NIM : O11116009
TUJUAN PRAKTIKUM
Adapun tujuan dari praktikum ini, yaitu:
1. Untuk mengetahui cara pembuatan preparat darah natif
2. Untuk mengetahui waktu pembekuan darah
3. Untuk mengetahui waktu pendarahan
4. Untuk mengetahui pengaruh konsentrasi terhadap sel darah
5. Untuk mengetahui cara menghitung kadar Hemoglobin melalui metode Sahli
Darah adalah Cairan merah yang melewati pembuluh dan yang membawa molekul
nutrisi dan gas di seluruh tubuh adalah jaringan ikat yang paling atipikal. Komponen cair
darah disebut plasma dan merupakan matriks. Komponen berserat dari matriks adalah sebuah
molekul protein yang tersuspensi dalam larutan dan hanya terlihat ketika pembekuan darah.
Darah kaya dengan berbagai jenis sel, seperti erythrocytes (sel darah merah), Ieukocytes (sel
darah putih), dan thrombocytes, juga dikenal sebagai platelets (Colville and Bassert, 2016).
Darah adalah cairan merah yang dibawa oleh pembuluh darah dari sistem peredaran
darah. Ini terdiri dari bagian cairan plasma, dan bagian padat, sel-sel darah. plasma
membentuk bagian dari cairan ekstraselular (ECF) setiap konstituen dari darah memainkan
bagian spesifik dalam fungsi keseluruhan darah (Frandson et al., 2013).
a. Sel darah merah
Sel darah merah (erythrocytes) merupakan cairan bikonkaf dengan diameter sekitar 7
mikron. Bikonkavitas memungkinkan gerakan oksigen masuk dan keluar sel secara cepat
dengan jarak yang pendek antara membran dan inti sel. Warnanya kuning kemerahan-
merahan, karena di dalamnya mengandung suatu zat yang disebut hemoglobin.
Sel darah merah tidak memiliki inti sel, mitokondria dan ribosom, serta tidak dapat bergerak.
Sel ini tidak dapat melakukan mitosis, fosforilasi oksidatifsel, atau pembentukan protein
Handayani dan Hariwibowo, 2008).
b. Sel darah putih
Sel darah putih jauh lebih sedikit daripada sel darah merah dan sel-sel mengandung
nukleus. Sel darah putih dapat diklasifikasikan sebagai granulosit atau agranulosit tergantung
pada apakah mereka memiliki butiran terlihat di sitoplasma mereka ketika bernoda dan dilihat
di bawah mikroskop. Fungsi leukosit adalah mempertahankan tubuh terhadap infeksi
(Aspinall and Capello, 2015)
1. Granulosit
Jenis leukosit ini diproduksi di dalam sumsum tulang dan membentuk sekitar 70%
dari semua leukosit. Mereka memiliki butiran di dalam sitoplasma mereka dan memiliki
nukleus tersegmentasi atau berotasi yang dapat bervariasi bentuknya. Mereka disebut sebagai
polymorp honucleocytes atau PMNs (yang berarti nukleus berbentuk banyak). Mereka dapat
diklasifikasikan lebih lanjut sesuai dengan jenis noda yang mereka ambil: netral, dasar atau
asam. Ada tiga jenis granulosit: neutrofil, eosinofil, basofil (Aspinall and Capello, 2015).
a) Neufrofil mengambil pewarna netral dan butiran berwarna ungu. Neutrofil yang
belum matang memiliki nukleus yang terlihat seperti pita melengkung dan dikenal
sebagai sel-sel pita. Neutrofil adalah yang paling melimpah dari leukosit,
membentuk sekitar 90% dari semua granulosit. Mereka mampu bergerak melalui
lapisan othelial akhir pembuluh darah ke jaringan sekitarnya dan menelan bakteri
yang menyerang dan puing-puing sel oleh fagositosis, sehingga membantu untuk
melawan penyakit. Neutrofilia atau peningkatan jumlah neutrofil menunjukkan
adanya proses infektif. sementara neutropenia atau kurangnya sel-sel putih
mungkin merupakan karakteristik infeksi virus tertentu.
b) Eosinofil mengambil pewarna asam dan granula dalam warna sitoplasma merah.
Mereka terlibat dalam pengaturan proses alergi dan peradangan dan
mensekresikan enzim yang menonaktifkan histamin. Eosinofil memainkan peran
utama dalam mengendalikan infestasi parasit. Eosinofilia atau peningkatan
eosinofil terjadi sebagai respons terhadap infestasi parasit.
c) Basofil mengambil pewarna dasar atau basa dan butiran dalam warna sitoplasma
berwarna biru. Basofil mengeluarkan histamin, yang meningkatkan peradangan,
dan heparin, yang merupakan antikoagulan alami yang mencegah pembentukan
gumpalan darah yang tidak perlu. Basofil hadir dalam jumlah yang sangat kecil
dalam darah normal.
