Miscellaneous Compounds.

Monosodium glutamate.

The amino acid glutamic acid may be prepared synthetically, but chemical preparation produces a
racemic mixture. Since only the sodium salt of the naturally occurring L-glutamic acid is desired for food
flavor enhancement, this necessitates an expensive resolution step. L-Clutamic acid can be obtained
directly From fermentation of carbohydrates with Micrococcus glutamicus or Brevibacterium
ditaricatum. Many patents have been issued on variations of the process as this is one of the largest
volume compounds produced by fermentation.

--------

Senyawa Miscellaneous.

Monosodium glutamat.

Asam glutamat asam amino dapat dibuat secara sintetik, tetapi sediaan kimia menghasilkan campuran
rasemat. Karena hanya garam natrium dari asam L-glutamat alami yang diinginkan untuk peningkatan
rasa makanan, ini memerlukan langkah resolusi yang mahal. Asam L-Clutamic dapat diperoleh secara
langsung Dari fermentasi karbohidrat dengan Micrococcus glutamicus atau Brevibacterium ditaricatum.
Banyak paten telah dikeluarkan pada variasi proses karena ini adalah salah satu senyawa volume
terbesar yang dihasilkan oleh fermentasi.

3. Proses fermentasi

Secara umum tahapan pembuatan MSG dengan menggunakan proses fermentasi adalah

sebagai berikut:

- Seeding

Tangki seeding ini mirip tangki fermentor tapi lebih kecil volumenya. Di tangki ini bakteri tersebut
dibiarkan berkembangbiak dengan baik, dilengkapi dengan
penganduk, alat pendingin, pemasukan udara dan lain-lain.

- Fermentasi

Setelah dari tangki seeding, bakteri tersebut dipindahkan ke tangki fermentor. Di tangki ini mulailah
proses fermentasi yang sebenarnya berjalan. Pengawasan proses merupakan pekerjaan yang sangat
penting. Pengaturan pH dengan pemberian NH3, pemberian udara, jumlah gula, jumlah bakteri harus
selalu diamati. - Pengambilan asam glutamat Setelah fermentasi selesai ± 30-40 jam cairan hasil
fermentasi yaitu TB (ThinBroth) dipekatkan untuk mengurangi kadar airnya kemudian ditambahkan HCl
untuk mencapai titik isoelektrik pada pH ± 3,2.

- Netralisasi atau refining

pada tahapan ini dilakukan pencampuran NaOH.

- Kristalisasi asam glutamat.

- Tahap lanjutan pereaksian asam glutamat dengan NaOH sehingga terbentuk monosodium glutamat
liquor.

- Decolorisasi atau penjernihan warna menggunakan karbon aktif.

- Kristalisasi monosodium glutamat, menghasilkan kristal monosodiumglutamat yang masih mengandung

liquor..

- Pengeringan kristal monosodium glutamat dengan menggunakanRotary dryer sehingga didapatkan

kristal Monosodium glutamat yang mempunyai kemurnian tinggi ± 99,7 %.

Fermentasi adalah suatu reaksi oksidasi reduksi di dalam sistem biologi yang menghasilkan energi.
Fermentasi menggunakan senyawa organik yang biasanya digunakan adalah karbohidrat dalam bentuk
glukosa. Senyawa tersebut akan diubah oleh reaksi reduksi dengan katalis enzim menjadi bentuk lain
(Winarno, 1990).

Proses pembuatan monosodium glutamat dari molasses dengan menggunkan metode fermantasi
menggunakan fermentor batch pada suhu 35°C dan tekanan atmosferis. Kandungan sukrosa dalam
molasses dikonversi terlebih dahulu hingga terbentuk glukosa. Selanjutnya dilakukan proses fermentasi
dengan menggunakan bakteri

Micrococcus glutamicus
Reaksi :

C6H12O6( ) + NH3(g) + 3/2O2(g) C5H9NO4( ) + CO2(g) + 3H2O( )

glukosa amonia oksigen asam glutamate karbondioksida air

Yield = 81,7% (Atkinson, 1983).

C5 H9 NO4( ) + NaOH( ) C5H8NNaO4( ) + H2O( )

asam glutamat sodium hidroksida monosodium glutamat + air

Yield = 80%(Keyes, 1961).

Hasil dari fermentasi adalah asam glutamat dalam bentuk cair yang masih tercampur dengan sisa
fermentasi.

L-LYSINE.

L-Lysine may be formed by microorganisms acting on carbohydrates. The usual organisms are
Micrococcus glutamicus, Brevibacterium flavum, Corynebacterium acetoglutamicum, and
Microbacterium ammoniaphilum. Each of these organisms requires special conditions and/or special
additives to produce the product in good yields.

