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INDICE

1. INTRODUCCION

2. ASPECTOS TEORICOS

3. CONTENIDO

3.1. AGAR NUTRITIVO

3.1.1 COMPOSICION DEL AGAR

3.1.2 CARACTERISTICAS DEL AGAR

3.1.3 CONDICIONES PARA SU USO

3.1.4 A QUE TIPO DE MICROORGANISMOS VA DIRIGIDO

3.2. AGAR SANGRE

3.2.1 COMPOSICION DEL AGAR

3.2.2 CARACTERISTICAS DEL AGAR

3.2.3 CONDICIONES PARA SU USO

3.2.4 A QUE TIPO DE MICROORGANISMOS VA DIRIGIDO

3.3. AGAR MACCONKEY

3.3.1 COMPOSICION DEL AGAR

3.3.2 CARACTERISTICAS DEL AGAR

3.3.3 CONDICIONES PARA SU USO

3.3.4 A QUE TIPO DE MICROORGANISMOS VA DIRIGIDO

3.4. AGAR CHOCOLATE

3.4.1 COMPOSICION DEL AGAR

3.4.2 CARACTERISTICAS DEL AGAR

3.4.3 CONDICIONES PARA SU USO

3.4.4 A QUE TIPO DE MICROORGANISMOS VA DIRIGIDO

3.5. AGAR SS

3.5.1 COMPOSICION DEL AGAR

3.5.2 CARACTERISTICAS DEL AGAR

3.5.3 CONDICIONES PARA SU USO


3.5.4 A QUE TIPO DE MICROORGANISMOS VA DIRIGIDO

3.6. AGAR MUELLER-HINTON

3.6.1 COMPOSICION DEL AGAR

3.6.2 CARACTERISTICAS DEL AGAR

3.6.3 CONDICIONES PARA SU USO

3.6.4 A QUE TIPO DE MICROORGANISMOS VA DIRIGIDO

3.7. AGAR LÖWENSTEIN-JENSEN

3.7.1 COMPOSICION DEL AGAR

3.7.2 CARACTERISTICAS DEL AGAR

3.7.3 CONDICIONES PARA SU USO

3.7.4 A QUE TIPO DE MICROORGANISMOS VA DIRIGIDO

3.8. CHROMAGAR CANDIDA

3.8.1 COMPOSICION DEL AGAR

3.8.2 CARACTERISTICAS DEL AGAR

3.8.3 CONDICIONES PARA SU USO

3.8.4 A QUE TIPO DE MICROORGANISMOS VA DIRIGIDO

4. CONCLUSION

5. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

6. ANEXOS
INTRODUCCION
Los medios de cultivo son una parte muy importante en el estudio de microorganismos ya que nos
permiten sembrarlos y aislarlos, otorgándoles un medio apto para tu desarrollo y nutrición. Con los
cultivos obtenidos se puede inferir de que microorganismo se trata por el olor, color y morfología de la
colonia y con esto incluso si es patógeno o micro biota normal.

El medio solido es el principal utilizado, el cual está compuesto por agar-agar, extractos de carne, y
demás sustancias que asemejan a las presentes en el cuerpo humano. Al momento de hacer un cultivo
elegir el tipo de agar en el que vas a sembrar es un paso importante ya que todos son diferentes en su
contenido (nutrientes, colorantes, inhibidores, etc.) y el de tu elección debe ser apto para el
microorganismo que vas a sembrar o que estás buscando identificar, ya que este puede quedar inhibido
si el tipo de agar que elegiste no es el correcto.

Por estas razones poseer información relevante respecto a los diferentes tipos de agares utilizados con
frecuencia en el área de microbiología, nos ayuda al momento de elegir el tipo adecuado de agar en el
cual sembrar nuestra muestra.

Esta información engloba: los componentes que contiene el agar (ver si estos favorecen o inhiben al MO
que buscamos cultivar), las condiciones de uso (su temperatura, presión y tiempo de incubación
adecuados, es primordial usarlo como se debe ya que una alteración en sus condiciones o preparación
nos puede llevar a resultados incorrectos), y los tipos de microorganismos a los que va dirigido, ya sea
por su género, o en el caso de bacterias si va dirigido a gram negativas o positivas (esto nos permite
identificar el microorganismo que crece en el cultivo).

