Pas

UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE CIENCIAS MÉDICAS
CARRERA DE LABORATORIO CLÍNICO E HISTOTECNOLÓGICO
"Frecuencia de las tinciones histoquímicas de PAS, Grocott y Ziehl-

Neelsen utilizadas para la identificación de microorganismos,
realizadas en el Servicio de Anatomía Patológica del Hospital de
Especialidades Eugenio Espejo en el año 2015"
Trabajo de Titulación presentado previo a la obtención del Título de licenciado en

Laboratorio Clínico e Histotecnológico
Mestanza Hurtado Ricardo Gabriel
TUTORA: MSc. Yolanda del Rocío Paredes Jiménez
Quito, Octubre 2016

DEDICATORIA
Dedico con mucho amor a mis padres por el esfuerzo que

hicieron y que significó que ahora logre esta meta, que será una
de muchas en mi vida. A mi amada esposa por todo el tiempo
sacrificado y su paciencia que contribuyó en la realización de
este trabajo.
ii
AGRADECIMIENTO
Mi agradecimiento infinito por todo lo conseguido a Dios, por las

bendiciones de cada día, que es el motivo para seguir adelante
con mis sueños.
Agradezco de manera especial a mi madre que fue la persona que

ha estado con su apoyo y consejos constantemente.
Un agradecimiento sincero al personal del servicio de Anatomía

Patológica del Hospital Eugenio Espejo en especial al Lic.
Franklin Aponte por su ayuda y total apertura en todo lo que
necesitaba.
iii
AUTORIZACIÓN DE LA AUTORÍA INTELECTUAL
Yo, Ricardo Gabriel Mestanza Hurtado en calidad de autor del Proyecto de

Investigación realizado sobre “Utilización de las tinciones histoquímicas de PAS,
Grocott y Ziehl-Neelsen para la identificación de microorganismos, realizadas en el
Servicio de Anatomía Patológica del Hospital de Especialidades Eugenio Espejo en
el año 2015”, por la presente autorizo a la UNIVERSIDAD CENTRAL DEL
ECUADOR, hacer uso de todos los contenidos que me pertenecen o de parte de los
que contienen esta obra, con fines estrictamente académicos o de investigación.
Los derechos que como autor me corresponden, con excepción de la presente

autorización, seguirán vigentes a mi favor, de conformidad con lo establecido en los
artículos 5, 6, 8; 19 y demás pertinentes de la Ley de Propiedad Intelectual y su
Reglamento.
Quito, 28 de Julio del 2016
Ricardo Gabriel Mestanza

CI: 050367710-6
E-mail: ricardomest_1@hotmail.com
iv
APROBACIÓN DEL TUTOR/A DEL TRABAJO DE TITULACIÓN
En mi calidad de Tutora del Trabajo de Titulación, presentado por RICARDO

GABRIEL MESTANZA HURTADO, para optar por el Grado de Licenciado en
Laboratorio Clínico e Histotecnológico; cuyo título es: "FRECUENCIA DE LAS
TINCIONES HISTOQUÍMICAS DE PAS, GROCOTT Y ZIEHL-NEELSEN
UTILIZADAS PARA LA IDENTIFICACIÓN DE MICROORGANISMOS,
REALIZADAS EN EL SERVICIO DE ANATOMÍA PATOLÓGICA DEL HOSPITAL
DE ESPECIALIDADES EUGENIO ESPEJO EN EL AÑO 2015", considero que
dicho trabajo reúne los requisitos y méritos suficientes para ser sometido a la
presentación pública y evaluación por parte del tribunal examinador que se designe.
En la ciudad de Quito, a los 29 días del mes de Julio de 2016.
MSc. Yolanda del Rocío Paredes Jiménez

DOCENTE-TUTORA
C.C. 1705148003
v
APROBACIÓN DEL TRIBUNAL
Los miembros del Tribunal Examinador aprueban el informe de titulación

"FRECUENCIA DE LAS TINCIONES HISTOQUÍMICAS DE PAS, GROCOTT Y
ZIEHL-NEELSEN UTILIZADAS PARA LA IDENTIFICACIÓN DE
MICROORGANISMOS, REALIZADAS EN EL SERVICIO DE ANATOMÍA
PATOLÓGICA DEL HOSPITAL DE ESPECIALIDADES EUGENIO ESPEJO EN
EL AÑO 2015", presentado por: RICARDO GABRIEL MESTANZA HURTADO.
Para constancia certifican,
MSc. Bernardita Ulloa MSc. Lucrecia Pabón

_____________________________ _____________________________
PRESIDENTE VOCAL
MSc. Carmen Salvador

________________________________
VOCAL
vi
ÍNDICE DE CONTENIDO:
DEDICATORIA ....................................................................................................... II
AGRADECIMIENTO .............................................................................................. III
AUTORIZACIÓN DE LA AUTORÍA INTELECTUAL ............................................. IV
APROBACIÓN DEL TUTOR/A DEL TRABAJO DE TITULACIÓN ........................ V
APROBACIÓN DEL TRIBUNAL ........................................................................... VI
ÍNDICE DE IMÁGENES .......................................................................................... X
ÍNDICE DE TABLAS .............................................................................................. XI
ÍNDICE DE GRÁFICOS ....................................................................................... XIII
ÍNDICE DE ANEXOS ........................................................................................... XV
RESUMEN .......................................................................................................... XVI
ABSTRACT........................................................................................................ XVII
INTRODUCCIÓN .................................................................................................... 1
CAPITULO I ............................................................................................................ 3
EL PROBLEMA ...................................................................................................... 3
1.1 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA............................................................. 3
1.2 OBJETIVOS ................................................................................................... 4
1.2.1 OBJETIVO GENERAL ............................................................................. 4
1.2.2 OBJETIVOS ESPECIFICOS .................................................................... 4
1.3 JUSTIFICACIÓN ............................................................................................ 5
CAPITULO II ........................................................................................................... 6
MARCO TEÓRICO ................................................................................................. 6
2.1 TINCIONES HISTOQUÍMICAS ...................................................................... 6
2.2 TINCIÓN DE PAS (ÁCIDO PERYÓDICO DE SCHIFF) ................................... 7
2.2.1 FUNDAMENTO DE LA TINCIÓN PAS .................................................... 8
2.2.2 REACTIVOS UTILIZADOS EN LA TINCIÓN PAS ................................... 9
2.2.3 TÉCNICA DE LA TINCIÓN PAS .............................................................. 9
2.2.4 RESULTADOS DE LA TINCIÓN PAS ................................................... 10
2.3 TINCIÓN DE GROCOTT (PLATA-METENAMINA)....................................... 11
vii
2.3.1 FUNDAMENTO DE LA TINCIÓN GROCOTT ........................................ 12
2.3.2 REACTIVOS UTILIZADOS EN LA TINCIÓN GROCOTT ...................... 13
2.3.3 TÉCNICA DE LA TINCIÓN GROCOTT ................................................. 13
2.3.4 RESULTADOS DE LA TINCIÓN GROCOTT ......................................... 14
2.4 TINCIÓN DE ZIEHL-NEELSEN (BAAR) ....................................................... 15
2.4.1 FUNDAMENTO DE LA TINCIÓN ZIEHL-NEELSEN.............................. 16
2.4.2 REACTIVOS UTILIZADOS EN LA TINCIÓN ZIEHL-NEELSEN ............ 17
2.4.3 TÉCNICA DE LA TINCIÓN ZIEHL-NEELSEN ....................................... 17
2.4.4 RESULTADOS DE LA TINCIÓN ZIEHL-NEELSEN............................... 18
2.5 MICROORGANISMOS EN LAS SECCIONES DE TEJIDOS ........................ 20
2.6 MICROORGANISMOS MICÓTICOS............................................................ 20
2.6.1 Histoplasma ........................................................................................... 22
2.6.2 Cándida Albicans ................................................................................... 23
2.6.3 Cryptococcus ......................................................................................... 23
2.6.4 Aspergillus ............................................................................................. 24
2.7 MICROORGANISMOS BACTERIANOS ...................................................... 24
2.7.1 Actinomyces .......................................................................................... 24
2.8 MICROORGANISMOS PARASITARIOS ..................................................... 25
2.8.1 Amebas .................................................................................................. 25
2.8.2 Leishmania ............................................................................................ 26
2.9 MICROORGANISMOS BACTERIAS ALCOHOL-ÁCIDO RESISTENTES
(BAAR) ............................................................................................................... 26
CAPITULO III ........................................................................................................ 27
METODOLOGÍA ................................................................................................... 27
3.1 TIPO DE ESTUDIO ...................................................................................... 27
3.2 POBLACIÓN ................................................................................................ 27
3.3 TÉCNICAS E INSTRUMENTOS DE INVESTIGACIÓN ................................ 27
3.4 CONSIDERACIONES ÉTICAS..................................................................... 27
CAPÍTULO IV........................................................................................................ 28
RESULTADOS ...................................................................................................... 28
viii
4.1 PRESENTACIÓN ......................................................................................... 28
4.2 CONCLUSIONES......................................................................................... 42
4.3 RECOMENDACIONES ................................................................................ 43
CAPITULO V......................................................................................................... 44
PROPUESTA ........................................................................................................ 44
5.1 DESCRIPCIÓN ............................................................................................ 44
5.2 JUSTIFICACIÓN .......................................................................................... 44
5.3 BENEFICIARIOS.......................................................................................... 45
5.4 TRIPTICO DE DIFUSIÓN ............................................................................. 45
BIBLIOGRAFÍA .................................................................................................... 47
ANEXOS ............................................................................................................... 51
ix
ÍNDICE DE IMÁGENES
IMAGEN 1. TINCIÓN PAS. ASPERGILLUS ......................................................... 10

IMAGEN 2. TINCIÓN PAS DE GLÁNDULA SALIVAL .......................................... 11
IMAGEN 3. HONGOS FILAMENTOSOS DE TAMAÑOS VARIABLES Y
SEPARADOS (TINCIÓN DE GROCOTT)....................................................... 15
IMAGEN 4. TINCIÓN DE ZIEHL-NEELSEN. MYCOBACTERIUM
TUBERCULOSIS. ........................................................................................... 19
IMAGEN 5. TINCIÓN DE ZIEHL-NEELSEN. LEPRA LEPROMATOSA .............. 19
x
ÍNDICE DE TABLAS
TABLA 1. DISTRIBUCIÓN DE LAS TINCIONES HISTOQUÍMICAS REALIZADAS

DURANTE EL PERÍODO 2015 EN EL SERVICIO ANATOMÍA PATOLÓGICA
DEL HOSPITAL DE ESPECIALIDADES EUGENIO ESPEJO ........................ 28
TABLA 2. DISTRIBUCIÓN DE LOS CASOS POR LA EDAD DE LOS PACIENTES
DEL SERVICIO DE ANATOMÍA PATOLÓGICA DEL HOSPITAL DE
ESPECIALIDADES EUGENIO ESPEJO EN EL PERÍODO 2015................... 29
TABLA 3. DISTRIBUCIÓN DE LOS CASOS POR SEXO DE LOS PACIENTES
TABLA 4. FRECUENCIA DE CASOS POSITIVOS PARA MICROORGANISMOS
EN EL SERVICIO DE ANATOMÍA PATOLÓGICA DEL HOSPITAL DE
TABLA 5. TINCIONES POSITIVAS PARA MICROORGANISMOS EN EL
SERVICIO DE ANATOMÍA PATOLÓGICA DEL HOSPITAL DE
TABLA 6. TINCIONES DE PAS, GROCOTT Y ZIEHL-NEELSEN POSITIVAS EN
EL SERVICIO DE ANATOMÍA PATOLÓGICA DEL HOSPITAL DE
TABLA 7. TINCIONES POSITIVAS DE PAS, GROCOTT Y ZIEHL-NEELSEN EN
RELACIÓN AL TOTAL DE CADA UNA DE ESTAS TINCIONES REALIZADAS
TABLA 8. DISTRIBUCIÓN DE LAS TINCIONES POSITIVAS PARA PAS DE
ACUERDO A LOS MICROORGANISMOS DIAGNOSTICADOS EN EL
TABLA 9. DISTRIBUCIÓN DE LOS TIPOS DE TEJIDOS EN LOS QUE SE
REALIZÓ LAS TINCIONES HISTOQUÍMICAS EN EL SERVICIO DE
ANATOMÍA PATOLÓGICA DEL HOSPITAL DE ESPECIALIDADES EUGENIO
ESPEJO EN EL PERÍODO 2015 .................................................................... 36
TABLA 10. DISTRIBUCIÓN DE LOS TIPOS DE TEJIDOS POR TINCIONES
HISTOQUÍMICAS DE PAS, GROCOTT Y ZIEHL-NEELSEN REALIZADAS EN
xi
TABLA 11. DISTRIBUCIÓN DE LOS TEJIDOS EN LOS QUE SE IDENTIFICÓ LA
PRESENCIA DE MICROORGANISMOS EN EL SERVICIO DE ANATOMÍA
PATOLÓGICA DEL HOSPITAL DE ESPECIALIDADES EUGENIO ESPEJO
EN EL PERÍODO 2015 ................................................................................... 38
TABLA 12. DISTRIBUCIÓN DE LOS MICROORGANISMOS IDENTIFICADOS
CON LAS TINCIONES DE PAS, GROCOTT Y ZIEHL-NEELSEN EN EL
TABLA 13. DISTRIBUCIÓN DE LOS MICROORGANISMOS MICÓTICOS
HALLADOS CON LAS TINCIONES HISTOQUÍMICAS EN EL SERVICIO DE
TABLA 14. IDENTIFICACIÓN DE LOS MICROORGANISMOS MICÓTICOS POR
TINCIÓN DE PAS Y GROCOTT EN EL SERVICIO DE ANATOMÍA
EN EL PERÍODO 2015 ................................................................................... 41
xii
ÍNDICE DE GRÁFICOS
GRÁFICO 1. DISTRIBUCIÓN DE LAS TINCIONES HISTOQUÍMICAS