The organism Corynebacterium glutamicum is used in industry to produce L-lysine through an aerobic
process (Anastassiadis, 2007). Figure 2 shows the biosynthesis of L-Lysine, in which a pathway is followed
leading from aspartate (which is itself derived from oxaloacetate, a Krebs cycle intermediate) through a
series of3intermediates, all the way to L-Lysine. Pertinent enzymes are shown on the left, and this shows
that significant attention can be expended on strain development and metabolic pathway engineering to
tune the expression of all of these components and boost production. According to Anastassiadis (2007),
“Process improvement for producing larger amounts of L-lysine using microorganisms remains a
continual attempt, whereas the continuous development of classical and modern genetics resulted in the
development of superior strains imparted with properties advantageous for the commercial production
of L-lysine.” For this project a culture will be ordered from a cell culture bank, such as the American Type
Culture Collection. An example culture that is known to be effective is labeled as ATCC13032 (Käß et al.,
2014).

The organism selected to carry out

the production of L-lysine is Corynebacterium glutamicum. This microorganism is a gram-positive, non-
sporulating, non-motile, ellipsoidal bacteria and is aerobic. The strains of this bacteria typically form pale
yellow colonies, however some cream-white strands can also occur (Kjeldsen, 2008).

C.glutamicum strains have been isolated from soils, soils contaminated with bird feces, and manure
(Kjeldsen, 2008). This organism is widely used in the production of L-lysine because it is able to
metabolize a variety of carbohydrates, alcohols and organic acids as carbon and energy sources for
growth and for amino acid production. It is also able to metabolize inorganic nitrogen sources such as
ammonia. L-lysine is produced in about seven or ten steps from its precursor oxalacetate. C. glutamicum
has a respiratory metabolism, with oxygen as its terminal electron acceptor. In addition, nitrate can serve
as the electron acceptor (Kjeldsen, 2008). 4

-----

L-LYSINE.

L-Lysine dapat dibentuk oleh mikroorganisme yang bekerja pada karbohidrat. Organisme yang biasa
adalah Micrococcus glutamicus, Brevibacterium flavum, Corynebacterium acetoglutamicum, dan
Microbacterium ammoniaphilum. Setiap organisme ini memerlukan kondisi khusus dan / atau aditif
khusus untuk menghasilkan produk dengan hasil yang baik.

Organisme Corynebacterium glutamicum digunakan dalam industri untuk memproduksi L-lysine melalui
proses aerobik (Anastassiadis, 2007). Gambar 2 menunjukkan biosintesis L-Lysine, di mana jalur diikuti
memimpin dari aspartat (yang itu sendiri berasal dari oxaloacetate, siklus Krebs menengah) melalui
serangkaian zat interstediasi, sampai ke L-Lysine. Enzim yang relevan ditunjukkan di sebelah kiri, dan ini
menunjukkan bahwa perhatian yang signifikan dapat dikeluarkan pada pengembangan regangan dan
rekayasa jalur metabolisme untuk menyetel ekspresi semua komponen ini dan meningkatkan produksi.
Menurut Anastassiadis (2007), “Peningkatan proses untuk memproduksi L-lisin dalam jumlah yang lebih
besar dengan menggunakan mikroorganisme tetap merupakan upaya yang berkelanjutan, sedangkan
pengembangan berkelanjutan genetika klasik dan modern menghasilkan pengembangan strain superior
yang diberikan dengan sifat-sifat yang menguntungkan untuk produksi komersial dari L-lysine. ”Untuk
proyek ini, sebuah budaya akan dipesan dari bank budaya sel, seperti Koleksi Budaya Tipe Amerika.
Contoh budaya yang dikenal efektif diberi label sebagai ATCC13032 (Käß et al., 2014).

Organisme yang dipilih untuk melakukan produksi L-lisin adalah Corynebacterium glutamicum.
Mikroorganisme ini adalah bakteri gram-positif, non-sporulating, non-motil, ellipsoidal dan bersifat
aerobik. Strain bakteri ini biasanya membentuk koloni kuning pucat, namun beberapa helai putih krim
juga dapat terjadi (Kjeldsen, 2008).

Strain C.glutamicum telah diisolasi dari tanah, tanah yang terkontaminasi dengan kotoran burung, dan
kotoran (Kjeldsen, 2008). Organisme ini banyak digunakan dalam produksi L-lisin karena mampu
memetabolisme berbagai karbohidrat, alkohol dan asam organik sebagai sumber karbon dan energi
untuk pertumbuhan dan untuk produksi asam amino. Ia juga mampu memetabolisme sumber nitrogen
anorganik seperti amonia. L-lisin diproduksi sekitar tujuh atau sepuluh langkah dari oksalat
pendahulunya. C. glutamicum memiliki metabolisme pernafasan, dengan oksigen sebagai akseptor
elektron terminalnya. Selain itu, nitrat dapat berfungsi sebagai penerima elektron (Kjeldsen, 2008).