Así como identificar las características de los agares a investigar, se podrá descubrir cuales son
selectivos (inhiben el crecimiento de unos y no de otras), no selectivos (se puede cultivar una amplia
variedad de Mo’s) y especializados (para grupos específicos).
ASPECTOS TEORICOS
El material alimenticio en el que crecen los microorganismos es el Medio de Cultivo y el crecimiento de
los microorganismos es el Cultivo. Este es uno de los sistemas más importantes para la identificación de
microorganismos es observar su crecimiento.

Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe reunir una serie de
condiciones como son: temperatura, grado de humedad y presión de oxígeno adecuado, así como un pH
específico. Un medio de cultivo debe contener los nutrientes y factores de crecimiento necesarios y estar
exento de todo microorganismo contaminante.

La base de muchos medios de cultivo es una infusión de extractos de carne y Peptona a la que se
añadirán otros ingredientes ya que mayoría de las bacterias patógenas requieren nutrientes complejos
similares a líquidos del cuerpo humano.

El agar es un elemento solidificante muy empleado para la preparación de medios de cultivo. Con
mínimas excepciones no tiene efecto sobre el crecimiento de las bacterias y no es atacado por aquellas
que crecen en él. En los diferentes medios de cultivo se encuentran numerosos materiales de
enriquecimiento como hidratos de carbono, suero, sangre completa, bilis, etc.

Los carbohidratos se adicionan para incrementar el valor nutritivo del medio y para detectar reacciones de
fermentación. El suero y la sangre completa se añaden para promover el crecimiento de los
microorganismos menos resistentes. También se añaden colorantes que actúan como indicadores para
detectar, por ejemplo, la formación de ácido o como inhibidores del crecimiento de unas bacterias y no de
otras.
CONTENIDO
1. AGAR NUTRITIVO
1.1 COMPOSICION DEL AGAR

Formula (en gramos por litro) // Ph final 7.3 +- 0.2

Pluripetona 5.0
Extracto de carne 3.0
Cloruro de sodio 8.0
Agar 15.0

1.2 CARACTERISTICAS DEL AGAR

El Agar nutritivo es un medio de cultivo usado normalmente como rutina para todo tipo de bacteria. Es
muy útil porque permanece sólido incluso a relativas altas temperaturas. Además, el crecimiento
bacteriano en este agar lo hace en la superficie, por lo que se distinguen mejor las colonias pequeñas. No
selectiva. Crecimiento entre moderado y denso, pigmentación de color verde. (gram negativo, aerobio
estricto). (Fig. 1).

Deshidratado: color beige claro, homogéneo, libre deslizamiento.

Preparado: color ámbar claro ligeramente opaco.

1.3 CONDICIONES PARA SU USO

Incubación: El tiempo, la temperatura, y la atmósfera de incubación, dependerán del microorganismo


que se quiera recuperar. En general se recomienda: Bacterias de fácil crecimiento: en aerobiosis, a
35-37º C durante 18 a 24 horas.

Bacterias exigentes en sus requerimientos nutricionales: en atmósfera con 5-10 % de C02 a 35-37 ºC
durante 24-48 horas.

1.4 A QUE TIPO DE MICROORGANISMOS VA DIRIGIDO

 Escherichia coli: Colonias grandes, crema, brillante y lisas (gram negativo, anaerobio facultativo) (fig.
2).
 Staphylococcus aureus: Colonias grandes ligeramente amarillas/ doradas, brillantes y lisas. (Gram
positiva, anaerobio facultativo, coagulasa positiva)
 Enterococcus faecalis: Colonias pequeñas, crema, opacas y lisas. (Gram positivas, anaerobios
facultativos)
 Shigella flexneri: crecimiento moderado a denso. (Gram negativa, aerobio).
 Pseudomona aeruginosa: Crecimiento entre moderado y denso, pigmentación de color verde. (gram
negativo, aerobio estricto)