REALIZADAS DURANTE EL PERÍODO 2015 EN EL SERVICIO ANATOMÍA
PATOLÓGICA DEL HOSPITAL DE ESPECIALIDADES EUGENIO ESPEJO 28
GRÁFICO 2. DISTRIBUCIÓN DE LOS CASOS POR LA EDAD DE LOS
PACIENTES DEL SERVICIO DE ANATOMÍA PATOLÓGICA DEL HOSPITAL
DE ESPECIALIDADES EUGENIO ESPEJO EN EL PERÍODO 2015 ............. 29
GRÁFICO 3. DISTRIBUCIÓN DE LOS CASOS POR SEXO DE LOS PACIENTES
GRÁFICO 4. FRECUENCIA DE CASOS POSITIVOS PARA
MICROORGANISMOS EN EL SERVICIO DE ANATOMÍA PATOLÓGICA DEL
HOSPITAL DE ESPECIALIDADES EUGENIO ESPEJO EN EL PERÍODO
2015 ................................................................................................................ 31
GRÁFICO 5. TINCIONES POSITIVAS PARA MICROORGANISMOS EN EL
GRÁFICO 6. TINCIONES DE PAS, GROCOTT Y ZIEHL-NEELSEN POSITIVAS
GRÁFICO 7. TINCIONES POSITIVAS DE PAS, GROCOTT Y ZIEHL-NEELSEN
EN RELACIÓN AL TOTAL DE CADA UNA DE ESTAS TINCIONES
REALIZADAS EN EL SERVICIO DE ANATOMÍA PATOLÓGICA DEL
HOSPITAL DE ESPECIALIDADES EUGENIO ESPEJO EN EL PERÍODO
2015 ................................................................................................................ 34
GRÁFICO 8. DISTRIBUCIÓN DE LAS TINCIONES POSITIVAS PARA PAS DE
ACUERDO A LOS MICROORGANISMOS DIAGNOSTICADOS EN EL
GRÁFICO 9. DISTRIBUCIÓN DE LOS TIPOS DE TEJIDOS EN LOS QUE SE
REALIZÓ LAS TINCIONES HISTOQUÍMICAS EN EL SERVICIO DE
GRÁFICO 10. DISTRIBUCIÓN DE LOS TIPOS DE TEJIDOS POR TINCIONES
HISTOQUÍMICAS DE PAS, GROCOTT Y ZIEHL-NEELSEN REALIZADAS EN
xiii
GRÁFICO 11. DISTRIBUCIÓN DE LOS TEJIDOS EN LOS QUE SE IDENTIFICÓ
LA PRESENCIA DE MICROORGANISMOS EN EL SERVICIO DE ANATOMÍA
EN EL PERÍODO 2015 ................................................................................... 38
GRÁFICO 12. DISTRIBUCIÓN DE LOS MICROORGANISMOS IDENTIFICADOS
CON LAS TINCIONES DE PAS, GROCOTT Y ZIEHL-NEELSEN EN EL
GRÁFICO 13. DISTRIBUCIÓN DE LOS MICROORGANISMOS MICÓTICOS
HALLADOS CON LAS TINCIONES HISTOQUÍMICAS EN EL SERVICIO DE
GRÁFICO 14. IDENTIFICACIÓN DE LOS MICROORGANISMOS MICÓTICOS
POR TINCIÓN DE PAS Y GROCOTT EN EL SERVICIO DE ANATOMÍA
EN EL PERÍODO 2015 ................................................................................... 41
xiv
ÍNDICE DE ANEXOS
ANEXO 1. HOJA DE RECOLECCIÓN DE DATOS............................................... 51

ANEXO 2. HOJA DE PEDIDO DE TINCIONES HISTOQUÍMICAS ...................... 52
ANEXO 3. LIBRO DE TÉCNICAS DE TINCIONES HISTOQUÍMICAS ................. 52
ANEXO 4. PLACAS COLOREADAS CON LAS TINCIONES HISTOQUÍMICAS
PAS, GROCOTT Y ZIEHL-NEELSEN ............................................................ 53
ANEXO 5. CRONOGRAMA DEL PROYECTO ..................................................... 54
xv
TEMA: "Frecuencia de las tinciones histoquímicas de PAS, Grocott y Ziehl-Neelsen
utilizadas para la identificación de microorganismos, realizados en el Servicio de
Anatomía Patológica del Hospital de Especialidades Eugenio espejo en el año
2015"
Autor: Ricardo Gabriel Mestanza Hurtado
Tutora Académica: MSc. Yolanda Paredes
RESUMEN
Este estudio descriptivo transversal permitió determinar la frecuencia de las

tinciones histoquímicas de PAS, Grocott y Ziehl-Neelsen utilizadas para identificar
microorganismos, realizados en el Servicio de Anatomía Patológica del Hospital de
Especialidades Eugenio Espejo en el año 2015 de un total de 556 tinciones
histoquímicas. En el desarrollo de este estudio se realiza los diferentes conceptos
orientados hacia las tinciones histoquímicas, técnicas utilizadas y los
microorganismos identificados. La tinción PAS fue la más utilizada con un 36%
mientras que las tinciones de Ziehl-Neelsen y Grocott obtuvieron un 32%. De las
tinciones histoquímicas positivas para microorganismos se obtuvieron 52 que
equivalen al 9% de las cuales los hongos fueron los más identificados. Las tinciones
histoquímicas de este estudio muestran una frecuencia alta pero su positividad es
baja para microorganismos.
PALABRAS CLAVES: PAS / GROCOTT / ZIEHL-NEELSEN /

MICROORGANISMOS
xvi
TITLE: “Frequency of histochemical staining of PAS, Grocott and Ziehl-Neelsen
used for the identification of microorganisms, carried out in the Pathological Anatomy
Service at the Hospital de Especialidades Eugenio Espejo in 2015”
Author: Ricardo Gabriel Mestanza Hurtado
Academic Tutor: MSc. Yolanda Paredes
ABSTRACT
This cross-sectional descriptive study allowed determinig the frequency of

histochemical staining of PAS, Grocott, Ziehl-Neelsen used to identify
microorganisms, carried out in the of Pathological Anatomy Service at the Hospital
de Especialidades Eugenio Espejo in 2015 out of a total of 556 histochemical
staining. In the development of this study, there are different concepts toward
histochemical stains, techniques used and identified microorganisms. The PAS
staining was the most commonly use with a 36% while Ziehl-Neelsen and Grocott
stains obtained a 32%. For positive histochemical staining 52 amounting to 9% of
which fungi were those most identified obtained from microorganisms. This
Histochemical stains of this study show a high frequency but their positivity is low for
microorganisms.
KEYWORDS: PAS / GROCOTT / ZIEHL-NEELSEN / MICROORGANISM
xvii
INTRODUCCIÓN
Desde casi 100 años, los médicos patólogos han utilizado tinciones histoquímicas
llamadas también coloraciones especiales para apoyar en el diagnóstico
fundamentado en el estudio de los tejidos. Aunque la tinción de hematoxilina y
eosina (H&E) es una coloración muy conocida entre Histotecnólogos y Patólogos
para observar especímenes quirúrgicos, post mortem y biopsias, esta tinción tiene
algunos escasos inconvenientes en el diagnóstico, por tanto en estos casos, es
donde las tinciones especiales son útiles para el reconocimiento de estructuras
específicas, sustancias orgánicas o inorgánicas en las células o reacciones y
presencia de microorganismos en los tejidos.
La terminología "coloración especial" es empleada con más frecuencia en el ámbito

clínico, y sencillamente quiere decir cualquier técnica que no sea la H&E usada para
dar colores en una muestra de tejido (Pujar, Pereira, Tamgadge, Bhalerao, &
Tamgadge, 2015).
Se abarcan dentro de las coloraciones histoquímicas aquellas que impliquen

una reacción química en la que intervienen moléculas pertenecientes al propio
tejido. La finalidad de las técnicas histoquímicas es poner en evidencia una molécula
o familia de moléculas y estructuras biológicas que se muestran en una sección
histológica y poder analizar su distribución tisular "in situ". Estas estructuras y
moléculas son complicadas de distinguir con colorantes generales.
Durante el procesamiento del tejido previo a la reacción histoquímica, como la

fijación o la inclusión, hay que prevenir afectar a la estructura que queremos poner
de manifiesto porque de otra manera resultaría en falsos negativos, es decir, no
tener coloración cuando realmente la molécula de interés sí se encuentra en el
tejido, aunque dañada.
En ciertas ocasiones es imprescindible ejecutar pasos antes de la reacción

histoquímica para revelar la molécula que se quiere mostrar, por ejemplo utilizando
1
un fijador apropiado, porque de otro modo no reaccionaría con los reactivos
químicos (Megías, Molist, & Pombal, 2015).
Ya en la práctica se utiliza la palabra histoquímica para elegir el método que

convenga junto con la ayuda de los microscopios óptico y electrónico (Resino ,
2015).
Se ha tenido innumerables avances en la medicina moderna, el empleo de

medicamentos, y aún se puede decir que las infecciones todavía no pueden ser
erradicadas, al contrario, abundantes de estos agentes han cambiado al mismo
tiempo con los adelantos científico-técnicos (Walwyn Salas, y otros, 2004)
En éste trabajo se trata de describir la utilización de estas tinciones histoquímicas,

especialmente la frecuencia con que se utiliza las tinciones de PAS, Grocott y Ziehl-
Neelsen como apoyo en la identificación de microorganismos, y en qué casos se
solicitan éstas tinciones.
2
CAPITULO I
EL PROBLEMA
1.1 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
Uno de los procedimientos que son importantes dentro del Laboratorio de

Histopatología son las tinciones histoquímicas con las cuales se puede diferenciar
distintas estructuras del tejido, pudiendo observar lesiones específicas,
microorganismos o una presunta lesión.
Las tinciones “especiales” se utilizan principalmente para apoyar en el diagnóstico

de enfermedades infecciosas, y también pueden ser utilizadas en el diagnóstico
diferencial de otras patologías como un cáncer. Las tinciones histoquímicas se lo
utilizan con colorantes químicos específicos que identifican los microorganismos
presentes en los tejidos.
Estas técnicas de tinciones histoquímicas como son PAS, plata-metenamina

(Grocott), Ziehl-Neelsen entre otras, elevan la calidad de los diagnósticos
histopatológicos en biopsias, citología y autopsias en relación con infecciones
nosocomiales. Los resultados de estas tinciones posibilitan un diagnóstico
histológico específico del agente causal lo que permitirá una rápida aplicación de
conductas terapéuticas y preventivas al paciente (Walwyn Salas, y otros, 2004).
En algunos estudios realizados en México, la tinción PAS se utilizó en un 5% de los

casos histopatológicos a pesar de ser una de las técnicas más comúnmente
utilizada de las no rutinarias en la dermatopatología e histopatología, en la cual nos
ayuda a visualizar microorganismos como parásitos y hongos (Hajar Serviansky,
Kresch Tronik, Moreno Coutiño, Arenas, & Vega Memije, 2013).
Las tinciones de Grocott que son coloraciones argénticas porque utilizan como
colorante específico el nitrato de plata son utilizadas para la identificación de
3
hongos, y en vista de que la "patología fúngica" ha tenido un aumento en estos
últimos años sobre todo en inmunodeprimidos estas tinciones han sido mas
frecuentemente realizadas en los laboratorios de histopatología, según refieren los
estudios realizados en España (Mayayo Artal, 2004).
Por lo expuesto anteriormente la formulación del problema de este proyecto de

investigación es: ¿Con qué frecuencia se realizan las tinciones histoquímicas de
PAS, Grocott y Ziehl-Neelsen para la identificación de microorganismos en el
Servicio de Anatomía Patológica del Hospital de Especialidades Eugenio Espejo?
1.2 OBJETIVOS
1.2.1 OBJETIVO GENERAL
Determinar la frecuencia de las tinciones histoquímicas de PAS, Grocott y Ziehl-