2. Agranulosit
Agranulosit memiliki sitoplasma yang jelas. Ada dua jenis (Aspinall and Capello,
2015):
a) Limfosit adalah jenis sel darah putih yang paling umum kedua, membentuk 80%
dari semua agranulosit. Limfosit adalah jenis sel utama dari sistem kekebalan dan
terbentuk di jaringan limfoid, meskipun mereka berasal dari sel induk di
sumsum tulang. Limfosit bertanggung jawab untuk respons imun spesifik, dan ada
dua jenis yang berbeda: limfosit B, yang menghasilkan antibodi dan terlibat dalam
imunitas humoral, dan limfosit T, yang terlibat dalam respons imun seluler.
b) Monosit memiliki nukleus berbentuk tapal kuda dan merupakan yang terbesar dari
leukosit, meskipun mereka hanya ada dalam jumlah kecil. Mereka adalah sel
fagositik dan ketika mereka bermigrasi ke jaringan mereka dewasa dan menjadi
dikenal sebagai makrofag.
c. Trombosit (platelets)
Trombosit darah, juga disebut trombosit, adalah fragmen megakaryocytes, sel besar
yang terbentuk dan berada di sumsum tulang. Trombosit adalah elemen terkecil yang
terbentuk di darah. Tombosit dikelilingi oleh membran plasma dan mengandung beberapa
organel, tetapi bukan nuklei. Trombosit berkisar dari 150.000 hingga 500.000 per mikroliter
darah pada sebagian besar spesies mamalia. Munculnya trombosit dalam apusan bernoda
mungkin jauh berbeda dari penampilan aktual mereka dalam sirkulasi darah, di mana mereka
adalah cakram oval. Dalam smear mereka dapat muncul sebagai disk melingkar, fragmen
berbentuk bintang, atau gumpalan bentuk tidak beraturan. Trombosit mengurangi kehilangan
darah dari pembuluh yang terluka. Dengan melekatkan dinding pembuluh darah dan satu
sama lain di area cedera, trombosit bisa bentuk tusukan dimana trombus (bekuan) terbentuk
untuk menutup lubang pada pembuluh darah dan mencegah kehilangan darah lebih lanjut.
Zat-zat yang dilepaskan oleh trombosit dan bersarang di membran permukaannya
menstimulasi pembekuan dan membantu menyebabkan penyempitan lokal pembuluh darah
yang cedera (Frandson, 2013).
B. Karakteristik Fisik Darah
Darah lebih padat dan lebih kental dari pada air. Ini berisi komponen seluler dan cair.
Sel-sel (unsur-unsur yang terbentuk) dan fragmen sel disuspensikan dalam plasma. Meskipun
serat yang biasanya terlihat di jaringan ikat tidak ada, selama proses pembekuan, protein
terlarut bergabung membentuk untaian berserat (Akers and Danbow, 2013).
Pada anjing dan kuda, limpa menyimpan erythrocytes. Bahkan, kuda dapat
menyimpan hingga 50% erythrocytes di limpa. Oleh karena itu, ketika hewan melakukan
latihan, limpa dapat menyuntikkan erythrocytes ke dalam sirkulasi, meningkatkan hematokrit
hingga hampir 25% (Akers and Danbow, 2013).
a. Hematokrit
Proporsi relatif sel ke plasma adalah ukuran yang berguna secara klinis yang dapat
ditentukan oleh hematokrit (Hct). ketika kolom darah disentrifugasi, komponen
dipisahkan menurut gravitasi spesifik relatifnya. Komponen seluler (eritrosit,
Ieukocyics, dan trombosit, juga dikenal sebagai trombosit) menempati bagian bawah
dan, diambil bersama-sama, dikenal sebagai Hct. Plasma menempati bagian atas dan
merupakan komponen cairan darah, di mana sel dan koloid tersuspensi dan zat yang
diangkut lainnya dilarutkan.
b. Warna darah
Warna merah darah diberikan oleh hemoglobin yang terkandung dalam eritrosit.
