,6-DMDBT dengan 0,3
mmol / l setelah 4 hari.

Ishii dkk. (2005) menunjukkan bahwa Mycobacterium phlei WU-0103 mampu


mendegradasi berbagai senyawa sulfur heterosiklik seperti naphto [2,1-b] thiophene (NTH),
benzo [b] thiophene (BTH) dan dibenzothiophene (DBT) derivatif. yang ada dalam minyak
diesel. Pada percobaan ini, bakteri ini tumbuh pada 50oC dan di hadapan 0,54 mM konsentrasi
NTH, DBT dan BTH sebagai sumber belerang secara terpisah. Bakteri ini dapat menghilangkan
NTH yang merupakan struktur asimetris DBT setelah 5 hari sepenuhnya pada 50oC. Dalam
penelitian itu, Ishii dkk. (2005) dapat mendeteksi 2¹-hydroxynaphthylethene (HNE) dan naphto
(2,1-b) furan (NFU), senyawa bebas sulfur, sebagai produk akhir dari degradasi sulfur sulfur
NTH dan NTH. Selain itu, 2-HBP (2-hydroxybiphenyl) terdeteksi sebagai metabolit DBT.
Selanjutnya, BTH sulfon dan benzofuran terdeteksi sebagai metabolit BTH. Dengan demikian,
bakteri ini dapat desulfurisasi NTH ke NFU melalui sulfon NTH atau dapat dilakukan melalui
jalur khusus sulfur oleh produksi akhir HNE.

Juga dilaporkan bahwa Mycobacterium phlei WU-0103 mampu menurunkan NTH dalam
kisaran suhu yang berbeda antara 30 dan 50oC dengan suhu optimal 45oC. Aspek lain yang baik
dari penelitian itu adalah penyelidikan degradasi DBT, BTH dan turunan NTH oleh sel-sel
tumbuh M.phlei WU-0103. Bakteri ini dikultur dalam medium yang mengandung 0,54 mM dari
masing-masing senyawa sulfur heterosiklik sebagai sumber belerang dan itu memungkinkan
tumbuh selama 4 hari di 45oC. Dalam kasus degradasi derivatif DBT, senyawa yang paling dapat
desulfurized adalah DBT sulfone dengan 90% degradasi (tingkat degradasi paling) diikuti oleh
DBT sulfoxide oleh degradasi 88%.

Selain itu, persentase degradasi paling sedikit adalah untuk menghilangkan hanya 8,9%
dari 4,6-Dipentil DBT sulfon. Ishii dkk. (2005) juga melaporkan bahwa strain M.phlei WU-0103
dibandingkan dengan dua strain Rhodococcus sp.WU-K2R dan M.phlei WU-F1 memiliki
aktivitas yang lebih tinggi dalam hal biodesulfurization NTH.

Mycobacterium phlei GTIS10 diisolasi dan dikarakterisasi dengan baik oleh Kayser et al.
(2002). Bakteri ini mampu tumbuh di hadapan DBT sebagai sumber tunggal belerang pada suhu
yang berbeda pada 45 - 65oC. Selain itu, aktivitas paling desulfurisasi bakteri ini diamati pada
45-52oC untuk mengubah DBT menjadi 2-HBP dengan mempertimbangkan fakta bahwa
aktivitas desulfurizing R. erythropolis IGTS8 adalah pada 30oC. Ia juga mengamati bahwa
bakteri ini mampu memanfaatkan berbagai senyawa sulfur organik sebagai sumber tunggal
belerang pada suhu tinggi yang membuat bakteri ini berharga dalam proses biorefineries.

Rhodococcus sp. Strain WU-K2R, yang diisolasi oleh Kirimura et al. (2002), mampu
menurunkan 0,27 mM NTH selama seminggu. Selain itu, bakteri ini tidak menggunakan NTH
dan BFU sebagai sumber karbon. Pengalaman tumbuh strain ini pada beberapa senyawa belerang
sebagai sumber tunggal belerang menunjukkan bahwa Rhodococcus sp. strain WU-K2R tidak
dapat menggunakan DBT, DBTO2, atau 4,6-dimethyl-DBT sebagai sumber tunggal belerang.
Aktivitas desulfurisasi dari Rhodococcus sp. strain WU-K2R jauh lebih tinggi daripada aktivitas
desulfurisasi M. phlei WU-F1 karena laju degradasi desulfurisasi 0,27 mM NTH adalah 80% dan
39% setelah 5 hari oleh Rhodococcus sp. strain WU-K2R dan M. phlei WU-F1, masing-masing.