2. AGAR SANGRE

2.1 COMPOSICION DEL AGAR


Formula por litro de agua destilada // pH 7,3 ± 0,2
Digerido pancreático de caseína 12,0 g
Digerido péptico de tejido animal 5,0
Extracto de levadura 3,0
Extracto de carne bovina 3,0
Almidón de maíz 1,0
Cloruro sódico 5,0
Agar 13,5
Sangre de carnero desfibrinada 5%
2.2 CARACTERISTICAS DEL AGAR
Es un medio de aislamiento primario, enriquecido en el cual crecen numerosos microorganismos como
Enterobacteriaceae, Pseudomonas y otros bacilos gram-negativos no fermentantes, estreptococos,
enterococos, estafilococos, corineformes, especies de Candida y muchos más. Se utiliza además para la
investigación de los diversos tipos de hemólisis (α, ß ó gamma) (fig. 3).
Hemólisis alfa: lisis parcial de los glóbulos rojos. Se observa un halo de color verdoso alrededor de la
colonia en estudio.
Hemólisis beta: lisis total de los glóbulos rojos. Se observa un halo claro, brillante alrededor de la colonia
en estudio.
Hemólisis gamma: ausencia de lisis de los glóbulos rojos. El medio de cultivo no presenta modificaciones
de color y aspecto alrededor de la colonia en estudio
Deshidratado: color beige claro, homogéneo, libre deslizamiento.
Preparado: color ámbar.
Sangre: color rojo cereza.
2.3 CONDICIONES PARA SU USO
Incubación: inmediatamente en condiciones anaerobias o colocar en un frasco de contención lleno de
gas(es) libres de oxígeno hasta que haya suficientes placas acumuladas pero sin superar las 3 hrs.
Proteger de la luz. La incubación debe ser a 35+- 2°C durante al menos 48 hrs y hasta un máximo de 7
días.
Bacterias de fácil crecimiento: en aerobiosis, a 35-37 °C hasta 48 hrs.
Bacterias exigentes en sus requerimientos nutrimentales: en atmósfera con 5% de CO2 a 35-37 °C
durante 24-48 hrs.
Tipo de muestra: Este es un medio universal de aislamiento que se puede utilizar con todos los tipos de
muestras clínicas incubadas en atmósfera aerobia.
2.4 A QUE TIPO DE MICROORGANISMOS VA DIRIGIDO
Streptococcus pyogenes: Crecimiento bueno o excelente, débil o adecuada hemólisis beta, colonias
blancas o grises de 1-2 mm rodeado de eritrocitos presentes en el medio.
Streptococcus pneumoniae: Crecimiento bueno o excelente producen un halo de hemólisis alfa
alrededor de sus colonias.
Staphylococcus aureus: Crecimiento bueno o excelente; puede ser o no beta hemolítico. (fig.4)
Escherichia coli: Crecimiento bueno o excelente; puede ser o no beta hemolítico.
3. AGAR MCCONKEY
3.1 COMPOSICION DEL AGAR

Fórmula* por litro de agua purificada // pH 7,1 ± 0,2


Digerido pancreático de gelatina 17,0 g
Digerido pancreático de caseína 1,5
Digerido péptico de tejido animal 1,5
Lactosa 10,0
Sales biliares 1,5
Cloruro sódico 5,0
Rojo neutro 0,03
Cristal violeta 0,001
Agar 13,5

3.2 CARACTERISTICAS DEL AGAR


Medio de cultivo color rojizo púrpura.
Es un medio de diferenciación selectivo para el aislamiento y la diferenciación de Enterobacteriaceae y
diversos otros bacilos gram negativos. Medio selectivo por contener sales biliares y violeta cristal que
inhiben el crecimiento de bacterias no entéricas. También es un medio diferencial porque contiene lactosa
y un indicador de pH (rojo neutro).
Microorganismos fermentadores de lactosa: colonias rosadasrojizas. Puede observarse halo de
precipitación biliar.
Microorganismos no fermentadores de lactosa: colonias del color del medio, incoloras. (fig.5)
3.3 CONDICIONES PARA SU USO
Incubación: En aerobiosis, protegidas de la luz, (no utilizar atmósfera enriquecida con CO2) a 35-37 ºC
durante 18-48 horas. Examinar las placas después de 18 – 24 h para comprobar la extensión del
crecimiento, el tamaño de las colonias, la pigmentación y la selectividad.
Tipos de muestras: puede utilizarse para todos los tipos de muestras clínicas y para una diversidad de
materiales no clínico.
3.4 A QUE TIPO DE MICROORGANISMOS VA DIRIGIDO
 Escherichia coli Crecimiento; colonias de color rosas-rojas.
 Proteus mirabilis Crecimiento; colonias de incoloras a color beige, agrupamiento dinámico inhibido.
 Salmonella Typhimurium Crecimiento; colonias de incoloras a color beige.
 Salmonella Abony Crecimiento; colonias de incoloras a color beige.
 Shigella flexneri Crecimiento; colonias incoloras.
 Enterococcus faecalis Inhibición de parcial a completa.
4. AGAR CHOCOLATE
4.1 COMPOSICION DEL AGAR
Fórmula* por litro de agua purificada
Extracto de carne bovina 2,0 g
Hidrolizado ácido de caseína 17,5
Almidón 1,5
Hemoglobina 10,0
Agar 0,013