Gradasi warna dari merah terang ke busur kebiruan-ungu terlihat, tergantung pada
tingkat saturasi hemoglobin dengan oksigen. Semakin besar saturasi, semakin terang
warna merah. Plasma berwarna kuning hingga tidak berwarna, tergantung pada
quamnity dan spesies yang diperiksa. Primma yang biasanya berwarna kuning muda
ketika diamati dalam tabung percobaan mungkin tidak berwarna dalam tabung
kapiler. Warna hasil plasma terutama dari kehadiran bilirubin, produk degradasi
hemoglobin. Ini adalah kuning yang lebih gelap pada sapi dan bahkan lebih gelap di
kuda, yang memiliki konsentrasi bilirubin yang relatif tinggi.
c. Volume darah
Volume darah (BV) adalah fungsi dari berat badan tanpa lemak dan umumnya 8-10%
dari berat badan. BV tidak dapat diukur secara langsung karena ekssanguinasi
(pengangkatan darah) menyebabkan hilangnya hanya sekitar 50% dari darah; sisanya
terperangkap dalam kapiler, sinus vena, dan pembuluh darah lainnya. Volume eritrosit
dan volume plasma (PV) dapat diukur dengan berbagai teknik. Jika satu atau yang
lain diukur, dan Ht diketahui BV dapat dihitung.
d. PH darah
Darah memiliki pH sekitar 7,4. Darah vena sedikit lebih asam daripada darah arteri.
Jadi, jika pH darah arteri 7,4, orang akan mengharapkan pH darah vena sekitar 7,36.
Keasaman darah vena yang lebih tinggi terkait dengan pengangkutan karbon dioksida;
konsentrasi CO2 yang lebih tinggi ada dalam darah vena. Hidrasi karbon dioksida
dalam darah vena (CO2 + H2O -> H2CO3 <-> H + + HCO3-) membentuk ion
hidrogen, sehingga menghasilkan keasaman yang lebih tinggi dan pH yang lebih
rendah.
C. Fungsi Darah
Sebagian besar fungsi darah termasuk dalam daftar berikut (Frandson et al., 2013):
a. Distribusi nutrisi yang diserap dari saluran pencernaan
b. Mengangkut oksigen dari paru-paru ke sel-sel di seluruh tubuh
c. Pengangkutan karbon dioksida dari metabolisme sel ke paru-paru
d. Pengangkutan produk limbah dari metabolisme sel ke ginjal untuk ekskresi
e. Transportasi hormon dari kelenjar endokrin untuk menargetkan sel
f. Bantuan dalam mengontrol suhu tubuh dengan mengangkut panas dari struktur
yang lebih dalam ke permukaan tubuh
g. Bantuan dalam menjaga pH cairan tubuh konstan dengan menyediakan buffer
kimia
h. Bantuan dengan pencegahan kehilangan darah yang berlebihan dari cedera
dengan menyediakan protein dan [pelaku lain yang diperlukan untuk
pembekuan darah
i. Bantuan dengan pertahanan tubuh terhadap penyakit dengan menyediakan
antibodi, sel, dan faktor pertahanan tubuh lainnya
D. Darah Sebagai Sistem Regulasi
Darah memainkan peran penting dalam homeostasis dengan mengatur (Aspinall and
Capello, 2015):
a. Volume dan konstituen dari kedua cairan: Darah membawa air dalam bentuk
plasma ke jaringan dan bertanggung jawab untuk menjaga keseimbangan osmotik
dari cairan dan sel. Kehadiran protein plasma, terutama albumin dalam darah,
mengontrol aliran cairan antara kompartemen cairan dan bertanggung jawab untuk
menjaga volume darah dan tekanan darah.
b. Suhu tubuh: Darah melakukan panas ke seluruh tubuh ke permukaan tubuh di
mana, jika perlu, hilang oleh vasodilatasi perifer.
c. Asam-basa keseimbangan: Darah mempertahankan pH internal konstan dalam
tubuh dengan adanya buffer, seperti bikarbonat, yang mampu menyerap ion H
ketika darah adalah asam (pH rendah) dan memberikan ion H ketika darah basa
(pH tinggi). Dengan cara ini, semua proses tubuh dapat berfungsi secara efektif.
d. Pertahanan melawan infeksi: Darah membantu mencegah infeksi melalui aksi sel
darah putih, yang merupakan bagian dari sistem kekebalan tubuh. Ini juga
membawa antibodi dan antitoksin yang diproduksi oleh sistem kekebalan tubuh di
sekitar tubuh.
e. Pembekuan darah: Mekanisme pembekuan mencegah kehilangan darah yang
berlebihan dari luka dan cedera lain dan mencegah masuknya infeksi.