Neelsen para la identificación de microorganismos en el Servicio de Anatomía
Patológica del Hospital de Especialidades Eugenio Espejo durante el período 2015.
1.2.2 OBJETIVOS ESPECIFICOS
 Distribuir los casos de tinciones histoquímicas por grupo de edades y sexo

de los pacientes.
 Establecer los casos de tinciones histoquímicas positivas para
microorganismos.
 Distribuir los casos de tinciones histoquímicas positivas de PAS, Grocott y
Ziehl-Neelsen.
 Describir los tipos de tejidos en los que fueron realizadas las tinciones
histoquímicas de PAS, Grocott y Ziehl-Neelsen.
 Identificar los microorganismos diagnosticados con las tinciones
histoquímicas de PAS, Grocott y Ziehl-Neelsen.
4
1.3 JUSTIFICACIÓN
Las técnicas de coloración histoquímica son de gran ayuda en el diagnóstico

histopatológico, y la realización de las mismas es una competencia del perfil
profesional del Licenciado en Laboratorio Clínico e Histotecnológico, el mismo que
tiene un papel preponderante en la aplicación de los protocolos de la técnica de las
coloraciones histoquímicas, así como en los procedimientos previos del manejo de
las muestras de tejido: como son la fijación, el procesamiento, el bloqueo, la
microtomía, la preparación de reactivos y colorantes, que influyen directamente en
la calidad de las placas que se entregan al médico patólogo para que emita el
diagnóstico
Ante la importancia que aún tiene la utilización de las coloraciones histoquímicas

este trabajo evidencia que el uso de las tinciones histoquímicas de PAS, Grocott y
Ziehl-Neelsen son las más utilizadas en el Servicio de Anatomía Patológica del
Hospital de Especialidades Eugenio Espejo durante el año 2015, además el uso de
estas tres tinciones demostró que si ayudaron al diagnóstico histopatológico, siendo
la tinción de PAS la que tuvo mayor frecuencia de utilización actualmente.
Los resultados obtenidos en este estudio pueden constituirse en las herramientas

necesarias para que se planteen otros trabajos de investigación que tengan un
mayor impacto en el sentido de que se generalice el uso de las coloraciones
histoquímicas para el diagnóstico e incluso se estandaricen los protocolos de las
técnicas de las tinciones histoquímicas en todos los laboratorios de Histopatología.
Información que puede y debe ser utilizada por el personal sanitario de otros
hospitales para la toma de decisiones en favor de la mejora del servicio que brindan
estas instituciones de salud en lo que respecta al diagnóstico histopatológico
partiendo de la realidad de nuestro país, en lo que respecta a la prevalencia de
tumores benignos y malignos que afectan a toda la población sin especificidad de
sexo, edad, condición socio económica, cultural, etc.
5
CAPITULO II
MARCO TEÓRICO
2.1 TINCIONES HISTOQUÍMICAS
La química de los colorantes y tinciones ayudó al progreso del campo científico que
son diversos, entre las cuales está la histología y la histopatología. El Histólogo y el
Histopatólogo manejan una variada serie de colorantes para conseguir imágenes
de la morfología de los tejidos biológicos, con ayuda del microscopio óptico. El
análisis microscópico de los elementos y reacciones químicas que distinguen a los
tejidos biológicos componen la histoquímica, y se apoya de la misma manera
utilizando colorantes que son específicos (Acuña Fernández & Elguero Bertolini,
2012).
Las tinciones histoquímicas se fundamentan en la unión de las moléculas de un

colorante a los tejidos. Estos procedimientos se los puede utilizar para
preparaciones en microscopía óptica o electrónica (Ross & Pawlina, 2012, pág. 3).
La histoquímica son técnicas de tinción histológicas que utilizamos a menudo para

identificar algunas substancias o ciertos agentes infecciosos. De tal forma que
podemos observar elementos o compuestos como hierro (Azul de Prusia),
lipofucsina (técnica de von Kossa), glucógeno (tinción PAS), etc. (de Ferraris
Gómez, 2009, pág. 18).
Las células de los tejidos no tienen color, por lo tanto deben teñirse para que sean
visibles al microscopio óptico (Stevens & Lowe, 2006, pág. 5). Partiendo de este
principio en el laboratorio de Histopatología se realizan varios tipos de tinciones
histológicas con el propósito de impregnar de un color a las estructuras del tejido
para observar innumerables componentes celulares, mismos que de acuerdo a las
características que presentan pueden ser valorados dentro de los patrones
6
histológicos normales o de los patrones histológicos con alteraciones benignas (no
cáncer) o alteraciones malignas (cáncer).
Las tinciones histológicas son de uso general como es el caso de la tinción

hematoxilina-eosina que es conocida también como la coloración de rutina que
puede comportarse como una tinción regresiva cuando se utiliza como colorante
nuclear, la hematoxilina de Harris o como una coloración progresiva cuando el
colorante nuclear es la hematoxilina de Mayer, esto debido a la capacidad de los
componentes químicos de cada colorante de interaccionar con las diversas
estructuras celulares que constituyen los tejidos. Y son de uso específico por su
mayor complejidad las tinciones histoquímicas, Inmunohistoquímica y las
Enzimohistoquímicas ya que emplean colorantes específicos, sustratos, enzimas,
anticuerpos marcados, etc. Estas tinciones en sus orígenes se hicieron en forma
empírica y con el paso del tiempo se fueron desarrollando en base al conocimiento
y a la experiencia científica, llegando a desarrollar incluso las técnicas de tinción
para el diagnóstico a través de la microscopía electrónica. Sin embargo el uso de
las técnicas de tinción histoquímica o tinciones especiales han prevalecido al pasar
del tiempo y se siguen utilizando al parecer por la capacidad que tienen de permitir
reconocer estructuras específicas coloreadas de un color determinado, como
ejemplo de estas tinciones, las más reconocidas son las tinciones de Orceína,
tinciones de Sudan, de Ácido Peryódico de Schiff, de Tricrómica de Masson; o las
tinciones para evidenciar microorganismos como la tinción de Gram, tinción de
Ziehl-Neelsen, tinción de Grocott o la tinción de tinta china (Cediel, y otros, 2009,
págs. 40-42).
2.2 TINCIÓN DE PAS (ÁCIDO PERYÓDICO DE SCHIFF)
La tinción ácido periódico de Schiff (PAS) es una de las técnicas de tinción especial
más comúnmente realizada en el laboratorio de histopatología que se utiliza para
poner de relieve las moléculas con alto porcentaje de contenido de carbohidratos
tales como mucina, glucógeno, microorganismos micóticos, parasitarios y para
delimitar la membrana basal en la piel y en otros tejidos (Giri D. , 2015).
7
Al contrario de otras técnicas, la tinción PAS también identifica mucinas neutras. La
reactividad del PAS no se fundamenta en la existencia de grupos ácidos entre los
polisacáridos, pero si en la estructura de las unidades de monosacáridos (Myers,
2016).
La técnica de tinción de PAS tiene muchas utilidades en lo que respecta a la

demostración de los distintos hidratos de carbono como se mencionó anteriormente,
pero también combinados con otros tipos de moléculas como proteínas que tienen
una coloración roja, y las mucinas del estómago también presentan una tinción muy
positiva para PAS de ahí que como control testigo positivo de la técnica de tinción
de PAS se utiliza un corte de tejido de estómago (Lowe & Anderson, 2015, pág. 6).
2.2.1 FUNDAMENTO DE LA TINCIÓN PAS
La reacción de la técnica de PAS se basa en la demostración de monosacáridos y

glucógeno. La primera reacción en la tinción implica la acción del ácido peryódico
como agente oxidante para oxidar los enlaces carbono-carbono entre dos grupos
hidroxilo adyacente. Se liberan grupos aldehído que se detectan por el reactivo de
Schiff (Parry N. , 2012).
En la segunda reacción, la sección de tejido reacciona con el reactivo de Schiff. Éste

comprende una mezcla de fucsina básica, ácido clorhídrico, y meta-bisulfito de sodio
dando como resultado un ácido inestable que es incoloro, y en la presencia de los
aldehídos adquiere un color purpura (García Espinoza, Campal Rubio, & Crespo
González, 2015, pág. 190).
La intensidad del color es proporcional a la concentración de grupos hidroxilo

originalmente presentes en las unidades de monosacárido (Parry N. , 2012).
A continuación la Hematoxilina se utiliza típicamente como una tinción de contraste

para visualizar otros elementos en el tejido. En ésta tinción se demuestra
compuestos como los mucopolisacáridos y glucógeno para delimitar las membranas
8
basales y poder evidenciar más a la mayoría de parásitos y hongos (Ceccotti,
Sforza, Carzoglio, Luberti, & Flichman, 2007, pág. 67).
2.2.2 REACTIVOS UTILIZADOS EN LA TINCIÓN PAS
Los reactivos necesarios usados en la tinción PAS se basan en el manual del “AFIP”
(Instituto de Patología de las Fuerza Armadas de los Estados Unidos de América)
utilizado en el laboratorio de Anatomía Patológica del Hospital de Especialidades
Eugenio Espejo. (2015)
 Solución de ácido Peryódico 5%

 Solución de ácido clorhídrico 1N
 Reactivo de Schiff de Coleman
 Solución Hematoxilina de MAYER o la solución de Hematoxilina de
HARRIS (Instituto de Patología de las Fuerza Armadas de los Estados
Unidos de América, 1995, pág. 153).
2.2.3 TÉCNICA DE LA TINCIÓN PAS
En el laboratorio de Anatomía Patológica del Hospital de Especialidades Eugenio

Espejo se realiza la tinción de PAS siguiendo el procedimiento del manual del
Instituto de Patología de Fuerzas Armadas “AFIP”
Técnica en secciones de tejidos
 Desparafinizar y luego hidratar hasta el agua destilada.

 Realizar la Oxidación con ácido peryódico durante 5 min. (10 min)
 Enjuagar con agua destilada.
 Ponemos el reactivo de Schiff de Coleman durante 15 min. (30 min)
 Lavar con agua tibia normal durante10 min.
 Para el contraste se usa Hematoxilina de Mayer durante 15 min o a su vez
la Hematoxilina de Harris durante 6 min. (1 min)
 Lavar con agua corriente durante 15 min. (8 min)
9
 Deshidratar y aclarar con alcohol al 95% o alcohol absoluto y xileno con dos
cambios por dos minutos cada uno.
 Realizar el montaje con un medio de resina (Instituto de Patología de las
Fuerza Armadas de los Estados Unidos de América, 1995, págs. 153, 154) .
2.2.4 RESULTADOS DE LA TINCIÓN PAS (ver imagen 1 y 2)
Los resultados de la Tinción PAS son basados en la descripción del “AFIP” utilizado
en el del laboratorio de Anatomía Patológica del Hospital de Especialidades
Eugenio Espejo
Las mucinas el glucógeno y membranas basales………………….......rojo a purpura
Hongos………………………………………………………………………rojo a purpura
Núcleos……………………………………………………………………….…………azul
(Instituto de Patología de las Fuerza Armadas de los Estados Unidos de América,
1995, pág. 154).
Imagen 1. Tinción PAS. Aspergillus
Fuente: http://www.life-worldwide.org/esp/fungal-diseases/histopathology
Fecha de consulta: 25/Julio/2016
10
Imagen 2. Tinción PAS de glándula salival
Fuente: http://sosbiologiacelularytisular.blogspot.com/2010_04_01_archive.html
2.3 TINCIÓN DE GROCOTT (PLATA-METENAMINA)
El Ácido peryódico de Schiff (PAS), coloración de Gridley, y la tinción Grocott

conforman técnicas histoquímicas para identificación de hongos en secciones de
tejido. De las tres técnicas, la tinción de Grocott muestra mayor sensibilidad para la
detección de hongos y otros microorganismos en secciones de parafina preparados
de forma rutinaria (Shiogama, y otros, 2015).
La tinción de Grocott es probablemente la más conocida para la tinción de

organismos micóticos. Los hongos son en general relativamente grandes y
morfológicamente diversos, y pueden presentarse en los tejidos en diversas formas:
como hifas, esporas, levaduras, endosporas, o una combinación de estas formas
(Parry N. , 2013).
11
Para la detección de elementos micóticos en secciones de tejidos, ésta es una
tinción esencial y debe utilizarse siempre que se sospeche de una patología de
etiología fúngica (Ellis, 2016).
Particularmente es útil la tinción en aspirados bronquiales, esputos inducidos o

biopsias pulmonares utilizados para identificar hongos de tipo Pneumocystis carinii
u otros tipos de hongos que son oportunistas como aspergillus que hace que
provoquen una neumonía (García, Cárdenas, & Urbano, 2012, pág. 51). Las
paredes celulares de estos microorganismos se describen por el color en la tinción
marrón a negro (World Heritage Encyclopedia, 2016).
El Nitrato plata-metenamina de Gomori y el ácido crómico constituyen los principales

reactivos utilizados en la tinción de Grocott , recalcando que es el nitrato de plata el
que actúa como colorante, dotándoles de un color negro mate o brillante a las
estructuras fúngicas (Shiogama, y otros, 2015).
2.3.1 FUNDAMENTO DE LA TINCIÓN GROCOTT
El paso inicial de la tinción Grocott es similar a la tinción de PAS con la diferencia

en que Grocott utiliza el ácido crómico como un agente fijador y oxidante. En el
primer paso el ácido crómico produce la oxidación de los grupos hidroxilos a
aldehídos a partir de componentes mucopolisacáridos de la pared celular de los
hongos (Parry N. , 2013).
Después de ser tratadas con ácido crómico en los tejidos se emplea la solución de
nitrato-plata, en este caso los aldehídos reacciona con la mezcla de nitrato-plata
para producir un depósito de color negro, es decir, una reacción argentafin. Los
hongos se tiñen de negro (Ellis, 2016).
Cuando se usa un colorante de contraste de solución de color verde claro, los

elementos fúngicos se tiñen de color negro con márgenes afilados y un centro
aclarado, en un fondo de tejido de color verde claro (Parry N. , 2013).
12
2.3.2 REACTIVOS UTILIZADOS EN LA TINCIÓN GROCOTT
Los reactivos necesarios usados en la tinción Grocott se basan en el manual del