4.2 CARACTERISTICAS DEL AGAR


Medio de cultivo color marrón.
Medio no selectivo enriquecido en el que crecen bacterias exigentes y no exigentes, incluidas la flora
normal. Por consiguiente, se recomienda inocular las muestras también en medios selectivos adecuados.
El término “bacterias exigentes” se refiere a las bacterias que no crecen o no crecen bien en los medios
de aislamiento primario utilizados normalmente con sangre de carnero.
El medio de cultivo es ampliamente nutritivo por la presencia de peptona, tripteína, extracto de levadura,
extracto de corazón y almidón.
4.3 CONDICIONES PARA SU USO
Incubación: Incubar las placas a una temperatura de 35 ± 2 °C en una atmósfera aerobia con dióxido de
carbono. Efectuar lectura de las placas después de 18 – 24 h y 42 – 48 h de incubación.
Bacterias de fácil crecimiento: en aerobiosis, a 35-37 º C durante 18 a 24 horas.
Bacterias exigentes en sus requerimientos nutricionales: en atmósfera con 5 % de Co2, a 35-37 ºC
durante 18-48 horas.
Tipos de muestras: Puede utilizar para todo tipo de muestras clínicas potencialmente infectadas con
organismos exigentes, en especial las muestras de zonas corporales esencialmente estériles y como
medio de subcultivo de hemocultivos.
4.4 A QUE TIPO DE MICROORGANISMOS VA DIRIGIDO
 Haemophilus influenzae: Pequeñas, húmedas, nacaradas con un olor de "ratón" característico.
Neisseria gonorrhoeae: Pequeñas, de color blanco grisáceo a incoloro, mucoides. (fig 6.)
 Neisseria meningitidis: Medianas a grandes, gris azulado, mucoides.
 Streptococcus pneumoniae: Colonias pequeñas, planas o más grandes, mucoides Verdosas, las
colonias circundantes pueden ser verdosas.
5. AGAR SS
5.1 COMPOSICION DEL AGAR

Fórmula por litro de agua purificada // pH 7,2 ± 0,2


Extracto de carne bovina 5,0 g
Digerido pancreático de caseína 2,5
Digerido péptico de tejido animal 2,5
Lactosa 10,0
Sales biliares 8,5
Citrato sódico 8,5
Tiosulfato sódico 8,5
Citrato férrico 1,0
Rojo neutro 0,025
Agar 13,5
Verde brillante 0,330 mg

5.2 CARACTERISTICAS DEL AGAR

Deshidratado: Polvo fino, Rosáceo.

Preparado: Estéril, Rojo-naranja.

Es un medio selectivo y de diferenciación para el aislamiento de bacilos entéricos patógenos, en


especial los pertenecientes al género Salmonella, a partir de muestras clínicas. Se le considera un medio
moderadamente selectivo según el nivel de inhibición de los microorganismos gram positivos y
Enterobacteriaceae diferentes de Salmonella y Shigella, que inhibe por contenido de sales biliares, verde
brillante y citratos.

Los organismos que fermentan lactosa producen ácido que, en presencia del indicador rojo neutro,
propicia la formación de colonias de color rojo. Los organismos no fermentadores de lactosa forman
colonias incoloras. El tiosulfato sódico y el citrato férrico permiten la detección de producción de ácido
sulfhídrico, como lo demuestran las colonias con centros de color negro.