Li et al. (2005) menguji pertumbuhan Mycobacterium goodii X7B pada senyawa organik
sulfur yang berbeda. Degradasi 0,5 mM sulfur organik yang berbeda seperti dimetil sulfoksida,
4,6-dimetil-DBT, DBT sulfon, DBT, BTH, 5-metil-BTH, 2-tiopheneacetic acid, 2-thiophene
carboxylic acid, 4-Methyl- DBT propilmercaptan dan 3,3¹-thiodipropionic acid oleh strain ini
pada 45oC menunjukkan hasil berikut.

Untuk senyawa sulfur kedelapan pertama, strain ini dapat menggunakannya sebagai
sumber sulfur dan tumbuh setelah 24 jam dan tumbuh baik pada senyawa belerang kesembilan
setelah 48 jam. Untuk senyawa belerang terakhir, X7B dapat menggunakannya sebagai sumber
tunggal belerang dan tumbuh dengan baik setelah 72 jam inkubasi. Selain itu, Li et al. (2005)
menyetujui degradasi senyawa ini oleh strain ini.

Kitauchi et al. (2005) membuktikan bahwa strain Pseudomonas stutzeri, Rhizobium sp.,
Shingomo-nas sp., Dan Xanthobacter polyaromaticivorans strain 127W mampu menurunkan 50
mg / l DBT sepenuhnya dengan melalui jalur Kodama dalam tiga hari di bawah kondisi aerobik
setelah 3 hari.

Dalam percobaan lain yang dilakukan oleh DS et al. (2009) degradasi DBT dan BT oleh
Desulfobacterium anilin diukur. Itu menunjukkan bahwa bakteri ini mampu menghilangkan 82%
dan 81% dari DBT dan BT senyawa diesel ini setelah tiga hari (diesel yang diperiksa
mengandung 9,006 mg / L benzothiophene dan 157,031 mg / L dari dibenzothiophene).

KESIMPULAN

Banyak penelitian (Mohebali dan Ball, 2008; Ohshiro dkk., 2005; Borgne dan Quintero,
2003; Matsui et al., 2001; Monticello, 1998; Bell et al., 1998) telah dilakukan untuk
meningkatkan efisiensi biodesulfurisasi. Campuran mikroorganisme mungkin diperlukan untuk
menjalankan biodesulfurisasi dalam skala besar dan tujuan komersial (Marcelis, 2002).
Mengenai masalah ini, para peneliti berusaha mengidentifikasi dan mengisolasi gen, yang
terlibat dalam jalur desulfurisasi, diikuti dengan kloning mereka untuk meningkatkan potensi
biologis mereka untuk menghilangkan senyawa belerang. Metabolisme dan strategi rekayasa
genetika bertujuan untuk mengambil keuntungan dari sifat strain yang diinginkan tanpa aktivitas
desulfurisasi. Bahkan, mereka direkrut untuk menghasilkan biokatalis desulfurisasi yang dibuat
dalam bakteri terisolasi dengan kegiatan desulfurisasi efisiensi rendah karena sifat mereka.
Dengan cara ini, efisiensi desulfurisasi enzim yang diisolasi dapat ditingkatkan dengan
mengkloning gen mereka dalam strain inang yang sesuai lainnya.

Di sisi lain, efek dari sifat strain host seperti sifat fisik, sifat pertumbuhan, atau tingkat
metabolisme dasar yang lebih tinggi pada ekspresi gen desulfurisasi yang diperkenalkan dari
bakteri terisolasi tidak sepenuhnya diketahui dan lebih banyak penelitian harus dilakukan untuk
menyelidiki mereka. Oleh karena itu, memahami faktor dan sifat yang dapat efektif pada laju
jalur biodesulfurisasi dan meningkatkan tingkat ekspresi gen enzim desulfurisasi dapat dicapai
dengan isolasi dan identifikasi strain bakteri baru dan identifikasi biokatalis mereka (Kilbane,
2006).

Meningkatkan jumlah salinan gen desulfurisasi, manipulasi gen desulfurisasi untuk


meningkatkan produk dengan lebih banyak aktivitas dan efisiensi dan meningkatkan laju dan
jumlah ekspresi gen dapat membantu peneliti untuk meningkatkan efisiensi biodesulfurisasi
(Hirasawa et al., 2001; Matsui et al., 2001a; Kertesz dan Wietek 2001; Li et al., 1996). Oleh
karena itu, faktor kunci untuk meningkatkan efisiensi biodesulfurisasi adalah meningkatkan
kegiatan desulfurisasi spesifik, desulfurisasi pada kondisi yang sangat keras seperti tekanan dan
suhu tinggi dan isolasi strain bakteri baru dengan aktivitas desulfurisasi yang nyata untuk
menghilangkan berbagai macam senyawa belerang yang ada dalam fosil. bahan bakar.