“AFIP” utilizado en el laboratorio de Anatomía Patológica del Hospital de
Especialidades Eugenio Espejo. (2015)
 Solución de ácido crómico al 4%

 Solución de nitrato de plata al 5%
 Solución de metenamina al 3%
 Solución bórax al 5% (Instituto de Patología de las Fuerza Armadas de los
Estados Unidos de América, 1995, pág. 232).
2.3.3 TÉCNICA DE LA TINCIÓN GROCOTT
El procedimiento para realizar la tinción de Grocott se basan en el manual del “AFIP”

Eugenio Espejo. (2015)
 Desparafinizar y luego hidratar hasta llegar al agua destilada

 Realizar la oxidación con ácido crómico al 4%, durante 1 hora.
 Lavar con agua corriente unos segundos
 Colocar en una solución de bisulfito de sodio durante 1 minuto esto para
remover el residuo de la solución del ácido crómico que haya quedado.
 Se lava después con agua corriente durante 5 a 10 minutos.
 Enjuagar con agua destilada unas 3 o 4 veces
 Colocar la mezcla de nitrato de plata-metenamina en una estufa de
laboratorio a una temperatura de 58°C a 60°C, en un periodo de 50 a 60
minutos.
 Enjuagar con el agua destilada unas 6 veces.
 Realizar el matizado con la solución de cloruro de oro de 2-5 minutos.
 Realizar un nuevo enjuague con agua destilada.
 Colocar el tiosulfato de sodio de 2-5 minutos.
 Realizar un buen lavado con agua.
13
 Realizar el contrastado con la solución de verde claro durante unos 30-45
segundos.
 Deshidratar y aclarar con alcohol al 95% o alcohol absoluto y xileno.
 Realizar el montaje con un medio de resinoso (Instituto de Patología de las
Fuerza Armadas de los Estados Unidos de América, 1995, págs. 232, 233) .
2.3.4 RESULTADOS DE LA TINCIÓN GROCOTT (Ver imagen 3)
Los resultados de la Tinción Grocott son basados en la descripción del “AFIP”

Eugenio Espejo (2015)
Hongos………………………………………….Claramente delineados de color negro
Mucina…………………………………………………………………………..gris oscuro
Micelios e hifas…………………………………………………………..rosado grisáceo
Fondo…………………………………………………………………………………verde
1995, pág. 233)
14
Imagen 3. Hongos filamentosos de tamaños variables y separados (tinción de
Grocott)
Fuente: http://www.scielo.org.ar/img/revistas/medba/v72n6/a10fig3.gif
2.4 TINCIÓN DE ZIEHL-NEELSEN (BAAR)
La técnica de tinción de Ziehl-Neelsen se basa en el trabajo de cinco

personas; Koch, Ehrlich, Ziehl, Rindfleisch y Neelsen, pero se conoce popularmente
como la tinción de “Ziehl-Neelsen” (Giri D. , 2016).
La tinción de Ziehl-Neelsen es usada para evidenciar la presencia de bacterias

alcohol-ácido resistente, que por lo general se lo realiza en muestras de
expectoración, pero también se lo hace en muestras de diferentes tejidos. La tinción
es muy importante en el diagnóstico de la tuberculosis pulmonar y de otras
enfermedades producidas por bacterias acido resistentes como la lepra (Ramos
Jiménez, 2012, pág. 27).
15
El bacilo de la tuberculosis no es la única que se puede identificar con esta técnica
de tinción, sino a todos los bacilos del género Mycobacterium, y otros tipos de
microorganismos.
La tinción de Ziehl-Neelsen es la técnica de preferencia que es utilizada en los

laboratorios de América Latina y por lo tanto es la técnica que recomienda la
“Organización Mundial de la Salud” (OMS) y la “Unión Internacional Contra la
Tuberculosis y Enfermedades Respiratorias” (UICTER) por que se obtienen
resultados confiables y reproducibles con costos económicos bajos (Sequeira de
Latini & Barrera, 2012, pág. 23).
2.4.1 FUNDAMENTO DE LA TINCIÓN ZIEHL-NEELSEN
Las micobacterias no se tiñen fácilmente porque contienen gran cantidad de ácidos

micólicos (lípidos complejos) en su pared celular, lo que las hacen impenetrables a
los colorantes rutinarios (García, Cárdenas, & Urbano, 2012, pág. 56).
En ésta tinción se utilizan colorantes fuertes como la fucsina que es un colorante

básico que se asocia al ácido fenico (mordiente químico) y se necesita aplicar calor
para que estas bacterias retengan el colorante y no se puedan decolorar con
agentes químicos como el alcohol-acido (Negroni, 2009, pág. 547).
De contraste se usa un contra colorante que es el azul de metileno que tiñe el resto
de la muestra. No todas la micobacterias son alcohol-ácidos resistentes porque
existen muchas otras bacterias y microorganismos con capacidad alcohol-acido
resistentes en diferentes grados como por ejemplo; Cryptosporidium, Legionella y
otros (García, Cárdenas, & Urbano, 2012, pág. 56).
La denominación de bacterias alcohol-ácido resistentes se les da a todos los

microorganismos que resisten la decoloración y se observan de un color rojo en las
muestras de tejidos teñidos, en tanto que los microorganismos que no tiene la
capacidad de resistir la decoloración se los denominan bacterias no alcohol-ácido
resistentes y se observan con un color azul (Negroni, 2009, pág. 547).
16
2.4.2 REACTIVOS UTILIZADOS EN LA TINCIÓN ZIEHL-NEELSEN
Los reactivos necesarios usados en la tinción Ziehl-Neelsen se basan en el manual

del “AFIP”, utilizado en el laboratorio de Anatomía Patológica del Hospital de
 Carbol fucsina de Ziehl-Neelsen

 Solución de alcohol acido al 1%
 Solución matriz de azul de metileno
 Solución azul de metileno (solución diaria de trabajo) (Instituto de Patología
de las Fuerza Armadas de los Estados Unidos de América, 1995, pág. 225).
2.4.3 TÉCNICA DE LA TINCIÓN ZIEHL-NEELSEN
El procedimiento para realizar la tinción Ziehl-Neelsen se basa en el manual del

“AFIP”, utilizado en el laboratorio de Anatomía Patológica del Hospital de
 Realizar la desparafinización y luego hidratar hasta llegar al agua destilada.

 Teñir las placas con la solución fresca de carbol fucsina, durante unos 30
minutos.
 Después lavar bien con agua corriente
 Provocar la decoloración con la solución de alcohol acido al 1% hasta que
las secciones de tejido presenten un color rosado pálido.
 Lavar bien con agua corriente durante unos 8 minutos.
 Realizar la contrastación sumergiendo una placa a laves en la solución diaria
de azul de metileno. Estas secciones deben ser de color azul pálido, ya que
el exceso de contraste puede ocultar los bacilos.
 Lavar con agua corriente y después con agua destilada.
17
 Realizar una deshidratación rápido con alcohol etílico del 95% y alcohol
etílico absoluto, realizar 2 cambios cada uno y aclarar con xileno de igual
forma por 2 minutos cada uno.
 Finalmente se realiza el montaje con un medio resinoso y laminilla
cubreobjetos (Instituto de Patología de las Fuerza Armadas de los Estados
Unidos de América, 1995, pág. 225).
2.4.4 RESULTADOS DE LA TINCIÓN ZIEHL-NEELSEN (Ver imagen 4 y 5)
Los resultados de la Tinción Ziehl-Neelsen son basados en la descripción del

“AFIP”, utilizada en el del laboratorio de Anatomía Patológica del Hospital de
Bacilos alcohol-ácido resistentes………………………………..………….rojo brillante
Eritrocitos……………………………………………………….........amarillo-anaranjado
Otros elementos tisulares……………………………………………………………..azul

1995, pág. 225).
18
Imagen 4. Tinción de Ziehl-Neelsen. Mycobacterium tuberculosis.
Fuente: http://www.ibcrosario.com.ar/articulos/tuberculosis_2014.html
Imagen 5. Tinción de Ziehl-Neelsen. Lepra Lepromatosa
Fuente: http://www.saber.ula.ve/tropical/contenido/capitulo5/capitulo40/figuras/40-0002-es.html
19
2.5 MICROORGANISMOS EN LAS SECCIONES DE TEJIDOS
Los microorganismos son pequeñas formas de vida que nos rodean, y demasiados
pequeños para ser vistos a simple vista. Se encuentran en el agua, aire y en el
suelo. El cuerpo humano es también el hábitat de millones de estos microrganismos
que causan enfermedades, y también de otros microrganismos que son importantes
para mantener un buen estado de salud. Los más comunes son las bacterias, virus y
hongos pero también hay microorganismos del grupo de los protozoos que son
responsables de enfermedades (IQWiG, 2015).
Todas las superficies del cuerpo humano están colonizadas por microorganismos
y la flora normal es el resultado de la colonización permanente de microorganismos
en una relación simbiótica que produce resultados beneficiosos. En ocasiones la
flora normal puede llegar a ser un patógeno oportunista y causar enfermedades si
tienen acceso a las áreas que son normalmente estériles del cuerpo o si la persona
es inmunocomprometido causando infecciones y daños en los tejidos (Dudeja,
Dudeja, Srivastava, & Grover, 2016).
Se tiene una fuerte evidencia sobre los microorganismos que pueden ser los
agentes causales de muchas enfermedades crónicas no infecciosas tales como
algunos tipos de cáncer evidenciados en diferentes tejidos y en enfermedades
coronarias. Existen enfermedades que son causadas por diferentes tipos de
microorganismos que invaden los tejidos en mayor o menor medida (Microbiology
Society, 2016).
2.6 MICROORGANISMOS MICÓTICOS
Los microorganismos micóticos u hongos presentan estructuras eucariotas las

cuales contienen paredes gruesas formadas por quitina y ergosteroles en sus
membranas celulares. Estos microorganismos micóticos se pueden desarrollar
como formas unicelulares llamadas levaduras o como unas formas filamentosas
denominadas hifas, las cuales pueden ser tabicada o no tabicadas. Tenemos
20
algunos de estos microorganismos micóticos que adoptan una forma dimorfa, es
decir pueden crecer como hifas o levaduras, y estos tipos de hongos son de gran
interés clínico por ser causa de muchas infecciones micóticas.
Los microorganismos micóticos pueden ser causa de infecciones superficiales que

son afectaciones de la piel, uñas o cuero cabelludo. Los hongos también pueden
causar infecciones profundas, las cuales se diseminan e infectan los tejidos
causando daños en órganos importantes en pacientes que son
inmunocomprometidos (MacAdam & Sharpe, 2013, pág. 313).
Las infecciones por hongos son cada vez más frecuentes debido a la expansión de
las poblaciones. Los cambios en las infecciones fúngicas endémicas se puede
atribuir a los cambios climáticos, mayor población, factibilidad de viajes, y
poblaciones cambiantes. Las poblaciones en riesgo para las infecciones micóticas
oportunistas o diseminadas endémicas incluyen pacientes que han recibido
trasplantes, los inmunosupresores prescritos, medicamentos quimioterapéuticos,
pacientes infectados por el VIH etc.
En la actualidad los hongos que antes se consideraban no patógenos son causa de

enfermedades frecuentes en pacientes inmunocomprometidos. Por otra parte, los
avances en el diagnóstico radiológico y en apoyo al paciente han permitido una
mayor capacidad de diagnóstico mediante muestras de biopsia de tejidos de
diferentes sitios del cuerpo que antes no eran posibles para el examen
histopatológico.
El examen histopatológico de los tejidos para detectar hongos seguirá siendo una
herramienta importante a la hora de definir un diagnóstico por infecciones fúngicas.
La Histopatología también puede proporcionar un rápido diagnóstico presuntivo de
microorganismos micóticos en relación a la espera de los resultados de un cultivo
de hongos.
El examen histopatológico de muestras de biopsia, especímenes quirúrgicos y

autopsia debe comenzar siempre con la tinción de rutina H & E, en cambio la tinción
de Grocott y la tinción de PAS deben efectuarse si se sospecha de hongos después
21
de la revisión de los tejidos por una alta sospecha clínica y porque existe una
respuesta inflamatoria en el tejido (Guarner & Brant, 2011).
Los microorganismos micóticos que causaron mayores infecciones y que se

observaron con las tinciones histoquímicas registradas en el presente estudio se
describen a continuación.
2.6.1 Histoplasma
Las infecciones causadas por este hongo Histoplasma genera la histoplasmosis. El

