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Coloración de schaeffer - fulton (esporas).

El procedimiento fue diseñado por Alicia B. schaeffer y macDonald fulton, dos


microbiólogos en middlebury college, durante la década de 1930.

La mancha Schaeffer-Fulton es una técnica diseñada para aislar endosporas tiñendo


cualquier endosporas presentes verde, y cualesquiera otros organismos bacterianos rojo. La
mancha verde es verde malaquita, y la de contraste es safranina, que tiñe cualquier otro
organismo bacterianas rojo.

En algunos microorganismos es difícil de apreciar sus endosporas a través de un


microscopio, debido a la impermeabilidad de su pared que evita la entrada de las tinciones
ordinarias. Mientras el resto de la bacteria puede teñirse, la endosporas permanece
descolorida. Debido a esto surgió la técnica conocida como Tinción de Schaeffer-Fulton
con la que vemos la endosporas verde y la bacteria roja. La tinción de Scheffer y Fulton
emplea verde malaquita, como colorante primario, el cual es eliminado posteriormente por
el resto de la célula bacteriana, pero no de la espora, mediante un enjuague con agua. Como
contra tinción se emplea la safranina, la cual tiñe la célula vegetativa.

Finalmente podemos mencionar que a pesar que la bacteria es una estructura muy pequeña,
por medio de la tinción con verde de malaquita, el cual requirió del calor para la
penetración; se pudo observar la estructura interna de la célula bacteriana, particularmente
las endeosporas. Esporas teñidas de verde y células vegetativas teñidas de rosa. Observar la
forma, tamaño relativo y posición de la espora en la célula vegetativa.

Fundamento:
Verde de malaquita: El verde de malaquita es un colorante débilmente básico (tiene una
carga positiva débil) y por tanto, se une débilmente a la bacteria. Penetra en las células
vegetativas. Cuando se calienta la preparación también penetra las endosporas.

Decoloración: Durante el lavado con agua, el verde de malaquita se elimina de las células
vegetativas, pero no de las endosporas.

Safranina: El colorante de contraste (la safranina) solo puede teñir a las células
vegetativas (decoloradas por el agua).

Material necesario: Cultivo de Bacillus sp, Verde malaquita y Safranina al 0.5%, agua
destilada, porta objetos, aceite de inmersión, microscopio.
Procedimiento en Flujograma:

Realizar frotis en cultivo Bacillus sp.

Secar al aire y Fijar con calor

Cubrir portaobjeto con VERDE DE MALEQUITA y Calentar 30seg.

Enfriar.

Lavar con agua destilada.

Adicionar SAFRANINA al 0.5% 1 min.

Lavar con agua destilada.

Secar.

Observar al microscopio con objetivo de inmersión.

Reportar lo observado.
Resultados:

Coloración de schaeffer - fulton (esporas),


GRUPO INFET – 06/02/19.

Debido a la coloración roja se puede decir que presentaban células vegetativas, Los datos
importantes que se obtienen como resultado de esta coloración son: presencia o ausencia de
esporas deformación o no del cuerpo celular.