DIHYDROXYACETONE.

Dihydroxyacetone (HOCH2COCH2OH) is made by the action of sorbose bacterium fermentation of

glycerin. This is an ingredient of suntan lotion that creates an artificial tan. It is also valuable as a
chemical intermediate and as a catalyst in buatadiene-styrene polymerization. Fatty acid esters of the
hydroxyl groups are excellent emulsifying agents.

----

DIHYDROXVACETONE.

Dihydroxyacetone (HOCH2COCH2OH) is made by the action of sorbose bacterium fermentation of

glycerin. This is an ingredient of suntan lotion that creates an artificial tan. It is also valuable as a
chemical intermediate and as a catalyst in buatadiene-styrene polymerization. Fatty acid esters of the
hydroxyl groups are excellent emulsifying agents.
Dihydroxyacetone Fermentation

The DHA is useful in chemical and pharmaceutical industries. DHA is an oxidation product of glycerol
produced by the action of membrane bound glycerol dehydrogenase (Kersters and De Ley, 1963).

Glycerol - Dehydrogenase Glycerol → Dihydroxyacetone

The kinetic studies and optimization for the production of DHA from glycerol have been done using G.
oxydans ATCC 621 (Bories et al., 1991). G. oxydans was cultured (batch or fed batch cultures) in a 6l LSL
Biolafitte fermentor containing 4 l growth medium and 25-100g/l carbon source (glycerol or mannitol)
and 10g/l nitrogen-source (yeast extract) at pH 6.0. The incubation was performed at 28°C, 800rpm,
1vvm aeration and O2 partial pressure above 10%. The rate of growth decreased with increasing DHA
concentration and finally ceased at DHA concentration of 61g/l. Glycerol oxidation into DHA ceased at
108 g/l. Svitel and Sturdik (1994a) studied the product yield and by- product formation during conversion
of glycerol into DHA using G. oxydans CCM 1783 (ATCC621). An increase in the O2 consumption rate was
observed at glycerol concentration upto 300g/l. Batch cultures incubated with gassing by air and/or O2,
yielded upto 94% DHA. Sodium glycerate was identified in the fermentation broth (after neutralization
with NaOH). Ohrem and Voss (1995) reported production of 220 g/l DHA (96-98% production) after G.
oxydans fermentation for 30 hr. The Maximum productivity reached after 6-10 hr. The fermentation
broth pH was maintained between 3.8-4.8 using Ca(OH)2. Ohrem and Voss (1996) studied effect of
glycerol on the growth and DHA production in Gluconobacter oxydans. They showed that neither
glycerol oxidation nor metabolism of DHA was inhibited by high glycerol concentrations. They showed
that DHA damaged the cells irreversibly and the viability of Gluconobacter decreased exponentially with
time.

-----

DIHYDROXVACETONE.

Dihydroxyacetone (HOCH2COCH2OH) dibuat oleh aksi fermentasi bakteri sorbose gliserin. Ini adalah
bahan lotion berjemur yang menciptakan tan buatan. Ini juga berharga sebagai zat antara kimia dan
sebagai katalis dalam pembuatan polimer stirena-stirena. Ester asam lemak dari gugus hidroksil adalah
agen pengemulsi yang sangat baik.

The DHA is useful in chemical and pharmaceutical industries. DHA is an oxidation product of glycerol
produced by the action of membrane bound glycerol dehydrogenase (Kersters and De Ley, 1963).

Glycerol - Dehydrogenase Glycerol → Dihydroxyacetone

The kinetic studies and optimization for the production of DHA from glycerol have been done using G.
oxydans ATCC 621 (Bories et al., 1991). G. oxydans was cultured (batch or fed batch cultures) in a 6l LSL
Biolafitte fermentor containing 4 l growth medium and 25-100g/l carbon source (glycerol or mannitol)
and 10g/l nitrogen-source (yeast extract) at pH 6.0. The incubation was performed at 28°C, 800rpm,
1vvm aeration and O2 partial pressure above 10%. The rate of growth decreased with increasing DHA
concentration and finally ceased at DHA concentration of 61g/l. Glycerol oxidation into DHA ceased at
108 g/l. Svitel and Sturdik (1994a) studied the product yield and by- product formation during conversion
of glycerol into DHA using G. oxydans CCM 1783 (ATCC621). An increase in the O2 consumption rate was
observed at glycerol concentration upto 300g/l. Batch cultures incubated with gassing by air and/or O2,
yielded upto 94% DHA. Sodium glycerate was identified in the fermentation broth (after neutralization
with NaOH). Ohrem and Voss (1995) reported production of 220 g/l DHA (96-98% production) after G.
oxydans fermentation for 30 hr. The Maximum productivity reached after 6-10 hr. The fermentation
broth pH was maintained between 3.8-4.8 using Ca(OH)2. Ohrem and Voss (1996) studied effect of
glycerol on the growth and DHA production in Gluconobacter oxydans. They showed that neither
glycerol oxidation nor metabolism of DHA was inhibited by high glycerol concentrations. They showed
that DHA damaged the cells irreversibly and the viability of Gluconobacter decreased exponentially with
time.