Histoplasma vive en el medio ambiente, comúnmente en el suelo que contiene
grandes cantidades de excrementos de murciélagos y pájaros (CDC, 2015).
El Histoplasma es un hongo que se distribuye en todo el mundo y es endémico en

zonas geográficamente limitadas.
La histoplasmosis ocurre más frecuentemente en América, ya que la mayoría de los

estudios se publican a partir de pacientes que viven en ésta parte del mundo. En
América del Norte, el Histoplasma es endémico en los valles de Mississippi y Ohio
y también en algunas partes localizadas en la región. En el Caribe Central y América
del Sur se ha descrito en casi todos los países, y otras partes endémicas que
incluyen zonas de África, Asia y Australia (Adenis, Aznar, & Couppié, 2014).
Estas infecciones causadas por el Histoplasma son debidas a la inhalación de

esporas o microconidias las cuales llegan por vía aérea a los alveolos y después
fagocitadas por los macrófagos alveolares se desarrollan al interior de los mismos
macrófagos actuando como parásitos intracelulares (Miquel, 2012, pág. 262).
En el laboratorio la histopatología es de mucha ayuda para poner en aviso al médico

sobre una infección de patógenos de estas características compatibles con
Histoplasma. Los especímenes en los cuales se realizan estudios son muy variados,
como líquidos, secreciones, biopsias etc.
Se puede realizar tinciones de H&E que tiñen débilmente la pared de estos hongos,
en cambio con tinciones “especiales” como la de PAS y Grocott las paredes son
22
coloreadas con mayor intensidad haciéndolas más visibles al microscopio
(Fernández Andreu, Illnait, Martínez, Perurena , & Monroy , 2011).
2.6.2 Cándida Albicans
La Cándida albicans coloniza zonas del cuerpo humano como la oro faringe y la
vagina. Las infecciones superficiales que se producen en el aparato genitourinario
o tracto gastrointestinal se dan cuando existe un desequilibrio de los
microorganismos causado por diferentes aspectos, como las hormonas
reproductivas, los antibióticos, y la inmunosupresión que puede deberse a una
infección por VIH o la diabetes (Guarner & Brant, 2011).
En las infecciones superficiales por Cándida hay un predominio de éste hongo en

forma de filamentos que se denomina pseudo hifas, mientras tanto en infecciones
sistémicas existe un mayor predominio de las formas en levaduras que pueden
presentar también gemaciones.
El diagnóstico de la Cándida Albicans se puede realizar por una visualización directa

al microscopio por medio de un frotis o en biopsias de tejidos con alguna técnica de
tinción histoquímica como PAS o Grocott (Miquel, 2012, pág. 261).
2.6.3 Cryptococcus
El microorganismo micótico Cryptococcus neoformans es el responsable de la

mayoría de infecciones que se encuentra en los individuos inmunocomprometidos,
mientras que el Cryptococcus gattii causa infecciones en inmunocompetentes e
inmunocomprometidos.
El criptococo tiene una distribución mundial que se encuentra asociada

principalmente al excremento de las palomas. La infección por VIH es el factor
predisponente más frecuente para la criptococosis, sin embargo esta micosis se
puede dar por afectaciones del pulmón, el hígado, uso de inmunosupresores,
tumores malignos y enfermedades autoinmunes (Guarner & Brant, 2011).
23
El cryptococcus neoformans solo existe en su forma de levadura que se caracteriza
por poseer una cápsula gruesa de mucopolisacaridos, y para su identificación en
muestras tisulares se emplean tinciones histoquímicas de Grocott o de PAS,
coloraciones que las hacen más evidentes (Miquel, 2012, pág. 262).
2.6.4 Aspergillus
La aspergilosis es una infección micótica oportunista causada por el

hongo Aspergillus en pacientes inmunocomprometidos, por lo general después de
la inhalación de las esporas.
La aspergilosis abarca tres tipos de infecciones que incluyen la aspergilosis

broncopulmonar alérgica, aspergiloma pulmonar crónico, y la aspergilosis invasiva
o sistémica (Guarner & Brant, 2011).
2.7 MICROORGANISMOS BACTERIANOS
El ser humano contiene abundantes bacterias, pero se localizan en ciertas zonas

del cuerpo humano, como la piel, mucosa de la boca, el tracto gastrointestinal, la
vagina etc. Los tejidos al interior son generalmente estériles. En ocasiones, algunos
patógenos oportunistas son capaces de penetrar en el individuo mediante lesiones
o por deficiencias de las diferentes barreras.
Los microorganismos patógenos han desarrollado mecanismos para superar las

barreras y alcanzar órganos más internos en los que puedan desarrollarse y
provocar enfermedades más graves en el individuo (Ribet & Cossart, 2015).
2.7.1 Actinomyces
La actinomicosis es una enfermedad invasiva poco frecuente causada por el

actinomyces identificada hace más de un siglo. Los actinomyces son
microorganismos filamentosos bacilares que generalmente pertenecen a la flora
comensal de los seres humanos y están colonizando la orofaringe, tracto
gastrointestinal y urogenital (Valour, y otros, 2014).
24
La tinción con plata-metenamina Grocott también es útil para demostrar las
estructuras filamentosas, que no se hayan coloreado con tinción H&E, tinción de
PAS o Gridley (Roy S. , 2016a).
2.8 MICROORGANISMOS PARASITARIOS
Los microorganismos parasitarios son los que poseen una mayor complejidad, ya
que por su clasificación son microorganismos eucariotas, aunque algunos sean
unicelulares y otros pluricelulares. El ciclo vital de estos microorganismos también
tiene una complejidad ya que están relacionados generalmente con el ser humano
y muchos otros tienen que atravesar una serie de ciclos en diferentes hospederos
animales (Murray, Rosenthal, & Pfaller, 2013, pág. 4).
Los microorganismos parasitarios incluyen a los protozoos que son más frecuentes
en zonas tropicales y en condiciones sanitarias deplorables las cuales provocan
enfermedades y muertes.
Los efectos en el tejido que son causa de estos microorganismos varían desde una
reacción importante eosinofílica acompañada de necrosis o también de una
reacción granulomatosa o pueden no producir ninguna reacción. Las tinciones que
pueden ser de utilidad en los tejidos histológicos para evidenciar estos
microorganismos son la tinción de PAS y Giemsa (Miquel, 2012, págs. 265, 266).
Los microorganismos que fueron causa de infecciones parasitarias realizadas en

este estudio fueron de dos tipos de parásitos que se describirán brevemente a
continuación.
2.8.1 Amebas
La amebiasis intestinal es causada por la entamoeba histolytica, que puede afectar

a cualquier parte del intestino. Esto implica el colon ascendente, ciego, el recto y el
apéndice.
25
En las secciones histológicas la infección por amebas revela un tejido
granulomatoso, fibrosis, células inflamatorias etc. La tinción de PAS colorea el
citoplasma de los trofozoítos de rojo, evidenciándolos en el tejido (Roy S. , 2016b).
2.8.2 Leishmania
La infección por leishmaniasis la causa el parasito protozoo Leishmania que la

provocan varias especies, las cuales son trasmitidas a los seres humanos por
vectores que realizan picaduras (OMS, 2015).
Estos microorganismos son parásitos intracelulares que infectan los tejidos que
están dentro de los macrófagos. Existen tres formas de infección de estos parásitos:
visceral, cutánea y mucocutánea (Miquel, 2012, pág. 269).
2.9 MICROORGANISMOS BACTERIAS ALCOHOL-ÁCIDO RESISTENTES

(BAAR)
Los microorganismos denominados BAAR son todas las especies de

Mycobacterium. El Mycobacterium tuberculosis es de gran importancia clínica ya
que casusa infecciones generalmente a los pulmones pero también se puede
encontrar en cualquier tejido (Lee, Kurbanyan, & Hamrah, 2011).
Estos microorganismos no captan el colorante pero después de teñirlos resisten a

la decoloración por ácidos y alcoholes y por esta razón su denominación de alcohol-
ácido resistente. Otros tipos de Micobacterias también son de relevancia clínica
como Mycobacterium leprae que causa la lepra. En los tejidos se observan
estructuras cilíndricas rectas las cuales se pueden apreciar de color rojo brillante en
un fondo azul celeste con la tinción de Ziehl-Neelsen que es específica para
evidenciar micobacterias (Brooks & Carroll, 2011).
26
CAPITULO III
METODOLOGÍA
3.1 TIPO DE ESTUDIO
Este estudio es descriptivo transversal por que utiliza la recolección de información

de registros existentes como informes de resultados en un momento determinado.
3.2 POBLACIÓN
Todos los casos de tinciones de PAS, Grocott y Ziehl-Neelsen que se realizaron de

muestras de los pacientes que acudieron al Servicio de Anatomía Patológica del
Hospital de Especialidades Eugenio Espejo durante el año 2015.
3.3 TÉCNICAS E INSTRUMENTOS DE INVESTIGACIÓN
Las técnicas aplicadas consistieron en lo siguiente: realización del análisis

documental bibliográfico de las tinciones histoquímicas, para lo cual se recolectó los
datos de las historias clínicas de los pacientes que se realizaron exámenes en el
Servicio de Anatomía Patológica del “Hospital de Especialidades Eugenio Espejo
durante el año 2015, los mismos que se registraron en una hoja de recolección
(Anexo 1) en la que se consignaron todas las variables establecidas para el estudio,
los mismos que fueron procesados en una hoja de cálculo de Excel para su
respectivo análisis estadístico en porcentajes y su representación en tablas y
gráficos en el capítulo IV que corresponde a resultados.
3.4 CONSIDERACIONES ÉTICAS
Todos los datos obtenidos de los pacientes se manejaron en forma confidencial

solo con fines académicos y no fueron ni serán utilizados con ninguna otra finalidad.
27
CAPÍTULO IV
RESULTADOS
4.1 PRESENTACIÓN
En este estudio se trabajó con un total de 267 muestras de pacientes, de las cuales
la mayoría fueron biopsias, en estas 267 muestras de diferentes tejidos se realizaron
y se analizaron 556 tinciones histoquímicas en el Servicio de Anatomía Patológica
del “Hospital de Especialidades Eugenio Espejo”.
Tabla 1
Distribución de las tinciones histoquímicas realizadas durante el período 2015 en
el Servicio Anatomía Patológica del Hospital de Especialidades Eugenio Espejo
Tinciones histoquímicas empleadas N° de tinciones Porcentaje
PAS 202 36,3%
GROCOTT 175 31,5%
ZIEHL NEELSEN 179 32,2%
TOTAL 556 100%
Fuente: Servicio Anatomía Patológica. HEEE. 2015
Elaborado por: Mestanza, Ricardo. 2016
Gráfico 1
Distribución de las tinciones histoquímicas realizadas durante el período 2015 en
el Servicio Anatomía Patológica del Hospital de Especialidades Eugenio Espejo
ZIEHL
NEELSEN;
32,2% PAS; 36,3%
GROCOTT;
31,5%
En la tabla 1 y el gráfico 1 se demuestra que la tinción de PAS es la que se realiza

con mayor frecuencia (36,3%) mientras que la tinción de Grocott y Ziehl-Neelsen
alcanza porcentajes similares (32%) entre ellas, pero menores a la tinción de PAS.
Estas tinciones histoquímicas también muestran una utilización para el diagnóstico
de microorganismos en estudios realizados en Cuba por Walwyn Salas et al.(2004).
28
Tabla 2
Distribución de los casos por la edad de los pacientes del Servicio de Anatomía
Patológica del Hospital de Especialidades Eugenio Espejo en el período 2015
Grupo de edades en años N° de casos Porcentaje
01 – 20 24 9%
21 – 40 123 46%
41 – 60 67 25%
61 – 80 41 15%
81 – 100 9 4%
S/E 3 1%
TOTAL 267 100%
Gráfico 2
Distribución de los casos por la edad de los pacientes del Servicio de Anatomía
4% 1%
9%
15%
25% 46%
EDAD
1 -20 21 - 40 41 - 60 61 - 80 81 -100 S/E

En la tabla 2 y el gráfico 2 se evidencia que el grupo de edades con un mayor

predominio de casos fue en los de 21 a 40 años (46%), en comparación al grupo de
edad de 1 a 20 años (9%) que mostró un menor número de casos.
Otro grupo de edades que también destacan un importante número de casos son el
grupo de 41 a 60 años (25%), pero que al compararlos con el grupo de edades de
21 a 40 años en los que predominan los casos alcanzando un 46%, estos
corresponden casi a la mitad con tan solo un 25%.
29
Tabla 3
Distribución de los casos por sexo de los pacientes del Servicio de Anatomía
Sexo N° de casos Porcentaje
HOMBRE
117 43,8%
MUJER
150 56,2%
TOTAL
267 100%
Gráfico 3
Distribución de los casos por sexo de los pacientes del Servicio de Anatomía
43,8%
56,2%
HOMBRE MUJER

En la tabla 3 y el gráfico 3 nos muestra que el predominio de casos en el sexo

femenino es relativamente mayor (56%) a los casos registrados en el sexo
masculino (44%), lo que evidencia que tanto las mujeres como los hombres reciben
atención por igual en el Hospital de Especialidades Eugenio Espejo.
30
Tabla 4
Frecuencia de casos positivos para microorganismos en el Servicio de Anatomía
Microorganismos
N° de Casos Porcentaje
POSITIVOS
39 14,6%
NEGATIVOS
228 85,4%
Total
267 100%
Gráfico 4
Frecuencia de casos positivos para microorganismos en el Servicio de Anatomía
POSITIVOS NEGATIVOS
POSITIVOS
14,6%
NEGATIVOS
85,4%