5.3 CONDICIONES PARA SU USO

Almacenamiento: almacenar en un lugar oscuro a una temperatura entre 2 y 8 °C, envueltas en su


envase original, hasta justo antes de usarlas. Evitar la congelación y el calentamiento excesivo.

Incubación: protegidas de la luz, condiciones aerobias a una temperatura entre 35 y 37 °C, por un
período de 18 a 24 horas.

Tipos de muestras: muestras fecales o torundas rectales de pacientes en los que hay sospecha de una
infección entérica bacteriana

5.4 A QUE TIPO DE MICROORGANISMOS VA DIRIGIDO


Salmonella Shigella Agar es uno de los medios recomendados para el aislamiento de las especies
Salmonella a partir de muestras fecales humanas. Este medio no se recomienda para el aislamiento de
Shigella.

 Escherichia coli : Crecimiento ligero, color rosa o rojo


 Enterococcus faecalis: Crecimiento leve, color rosa
 Salmonella Typhimurium: Incoloro, generalmente con centro de color negro (fig.7)
 Shigella flexneri : Crecimiento de adecuado a excelente; colonias de color de rosa claro a incoloras

6. AGAR MUELLER-HINTON
6.1 COMPOSICION DEL AGAR

Fórmula por litro de agua purificada // pH 7,3 +/- 0,2

Extracto de carne bovina 2,0 g


Hidrolizado ácido de caseína 17,5
Almidón 1,5
Agar 17,0
6.2 CARACTERISTICAS DEL AGAR

Deshidratado: color beige, homogéneo, libre deslizamiento.

Preparado: color ámbar claro.

Ha sido uno de los primeros medios utilizados en microbiología, tiene utilidad en el mantenimiento y
transporte de cultivos puros. Es el medio recomendado para la realización de pruebas de sensibilidad a
antibióticos. Es un medio estándar utilizado para la prueba de sensibilidad de bacterias aerobias de
rápido crecimiento o anaerobias facultativas, como estafilococos, enterococos, miembros de la especie
Enterobacteriaceae y bacilos gram negativos aerobios.

Utilizado en forma rutinaria en la realización del antibiograma (fig. 8) (cálculo de la Concentración Mínima
Inhibitoria de antibióticos para la cepa problema) la mayoría de los patógenos microbianos crece
satisfactoriamente. Cuando se suplementa con sangre de carnero al 5%, permite realizar las pruebas de
sensibilidad a los antimicrobianos en especies de estreptococos. También, con el agregado de
sangre puede utilizarse para el cultivo y aislamiento de microorganismos nutricionalmente exigentes.
6.3 CONDICIONES PARA SU USO

La reducción excesiva de este medio debido a la deshidratación puede causar resultados de sensibilidad
falsos.

Almacenamiento: en un lugar oscuro a una temperatura de 2 a 8 °C. Evitar la congelación y el


sobrecalentamiento.
Incubación: preferiblemente en posición invertida, deben analizarse al menos dos veces por semana
para determinar el rendimiento adecuado. La lectura se realiza entre 18-24 h, adecuado únicamente para
bacterias patógenas de rápido crecimiento.

Temperatura de 35 a 37 °C y de 16 a 20h dependiendo la cepa y el agente microbiano.

Tipos de muestras: análisis de sensibilidad de cultivos puros que se han aislado a partir de muestras
clínicas.

6.4 A QUE TIPO DE MICROORGANISMOS VA DIRIGIDO

La fórmula de Mueller Hinton fue desarrollada originalmente como un medio de agar sencillo y
transparente para el cultivo de la Neisseria patógena.

Escherichia coli

Enterococcus faecalis

Staphylococcus aureus

Pseudomonas aeruginosa

Se han desarrollado diferentes procedimientos y otros medios y condiciones para analizar las especies
exigentes: Haemophilus spp., Neisseria spp. y Streptococcus pneumoniae, y estreptococos.