DHA berguna dalam industri kimia dan farmasi. DHA adalah produk oksidasi gliserol yang dihasilkan oleh
aksi membran yang terikat gliserol dehidrogenase (Kersters dan De Ley, 1963).

Gliserol - Dehidrogenase Glycerol → Dihydroxyacetone

Studi kinetik dan optimasi untuk produksi DHA dari gliserol telah dilakukan menggunakan G. oxydans
ATCC 621 (Bories et al., 1991). G. oxydan dikultur (batch atau fed batch culture) dalam fermentor 6L LSL
Biolafitte yang mengandung 4 l medium pertumbuhan dan 25-100 g / l sumber karbon (gliserol atau
manitol) dan 10 g / l nitrogen-source (ekstrak ragi) pada pH 6,0 . Inkubasi dilakukan pada 28 ° C, 800 rpm,
aerasi 1vvm dan tekanan parsial O2 di atas 10%. Laju pertumbuhan menurun dengan meningkatnya
konsentrasi DHA dan akhirnya berhenti pada konsentrasi DHA 61 g / l. Oksidasi gliserol menjadi DHA
berhenti pada 108 g / l. Svitel dan Sturdik (1994a) mempelajari hasil produk dan produk sampingan
selama konversi gliserol menjadi DHA menggunakan G. oxydans CCM 1783 (ATCC621). Peningkatan
tingkat konsumsi O2 diamati pada konsentrasi gliserol hingga 300 g / l. Kultur batch yang diinkubasi
dengan penyerangan gas melalui udara dan / atau O2, menghasilkan hingga 94% DHA. Sodium glycerate
diidentifikasi dalam kaldu fermentasi (setelah netralisasi dengan NaOH). Ohrem dan Voss (1995)
melaporkan produksi 220 g / l DHA (96-98% produksi) setelah fermentasi G. oxydans selama 30 jam.
Produktivitas maksimum tercapai setelah 6-10 jam. PH kaldu fermentasi dipertahankan antara 3,8-4,8
menggunakan Ca (OH) 2. Ohrem dan Voss (1996) mempelajari efek gliserol pada pertumbuhan dan
produksi DHA di Gluconobacter oxydans. Mereka menunjukkan bahwa baik oksidasi gliserol maupun
metabolisme DHA terhambat oleh konsentrasi gliserol yang tinggi. Mereka menunjukkan bahwa DHA
merusak sel-sel secara permanen dan kelangsungan hidup Gluconobacter menurun secara eksponensial
dengan waktu.
.

PHARMACEUTICAL PRODUCTS.

The pharmaceutical industry has long employed fermentation (biosynthesis) to manufacture some of its
most important medicaments. See Chap. 40, where fermentation is presented for antibiotics, biological,
vitamins, and hormones. Controlled microorganisms are a most important chemical processing agent
and assist in performing very complicated chemical reactions, in many cases more economically than
purely chemical conversions. This is especially true for complicated structural changes to make
derivatives o natural steroid hormones. Detailed flowcharts (Fig. 6 .5) are given for three antibiotics,
penicillin, streptomycin, and erythromycin. Chemical synthesis is given in Chap. 6 for riboflavin, as well
as fermentation processes.

------

PRODUK FARMASI.

Industri farmasi telah lama menggunakan fermentasi (biosintesis) untuk memproduksi beberapa obat-
obatan yang paling penting. Lihat Chap. 40, di mana fermentasi disajikan untuk antibiotik, biologis,
vitamin, dan hormon. Mikroorganisme terkendali adalah agen pemrosesan kimia yang paling penting
dan membantu dalam melakukan reaksi kimia yang sangat rumit, dalam banyak kasus lebih ekonomis
daripada konversi kimia murni. Hal ini terutama berlaku untuk perubahan struktural yang rumit untuk
membuat turunan dari hormon steroid alami. Detil flowchart (Gambar 6 .5) diberikan untuk tiga
antibiotik, penisilin, streptomisin, dan eritromisin. Sintesis kimia diberikan dalam Chap. 6 untuk
riboflavin, serta proses fermentasi.