La tabla 4 y el gráfico 4 demuestran que del total de casos que fueron 267 muestras
de tejido sometidas a estudio por tinciones histoquímicas se determinó que solo 39
casos (15%) fueron positivos para microorganismos, los mismos que fueron
identificados indistintamente por cada tinción utilizada, mientras que los 228 casos
restantes fueron casos negativos (85%) para microorganismos.
31
Tabla 5
Tinciones positivas para microorganismos en el Servicio de Anatomía Patológica
del Hospital de Especialidades Eugenio Espejo en el período 2015
Tinciones Histoquímicas N° de tinciones Porcentaje
POSITIVAS 52 9,4%
NEGATIVAS 504 90,6%
Total 556 100%

Gráfico 5
Tinciones positivas para microorganismos en el Servicio de Anatomía Patológica
del Hospital de Especialidades Eugenio Espejo en el período 2015
POSITIVAS
9,4%
NEGATIVAS
90,6%

En los 267 casos que corresponden a las muestras de tejido de los pacientes que
acudieron al Servicio de Anatomía Patológica del Hospital de Especialidades
Eugenio Espejo en el período 2015, se realizaron un total de 556 tinciones
histoquímicas es decir, un promedio de 2 tinciones por cada caso y de 3 tinciones
en algunos casos, y de estas 556 tinciones solo 52 (9%) fueron positivas para
microorganismos, por lo que las 504 (91%) tinciones histoquímicas fueron negativas
para microorganismos, según se demuestra en la tabla 5 y gráfico 5.
32
Tabla 6
Tinciones de PAS, Grocott y Ziehl-Neelsen positivas en el Servicio de Anatomía
N° de tinciones
Tinción Histoquímica Porcentaje
positivas
PAS 29 55,7%
GROCOTT 21 40,3%
ZIEHL NEELSEN 2 4,0%
Total 52 100%
Gráfico 6
Tinciones de PAS, Grocott y Ziehl-Neelsen positivas en el Servicio de Anatomía
ZIEHL
NEELSEN;
4,0%
GROCOTT;
40,3%
PAS; 55,7%

En la tabla 6 y el gráfico 6 se puede apreciar que de las 52 (9%) tinciones

histoquímicas positivas para microorganismos, 29 corresponden a la tinción de PAS
(Peryódico Ácido Schiff) por lo que se puede establecer que con esta tinción se
diagnosticó el mayor porcentaje (56%) de microorganismos, mientras que 21
tinciones fueron de Grocott alcanzando esta tinción el 40% del diagnóstico de
microorganismos. En lo que se refiere a las tinciones positivas para Ziehl-Neelsen
fueron solamente 2 por lo que presentaron un menor porcentaje (4%) en relación a
las tinciones positivas de PAS y Grocott.
33
Tabla 7
Tinciones positivas de PAS, Grocott y Ziehl-Neelsen en relación al total de cada
una de estas tinciones realizadas en el Servicio de Anatomía Patológica del
Hospital de Especialidades Eugenio Espejo en el período 2015
N° de tinción/Total de Porcentaje de
Tinción Histoquímica
tinción positivos
PAS 29 / 202 14,4%
GROCOTT 21 / 175 12%
ZIEHL NEELSEN 2 / 179 1,1%
Gráfico 7
Tinciones positivas de PAS, Grocott y Ziehl-Neelsen en relación al total de cada
una de estas tinciones realizadas en el Servicio de Anatomía Patológica del
Hospital de Especialidades Eugenio Espejo en el período 2015
200 173 177

154
150
100
29 21
50
2
0
PAS GROCOTT ZIEHL NEELSEN
POSITIVOS NEGATIVOS

En la tabla 7 y el gráfico 7 se observa que se realizaron 202 tinciones de PAS de

las cuales 29 (14%) fueron positivas para microorganismos, 179 de Ziehl-Neelsen
con 2 (1%) tinciones positivas para BAAR y 175 de Grocott, con 21 (12%) tinciones
positivas para hongos. Al sumar estos valores se obtiene el total de 556 tinciones
histoquímicas que se realizaron en las 267 muestras de tejido. Además se puede
establecer al tomar en cuenta el total de cada una de las tres tinciones
histoquímicas realizadas, que predominan los casos negativos siendo más
evidentes en las tinciones de Ziehl-Neelsen, en las cuales su positividad apenas
representa el 1% del total para ésta tinción. La tinción Grocott utilizada en este
estudio tiene una mayor frecuencia de positivos para hongos (12%) si comparamos
en un estudio similar que presentó una positividad del 4% para estos
microorganismos (Nowaseb, Gaeb , Fraczek , Richardson , & Denning , 2014),
posiblemente porque no se utilizó mas tejidos como en el presente estudio.
34
Tabla 8
Distribución de las tinciones positivas para PAS de acuerdo a los microorganismos
diagnosticados en el Servicio de Anatomía Patológica del Hospital de
Especialidades Eugenio Espejo en el período 2015
Microorganismos N° de tinción/Total de tinción PAS Porcentaje
HONGOS 22 / 202 10.9%
BACTERIAS 6 / 202 3%
PARASITOS 2 / 202 1%
Gráfico 8
Distribución de las tinciones positivas para PAS de acuerdo a los microorganismos
diagnosticados en el Servicio de Anatomía Patológica del Hospital de
196 200
200 180
150
100
50 22
6 2
0
HONGOS BACTERIAS PARÁSITOS
Tinciones positivos para PAS Tinciones negativas para PAS

En la tabla 8 y gráfico 8 se puede apreciar que del total de las tinciones de PAS que
se realizaron (202), los casos positivos para microorganismos en su mayoría fueron
hongos (11%), el resto de casos positivos para microorganismos en menor
porcentaje fueron bacterias (3%) y los parásitos fueron tan sólo 1% del total de las
tinciones PAS. Según estudios en México la tinción PAS identifico un 16% de
microorganismos micóticos en un servicio de Dermatopatología (Hajar Serviansky
et al., 2013) que presentó una frecuencia relativamente mayor de PAS positivos
para hongos en relación a este estudio (11%).
35
Tabla 9
Distribución de los tipos de tejidos en los que se realizó las tinciones histoquímicas
en el Servicio de Anatomía Patológica del Hospital de Especialidades Eugenio
Espejo en el período 2015
Tipo de tejido N° de tinción Porcentaje
RENAL 45 8,1%
DIGESTIVO 221 39,7%
NERVIOSO 13 2,3%
LINFATICO 89 16,0%
PULMONAR 48 8,6%
PIEL Y TEGUMENTOS 101 18,2%
ENDOCRINO 14 2,5%
MUSCULO ESQUELETICO 18 3,2%
HEMATOLÓGICO 5 0,9%
CARDÍACO 2 0,4%
TOTAL 556 100%
Gráfico 9
Distribución de los tipos de tejidos en los que se realizó las tinciones histoquímicas
CARDÍACO 2
HEMATOLÓGICO 5
MUSCULO ESQUELETICO 18
ENDOCRINO 14
PIEL Y TEGUMENTOS 101
PULMONAR 48
LINFATICO 89
NERVIOSO 13
DIGESTIVO 221
RENAL 45
0 50 100 150 200 250

En la tabla 9 y el gráfico 9 se puede ver claramente que en los tejidos digestivos

se realizaron 221 tinciones histoquímicas (40%), por lo que este tipo de tejido fue
predominante, seguido casi a la mitad de esta frecuencia, por la piel en la que se
hicieron 101 tinciones histoquímicas (18%) y por el tejido linfático con 89 tinciones
(16%), mientras que el resto de tejidos presentaron porcentajes inferiores al 9%.
Estos tipos de tejidos también pueden ser comprobados en estudios realizados por
Walwyn Salas et al. (2004) en las que también son utilizadas para realizar las
tinciones histoquímicas.
36
Tabla 10
Distribución de los tipos de tejidos por tinciones histoquímicas de PAS, Grocott y
Ziehl-Neelsen realizadas en el Servicio de Anatomía Patológica del Hospital de
Tinción PAS Tinción Grocott Tinción Ziehl-Neelsen
Tipo de tejidos
N° de tinción Porcentaje N° de tinción Porcentaje N° de tinción Porcentaje
RENAL 16 7,9% 15 8,6% 14 7,8%
DIGESTIVO 82 40,6% 69 39,4% 70 39,1%
NERVIOSO 6 3,0% 4 2,3% 3 1,7%
LINFATICO 34 16,8% 26 14,9% 29 16,2%
RESPIRATORIO 14 6,9% 13 7,4% 21 11,7%
PIEL Y TEGUMENTOS 37 18,3% 42 24,0% 22 12,3%
ENDOCRINO 6 3,0% 3 1,7% 5 2,8%
MUSCULO ESQUELETICO 4 2,0% 1 0,6% 13 7,3%
HEMATOLÓGICO 2 1,0% 2 1,1% 1 0,6%
CARDÍACO 1 0,5% 0 0,0% 1 0,6%
Total 202 100% 175 100% 179 100%
Gráfico 10
Distribución de los tipos de tejidos por tinciones histoquímicas de PAS, Grocott y
Ziehl-Neelsen realizadas en el Servicio de Anatomía Patológica del Hospital de
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0
Tinción PAS Tinción Grocott Tinción Ziehl-Neelsen

En la tabla 10 y el gráfico 10 se demuestra que el número de casos es mayor en

los tejidos digestivos con la tinción PAS (41%) que las tinciones de Grocott y Ziehl-
Neelsen que tuvieron porcentajes iguales (39%). En los tejidos respiratorios la
tinción de Ziehl-Neelsen tiene mayor número de casos (12%) sobre las otras dos
tinciones con porcentajes similares (7%). Y en los tejidos de piel la tinción de Grocott
predomina (24%) sobre las otras dos tinciones con porcentajes menores a la de
Grocott.
37
Tabla 11
Distribución de los tejidos en los que se identificó la presencia de microorganismos
Microorganismos
Tipo de tejido Porcentaje
Hongos Bacterias Parásitos BAAR Actinomyces
DIGESTIVO 19 4 1 2 0 60,5%
LINFATICO 4 0 0 0 0 9,3%
MUSCULO ESQUELETICO 0 1 0 0 0 2,3%
NERVIOSO 2 0 0 0 0 4,7%
PIEL Y TEGUMENTOS 5 0 1 0 1 16,2%
PULMONAR 3 0 0 0 0 7,0%
Total 33 5 2 2 1 100%
Gráfico 11
Distribución de los tejidos en los que se identificó la presencia de microorganismos
20 19
Microorganismos
15
10
4 4 5
5 3
1 2 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0
2
0 0 0 0 0 1 0 1 0 0 0 0
0
DIGESTIVO LINFATICO MUSCULO NERVIOSO PIEL Y PULMONAR
ESQUELETICO TEGUMENTOS
Tipo de tejido
Hongos Bacterias Parásitos BAAR Actinomyces

Los tipos de tejidos que en mayor frecuencia se identificó microorganismos son los
de tipo digestivo (61%) que mostro en su mayoría presencia de hongos y los tejidos
de piel que identifico un 16% de microorganismos siendo casi en su totalidad
microorganismos micóticos, los tejidos de tipo nervioso presentaron menor
frecuencia con presencia solo de hongos en 2 casos (5%) según se puede
demostrar en la tabla 11 y gráfico 11.
38
Tabla 12
Distribución de los microorganismos identificados con las tinciones de PAS,
Grocott y Ziehl-Neelsen en el Servicio de Anatomía Patológica del Hospital de
Microorganismos Recuento Porcentaje
BACTERIAS ACIDO RESISTENTES 2 4,7%
BACTERIAS 5 11,6%%
ACTINOMYCES 1 2,3%
HONGOS 33 76,7%
PARÁSITOS 2 4,7%
Total 43 100%
Gráfico 12
Distribución de los microorganismos identificados con las tinciones de PAS,
Grocott y Ziehl-Neelsen en el Servicio de Anatomía Patológica del Hospital de
4,7% 4,7%
11,6% 2,3%
76,7%
BACTERIAS ACIDO RESISTENTES BACTERIAS

ACTINOMYCES HONGOS
PARASITOS

En la tabla 12 y el gráfico 12 se puede comprobar que dentro de los

microorganismos diagnosticados a través de las tinciones histoquímicas, los más
frecuentes son los hongos, los mismos que superan con un amplio porcentaje que
es el 77%, al resto de microorganismos identificados, como los parásitos y las
bacterias alcohol ácido resistentes no superan el 5%.
39
Tabla 13
Distribución de los microorganismos micóticos hallados con las tinciones
histoquímicas en el Servicio de Anatomía Patológica del Hospital de
Microorganismo micóticos Recuento Porcentaje
HISTOPLASMA 12 36,4%
HONGOS NO ESPECIFICADOS 11 33,3%
CANDIDA ALBICANS 6 18,2%
CRYPTOCOCCUS 3 9,1%
ASPERGILLUS 1 3,0%
Total 33 100%
Gráfico 13
Distribución de los microorganismos micóticos hallados con las tinciones
histoquímicas en el Servicio de Anatomía Patológica del Hospital de
12
11
12
10
8 6
6
3
4
1
2
0
Microorganismos micóticos
HISTOPLASMA HONGOS NO ESPECIFICADOS CANDIDA ALBICANS CRYPTOCOCCUS ASPERGILLUS