E. Transport Darah
Darah merupakan alat transportasi dalam tubuh. Beberapa fungsi darah sebagai alat
transport antara lain (Aspinall and O’reilly, 2004) :
a. gas dalam larutan - darah membawa darah berosilasi dari paru-paru dan
mengirimkan oksigen ke jaringan di mana ia digunakan. Kemudian
mengumpulkan darah deoxygenuted yang mengandung karbon dioksida yang
dihasilkan oleh jaringan selama proses metabolisme mereka. dan membawanya
kembali ke paru-paru, di mana karbon dioksida ditukar dengan oksigen di udara
yang diilhami.
b. Nutrisi - darah mengangkut nutrisi. misalnya asam amino, asam lemak dan
glukosa yang dihasilkan dari proses pencernaan, dari sistem pencernaan ke hati
dan ke jaringan di mana mereka dibutuhkan.
c. Hasil metabolisme - darah mengumpulkan produk limbah yang dihasilkan dari
metabolisme dalam jaringan dan mengangkutnya ke ginjal dan hati di mana
mereka dikeluarkan dari tubuh.
d. hormon dan enzim - darah mengangkut enzim dan hormon dari kelenjar endokrin
ke jaringan targetnya.
F. Waktu Pembekuan Darah
Waktu pembekuan darah adalah waktu darah mulai keluar hingga tampaknya
benang-benang fibrin. Faktor yang diperlukan dalam penggumpalan darah adalah garam
kalsium sel yang luka yang membebaskan trombokinase, trombin dan protrombin dan fibrin
yang terbentuk dan fibrinogen. Mekanisme pembekuan darah yaitu trombosit meninggalkan
pembuluh darah dan pecah maka mengeluarkan tromboplastin. Bersama-sama dengan ion
Ca tromboplastin mengaktifkan protrombin menjadi trombin. Trombin adalah enzim yang
mengubah fibrinogen menjadi fibrin. Fibrin ini berfungsi menjaring sel-sel darah merah
menjadi gel atau mengumpal. Kisaran waktu terjadinya pembekuan darah adalah 15 detik
sampai 2 menit dan umumnya akan berakhir dalam 5 menit (Safitri et al., 2017).
Proses pembekuan darah (Safitri et al., 2017):
1. Kulit terluka menyebabkan darah keluar dan pernbuluh darah. Trombosit ikut
keluar juga bersama darah kemudian menyentuh permukaan-permukaan kasar dan
menyebabkan trombosit pecah. Trombosit akan mengeluarkan zat (enzim) yang
disebut trombokinase.
2. Trombokinase akan masuk ke dalam plasma darah dan akan mengubah
protrombin menjadi enzim aktif yang disebut trombin. Perubahan tersebut
dipengaruhi ion kalsium (Ca2+) di dalam plasma darah. Protrombin adalah
senyawa protein yang larut dalam darah yang mengandung globulin. Zat ini
merupakan enzim yang belum aktif yang dibentuk oleh hati. Pembentukannya
dibantu oleh vitamin K.
3. Trombin yang terbentuk akan mengubah fibrinogen menjadi benang-benang
fibrin. Terbentuknya benang-benang fibrin menyebabkan luka akan tertutup
sehingga darah tidak mengalir keluar lagi. Fibrinogen adalah sejenis protein yang
larut dalam darah
G. Waktu Pendarahan
Perdarahan biasanya berlangsung 1-6 menit. Lama perdarahan sangat bergantung
pada dalamnya luka dan derajat hiperemia di jari pada saat tes dilakukan. Waktu perdarahan
akan memanjang bila kekurangan faktor-faktor pembekuan, dan sangat memanjang bila
kekurangan trombosit (Lesmana et al., 2017).
Perdarahan merupakan suatu proses keluarmya darah dan pembuluh darah akibat
rusaknya dinding pembuluh darah karena trauma atau penyakit. Perdarahan memerlukan
penanganan khusus, sebab pendarahan yang berlangsung lama dan tidak segera ditangani
dapat menyebabkan syok. sinkop dan bila lebih lanjut dapat menyebabkan kematian (Wuisan
et al., 2015).
MATERI DAN METODE
3.1 Materi
3.1.1 Alat
1. Jarum Franckle/ lanset
2. Hemometer Sahli Set
3. Mikroskop
4. Jarum pentul atau peniti
5. Object glass dan cover glass
6. Stopwatch
3.1.2 Bahan
1. Seorang mahasiswa sebagai Probandus,untuk diambil darahnya
2. Darah hewan segar dalam EDTA
3. Akuades
4. Alkohol
5. Kertas saring
6. Pewarna giemza
7. NaCl 0.2 dan 0.3 M
8. HCl 0,1 N
3.2 Metode
Waktu beku darah Waktu yang dibutuhkan darah untuk membeku berdasarkan
pengataman adalah 4 menit 33 detik (273 detik).
Waktu pendarahan Waktu pendarahan yang diperoleh dari praktikum adalah 2 menit
15 detik (135 detik).