7. AGAR LOWENSTEIN-JENSEN
7.1 COMPOSICION DEL AGAR

Fórmula aproximada por 600 mL de agua purificada

Fécula de patata 30,0 g


L asparagina 3,6
Citrato sódico 0,6
Fosfato mono potásico 2,5
Sulfato magnésico 0,24
Verde Malaquita 0,4
Huevos enteros 1000,0 ml
Glicerol 12,0 ml
7.2 CARACTERISTICAS DEL AGAR

Medio de cultivo color verde pálido, opaco.(fig.9)

Los nutrientes de este medio de cultivo constituyen un rico soporte para el crecimiento de una gran
variedad de micobacterias excepto Mycobacterium leprae. El verde de malaquita inhibe el desarrollo de la
flora acompañante Gram positiva y de algunas bacterias Gram negativas. La glicerina estimula el
crecimiento de Mycobacterium tuberculosis, aunque gran parte de Mycobacterium bovis es inhibido.

La mezcla de glicerol y huevo proporcionan los ácidos grasos y proteína necesarios para el metabolismo
de las micobacterias. La coagulación de la albumina de huevo durante la tindalización proporciona un
medio sólido para la inoculación. Se añade asparragina para favorecer el inicio del crecimiento y el
aumento de la velocidad del mismo. La inhibición del resto de bacterias se logra mediante la presencia
del colorante Verde Malaquita.

7.3 CONDICIONES PARA SU USO

Incubación: En aerobiosis, a 35-37°C , No exponer a la luz directa (artificial o natural). Observar los
cultivos dos veces por semana. Si no se observa desarrollo, incubar hasta 8 semanas. Importante:
incubar los tubos con las tapas flojas, inclinados 5º aproximadamente. Esta posición evita que el inóculo
contacte con la parte superior del tubo.

Tipos de muestra: Esputo, hisopados, contenido gástrico, orina, biopsia de intestino

7.4 A QUE TIPO DE MICROORGANISMOS VA DIRIGIDO

 M. tuberculosis.- Produce colonias amarillas y granulares (fig. 10)


 M. fortuitum.- Produce colonias crema (que pueden mostrar un tono verdoso debido a la absorción del
colorante)
 M. kansasii.- Produce colonias amarillo limón y lisas
 M. bovis.- Produce colonias amarillas y secas

8. CHROMAGAR CANDIDA
8.1 COMPOSICION DEL AGAR

Fórmula por litro de agua purificada // pH 6,0 ± 0,3

Cromopeptona 10,0 g
Glucosa 20,0
Mezcla cromógena 2,0
Cloranfenicol 0,5
Agar 15,0

8.2 CARACTERISTICAS DEL AGAR

En incoloro a beige claro


Inhibe el crecimiento de bacterias y también puede utilizarse como medio de aislamiento selectivo para
otras especies de levaduras y para hongos filamentosos. Microorganismos gram positivos y anaerobios
facultativos.

La mezcla cromógena patentada está formada por sustratos artificiales, que liberan compuestos de
colores diferentes al ser degradados por enzimas específicas. De esta manera es posible diferenciar
determinadas especies o detectar ciertos grupos de organismos con sólo un mínimo de pruebas de
confirmación. El cloranfenicol inhibe la mayoría de los contaminantes bacterianos.

8.3 CONDICIONES PARA SU USO

Incubar las placas en atmósfera aerobia durante 20 – 48 h a 35 ± 2 °C. Tener en cuenta que se requiere
una incubación de 42 h para que las colonias desarrollen por completo el color. Evitar exposición a luz.
Tipo de muestra: Piel, esputo, orina, muestras vaginales

8.4 A QUE TIPO DE MICROORGANISMOS VA DIRIGIDO

Es un medio para el aislamiento y la identificación de Candida albicans, C. tropicalis y C. krusei a partir de


muestras clínicas. (fig. 11)

 Candida albicans: verde claro a mediano


 Candida tropicalis: azul verdoso a azul metálico
 Candida krusei: rosado claro con borde blancuzco
CONCLUSION

Se investigó sobre los diferentes tipos de agares que se utilizan como medio de cultivo de
microorganismos se abarcaron los puntos de composición de estos, características, condiciones para su
uso y los microorganismos a los que va dirigido dicha preparación de agar.

Gracias a esta información ahora puedo identificar para que sirven específicamente algunos tipos de agar
así como que tipo de microorganismos crecen en él, dicho conocimiento me puede ser de utilidad en
futuras prácticas de laboratorio en esta materia o en otras.