En la tabla 13 y el gráfico 13 se evidencia un mayor número de hongos de tipo

Histoplasma (36%) y hongos no especificados (33%), de ésta última se pueden
encontrar esporas, hifas y/o levaduras, mientras que el resto de hongos representan
un número menor, de los cuales el aspergillus se halla en menor frecuencia (3%).
40
Tabla 14
Identificación de los microorganismos micóticos por tinción de PAS y Grocott en el
Servicio de Anatomía Patológica del Hospital de Especialidades Eugenio Espejo
en el período 2015
Tinción de PAS Tinción de Grocott
Microorganismos N° de Porcentaje de N° de Porcentaje de
micóticos microorganismos/Total PAS con microorganismos/Total Grocott con
de microorganismos microorganismos de microorganismos microorganismos
CANDIDA 4/33 12,1% 3/33 9,1%
HISTOPLASMA 10/33 30,3% 6/33 18,2%
CRYPTOCOCCUS 3/33 9,1% 3/33 9,1%
ASPERGILLUS 0/33 0,0% 1/33 3,0%
HONGOS NO
7/33 21,2% 8/33 24,2%
ESPECIFICADOS
Gráfico 14
Identificación de los microorganismos micóticos por tinción de PAS y Grocott en el
Servicio de Anatomía Patológica del Hospital de Especialidades Eugenio Espejo
en el período 2015
10
10
8
8 7
6
6
4
4 3 3 3
2 1
0
0
CANDIDA HISTOPLASMA CRYPTOCOCCUS ASPERGILLUS HONGOS NO
ESPECIFICADOS
PAS GROCOTT

En la tabla 14 y el gráfico 14 se puede demostrar que la tinción de PAS identificó

un mayor número de hongos de tipo Histoplasma (30%), mientras que la tinción de
Grocott mostró en su mayoría hongos no especificados (24%). El resto de
microorganismos micóticos como cándida, criptococos y aspergillus tienen
porcentajes en su mayoría similares (9% y 3%).
41
4.2 CONCLUSIONES
Basado en los resultados obtenidos en este estudio se concluye que:
1. Las tinciones histoquímicas mas frecuentes para identificar microorganismos son

las tinciones de PAS (14%) y Grocott (12%) con más de la mitad de los casos
identificados, y la que menor identificación tiene es la tinción de Ziehl-Neelsen (1%).
La Tinción de PAS tuvo un papel protagónico en la identificación de
microorganismos micóticos como histoplasma y cándida, mientras que la tinción
Grocott no identificó hongos específicos sino la fase en la que se presentaron (hifas,
levaduras, esporas).
2. Los microorganismos con mayor frecuencia identificados por medio de las

tinciones histoquímicas fueron los hongos. Los microorganismos menos frecuentes
son las bacterias alcohol-ácido resistentes (BAAR). El Histoplasma fue el
microorganismo micótico con mayor frecuencia identificado en los tejidos mediante
tinciones histoquímicas, seguido de hongos en fase de hifas, levaduras y esporas,
se debe destacar que por cada 2 casos de histoplasma se pudo identificar uno de
cándida en los tejidos.
3. En relación al origen de las muestras se concluye que las de tipo digestivo son
las que más predominan para realizar tinciones histoquímicas seguidas de tejidos
de piel. La Tinción histoquímica de PAS fue utilizada preferentemente en los tejidos
de tipo digestivos, Ziehl-Neelsen para muestras provenientes del tracto respiratorio
y Grocott para tejidos de piel.
42
4.3 RECOMENDACIONES
Acorde a las conclusiones se puede hacer las siguientes recomendaciones:
1. Estandarizar el uso de las tinciones histoquímicas en base a la clínica de los

pacientes
2. En el caso de sospecha de infección micótica se debería emplear el uso de las

tinciones PAS y Grocott la cual daría mayor sensibilidad para identificar éstos
microorganismos.
3. Sí la sospecha clínica es de infección por BAAR se debe realizar la tinción de las

muestras con Ziehl-Neelsen para comprobar su presencia.
4. Si la impresión diagnóstica es de parasitosis en los tejidos se recomendaría el

empleo de la tinción PAS.
5. Capacitar al personal sanitario que emplea o solicita el uso de las tinciones

histoquímicas, ya que se evidenció un sobre uso de las mismas. Los reportes con
microorganismos fueron bajos en comparación al uso, y cabe resaltar que la
realización de biopsias u otros procedimientos son procesos invasivos y el empleo
de estas herramientas representa más costos.
43
CAPITULO V
PROPUESTA
5.1 DESCRIPCIÓN
La utilización de tinciones histoquímicas para poder diagnosticar e identificar

infecciones por microorganismos, es relativamente alta en relación a la positividad
que pueden tener estas tinciones, en especial la utilización de la tinción de Ziehl-
Neelsen que tuvo una positividad baja (1%) según los resultados arrojados en este
estudio en el año 2015, la cual nos lleva a plantear a modo de sugerencia que el
uso de tinciones histoquímicas soporte un mejor criterio, ya que en su mayoría los
pedidos de éstas tinciones al parecer no se fundamentan en la clínica del paciente.
Esta propuesta también incluye la necesidad de normatización y estandarización

de las técnicas de tinciones histoquímicas en todos los laboratorios de
histopatología, en especial a las tinciones más comúnmente utilizadas para la
identificación de microorganismos como son PAS, Grocott y Ziehl-Neelsen.
5.2 JUSTIFICACIÓN
La importancia en este trabajo sobre las tinciones histoquímicas permite hacer un

análisis sobre la frecuencia con la que fueron utilizas las tinciones de PAS, Grocott
y Ziehl-Neelsen y la ayuda que significa al dar un diagnóstico diferencial con otras
patologías. Las circunstancias en las que se solicitan las tinciones histoquímicas al
parecer no emplean buenos criterios al momento de tomar una decisión, por ello la
importancia de emplear normas para la solicitud de estas tinciones. Existen
organizaciones internacionales que establecen estándares para la histopatología y
definiciones de éstas a la hora de tomar decisiones en especial cuando se
sospecha de infecciones micóticas, de las cuales se puede mencionar a la “BSMM
Standards of Care” como una opción para la normatización en los casos de
44
infecciones de este tipo de microorganismos. De igual manera la utilización de la
tinción Ziehl-Neelsen requiere normas y guías estandarizadas que ayuden en el
diagnóstico, ya que como se puede apreciar en los resultados de este estudio fue
la segunda más utilizada y la que menos positividad obtuvo, y por lo consiguiente
generaría gastos innecesarios a la institución, y se reduciría el tiempo de espera de
un resultado, ya que con estas normas solo se realizaría el estudio histopatológico
con las tinciones histoquímicas cuando realmente las ameriten.
5.3 BENEFICIARIOS
Los beneficiarios en este caso son todos los profesionales de la salud incluidos los
médicos Patólogos e Histotecnólogos que pueden beneficiarse de los resultados
obtenidos para una toma de decisiones a la hora de solicitar una tinción histoquímica
en pro de la mejora del servicio de salud y recursos, y eventualmente los pacientes
que acuden al hospital de Especialidades Eugenio Espejo ya que tendrán un mejor
pronóstico en sus resultados.
5.4 TRIPTICO DE DIFUSIÓN
45
GROCOTT. Visualiza microorganismos
UNIVERSIDAD CENTRAL ¿QUÉ SON LAS TINCIONES micóticos de color de marrón a negro.
HISTOQUIMICAS?
DEL ECUADOR
Las tinciones histoquímicas comprenden un
FACULTAD DE CIENCIAS MÉDICAS conjunto de técnicas utilizadas para poner de
manifiesto la naturaleza química de los
CARRERA DE LABORATORIO
componentes tisulares y/o celulares. Se recurre al
CLINÍCO E HISTOTECNOLÓGICO uso de estas tinciones histoquímicas cuando se
necesita evidenciar estructuras determinadas. ZIEHL-NEELSEN. Visualiza micobacterias
Sustancias específicas, microorganismos, etc. alcohol-ácido resistente de color rojo
brillante.
OBJETIVO DE LAS TINCIONES
HISTOQUIMICAS
El objetivo de las técnicas histoquímicas es poner

en evidencia una molécula o familia de moléculas
que se encuentran en una sección de tejido y
observar su distribución tisular "in situ".
MICROORGANISMOS IDENTIFICADOS CON
LAS TINCIONES MÁS UTILIZADAS PARA MAYOR FRECUENCIA
“TINCIONES HISTOQUIMICAS PAS, LA IDENTIFICACIÓN DE Se encuentran microorganismos micóticos
GROCOTT Y ZIEHL-NEELSEN como:
MICROORGANISMOS  Hifas, levaduras, esporas
UTILIZADAS PARA IDENTIFICAR
 Histoplasma
MICROORGANISMOS EN EL HOSPITAL PAS. Visualiza carbohidratos como glucógeno,
 Cándida albicans
DE ESPECIALIDADES EUGENIO ESPEJO microorganismos micóticos y parásitos.
¿EN QUE CASOS SE SUGIERE SOLICITAR
EN EL AÑO 2015” UNA TINCIÓN HISTOQUIMICA?
En tejidos obtenidos de pacientes
Autor: RICARDO MESTANZA
inmunocomprometidos y de otros pacientes
con apreciación de infección microbiana.
TUTORA: MSc. Yolanda Paredes
Reacciones granulomatosas, invasión
Quito, 2016 vascular, necrosis, infarto trombosis.
Inflamación con hiperplasia epitelial y
abscesos dentro de la epidermis, deberían
ser analizados mediante tinciones
histoquímicas.
BIBLIOGRAFÍA
1. Acuña Fernández, U., & Elguero Bertolini, J. (2012). Histoquímica. Anales de la Real Sociedad
Española de Química, 114-118. Recuperado el 04 de 02 de 2016, de
http://dialnet.unirioja.es/servlet/articulo?codigo=3959325
2. Adenis, A., Aznar, C., & Couppié, P. (2014). Histoplasmosis in HIV-Infected Patients: A Review
of New Developments and Remaining Gaps. Current Tropical Medicine Reports, 1 (2): 119-
128. Recuperado el 17 de Julio de 2016, de
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4030124/
3. Brooks, G. F., & Carroll, K. C. (2011). BACTERIOLOGÍA. En M. Y. JAWETZ, MICROBIOLOGÍA

MÉDICA DE JAWETZ (pág. 289). México: McGRAW-HILL INTERAMERICANA.
4. CDC. (21 de Noviembre de 2015). Histoplasmosis. Recuperado el 16 de Julio de 2016, de

Centers for Disease Control and Prevention (CDC):
http://www.cdc.gov/fungal/diseases/histoplasmosis/
5. Ceccotti, E. L., Sforza, R. R., Carzoglio, J. C., Luberti, R., & Flichman, J. C. (2007). El Diagnóstico
en Clínica Estomatológica. Buenos Aires: Panamericana.
6. Cediel, j., Cárdenas, M., García, A., Chuaire, L., PAYÁN, C., Villegas , V., & Sánchez, C. (2009).
Manual de Histología Tejidos Fundamentales. Bogotá: Universidad del Rosario.
7. de Ferraris Gómez, M. E. (2009). Métodos y Técnicas Histológicas e Histoquímicas. En M. E.

Ferraris, Histología, Embriología e Ingeniería Tisular Bucodental (pág. 18). Mexico: Médica
Panamericana.
8. Dudeja, P. G., Dudeja, K. K., Srivastava, D., & Grover, S. (2016). Microorganisms in
periradicular tissues: Do they exist?. Journal of Oral and Maxillofacial Pathology, 19(3): 356–
363. Obtenido de http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4774290/
9. Ellis, D. (13 de 07 de 2016). Grocott's Methenamine Silver (GMS) stain. Obtenido de

Micology online:
http://www.mycology.adelaide.edu.au/Laboratory_Methods/Microscopy_Techniques_an
d_Stains/gms.html
10. Fernández Andreu, C., Illnait, M., Martínez, G., Perurena , M., & Monroy , E. (2011). Una
actualización acerca de histoplasmosis. Revista Cubana de Medicina Tropical, 63(3), 189-
205. Recuperado el 17 de Julio de 2016, de
http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0375-
07602011000300001&lng=es&tlng=es
47
11. García Espinoza, B., Campal Rubio, F., & Crespo González, M. R. (2015). Técnicas de Análisis
Hematológicas. Madrid: Paraninfo.
12. García, M. J., Cárdenas, M., & Urbano, A. (2012). Manual de laboratorio de microbiología
para el diagnostico de infecciones respiratorias. Online: OmniaScience.
13. Giri, D. (23 de Marzo de 2015). Periodic Acid Schiff (PAS) Staining Technique For
Carbohydrates. Recuperado el 4 de Julio de 2016, de LaboratoryInfo:
http://laboratoryinfo.com/periodic-acid-schiff-pas-staining-technique-for-carbohydrates/
14. Giri, D. (16 de Enero de 2016). Ziehl-Neelsen Stain (ZN-Stain) : Principle, Procedure,
Reporting and Modifications. Obtenido de LaboratoryInfo: http://laboratoryinfo.com/zn-
stain/
15. Guarner, J., & Brant, M. E. (2011). Histopathologic Diagnosis of Fungal Infections in the 21st
Century. Clinical Microbiology Reviews, 247-280. Recuperado el 17 de Julio de 2016, de
16. Hajar Serviansky, T., Kresch Tronik, N. S., Moreno Coutiño, G., Arenas, R., & Vega Memije,
M. (2013). Utilidad de la tinción PAS para el diagnóstico histopatológico. Dermatología
Cosmética, Médica y Quiruúgica, 11(1): 13-18. Obtenido de http://dcmq.com.mx/edicion-
enero-marzo-2013-volumen-11-n%C3%BAmero-1/121-utilidad-de-la-tincion-pas-para-el-
diagnostico-histopatologico
17. Instituto de Patología de las Fuerza Armadas de los Estados Unidos de América. (1995).
Métodos Histotecnológicos. Washintong D.C: Registro de Patología de los Estados Unidos
de América.
18. IQWiG. (15 de Enero de 2015). What are microbes? Obtenido de Pubmed Health:
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmedhealth/PMH0072571/
19. Lee, H. J., Kurbanyan, K., & Hamrah, P. (2011). Condiciones Sistemicas Relacionadas a la
Córnea. En S. Boyd, A. M. Gutiérrez, & J. P. McCulley, Atlas y Texto de Patología y Cirugía
Corneal (pág. 141). Panamá: Japee-Highlights Medical Publishers.
20. Lowe, J. S., & Anderson, P. G. (2015). Histología Humana. Barcelona: ELSEVIER.
21. MacAdam, A. J., & Sharpe, A. H. (2013). Patología general de las enfermedades infecciosas.
En V. Kumar, A. K. Abbas, & J. C. Aster, Patología humana de Robbins Novena edición (pág.
313). Barcelona: Elsevier.
22. Mayayo Artal, E. (2004). Diagnóstico histopatológico de las micosis. Revista Iberoamericana
de Micología, 21: 1-19. Recuperado el 5 de Diciembre de 2015, de
http://www.reviberoammicol.com/2004-21/001009.pdf
48
23. Megías, M., Molist, P., & Pombal, M. Á. (27 de 02 de 2015). HISTOQUÍMICA. Recuperado el
22 de 11 de 2015, de Atlas de histología vegetal y animal. Universidad de Vigo España:
http://mmegias.webs.uvigo.es/6-tecnicas/5-histoquimica.php
24. Microbiology Society. (2016). Microbes and disease. Obtenido de Microbiology Online:
http://www.microbiologyonline.org.uk/about-microbiology/microbes-and-the-human-
body/microbes-and-disease
25. Miquel, R. (2012). Infecciones por hongos y parásitos. En J. Ordi, Anatomía Patológica
General (págs. 259-274). Barcelona: Universitat.
26. Murray, P. R., Rosenthal, K. S., & Pfaller, M. A. (2013). Microbiología médica dE Murray 7ma.
edición. Barcelona: Elsevier.
27. Myers, R. (2016). Special Stain Techniques for the Evaluation of Mucins. Recuperado el 04
de 02 de 2016, de Leica Biosystems:
http://www.leicabiosystems.com/pathologyleaders/special-stain-techniques-for-the-
evaluation-of-mucins/
28. Negroni, M. (2009). Microbiología Estomatológica. Buenos Aires: Panamericana.
29. Nowaseb, V., Gaeb , E., Fraczek , M., Richardson , M., & Denning , D. (Marzo de 2014).
Frequency of Pneumocystis jirovecii in sputum from HIV and TB patients in Namibia. The
Journal of Infection in Developing Countries, 349-57. Obtenido de
http://www.jidc.org/index.php/journal/article/view/24619267
30. OMS. (2015). Leishmaniasis. . Recuperado el 17 de Julio de 2016, de WHO:

http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs375/es/
31. Parry, N. (9 de Octubre de 2012). Why Pick PAS for Histology? Recuperado el 17 de Julio de
2016, de bitesizeBio: http://bitesizebio.com/13413/why-pick-pas-for-histology/
32. Parry, N. (19 de Febrero de 2013). How To Find Fungi In Your Histology Samples- Go For
GMS! Recuperado el 19 de Julio de 2016, de BitesizeBio:
http://bitesizebio.com/13430/why-go-for-gms/
33. Pujar, A., Pereira, T., Tamgadge, A., Bhalerao, S., & Tamgadge, S. (2015). Comparing The
Efficacy of Hematoxylin and Eosin, Periodic Acid Schiff and Fluorescent Periodic Acid Schiff-
Acriflavine Techniques for Demonstration of Basement Membrane in Oral Lichen Planus: A
Histochemical Study. Recuperado el 21 de Noviembre de 2015, de Indian Journal
Dermatology. 60(5): 450–456.: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4601410/
34. Ramos Jiménez, J. (2012). Infectología Clínica. Mexico : Manual Moderno.
49
35. Resino , S. (27 de Febrero de 2015). Histoquímica y citoquímica. Recuperado el 23 de 11 de
2015, de Epidemiología Molecular de Enfermedades Infecciosas:
http://epidemiologiamolecular.com/histoquimica-citoquimica/
36. Ribet, D., & Cossart, P. (2015). How bacterial pathogens colonize their hosts and invade
deeper tissues. Microbes and Infection, Pages 173–183. Recuperado el 16 de Julio de 2016,
de http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S1286457915000179
37. Ross, M. H., & Pawlina, W. (2012). Histología Texto y Atlas color con Biología Celular y
Molecular. Buenos Aires: Médica Panamericana.
38. Roy, S. (2016a). Pathology of Actinomycosis. Recuperado el 17 de Julio de 2016, de

histopathology-india.net: http://www.histopathology-india.net/actino.htm
39. Roy, S. (2016b). Pathology of Amebiasis (Entamoeba Histolytica Infection). Recuperado el

17 de Julio de 2016, de histopathology-india.net: http://www.histopathology-
india.net/amco.htm
40. Sequeira de Latini, M., & Barrera, L. (2012). MANUAL PARA EL DIAGNÓSTICO
BACTERIOLÓGICO DE LA TUBERCULOSIS. Online: ORGANIZACIÓN PANAMERICANA DE LA
SALUD.
41. Shiogama, K., Kitazawa, K., Mizutani, Y., Onouchi, T., Inada, K.-i., & Tsutsumi, Y. (28 de 02 de
2015). New Grocott Stain without Using Chromic Acid. The Japan Society of Histochemistry
and Cytochemestry, No. 1 p. 9-14. Recuperado el 04 de 02 de 2016, de
https://www.jstage.jst.go.jp/article/ahc/48/1/48_14045/_article/references
42. Stevens, A., & Lowe, J. S. (2006). Ténicas empleadas en Histología y Biología Celular. En A.
Stevens, & J. S. Lowe, Histología Humana (pág. 5). Barcelona: ELSEVIER.
43. Valour, F., Sénéchal, A., Dupieux, C., Karsenty, J., Lustig, S., Breton, P., . . . Ferry, T. (2014).
Actinomycosis: etiology, clinical features, diagnosis, treatment, and management. Infection
and Drug Resistance, 183-197. Obtenido de
44. Walwyn Salas, V., Iglesias Duquesne, M., Almarales, M. R., Acosta Tieles, N., Mera
Fernández, A., & Cabrejas Acuña, M. O. (30 de 01 de 2004). Utilidad de técnicas histológicas
para el diagnóstico de infección en piezas anatómicas. Revista Cubana de Medicina Militar,
33(2). Recuperado el 21 de Noviembre de 2015, de
http://bvs.sld.cu/revistas/mil/vol33_2_04/mil06204.htm
45. World Heritage Encyclopedia. (14 de Julio de 2016). Grocott's methenamine silver stain.
Obtenido de World Public Library Association:
http://gejl.info/articles/Grocott's_methenamine_silver_stain
50
Otros
Tipo de Tinción Tinción Tinción Ziehl- Microorganism Casos
N° de caso Edad Sexo microorganismos
tejidos PAS Grocott Neelsen os VIH
no especificados
ANEXO 1. HOJA DE RECOLECCIÓN DE DATOS
ANEXOS
51
ANEXO 2. HOJA DE PEDIDO DE TINCIONES HISTOQUÍMICAS
Fuente: Lab. Anatomía Patológica HEEE, 2016
ANEXO 3. LIBRO DE TÉCNICAS DE TINCIONES HISTOQUÍMICAS
52
ANEXO 4. PLACAS COLOREADAS CON LAS TINCIONES HISTOQUÍMICAS
PAS, GROCOTT Y ZIEHL-NEELSEN
53
ANEXO 5. CRONOGRAMA DEL PROYECTO
FECHA ACTIVIDAD
Presentación del protocolo. Realización de trámites
para la aceptación del proyecto en el HEE. Primera
FEBRERO búsqueda y recolección de datos.
Recolección de datos del HEE. Realización del

MARZO marco teórico.
Búsqueda de información para el marco teórico.

Recolección de datos del HEE. Revisiones y
ABRIL
correcciones
Culminación de la recolección de datos. Primeros

MAYO análisis estadísticos
Análisis de los datos estadísticos. Tabulación de

JUNIO datos.
Revisiones de los datos que cumplan con los
JULIO objetivos planteados. Correcciones finales de la
tesis
Presentación del informe final del Trabajo de Fin

AGOSTO de Carrera
54

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UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR

FACULTAD DE CIENCIAS MÉDICAS

CARRERA DE LABORATORIO CLÍNICO E HISTOTECNOLÓGICO

"Frecuencia de las tinciones histoquímicas de PAS, Grocott y Ziehl-

Trabajo de Titulación presentado previo a la obtención del Título de licenciado en

Mestanza Hurtado Ricardo Gabriel

TUTORA: MSc. Yolanda del Rocío Paredes Jiménez

Quito, Octubre 2016

Dedico con mucho amor a mis padres por el esfuerzo que

Mi agradecimiento infinito por todo lo conseguido a Dios, por las

Agradezco de manera especial a mi madre que fue la persona que

Un agradecimiento sincero al personal del servicio de Anatomía

Yo, Ricardo Gabriel Mestanza Hurtado en calidad de autor del Proyecto de

Los derechos que como autor me corresponden, con excepción de la presente

Quito, 28 de Julio del 2016

Ricardo Gabriel Mestanza

En mi calidad de Tutora del Trabajo de Titulación, presentado por RICARDO

En la ciudad de Quito, a los 29 días del mes de Julio de 2016.

MSc. Yolanda del Rocío Paredes Jiménez

Los miembros del Tribunal Examinador aprueban el informe de titulación

Para constancia certifican,

MSc. Bernardita Ulloa MSc. Lucrecia Pabón

MSc. Carmen Salvador

IMAGEN 1. TINCIÓN PAS. ASPERGILLUS ......................................................... 10

TABLA 1. DISTRIBUCIÓN DE LAS TINCIONES HISTOQUÍMICAS REALIZADAS

GRÁFICO 1. DISTRIBUCIÓN DE LAS TINCIONES HISTOQUÍMICAS

ANEXO 1. HOJA DE RECOLECCIÓN DE DATOS............................................... 51

Autor: Ricardo Gabriel Mestanza Hurtado

Tutora Académica: MSc. Yolanda Paredes

Este estudio descriptivo transversal permitió determinar la frecuencia de las

PALABRAS CLAVES: PAS / GROCOTT / ZIEHL-NEELSEN /

Author: Ricardo Gabriel Mestanza Hurtado

Academic Tutor: MSc. Yolanda Paredes

This cross-sectional descriptive study allowed determinig the frequency of

KEYWORDS: PAS / GROCOTT / ZIEHL-NEELSEN / MICROORGANISM

La terminología "coloración especial" es empleada con más frecuencia en el ámbito

Se abarcan dentro de las coloraciones histoquímicas aquellas que impliquen

Durante el procesamiento del tejido previo a la reacción histoquímica, como la

En ciertas ocasiones es imprescindible ejecutar pasos antes de la reacción

Ya en la práctica se utiliza la palabra histoquímica para elegir el método que

Se ha tenido innumerables avances en la medicina moderna, el empleo de

En éste trabajo se trata de describir la utilización de estas tinciones histoquímicas,

1.1 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Uno de los procedimientos que son importantes dentro del Laboratorio de

Las tinciones “especiales” se utilizan principalmente para apoyar en el diagnóstico

Estas técnicas de tinciones histoquímicas como son PAS, plata-metenamina

En algunos estudios realizados en México, la tinción PAS se utilizó en un 5% de los

Por lo expuesto anteriormente la formulación del problema de este proyecto de

1.2.1 OBJETIVO GENERAL

Determinar la frecuencia de las tinciones histoquímicas de PAS, Grocott y Ziehl-

1.2.2 OBJETIVOS ESPECIFICOS

 Distribuir los casos de tinciones histoquímicas por grupo de edades y sexo

Las técnicas de coloración histoquímica son de gran ayuda en el diagnóstico

Ante la importancia que aún tiene la utilización de las coloraciones histoquímicas

Los resultados obtenidos en este estudio pueden constituirse en las herramientas

2.1 TINCIONES HISTOQUÍMICAS

Las tinciones histoquímicas se fundamentan en la unión de las moléculas de un

La histoquímica son técnicas de tinción histológicas que utilizamos a menudo para

Las tinciones histológicas son de uso general como es el caso de la tinción

2.2 TINCIÓN DE PAS (ÁCIDO PERYÓDICO DE SCHIFF)

La técnica de tinción de PAS tiene muchas utilidades en lo que respecta a la

2.2.1 FUNDAMENTO DE LA TINCIÓN PAS

La reacción de la técnica de PAS se basa en la demostración de monosacáridos y