Un ejemplo de donde poder hacer uso de esta información es en una situación en la que tengo que
sembrar una microorganismo desconocido, como no sé cuál es, no puedo saber cuáles son los nutrientes
que necesita o en que medio se desarrolló e identifica fácilmente, por lo cual ahora sé que el medio que
puedo utilizar es el agar nutritivo ya que este no es selectivo y puede albergar diferentes mo’s.

Un segundo caso es en el que tengo una sospecha o sé a qué género pertenece el mo’s, entonces lo
sembraría en un medio especifico o selectivo (como agar ss, lowenstein Jensen,chromagar candida) en
donde pueda crecer solo el mo’s que estoy buscando.
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

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ANEXOS

La evolución de los medios de cultivo

La microbiología empieza su verdadero desarrollo como ciencia en el momento en que se descubre el


microscopio y comienza la observación de los primeros microorganismos. La primera noticia de la
utilización de medios de cultivo nos llega del micólogo Brefeld, que consiguió aislar y cultivar esporas de
hongos en medios sólidos realizados a base de gelatina.

Sin embargo este sistema no era adecuado para las bacterias y no fue hasta el año 1878 cuando Lister
popularizó un método enfocado al cultivo puro basado en diluciones seriadas en un medio líquido.

Koch realizó sus investigaciones utilizando en un primer momento rodajas de patata como soporte
nutritivo sólido, pero no tardó en recurrir al caldo de carne líquido, diseñado por Loeffler, al que, en 1881,
añadió gelatina, logrando un medio sólido transparente ideal para la observación de la morfología
macroscópica de las colonias microbianas.

En el año 1882 tiene lugar uno de los grandes avances de la microbiología en relación con los medios de
cultivo: el médico alemán Walter Hesse introduce el agar-agar (polisacárido extraído de algas rojas) como
solidificante.

En 1887 un ayudante de Koch llamado Petri, comienza a utilizar placas de cristal planas, que se llaman
desde entonces placas de Petri, para sustituir a las clásicas bandejas de vidrio cubiertas con campanas
que se usaban hasta entonces.

Beijerinck y Winogradsky, que desde de 1888 realizaron sus investigaciones sobre las bacterias
quimioautótrofas (utilización de nitrógeno y azufre sobre todo) tuvieron gran importancia en el desarrollo
de los medios selectivos y de enriquecimiento. Diseñaron este tipo de medios de tal forma que su
especial composición química favorecía el crecimiento de ciertos tipos de microorganismos que, en
función de sus procesos metabólicos, eran los únicos capaces de utilizar para su desarrollo ciertos
nutrientes del medio.

En 1892 Würtz impulsó el uso de los medios diferenciales, incorporando indicadores de pH a la


composición de ciertos medios con lo cual se podía observar la producción de ácidos en la fermentación
en ciertos microorganismos.
Agar nutritivo: Instrucciones Suspender 31 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Mezclar y dejar
reposar 5 minutos. Calentar agitando frecuentemente y hervir 1 o 2 minutos hasta su disolución total.
Distribuir en recipientes apropiados y esterilizar en autoclave a 121°C durante 15 minutos.

Agar sangre: Suspender 40 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Dejar reposar 5 minutos y mezclar
perfectamente hasta obtener una suspensión homogénea. Calentar con agitación frecuente y hervir 1
minuto para disolución total. Esterilizar a 121 ºC durante 20 minutos. Preparación de Agar Sangre:
Agregar 5-10 % de sangre ovina desfibrinada estéril al medio esterilizado, fundido y enfriado a 45-50 ºC.
Homogeneizar y distribuir en placas de Petri estériles.

Agar macConkey: Suspender 50 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Reposar 5 minutos. Calentar
con agitación frecuente y llevar a ebullición 1 a 2 minutos hasta disolver completamente. Distribuir en
recipientes apropiados y esterilizar en autoclave a 121°C durante 15 minutos.

Agar Mueller Hinton: Suspender 37 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Dejar embeber de 10 a 15
minutos. Calentar con agitación frecuente y hervir durante 1 minuto para disolución total. Esterilizar a
121°C durante 15 minutos. Enfriar a 45°-50°C y distribuir en placas de Petri estériles, en volumen
apropiado para que el espesor sea de 4 mm sobre una superficie horizontal (25-30 ml en placas de 9 cm
de diámetro).

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